Cobacam plantel 07 Tenabo

TINCIONES
DIFERENCIALES
BACTERIOLOGÍA CLÍNICA
501
DOCENTE: DENICE SILVEIRA PERERA
INTEGRANTES:
WILLIAM ALEJANDRO PÉREZ OSALDE
JUAN LUIS REY CANUL FIGUEROA
LUIS ANTONIO CHAN KU "POLLO"
ANTONIO MANUEL GIL LEON
EDUARDO ISAAC CHIN CANCHE
¿QUÉ SON LAS TINCIONES
DIFERENCIALES?

Las tinciones diferenciales son aquellos colorantes diferenciales

que se usan para diferenciar de manera más detallada a los
microorganismos.
Las tinciones diferenciales más importantes son las de Gram y la
de Ziehl-Neelsen.
Ambas tinciones se utilizan para obtener información acerca de
la composición de las capas de la pared celular de las células
bacterianas.
COLORANTES
UN COLORANTE SE DEFINE COMO UNA SUSTANCIA CAPAZ
DE DAR COLOR A LOS MICROORGANISMOS
LOS COLORANTES MÁS UTILIZADOS SON:

CRISTAL VIOLETA SAFRANINA

AZUL DE METILENO
Está tinción sirve para evaluar la La safranina, es un colorante biológico,
Es una tinción para diferenciar
viabilidad celular bajo diversas de contraste que se utiliza en la Tinción
los organismos no
condiciones de estimulación, se de Gram para proporcionar un color
acidorresistentes de las
emplea en el examen violeta más intenso a las bacterias
micobacterias.
bacteriológico de muestras de Gram+ y tiñe de rosa a las bacterias G-
origen humano.
 GRAM POSITIVO
TINCIÓN DE GRAM
Es un examen usado para ayudar a identificar
bacterias, también permite distinguir entre
bacterias Gram positivas y Gram negativa,
en función del grado de permeabilidad de
las paredes celulares al disolvente aplicado
durante la tinción. Los filamentos Gram
positivo se observarán de color azul y los
Gram negativo de color rosado.

La tinción requiere cuatro soluciones un colorante o tinte GRAM NEGATIVO

básico, un mordiente (sustancia que incrementa la afinidad
entre la célula y el tinte), un decolorante (elimina el tinte de
una célula teñida) y un segundo tinte o colorante de contraste
(tinte de color diferente al inicial). Tras la tinción con el
primer colorante (Cristal violeta) se efectúa una decoloración
con etanol que arrastrará al colorante sólo en las Gram
negativas, mientras que en las Gram positivas el colorante
queda retenido y las células permanecerán azules. Las células
Gram negativas seteñirán después con el colorante de
contraste (safranina) para que puedan observarse.
PROCEDIMIENTO PARA
LA TINCIÓN DE GRAM

1. Con un asa de siembra tome una colonia y

extiendela en un porta con el fin de preparar un
frotis bacteriano y fije la preparación
2. Tiña con cristal violeta durante 30 segundos.
3. Tirar el exceso de colorante
4. Añadir lugol, esperar un minuto
5. Decolorar con etanol al 95%, 20 segundos.
6. Lavar con agua.
7. Añadir el colorante de contraste, safranina,
esperar 1 minuto.
8. Lavar con agua.
9. Observar al microscopio (x40, x100).
 TINCIÓN DE GRAM
Instrumentos Reactivos
Varillas de vidrio Cristal violeta
Pileta de coloración Solución de lugol
Mechero de bunsen Alcohol
Acetona
Asa bacteriológica
Safranina
Portaobjetos Aceite de
Pizeta inmersión
Gasas
Microscopio
TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN

Es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, y

gracias a ella se identifican microorganismos patógenos.
La tinción de Ziehl-Neelsen es de tipo diferencial, la principal
función de la tinción de Ziehl-Neelsen es la detección de
micobacterias, tales como las provocadoras de tuberculosis
(Mycobacterium tuberculosis). También hay otras micobacterias
que, si bien no son patógenas, sí que pueden ser patógenos
oportunistas en determinadas circunstancias.
Esto es muy útil, sobre todo teniendo en cuenta que
Mycobacterium tuberculosis no puede ser detectada
correctamente con la tinción de Gram.

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
PROCEDIMIENTO PARA LA
TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN
1. Hidratar y desparafinar los cortes.
2. Colocar ác. periódico al 5% por 10 minutos.
3. Lavar con agua destilada.
4. Agregar fucsina fenicada por 15 minutos.
5. Decolorar en alcohol ácido al 1%.
6. Lavar con agua destilada.
7. Poner la hematoxilina durante 10 minutos.
8. Azulidificar con carbonato de litio.
9. Deshidratar, aclarar y montar la muestra, la muestra
puede ser histológica o citológica.
TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN
Instrumentos Reactivos
Varillas de vidrio Fucsina fenicada
Pileta de coloración Decolorante BK
Azul de Metileno
Mechero de bunsen
Asa bacteriológica
Portaobjetos
Pizeta
Gasas
Microscopio
¡GRACIAS!
UWU