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INSTRUCTIVO

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SANGRE

1. OBJETIVOS
1.1 Identificar y determinar la concentración de etanol (mg/dl) en muestras de
sangre mediante un método indirecto

2. PROBLEMA
2.1 Cuantificar la concentración de etanol en muestras de sangre y mediante
los resultados obtenidos indique en qué grado de intoxicación se
encuentra

3. MATERIAL METODOS
3.1 Material Biologico: Muestra de sangre

3.2. Reactivos y soluciones

Dicromato de potasio

Ácido sulfúrico

Carbonato de potasio

Etanol

Agua destilada

3.3. Material y equipos de laboratorio

Balanza y centrifuga

Bagueta y gotero de punta fina

Vaso de PP

Pipetas

Tubos de ensayos
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Baño maría

4. PROCEDIMIENTO:

4.1. Extraer aproximadamente 5 ml de muestra de sangre en condiciones


asépticas
4.2. Proceder a centrifugar a 3500 rpm por 10 minutos
4.3. Prueba presuntiva para etanol
- Rotular 4 tubos como A,B,C,D. al tubo A agregar 5 gotas de etanol (control
positivo)
- Al tubo B agregar 5 gotas de agua estilada (control negativo)
- A los tubos C,D agregar 1ml de muestras de plasma sanguíneo
- A cada uno de los tubos añadir 0.5 ml de dicromato de potasio y tapar
- Colocar los tubos a baño maria por 2 minutos. Si se observa coloración AZUL
VERDOSA significa resultado positivo
4.4 Cuantificación de etanol
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5. RESULTADO

Muestra Rango
1 0.02 nm
2 0.04 nm

6. DISCUSION.
En la práctica realizada en el laboratorio, se buscaba encontrar la presencia de
alcohol etílico en una muestra de sangre mediante un análisis cualitativo, en este
proceso no se llegó a detectar la presencia del alcohol debido a que el donante,
quien se encargó de brindar la muestra de sangre, no había consumido ni una sola
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gota de alcohol en un aproximado de 48hrs. antes de haberse realizado la


extracción de la muestra; obtuvimos un rango entre 0.02 nm a 0.04 nm, lo cual indica
que está en condiciones normales. Debido a que no había presencia de alcohol en
la muestra, no se pudo diferenciar el cambio de color que se buscaba, pues al haber
una concentración mínima de alcohol en la sangre, el K2Cr2O7 se encargaría de
oxidar al etanol, y este cambio se reflejaría con el cambio de color de la sangre, de
un color rojo a un color medio violeta.

En caso de que hubiera existido alcohol, los resultados hubieran cambiado, y se


hubiera determinado el nivel de riesgo, como es explicado en la siguiente tabla:

Efectos progresivos del alcohol

g/L Comportamiento Discapacidad

 El individuo promedio  Con exámenes especiales se pueden


0,10 a
se ve normal detectar algunos efectos sutiles
0,29

0,30 a  euforia suave  concentración


0,592  relajación
 alegría
 locuacidad
 disminución de la
inhibición
0,60 a  sentimientos mitigados  razonamiento
0,99  desinhibición  percepción profunda
 extroversión  visión periférica
 recuperación de la vista después del
deslumbramiento
1,00 a  exceso de expresión  reflejos
1,99  vaivenes emocionales  aumento del tiempo de reacción
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 enojo o tristeza  motricidad fina


 bullicio  tambaleo, titubeo
 disminución de la libido  dificultad para hablar
 disfunción eréctil temporal
 posibilidad de intoxicación temporal
2,00 a  estupor  deficiencia motora grave
2,99  pérdida de la  pérdida de la conciencia
comprensión  amnesia
 deterioro de
sensaciones
 posibilidad de caer
inconsciente
3,00 a  depresión grave del  funcionamiento de la vejiga
3,99 sistema nervioso  hipoventilación
central  desequilibrio
 pérdida del  bradicardia (disminución de la
conocimiento frecuencia cardíaca).
 posibilidad de muerte
4,00 a  falta general de  respiración
4,99 comportamiento  frecuencia cardíaca
 pérdida del  nistagmo (movimiento involuntario e
conocimiento incontrolable de los ojos) posicional
debido al alcohol
5,00 o  alto riesgo de
más intoxicación
 posibilidad de muerte
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7. CONCLUSION.

No sé llegó a detectar presencia de alcohol en la muestra de sangre, mediante un


cambio de color porque la sangre debió cambiar de rojo a violeta por el K2Cr2O7
que es nuestro agente oxidante.

8. LINCOGRAFÍA.

- http://es.wikipedia.org/wiki/Control_de_alcoholemia

- http://www.msal.gov.ar/images/stories/ministerio/intoxicaciones/labora
torios/manual-procedimientos-analiticos.pdf

- http://dev.akersbiosciences.com/wpcontent/uploads/2013/11/prueba_d
e_alcohol_v2.pdf

- http://www.google.com.pe/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd
=6&sqi=2&ved=0CDoQFjAF&url=http%3A%2F%2Fcybertesis.unmsm.e
du.pe%2Fbitstream%2Fcybertesis%2F2597%2F1%2Fcanales_mc.pdf&
ei=q2dyVOO2A8ebgwTRz4LIAw&usg=AFQjCNEMzLSjNLdBUfhox2fOm
5MOEC8I4w&bvm=bv.80185997,d.eXY&cad=rja

- http://es.scribd.com/doc/59856661/Inf-1-Determinacion-de-Etanol

9. CUESTIONARIO.
1. ¿A qué se debe la presencia de color verde azulado en una prueba
presuntiva positiva?
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El color verde azulado en una prueba presuntiva positiva se debe a que


existió presencia de etanol frente al K2CR2O7, lo cual indica que el paciente
ha consumido alcohol en las últimas 48 horas y está con una intoxicación, el
nivel de esta se mide con respecto a los resultados obtenido en la prueba, lo
cual va a indicar el riesgo de la persona.
2. Con la prueba presuntiva podría asegurar la presencia de etanol en la
muestra. Justifique su respuesta

La prueba presuntiva si asegura la presencia de etanol, mientras esta sea


realizada dentro de las 48 horas que se haya ingerido alcohol por parte de la
persona, puesto que siempre que haya alcohol en la sangre habrá presencia
de etanol.

3. Indique las lecturas de absorbancia obtenidas para cada muestra


MUESTRA ABSORBANCIA
1 0.02 nm
2 0.04 nm
STANDAR 0.03 nm

Calcular la concentración de etanol en las muestras en mg/dl, desglosando


los cálculos realizados para cada una de las muestras tomando en cuenta la
lectura de la absorbancia de la solución estándar

Dónde:
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 c es la concentración de alcohol en la sangre


 A es la masa (cantidad) de alcohol ingerida en g
 r es el factor de distribución del individuo
 varones: 0,68 a 0,70
 mujeres o varones jóvenes: 0,55 a 0,60
 lactantes o niños pequeños: 0,75 a 0,80
 m es la masa de la persona en kg (kilogramos)

MUESTRA CONCENTRACION (mg/dl)


1 0
2 0

4. Con los valores obtenidos considere si sus muestras biológicas corresponde


a personas que están bajo el efecto del alcohol desde un punto de vista legal
de acuerdo a la sgte. tabla

Según nuestros resultados obtenido no sé llegó a detectar presencia de alcohol en


la muestra de sangre del individuo; por lo tanto se encontraba en un estado normal.