REALIZADO POR:

• Gabriel Caicedo
• Isabella Lara
• Carolina Moncada
• Johanys Rodriguez
1. Coloraciones simples en el laboratorio de Microbiología y su utilidad:
- Tinción de Azul de Metileno: Esta coloración se utiliza para visualizar bacterias en
una muestra, ya que tiñe las células, facilitando su observación al microscopio.
- Tinción de Cristal Violeta: Es una coloración básica que permite teñir la mayoría
de las bacterias para su posterior observación al microscopio.
- Tinción de Safranina: Es una coloración de contraste que se utiliza en
microbiología para teñir células bacterianas. Ayuda a diferenciar bacterias
gramnegativas de grampositivas.
- Tinción de Rojo de Congo: Se utiliza para detectar la presencia de cápsulas en
bacterias, ya que tiñe estas estructuras.

2. Razones para fijar las muestras de cultivo líquido con alcohol en lugar de calor:
La fijación con alcohol es preferida sobre la fijación con calor en muestras de
cultivo líquido debido a las siguientes razones:
- Evita la alteración del tamaño y la morfología de las células: La fijación con calor
puede llevar a la retracción y deformación de las células bacterianas, lo que
dificultaría su correcta observación y análisis microscópico.
- Preserva las estructuras celulares: El alcohol actúa rápidamente, penetrando las
células y preservando su morfología y estructuras internas.
- Evita la formación de artefactos: La fijación con calor puede producir artefactos
en la muestra, lo que dificultaría la interpretación adecuada de los resultados.
- Es más rápido y sencillo: La fijación con alcohol es un procedimiento más rápido
y fácil de realizar en comparación con la fijación con calor, lo que es
especialmente útil cuando se realizan numerosas muestras.

3. Errores que se pueden cometer al realizar un frotis:

- Mala preparación del frotis: Si la muestra no se extiende adecuadamente sobre
el portaobjetos, puede conducir a una distribución desigual de las células y
dificultar su observación.
- Tinción inadecuada: Si la coloración no se realiza correctamente o se omiten
algunos pasos, la muestra puede no teñirse adecuadamente, afectando la
visualización de las células.
- Contaminación de la muestra: La presencia de contaminantes externos puede
interferir con la observación de las bacterias presentes en la muestra.
- Uso excesivo de colorante: Un exceso de colorante puede saturar la muestra y
dificultar la observación de detalles importantes.

- Error en la interpretación: La identificación de las bacterias observadas requiere

experiencia y conocimiento adecuado, por lo que una mala interpretación puede
llevar a resultados erróneos.

4. Cuadro de la tinción de Gram:

Paso Reactivo Tiempo Resultado

1. Tinción Cristal Violeta 1 minuto Todas las células se tiñen de violeta

Alcohol-Acetona 10-30 Gram positivas: Retienen el color

2. Lavado (Etanol) segundos violeta

Gram negativas: Se decoloran y

quedan incoloras

3.
Contratinción Safranina 1 minuto Las Gram positivas siguen violeta;

las Gram negativas se tiñen de rojo

4. Lavado Agua - -

5. Otras coloraciones diferenciales además de la de Gram:

- Tinción de Ziehl-Neelsen: Utilizada para identificar bacterias ácido-alcohol
resistentes, como Mycobacterium tuberculosis, causante de la tuberculosis.
- Tinción de ácido resistente: Similar a Ziehl-Neelsen, utilizada para identificar
bacterias ácido-resistentes, especialmente Mycobacterium leprae, causante de la
lepra.
- Tinción de Kinyoun: Otra tinción para detectar bacterias ácido-resistentes, como
Mycobacterium spp.
- Tinción de tinta china o nigrosina: Empleada para visualizar cápsulas alrededor
de las bacterias.
- Tinción de esporas: Utilizada para identificar la presencia de esporas
bacterianas, como la tinción de Dorner o la de Schaeffer-Fulton.

6. Utilidad y fundamento de la tinción de tinta china o nigrosina:

La tinción de tinta china o nigrosina se utiliza para teñir las cápsulas que rodean
algunas bacterias. Las cápsulas son una capa de polisacáridos externa a la pared
celular que puede proporcionar protección a las bacterias contra la fagocitosis y
otros mecanismos de defensa del sistema inmunológico. Algunas bacterias
patógenas, como Streptococcus pneumoniae y Klebsiella pneumoniae, pueden ser
encapsuladas y, por lo tanto, son más virulentas.
La tinción de tinta china o nigrosina se basa en la propiedad de la cápsula de
repeler colorantes como la nigrosina, lo que da como resultado una apariencia
transparente de la cápsula contra un fondo teñido. Esta técnica permite visualizar
las cápsulas y ayudar en la identificación y clasificación de bacterias.

7. Fundamento y utilidad de la tinción de Schaeffer-Fulton:

La tinción de Schaeffer-Fulton, también conocida como tinción de esporas, es
utilizada para detectar la presencia de esporas bacterianas. Las esporas son
estructuras de resistencia que algunas bacterias forman cuando las condiciones
ambientales se vuelven desfavorables. Estas esporas son altamente resistentes al
calor, la sequedad y otros factores estresantes.
El fundamento de la tinción de Schaeffer-Fulton se basa en el hecho de que las
esporas bacterianas se tiñen con facilidad utilizando ciertos colorantes como la
malachita verde y la safranina. En este método, las esporas se tiñen de verde,
mientras que las células vegetativas se tiñen de rojo con la safranina.
La utilidad de la tinción de Schaeffer-Fulton radica en la identificación de bacterias
que forman esporas, lo que es relevante en el campo de la microbiología clín ica y
ambiental. La presencia de esporas puede tener implicaciones en la resistencia y
persistencia de ciertas bacterias en diferentes entornos, así como en la
patogenicidad de algunas especies.

8. Cuadro con las bacterias solicitadas y sus características:

Bacteria Gram Capsulada Esporas

Staphylococcus aureus Positiva No No

Streptococcus pneumoniae Positiva Sí No

Clostridium perfringes Positiva No Sí

Bacillus cereus Positiva No Sí

Escherichia coli Negativa No No

Proteus mirabilis Negativa No No

Enterococcus faecalis Positiva Sí No

Clostridium botulinum Positiva No Sí

Enterobacter aerogenes Negativa No No

Streptococcus pyogenes Positiva No No

Neisseria meningitidis Negativa No No