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CIEA Juan Sebastian Buitrago Guativa y

Nandy Vanessa Piquetero Molano

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS Y CUANTIFICACIÓN


DE ÁCIDOS GRASOS DE LA LARVA DE PHYLLOPHAGA CRINITA
Juan Sebastian Buitrago Guativa y
Nandy Vanessa Piquetero Molano1

lunes, 26 de septiembre de 2022

RESUMEN (3)

El propósito de este estudio fue identificar cualitativamente carbohidratos y lípidos y cuantitativamente


glucógeno por método de antrona y Molish presentes en larvas y gusanos. Utilizando técnicas como la
cromatografía en capa fina y la cromatografía de gases combinada con masa, se identificaron carbohidratos
como glucosa, fructosa, xilosa, ácidos grasos, triacilgliceroles y colesterol. Por otro lado, la cuantificación por
método de antrona obtuvo un mayor contenido de glucógeno (4.00%) que por el método de Molish (1.49 %),
aunque en la cuantificación de carbohidratos el método de Molish obtuvo mayor precisión que el método de
antrona

Palabras Clave: Carbohidratos, lípidos, ácidos grasos, cromatografía, glucosa, fructosa, xilosa,
triacilgliceroles, colesterol, glucógeno, antrona y Molish

ABSTRACT (2)

The purpose of this study was to identify qualitatively carbohydrates and lipids and quantitatively glycogen by
anthrone and Molish method present in larvae and worms. Using techniques such as thin layer
chromatography and gas chromatography combined with mass, carbohydrates such as glucose, fructose,
xylose, fatty acids, triacylglycerols and cholesterol were identified. On the other hand, quantification by the
anthrone method obtained a higher glycogen content (4.00%) than by the Molish method (1.49%), although
in the quantification of carbohydrates the Molish method obtained greater precision than the anthrone
method.

Key words: Carbohydrates, lipids, fatty acids, chromatography, glucose, fructose, xylose, triacylglycerols,
cholesterol, glycogen, anthrone and Molish.

1. INTRODUCCIÓN (2) la etapa larvaria, porque los componentes


nutricionales más importantes son proteínas ricas
La entomofagia es denominada como el consumo en aminoácidos esenciales, seguido de lípidos;
de insectos por los seres humanos. En muchos además contienen algunas sales minerales y
países del mundo es visto como un tabú pues los vitaminas. Sin embargo, en muchas de estas
insectos no se consideran un alimento especies se desconoce su aporte nutricional.[1]
indispensable en la alimentación, aunque en
regiones de Asia, África y América Latina se El estado larval de los insectos es muy requerido en
practica la entomofagia. Los insectos se ingieren en la entomofagia, ya que a que se almacenan un
todas sus etapas de desarrollo, principalmente en mayor contenido de grasa, que son una buena

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fuente de calorías por el contenido de ácidos útiles para gestionar las grasas y proteínas del
grasos saturados y poliinsaturados, como también organismo.(Lcmedranov, n.d.)
por el aporte de carbohidratos que forman la mayor
parte de su cuerpo [2]

La larva, que se distingue por su color blanco, 2. SECCION EXPERIMENTAL (3)


vellosidad y cuerpo alargado, parcialmente La información acerca de los procedimientos que se
cilíndrico y curvo. Una cabeza prominente de color realizaron para la Identificación de carbohidratos y
negro o marrón que revela mandíbulas fuertes, tres lípidos y también la cuantificación de ácidos grasos
pares de patas que bordean los tres segmentos se encuentra anexado en este documento.
torácicos y permiten identificarlos fácilmente, un
abdomen con diez segmentos, el último más 3. RESULTADOS (10) Y DISCUSIÓN (16)
grande que los demás, y una tráquea enrollada en
A través del proceso de la cromatografía de capa
el tórax a los lados de los segmentos abdominales.
fina para la identificación de lípidos y carbohidratos
El trabajo sobre nutrición de insectos continúa y Cuantificación de glucógeno por el método de
ampliándose con informes sobre hormigas culonas Antrona y Molish, las larvas de Phyllophaga Crinita
para el contenido de proteínas, grasas, cenizas, extraídas en la ciudad de Bogotá en la localidad de
fibra y carbohidratos, llevando a la determinación Tibabita (4.777544608121818,
de aminoácidos como glucosa, fructosa, xilosa, 74.0293555207152), obtuvieron los siguientes
maltosa, etc. En larvas se encontró que eran resultados:
esenciales.
3.1) Identificación cualitativa de
Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue carbohidratos por cromatografía en capa
identificar cualitativamente los carbohidratos fina.
(monosacáridos y disacáridos), los lípidos y
cuantitativamente el glucógeno y los ácidos grasos Tabla 1. Carbohidratos identificados en la larva de
presentes en el tipo A. si la especie contribuye al phyllophaga crinita por cromatografía de capa fina
equilibrio nutricional de estas macromoléculas o
puede ser una fuente potencial de alimento para Carbohidrato Rf (cm)
humanos u otras especies. Los resultados de este
Glucosa 0.82
estudio también permitirán desarrollar nuevos
estudios sobre el valor nutricional de otros Fructosa 0.67
productos metabólicos, que complementarán los
hallazgos encontrados en larvas o servirán como Xilosa 0.57
punto de partida para el estudio de otras especies. A través de la cromatografía de capa fina, se puedo
(Torres-Cifuentes et al., n.d.) observar que en la larva phyllophaga crinita se
Con ayuda de este estudio también podemos encuentran carbohidratos de glucosa, fructosa
determinar la importancia de los carbohidratos que xilosa. Esto se debe que las larvas de son insectos
radica en los beneficios para el organismo. Debido fitófagos los cuales se alimentan principalmente de
a que son las principales fuentes de energía para material orgánico encontrado en la madera muerta
realizar las funciones corporales. Estos son y raíces de las plantas. Este material orgánico de
necesarios, por ejemplo, para el trabajo muscular, madera muerta es rico en celulosa, almidón y
la actividad cerebral o la digestión. Además, son grasas, mientras que las raíces son fuentes ricas en

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hidratos de carbono como el almidón y
hemicelulosa. De ahí podríamos decir que la μg 5 5
glucosa se pudo obtener a través del metabolismo Fd 15 15
de la larva o atreves de la hidrolisis de almidón. Por
otro lado, la Xilosa es posible que se obtenga a Absorbancia 0 0.070
partir de la madera, específicos componentes de
% de Glucógeno 0 1.49
álcalis diluidos, que se hidroliza en ácidos o
componentes de un azúcar utilizando ácidos La cuantificación de glucógeno por el método de
diluidos. [3] entrona en las muestras de sobrenadante fu de
2.64 %, mientras que en el precipitado fue del 4.00
La Ramnosa en un monosacárido de seis carbonos %, los valores obtenidos de porcentaje de
muy raros de encontrar en las especies del reino glucógeno son muchos más altos que en el artículo
animalia, pues principalmente este se encuentra en de referencia, Esta diferencia se debe a que se
algunos tipos de plantas. Uno de ellos es la madera utilizaron más larvas de phyllophaga (15) y que tal
de los pinos, los cuales este carbohidrato es posible la especie de larva Crinita puede variar en el
que pertenezca a la hemicelulosa o sustancias contenido de proteínas y lípidos en comparación a
pépticas. Es posible que esta ramnosa sea parte de la larva de Ustulata.
los oligosacáridos de reconocimiento en superficie
de la larva phyllophaga crinita. [4] Por otro lado, en el método de Molish, solo se
encontró 1.49 % de glucógeno en el precipitado.
Por lo cual podríamos decir que para la
cuantificación de glucógeno el método de antrona
3.2) Cuantificación de glucógeno por el
es mucho más eficaz [2]
método de Antrona y Molish
Grafica 1. Curva patrón del método Antrona para la
Tabla 2. Resultados de la cuantificación de
cuantificación de carbohidratos
glucógeno de larva phyllophaga crinita por el
método de Antrona a 625 nm
Curva patron Antrona
Muestra Gs Gp
Absorbancia

1.200
1.000
μg 5 5 0.800 f(x) = 0.123753333333333 x − 0.35932
0.600 R² = 0.921094223736169
Fd 15 15 0.400
0.200
Absorbancia 0.116 0.176 0.000
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
% de Glucógeno 2.64 4.00
mg/dL

Tabla 3. Resultados de la cuantificación de Grafica 2. Curva patrón del método Antrona para la
glucógeno de phyllophaga crinita por el método de cuantificación de carbohidratos
Molish a 426 nm

Muestra Gs Gp

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phyllophaga Crinita podrían sustituir perfectamente
1.400
Curva patron Molish algunos alimentos, ya que son una fuente potencial
de carbohidratos y se consumirían alrededor de
1.200
Absorbancia

f(x) = 0.158063333333333 x − 0.350391111111111 0.1095 g/L de carbohidratos (si tomamos como


R² = 0.960774818445734
1.000
referencia la solución 1). Estos carbohidratos, en
0.800
especial la glucosa es muy importante para estos
0.600 insectos y para nosotros los humanos, debido a
0.400 que la glucosa proporcionaría la energía para el
0.200 funcionamiento principalmente del cerebro. [7]
0.000
1 2 3 4 5 6
mg/dL 7 8 9 10 11 Fue importante analizar el glucógeno ya que este
realiza un proceso denominado glucogénesis, el
Tabla 4. Concentraciones obtenidas de cual es la síntesis de glucosa a partir de este
carbohidratos en las diferentes diluciones polisacárido, la glucogénesis básicamente es la ruta
anabólica por la que tiene lugar la síntesis de
glucógeno a partir de un precursor más simple, la
Muestr Concentración Concentración
a por el método por el método glucosa-6-fosfato. Se lleva a cabo principalmente
Antrona Molish (mg/dL) en el hígado, y en menor medida en el músculo, es
(mg/dL) activado por insulina en respuesta a los altos
niveles de la glucosa, debido a la ingesta de
1 10,95 9,53
alimentos con carbohidratos. [7]
2 9,57 9,26
Se decidió utilizar prueba Q en los datos de
3 7,80 8,24 absorbancia de la grafica 1, ya que la serie de
datos pareciera seguir una tendencia no lineal sino
4 6,32 7,50
potencial. Los resultados fueron los siguientes:
5 4,88 6,30
Tabla 5. Prueba Q con intervalo de 90% en los
6 4,15 4,68 datos de absorbancia en el método de Antrona

7 3,80 2,94
Dato inicial Valor critico Aceptado o
8 3,42 2,83 Rechazado

9 3,10 2,71 0,025 0,0402 Aceptado

0,064 0,0484 Aceptado

Como se pudo observar en la tabla 4 y en las 0,111 0,0443 Aceptado


gráficas 1 y 2, el método mas preciso fue el
0,154 0,0937 Aceptado
método de Molish, ya que por la curva podemos
observar que esta presenta una menor dispersión 0,245 0,1834 Aceptado
en los datos en comparación al método de antrona,
0,423 0,1885 Aceptado
aunque esto no quita el hecho de que los dos
métodos puedan utilizarse, ya que el R² en las 0,606 0,2256 Aceptado
curvas es algo cercano a 1. Las larvas de

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Octanoico y palmítico se encontró en todas las
0,825 0,1759 Aceptado muestras tanto de phyllophaga crinita como de
0,996 0,1759 Aceptado gusanos en los tenebrios. Se puede evidenciar un
ovalo color azul en la placa, puede ser un ácido
Al realizar la prueba Q en los datos, con el fin de graso libre o un colesterol, esto teniendo en cuanta
identificar y rechazar valores atípicos, podemos la comparación entre el estudio de referencia, de
decir que todos los datos no fueron rechazados, igual forma también se pudo identificar la
por lo cual nos indica que a pesar que los datos no formación de triacilgliceroles
son atípicos, el error podría estar en el proceso
manual al realizar las diluciones. La presencia de colesterol se explica porque es
parte fundamental en las membranas y en el
3.3) Identificación de lípidos por desarrollo de las alas, este también permite la
cromatografía en capa fina síntesis de 20 – hidroxiecdisona y otras hormonas
ecdisteroides C27 que regulan los procesos de
Imagen 1. Cromatografía de capa fina para lípidos,
metamorfosis entre pupa y adulto. El ácido
en el carril 1 es una muestra de precipitado con
palmítico ha sido encontrado en los hidrocarburos
sobrenadante de phyllophaga crinita, el carril 2 es
cuticulares de machos y hembras y el ácido
muestra de precipitado de phyllophaga crinita , el
esteárico se reporta en la participación en la
carril 3 es muestra de sobrenadante de
biosíntesis del principal componente Z9-tricoseno,
phyllophaga crinita, el carril 4 contiene muestra
que es una feromona sexual. [5]
de precipitado de gusanos en los tenebrios , el
carril 5 es muestra de sobrenadante de gusanos en Cabe aclarar que la cromatografía de capa fina
los tenebrios, el carril 6 es patrón de Ácido para identificar lípidos no obtuvo un buen resultado
palmítico, el carril 7 es patrón de Ácido Octanoico ya que la fase móvil se evaporo con la muestra, por
y el carril 8 es un patrón de Ácido esteárico eso se observan líneas azules oscuras en el límite
de la fase estacionaria, esto paso casi igual con la
cromatografía de capa fina para la identificación de
carbohidratos.

4. CONCLUSIONES (10)

El análisis cuantitativo y cualitativo realizado,


permitió concluir que la larva phyllophaga crinita es
fuente de carbohidratos, en especial los
monosacáridos, también es una fuente rica en
lípidos entre estos ácidos grasos esenciales, es
posible que pueda sustituir a ciertos alimentos
debido a la cantidad de estas biomoléculas. El
método de antrona para cuantificar glucógeno fue
mayormente eficaz debido al porcentaje obtenido
(4.00%), aunque el método de Molish la
cuantificación de carbohidratos se obtuvo una
mayor precisión en los datos que por el método e
antrona, si se realizara nuevamente la práctica se
Se identificaron que en carril 2, 3, 4 y 5 contiene podría determinar cual de los 2 métodos es mas
acido esteárico o, es decir que las muestras de eficiente.
phyllophaga crinita y gusanos en los tenebrios
contiene este patrón, por otro lado, el ácido CUESTIONARIO (1)

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No hay cuestionario en esta práctica de laboratorio LARVA DE ANCOGNATHA USTULATA
(COLEOPTERA: MELOLONTHIDAE). 257–264.
5. BIBLIOGRAFÍA (3)

[1] FAO, “La contribución de los insectos a la


seguridad alimentaria, los medios de vida y
el medio ambiente,” Fao, pp. 1–4, 2018,
[Online]. Available:
http://www.fao.org/edible-insects/en/

[2] J. A. Olima, “( C Oleoptera : M Elolonthidae ,


M Elolonthinae ) From,” vol. 55, no. 4, pp.
485–500, 2001.

[3] E. García Martínez, A. Fuentes López, and I.


Fernández Segovia, “Extracción y
cuantificación de cafeína mediante
espectroscopía UV-Visible en café, té y
cacao,” ETSIAMN. Univ. Politècnica València,
pp. 1–9, 2018, [Online]. Available:
https://riunet.upv.es:443/handle/10251/104
055%0Ahttps://riunet.upv.es/bitstream/
handle/10251/104055/García%3BFuentes
%3BFernández - Extracción y cuantificación
de cafeína mediante espectroscopía UV-
Visi....pdf?sequence=1

[4] Blog Tegnologia y ciencia, Universidad


de la laguna, 2018 tomado de:
https://www3.gobiernodecanarias.org/medusa/eco
blog/msiedel/materiales-2/

[5] A. A. Romero López, “‘ECOLOGÍA QUÍMICA


DEL ESCARABAJO Phyllophaga obsoleta
(COLEOPTERA: MELOLONTHIDAE),’” Statew.
Agric. L. Use Baseline 2015, p. 86, 2003,
[Online]. Available:
http://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456
789/399/Binder4.pdf?sequence=1

[6] cmedranov. (n.d.).

[7] Torres-Cifuentes, D., Cortés-Torres, C., &


Ayala, A. (n.d.). IDENTIFICACIÓN DE
CARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS Y
CUANTIFICACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS DE LA
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