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CFGS TÉCNICO SUPERIOR EN

DIETÉTICA : CONTROL ALIMENTARIO A

DOSIER DE PRÁCTICAS: SESIÓN 2

Las normas de buenas prácticas en el laboratorio.


Análisis fisicoquímicos básicos de alimentos
Dosier de prácticas: Control alimentario A Ilerna Online
Sesión 2

Normas de buenas prácticas de laboratorio


Se empieza esta sesión de prácticas evaluando los conocimientos previos que hay en
materia de Buenas prácticas de laboratorio a través de la realización de un Kahoot.

Tras conocer el punto de partida, se empezará a trabajar esta parte en la sesión y


realizaremos actividades en común. Tras finalizar este bloque de trabajo, volveremos a
realizar el Kahoot para valorar los conocimientos adquiridos.

Podéis acceder a Kahoot desde kahoot.it. Si no tenéis cuenta, debéis crearos una. Y
buscaréis el Kahoot llamado “Normas de buenas prácticas de laboratorio (Ilerna
Online)”.

Análisis fisicoquímicos de alimentos

Extracción de ADN

Objetivos de la práctica:

- Aislar el ADN presente en las células que forman el epitelio bucal.


- Conocer las características estructurales y moleculares del ADN de eucariotas y
comprender la necesidad de emplear los diferentes materiales para poder
aislarlo.

Fundamento:

La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que
precipiten y se separen más fácilmente del ADN para poder obtenerlo con una mayor
pureza

El detergente líquido o el lavavajillas utilizado en el experimento tiene como función


destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando. El detergente
disuelve las grasas o lípidos, que es el componente principal de la membrana plasmática
y nuclear de las células (es el mismo principio por el que el gel limpia la grasa de nuestra
piel). Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior.

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El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse, de ahí la facilidad para retirarla.
Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol, ya que el ADN es soluble en
agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita. Por este motivo, nuestras hebras
de ADN comienzan a hacerse visibles en la interfase entre la mezcla y el alcohol.

Además de permitirnos distinguirlo, el alcohol separa el ADN de otros componentes


celulares, los cuales quedan en la solución acuosa.

El zumo de piña contiene una enzima denominada papaína. Esta enzima se encarga de
atacar y degradar el resto de proteínas y componentes celulares, lo que nos permite
separarlos del material que buscamos, nuestro ADN.

Materiales y reactivos:

● Sal de mesa
● Lavavajillas o detergente líquido
● Alcohol 96º
● Agua destilada o mineral
● 3 vasos
● Una cuchara sopera
● Zumo de piña

Desarrollo:

1. Verter en un vaso 120 ml de agua destilada y 1 cucharada de sal y disolver.


2. Enjuagar la boca con esta disolución durante 1 minuto y escupir en un vaso
nuevo.
3. Verter detergente en el vaso hasta llenar el fondo.
4. Remover poco a poco sin hacer espuma.
5. Dejar reposar 5 minutos.
6. Añadir 2 cucharadas de zumo de piña y remover muy lentamente.
7. Añadir, aproximadamente, el mismo volumen que tenemos de mezcla de alcohol
de 96º. Es importante verterlo lentamente por las paredes del vaso, con este
ligeramente inclinado, para que queden dos capas diferenciadas.
8. Dejar reposar.

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Precipitación

Objetivos de la práctica:

- Observar como en condiciones ácidas la caseína presente en la leche forma un


precipitado que se deposita en el fondo del vaso.

Fundamento:

La caseína es una proteína que precipita en condiciones ácidas, por ello, empleando un
refresco ácido conseguiremos recrear estas condiciones que harán que se forma un
precipitado en el fondo del vaso.

Materiales y reactivos:

● Vaso
● Leche
● Bebida ácida

Desarrollo:

1. Poner un poco de bebida en un vaso


2. Añadir un chorrito de leche
3. Dejar reposar

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Longitud de onda

Objetivos de la práctica:

- Comprender el concepto de longitud de onda en la radiación electromagnética,


así como determinar la longitud de onda de las microondas.

Fundamento:

Todas las radiaciones electromagnéticas están formadas por ondas.

La longitud de onda (λ) es la distancia que hay entre dos crestas sucesivas, y es una
propiedad característica de las ondas electromagnéticas.

Materiales y reactivos:

● Microondas
● Plato resistente al microondas
● Queso rallado

Desarrollo:

1. Haz en el centro de un plato una línea con queso rallado y métela en el


microondas 20 segundos quitando previamente el soporte de vidrio para que no
gire.

2. Responde a las siguientes cuestiones:

- ¿Qué pasa?

- ¿Qué distancia hay entre una y otra franja?

- ¿A qué crees que es debido?

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Refracción de luz

Objetivos de la práctica:

Observar el fenómeno de refracción que puede verse como consecuencia del cambio
de velocidad de la luz al cambiar de medio.

Fundamento:

Este método se basa en medir la diferencia de velocidad de la luz, en un medio


determinado, respecto a la velocidad de la luz en el vacío.
Cuando la velocidad de la luz se reduce, se produce un cambio de dirección de la misma
(refracción), de modo que este método consiste en medir esta refracción.

Materiales y reactivos:

- Recipiente de vidrio (tipo bol)


- Un láser
- Leche

Desarrollo:

1. Llena un recipiente de vidrio hasta la mitad con agua.


2. Añade un chorrito de leche.
3. Haz incidir el rayo de un láser sobre la muestra.

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La balanza analítica

Objetivos de la práctica:

- Realizar la calibración de la balanza analítica, a través de la utilización de pesas


patrón, con la finalidad de proporcionar al laboratorio de control de calidad los
instrumentos ajustados para la realización de los análisis correspondientes.
- Realizar mediciones precisas y adecuadas con la balanza analítica.

Fundamento:

La medida de la masa en una balanza analítica es una de


las operaciones más comunes en un laboratorio de
análisis.
La balanza analítica, es un instrumento de precisión que
sirve para determinar la cantidad de materia que existe
en un cuerpo (masa). La precisión va a depender del tipo
de balanza, pero rondan un rango de 0’0001 g y pueden
llegar a pesar hasta 310 g, es decir, se utilizan para medir
cantidades pequeñas.

Materiales y reactivos:

- Balanza analítica
- Juego de pesas de 5, 10, 15 y 20 g.
- Termómetro
- Guantes de latex
- Papel absorbente
- Agua destilada
- Acetona
- Brocha

Desarrollo:

Antes de la calibración

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● Limpiar las pesas con acetona y papel absorvente. Utilizar los guantes para
evitar el contacto con la piel, ya que esta puede adherir grasa que altera la
medición.
● Limpiar la superficie de la balanza con la brocha, garantizando que no existe
polvo en el platillo.
● Limpiar con papel absorbente húmedo la superficie exterior de la balanza.
● Colocar la balanza en una superficie lisa, nivelada y libre de vibraciones.
● Nivelar la burbuja de aire de la balanza con ayuda de las patas niveladoras.

● Elaborar la ficha técnica de la balanza. (Tablas Calibración interna y Datos


generales)
● Determinar la temperatura del laboratorio y registrarla en el certificado de
calibración. (Tabla características de la calibración)
● Determinar la humedad relativa y registrarla en el certificado de calibración.
● Realizar las observaciones necesarias a cada uno de los componentes de la
balanza y registrarlo en el registro de calibración. (Tabla inspecciones visuales
antes de la calibración)

Durante la calibración

Cada miembro del grupo debe tomar sus propias mediciones

● Conectar la fuente de poder y encender la balanza


● Tarar la balanza
● Colocar la pesa de 5 g sobre el platillo y cerrar las ventanas para evitar la
entrada de aire.
● Determinar su masa y registrar el valor en el certificado de calibración.
● Retirar la pesa y volver a tarar la balanza.
● Realizar la misma operación con la pesa de 10 g, la de 15 g y la de 20 g.
● Se deben realizar 10 determinaciones con cada pesa.

Después de la calibración

● Apagar la balanza y guardar las pesas utilizadas

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● Realizar los cálculos requeridos: No los vamos a realizar, pero estos nos darían
unos resultados que nos permitirían saber si es necesario o no realizar ajustes
sobre la balanza, es decir, si se detectan muchos errores o desviaciones deberá
ajustarse la balanza porque indica que nos está dando mediciones incorrectas.
● Guardar el certificado de calibración.

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CERTIFICADO DE CALIBRACIÓN

CALIBRACIÓN INTERNA

Balanza analítica monoplato Próxima calibración:

Analógica ( ) Digital ( )

DATOS GENERALES

Marca: Número de serie: Capacidad:

Modelo: División de escala:

Patrón utilizado:

CARACTERÍSTICAS DE LA CALIBRACIÓN

TEMPERATURA (ºC) HUMEDAD (Hr)

INSPECCIONES VISUALES ANTES DE LA CALIBRACIÓN

Estado general:

Estado del display:

Estado de la fuente de poder:

Lugar de instalación:

Observaciones adicionales:

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DATOS DE LA CALIBRACIÓN

PATRÓN (g)

Lectura 5 10 15 20

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Media

Fecha: Responsable de la calibración:

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El peachímetro

Objetivos de la práctica:

- Realizar la calibración del peachímetro, a través de la utilización de patrones de


calibración, con la finalidad de proporcionar al laboratorio de control de calidad
los instrumentos ajustados para la realización de los análisis correspondientes.
- Realizar mediciones precisas y adecuadas con el peachímetro.
- Interpretar adecuadamente los resultados de las mediciones realizadas.

Fundamento:

El pH o potencial de hidrógeno es la concentración de


iones de hidrógeno H + presentes en una
determinada sustancia.
El valor del pH se puede medir de forma precisa
mediante potenciometría gracias al peachímetro,
pero, en determinadas ocasiones, también se puede
hacer una medición aproximada empleando
indicadores que presentan diferentes colores en
función de si se encuentran en un pH ácido o básico.
El peachímetro, utiliza la potenciometría para la
medición del pH de una sustancia, utiliza un electrodo
selectivo para los iones H +.
Se trata de un instrumento de uso muy habitual en el
laboratorio de análisis de alimentos, ya que nos permite determinar de forma rápida y
precisa el valor de pH de las muestras.

Materiales y reactivos:

- pH-metro de mesa
- Buffers de calibración
- Vasos de precipitados (3)
- Pipetas Pasteur desechables
- Papel indicador pH
- Agua destilada
- Papel absorbente
- Muestras: Leche, coca-cola, lejía

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Desarrollo:

Excepto la medición con las tiras indicadoras el proceso debe ser realizado por cada
uno de los miembros del grupo.

Calibración
(Aquí se muestra un protocolo general para una calibración con dos mediciones, pero
es importante seguir en cada caso las indicaciones especificadas en el manual de uso
del pH-metro).

1. Encender el peachímetro y esperar unos minutos para que se prepare.


2. Sacar el electrodo de la solución de almacenamiento (Buffer pH4).
3. Aclarar el electrodo con agua destilada.
4. Sumergir el electrodo en solución pH 7 y presionar el botón de calibrar.
5. Esperar a que la medición se estabilice y presionar de nuevo el botón de calibrar.
6. Aclarar el electrodo con agua destilada y repetir el proceso con la solución de
pH 4.

Mediciones peachímetro

1. Aclarar el electrodo con agua destilada


2. Sumergir el electrodo en la muestra (depositada en un vaso de precipitados) y
presionar el botón de medir.
3. Anota el resultado en la tabla.

Mediciones indicador de pH

1. Introduce la tira de papel en la muestra


2. Compara el color obtenido con los equivalentes de pH
3. Anota el resultado en la tabla

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TABLA DE MEDICIONES

MUESTRA pH-metro Indicador Ácido/Básico

Sitúa las muestras analizadas en la escala de pH:

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Refractometría

Objetivos de la práctica:

- Conocer el fundamento del uso del refractómetro manual y sus aplicaciones en


la determinación del índice de refracción como un método de análisis en los
alimentos.

Fundamento:

La refractometría se basa en medir la diferencia de velocidad de la luz, en un medio


determinado, respecto a la velocidad de la luz en el vacío, es lo que se conoce como
índice de refracción.
Cuando la velocidad de la luz se reduce, se produce un cambio de dirección de la misma
(refracción), de modo que este método consiste en medir esta refracción,
concretamente, se mide el cambio de angulación entre la incidencia de la luz y su
refracción.
La unidad de medida utilizada es el % Brix.

Los refractómetros de mano son utilizados para hallar la concentración de sólidos


disueltos en una solución, pueden ser usados para una amplia gama de soluciones,
como la concentración de azúcar en zumos y bebidas, la concentración de salsas,
champú, leche,aceites industriales, sal marina, anticongelante, etc

Materiales:

- Refractómetro manual
- Balanza analítica
- Cucharilla
- Papel absorbente
- Pipetas Pasteur
- Matraz aforado (100 ml)
- Vaso de precipitados
- Agua destilada
- Azúcar
- Zumo de naranja
- Zumo de melocotón
- Zumo de piña
- Naranja

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Desarrollo:

Excepto la preparación de las soluciones de azúcar, el resto del procedimiento debe


ser realizado por todos los miembros del grupo.

Preparación de la solución de azúcar (10%)

1. Pesar 10 g de azúcar en un vaso de precipitados


2. Añadir un poco de agua destilada y disolver el azúcar
3. Introducir la disolución en un matraz aforado de 100 ml
4. Añadir agua destilada hasta la línea de enrase

Preparación de la solución de azúcar (30%)

1. Pesar 30 g de azúcar en un vaso de precipitados


2. Añadir un poco de agua destilada y disolver el azúcar
3. Introducir la disolución en un matraz aforado de 100 ml
4. Añadir agua destilada hasta la línea de enrase

Calibración del refractómetro

1. Abrir la tapa del refractómetro


2. Colocar dos gotas de agua destilada en el prisma del refractómetro
3. Cerrar la tapa
4. Orientar el refractómetro hacia la luz y observar que la lectura sea 0
5. Si no es así, ajustar con el tornillo de calibración hasta que marque 0
6. Secar el prisma con papel absorbente

Mediciones

1. Abrir la tapa del refractómetro


2. Colocar dos o tres gotas de la muestra en el prisma del refractómetro
3. Cerrar la tapa
4. Orientar el refractómetro hacia la luz
5. Leer el resultado (si se ve borroso se puede ajustar con el ocular)
6. Limpiar el prisma con agua destilada y secar con papel absorbente

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Muestra Grados Brix Cantidad de azúcar (g) en 100 g de disolución

Realiza una reflexión de los resultados obtenidos:

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Cromatografía

Objetivos de la práctica:

- Extraer los pigmentos fotosintéticos de una muestra de espinacas y separarlos


mediante una técnica sencilla de cromatografía en papel.

Fundamento

La cromatografía en papel es una técnica de separación


de sustancias que se basa en las diferentes velocidades
con que son arrastradas cada una de ellas a través de
un medio poroso por un disolvente en movimiento.
En nuestro caso, a medida que el disolvente sube por el
papel de filtro (el medio poroso), arrastra consigo los
pigmentos que contiene la hoja de espinaca. Como no
todos son arrastrados con la misma velocidad, con el
paso del tiempo se forman unas franjas de colores que
corresponden a los distintos componentes.

Materiales

- Mortero
- Embudo
- Vaso de precipitados
- Alcohol 96º
- Papel de filtro
- Hojas de espinaca
- Lápiz o varilla para sujetar el papel de filtro
- Cinta adhesiva

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Desarrollo

1. Lavar las hojas de espinaca, retirar los tallos y ponerlas en un mortero.


2. Añadir alcohol de 96º hasta cubrir el fondo del mortero y triturar la mezcla
hasta que el alcohol adquiera un color verde intenso.
3. Filtrar el contenido del mortero con ayuda del embudo y el
filtro recogiendo el filtrado en un vaso de precipitados.
4. Recortar un trozo rectangular de papel de filtro y enrollar
un extremo en un lápiz o varilla (puedes fijarlo con cinta
adhesiva) de tal manera que el otro extremo llegue al fondo
del vaso (ejemplo en la imágen).
5. Esperar a que la muestra vaya ascendiendo a lo largo del
filtro hasta separar completamente los distintos pigmentos.

Identifica de qué tipo de cromatografía se trata según:

- Naturaleza de sus fases


- Proceso fisicoquímico
- Soporte utilizado

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