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OCDE/OCDE 423
Adoptado:
17 de diciembre de 2001

DIRECTRICES DE LA OCDE PARA PRUEBAS DE PRODUCTOS QUÍMICOS

Toxicidad Oral Aguda – Método de Clase Tóxica Aguda

INTRODUCCIÓN

1. Las Directrices de la OCDE para el Ensayo de Productos Químicos se revisan periódicamente a la luz del progreso
científico o de las prácticas de evaluación cambiantes. La Directriz 423 original se adoptó en marzo de 1996 como la segunda
alternativa a la prueba de toxicidad aguda convencional, descrita en la Directriz de prueba 401. Sobre la base de las recomendaciones
de varias reuniones de expertos, se consideró oportuna la revisión porque: i) se ha llegado a un acuerdo internacional sobre la
armonización Valores límite de LD50 para la clasificación de sustancias químicas, que difieren de los límites recomendados en la
versión de 1996 de la Guía, y ii) ahora se considera suficiente la prueba en un sexo (generalmente mujeres).

2. El método de clasificación de tóxicos agudos (1) establecido en esta Guía es un procedimiento por
etapas con el uso de 3 animales de un solo sexo por etapa. Dependiendo de la mortalidad y/o el estado moribundo
de los animales, pueden ser necesarios un promedio de 2 a 4 pasos para poder juzgar la toxicidad aguda de la
sustancia de ensayo. Este procedimiento es reproducible, utiliza muy pocos animales y puede clasificar las
sustancias de manera similar a los otros métodos de prueba de toxicidad aguda (Directrices de prueba 420 y
425). El método de clasificación de toxicidad aguda se basa en evaluaciones biométricas (2)(3)(4)(5) con dosis
fijas, adecuadamente separadas para permitir clasificar una sustancia con fines de clasificación y evaluación de
peligros. El método adoptado en 1996 fue ampliamente validado in vivo frente a los datos de LD50 obtenidos de
la literatura, tanto a nivel nacional (6) como internacional (7).

3. En el documento de orientación sobre pruebas de toxicidad oral aguda (8) se puede encontrar orientación
sobre la selección del método de prueba más apropiado para un fin determinado. Este Documento de orientación
también contiene información adicional sobre la realización e interpretación de la Directriz de prueba 423.

4. Las definiciones utilizadas en el contexto de esta Guía se establecen en el Anexo 1.

CONSIDERACIONES INICIALES

debido a lasNo
acciones
es necesario
corrosivas
administrar
o intensamente
las sustancias
irritantes.
de ensayo,
Los animales
en dosis
moribundos,
que se sabe
o los
queanimales
causan con
dolordolor
y malestar
evidente
marcados
o que
muestren signos de angustia grave y duradera, se sacrificarán sin crueldad y se considerarán en la interpretación de los resultados
de la prueba de la misma manera que los animales que murieron en la prueba. Los criterios para tomar la decisión de sacrificar
animales moribundos o que sufren gravemente, y la orientación sobre el reconocimiento de una muerte predecible o inminente, son
objeto de un Documento de orientación independiente (9).

GlobalmenteElArmonizado
método utiliza
para
dosis
la clasificación
predefinidasdey sustancias
los resultados
químicas
permiten
quejerarquizar
causan toxicidad
y clasificar
aguda
una(10).
sustancia 6. según el Sistema

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423 OCDE/OCDE
7. En principio, el método no pretende permitir el cálculo de una LD50 precisa, pero sí permite la determinación de
rangos de exposición definidos en los que se espera letalidad, ya que la muerte de una proporción de los animales sigue
siendo el criterio de valoración principal de esta prueba. El método permite la determinación de un valor LD50 solo cuando
al menos dos dosis dan como resultado una mortalidad superior al 0% e inferior al 100%. El uso de una selección de dosis
predefinidas, independientemente de la sustancia de prueba, con una clasificación explícitamente vinculada a la cantidad
de animales observados en diferentes estados, mejora la oportunidad de que los informes de laboratorio a laboratorio sean
consistentes y repetibles.

8. realizar el
Elestudio.
laboratorio
Dicha
de información
pruebas debeincluirá
considerar
la identidad
toda layinformación
estructura química
disponible
de sobre
la sustancia;
la sustancia
sus propiedades
de prueba antes
físico-de
químicas; el resultado de cualquier otro ensayo de toxicidad in vivo o in vitro de la sustancia; datos toxicológicos sobre las
sustancias estructuralmente relacionadas; y los usos previstos de la sustancia. Esta información es necesaria para
convencer a todos los interesados de que la prueba es relevante para la protección de la salud humana y ayudará en la
selección de la dosis inicial más adecuada.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

9. El principio del ensayo es que, sobre la base de un procedimiento por etapas con el uso de un número mínimo
de animales por paso, se obtiene suficiente información sobre la toxicidad aguda de la sustancia de ensayo para permitir
su clasificación. La sustancia se administra por vía oral a un grupo de animales de experimentación a una de las dosis
definidas. La sustancia se prueba utilizando un procedimiento por etapas, cada paso utilizando tres animales del mismo
sexo (normalmente hembras). La ausencia o presencia de mortalidad relacionada con el compuesto de los animales
dosificados en un paso determinará el siguiente paso, es decir;

no se necesitan más pruebas,

dosificación de tres animales adicionales, con la misma dosis
dosificación de tres animales adicionales en el siguiente nivel de dosis más alto o más bajo.

10 Los detalles del procedimiento de prueba se describen en el Anexo 2. El método permitirá un juicio con respecto
a la clasificación de la sustancia de prueba en una de una serie de clases de toxicidad definidas por valores de corte de
LD50 fijos.

DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO

Selección de especies animales

11 La especie de roedor preferida es la rata, aunque se pueden usar otras especies de roedores. Normalmente se
utilizan hembras (9). Esto se debe a que las encuestas bibliográficas de las pruebas convencionales de LD50 muestran
que, aunque hay poca diferencia en la sensibilidad entre los sexos, en los casos en que se observan diferencias, las
mujeres son generalmente un poco más sensibles (11). Sin embargo, si el conocimiento de las propiedades toxicológicas
o toxicocinéticas de sustancias químicas estructuralmente relacionadas indica que es probable que los machos sean más
sensibles, entonces se debe usar este sexo. Cuando la prueba se realice en varones, deberá aportarse una justificación
adecuada.

12 Deben emplearse animales adultos jóvenes sanos de las cepas de laboratorio comúnmente utilizadas. Las
hembras deben ser nulíparas y no embarazadas. Cada animal, al comienzo de su dosificación, debe tener entre 8 y 12
semanas de edad y su peso debe caer en un intervalo de + 20 % del peso medio de cualquier animal previamente dosificado.

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OCDE/OCDE 423
Condiciones de alojamiento y alimentación.

13 La temperatura en la sala de animales de experimentación debe ser de 22ºC (+ 3ºC). Aunque la humedad relativa debe ser al
menos del 30 % y preferiblemente no exceder el 70 %, excepto durante la limpieza de la habitación, el objetivo debe ser del 50 al 60 %.
La iluminación debe ser artificial, siendo la secuencia de 12 horas de luz, 12 horas de oscuridad. Para la alimentación se pueden utilizar
dietas de laboratorio convencionales con un suministro ilimitado de agua potable. Los animales pueden agruparse en jaulas por dosis,
pero el número de animales por jaula no debe interferir con las observaciones claras de cada animal.

preparación de animales

14. Los animales se seleccionan al azar, se marcan para permitir su identificación individual y se mantienen en sus
jaulas durante al menos 5 días antes de la dosificación para permitir la aclimatación a las condiciones del laboratorio.

Preparación de dosis

15. En general, las sustancias de prueba deben administrarse en un volumen constante en el rango de dosis que se va a probar
variando la concentración de la preparación de dosificación. Sin embargo, cuando se va a probar un producto final líquido o una mezcla,
el uso de la sustancia de prueba sin diluir, es decir, a una concentración constante, puede ser más relevante para la evaluación de riesgos
posterior de esa sustancia, y es un requisito de algunas autoridades reguladoras. En cualquier caso, no se debe exceder el volumen
máximo de dosis para la administración. El volumen máximo de líquido que se puede administrar de una vez depende del tamaño del
animal de prueba. En roedores, el volumen normalmente no debe exceder 1 mL/100 g de peso corporal; sin embargo, en el caso de
soluciones acuosas, se puede considerar 2 mL/100 g de peso corporal. Con respecto a la formulación de la preparación dosificadora, se
recomienda el uso de una solución/suspensión/emulsión acuosa siempre que sea posible, seguida en orden de preferencia por una
solución/suspensión/emulsión en aceite (por ejemplo, aceite de maíz) y luego, posiblemente, una solución en otro vehículos Para vehículos
que no sean agua, se deben conocer las características toxicológicas del vehículo. Las dosis deben prepararse poco antes de la
administración, a menos que se conozca y se demuestre que la estabilidad de la preparación durante el período durante el cual se utilizará
es aceptable.

PROCEDIMIENTO

Administración de dosis.

dieciséis.
La sustancia de prueba se administra en una dosis única por sonda utilizando un tubo estomacal o una cánula de intubación
adecuada. En la circunstancia inusual de que una dosis única no sea posible, la dosis puede administrarse en fracciones más pequeñas
durante un período que no exceda las 24 horas.

durante la noche,
Los animales
con el ratón,
deben seestar
debeen
suspender
ayunas antes
la comida
de la pero
dosificación
no el agua
(p. ej.,
durante
con la3-4
rata,
horas).
se debe
Después
suspender
del período
la comida
de ayuno,
pero nolos
el agua
animales deben pesarse y administrarse la sustancia de ensayo. Después de administrar la sustancia, se puede suspender la comida
durante 3-4 horas más en ratas o 1-2 horas en ratones. Cuando una dosis se administre en fracciones durante un período, puede ser
necesario proporcionar a los animales comida y agua dependiendo de la duración del período.

Número de animales y niveles de dosis

niveles fijos,Se
5, 50,
utilizan
300 tres
y 2000
animales
mg/kg para
de peso
cadacorporal.
paso. ElElnivel
niveldededosis
dosisa inicial
utilizardebe
comoser
dosis
el que
inicial
tenga
se selecciona
más probabilidades
18. de uno
dede
producir
cuatro
mortalidad en algunos de los animales dosificados. Los diagramas de flujo del Anexo 2 describen el procedimiento a seguir para cada una
de las dosis iniciales.

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423 OCDE/OCDE

19 Cuando la información disponible sugiera que la mortalidad es poco probable con el nivel de dosis inicial más alto (2000
mg/kg de peso corporal), se debe realizar una prueba límite. Cuando no hay información sobre una sustancia a ensayar, por razones
de bienestar animal se recomienda utilizar la dosis inicial de 300 mg/kg de peso corporal.

20 El intervalo de tiempo entre los grupos de tratamiento está determinado por el inicio, la duración y la gravedad de los signos tóxicos.
El tratamiento de los animales con la siguiente dosis debe retrasarse hasta que se tenga confianza en la supervivencia de los animales
que recibieron la dosis anterior.

21 Excepcionalmente, y solo cuando lo justifiquen las necesidades reglamentarias específicas, se puede considerar el uso
de un nivel de dosis superior adicional de 5000 mg/kg de peso corporal (ver Anexo 3). Por motivos de preocupación por el bienestar
animal, se desaconseja la realización de pruebas en animales en los rangos de la categoría 5 del SGA (2000-5000 mg/kg) y solo se
debe considerar cuando exista una gran probabilidad de que los resultados de dicha prueba tengan una relevancia directa para la
protección de seres humanos o animales. la salud o el medio ambiente.

Prueba de límite

22 La prueba límite se usa principalmente en situaciones en las que el experimentador tiene información que indica que es
probable que el material de prueba no sea tóxico, es decir, que tenga toxicidad solo por encima de las dosis límite reglamentarias.
La información sobre la toxicidad del material de prueba se puede obtener a partir del conocimiento sobre compuestos probados
similares o mezclas o productos probados similares, teniendo en cuenta la identidad y el porcentaje de componentes que se sabe
que tienen importancia toxicológica. En aquellas situaciones en las que haya poca o ninguna información sobre su toxicidad, o en las
que se espere que el material de prueba sea tóxico, se debe realizar la prueba principal.

23. Se puede realizar una prueba límite a un nivel de dosis de 2000 mg/kg de peso corporal con seis animales (tres animales por
paso). Excepcionalmente, se puede realizar una prueba límite a un nivel de dosis de 5000 mg/kg con tres animales (ver Anexo 3). Si
se produce mortalidad relacionada con la sustancia de ensayo, es posible que sea necesario realizar más ensayos en el siguiente
nivel inferior.

OBSERVACIONES

24 Los animales se observan individualmente después de la dosificación al menos una vez durante los primeros 30 minutos,
periódicamente durante las primeras 24 horas, con especial atención durante las primeras 4 horas, y diariamente a partir de entonces,
durante un total de 14 días, excepto cuando sea necesario retirarlos. del estudio y asesinados humanamente por razones de
bienestar animal o son encontrados muertos. Sin embargo, la duración de la observación no debe fijarse de manera rígida. Debe
estar determinado por las reacciones tóxicas, el tiempo de inicio y la duración del período de recuperación, y por lo tanto puede
extenderse cuando se considere necesario. Los momentos en que aparecen y desaparecen los signos de toxicidad son importantes,
especialmente si existe una tendencia a que los signos tóxicos se retrasen (12). Todas las observaciones se registran
sistemáticamente y se mantienen registros individuales para cada animal.

25 Serán necesarias observaciones adicionales si los animales continúan mostrando signos de toxicidad.
Las observaciones deben incluir cambios en la piel y el pelaje, los ojos y las membranas mucosas, y también los sistemas respiratorio,
circulatorio, autónomo y nervioso central, y la actividad somatomotora y el patrón de comportamiento.
Se debe prestar atención a las observaciones de temblores, convulsiones, salivación, diarrea, letargo, sueño y coma. Deben tenerse
en cuenta los principios y criterios resumidos en el documento de orientación Humane Endpoints (9). Los animales que se encuentren
en un estado moribundo y los animales que muestren un dolor intenso o signos duraderos de angustia grave deben sacrificarse sin
crueldad. Cuando se sacrifican animales por razones humanitarias o se encuentran muertos, la hora de la muerte debe registrarse
con la mayor precisión posible.

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OCDE/OCDE 423
Peso corporal

26 Los pesos individuales de los animales deben determinarse poco antes de que se administre la sustancia de ensayo y
al menos una vez por semana a partir de entonces. Los cambios de peso deben calcularse y registrarse. Al final de la prueba, los
animales supervivientes se pesan y se sacrifican sin crueldad.

Patología

27 Todos los animales de prueba (incluidos los que mueren durante la prueba o se retiran del estudio por razones de
bienestar animal) deben someterse a una necropsia macroscópica. Todos los cambios patológicos graves deben registrarse para
cada animal. También se puede considerar el examen microscópico de órganos que muestren evidencia de patología macroscópica
en animales que sobreviven 24 horas o más porque puede brindar información útil.

DATOS E INFORMES

Datos

28 Deben proporcionarse datos de animales individuales. Además, todos los datos deben resumirse en forma tabular,
mostrando para cada grupo de ensayo el número de animales utilizados, el número de animales que muestran signos de toxicidad,
el número de animales encontrados muertos durante el ensayo o sacrificados por razones humanitarias, hora de la muerte de
animales individuales, una descripción y el curso temporal de los efectos tóxicos y la reversibilidad, y los hallazgos de la necropsia.

Informe de prueba

29 El informe de ensayo debe incluir la siguiente información, según corresponda:

Sustancia de prueba:

naturaleza física, pureza y, en su caso, propiedades fisicoquímicas (incluida la isomerización); datos de

identificación, incluido el número CAS.

Vehículo (si procede):

justificación de la elección del vehículo, si no es agua.

Animales de prueba:

especie/cepa utilizada;
estado microbiológico de los animales, cuando se conozca;
número, edad y sexo de los animales (incluyendo, cuando corresponda, una justificación para el uso de
machos en lugar de hembras); fuente, condiciones de vivienda, dieta, etc.

Condiciónes de la prueba:

detalles de la formulación de la sustancia de prueba, incluidos detalles de la forma física del

material administrado; detalles de la administración de la sustancia de ensayo, incluidos los
volúmenes de dosificación y el momento de la dosificación; detalles de la calidad de los alimentos
y el agua (incluyendo tipo/fuente de dieta, fuente de agua); la justificación de la selección de la
dosis inicial.

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423 OCDE/OCDE
Resultados:

tabulación de los datos de respuesta y nivel de dosis para cada animal (es decir, animales que muestran
signos de toxicidad, incluida la mortalidad; naturaleza, gravedad y duración de los efectos); tabulación del
peso corporal y cambios en el peso corporal; pesos individuales de los animales el día de la dosificación,
en intervalos semanales a partir de entonces y en el momento de la muerte o el sacrificio; fecha y hora
de la muerte si es anterior al sacrificio programado; evolución temporal de la aparición de los signos de
toxicidad y si estos eran reversibles para cada animal; hallazgos de necropsia y hallazgos histopatológicos
para cada animal, si están disponibles.

Discusión e interpretación de resultados.

Conclusiones.

LITERATURA

(1) Roll R., Höfer-Bosse Th. y Kayser D. (1986). Nuevas perspectivas en las pruebas de toxicidad aguda de productos
químicos. Toxicol. Lett., Supl. 31, 86.

(2) Roll R, Riebschläger M, Mischke U y Kayser D (1989). Nuevas formas de determinar la toxicidad aguda de los productos
químicos. Gaceta Federal de Salud 32, 336-341.

(3) Diener W., Sichha L., Mischke U., Kayser D. y Schlede E. (1994). La Evaluación Biométrica del Método de Clase Tóxica
Aguda (Oral). Arco. Toxicol. 68, 559-610.

(4) Diener W., Mischke U., Kayser D. y Schlede E. (1995). La evaluación biométrica de la versión modificada de la OCDE
del método de clase de toxicidad aguda (oral). Arco. Toxicol. 69, 729-734.

(5) Diener W. y Schlede E. (1999) Métodos de clase de toxicidad aguda: alternativas a las pruebas LD/LC50.
ALTEX 16, 129-134.

(6) Schlede E., Mischke U., Roll R. y Kayser D. (1992). Un estudio de validación nacional del método de clase de tóxicos
agudos: una alternativa a la prueba LD50. Arco. Toxicol. 66, 455-470.

(7) Schlede E., Mischke U., Diener W. y Kayser D. (1994). El estudio de validación internacional del método de clase de
toxicidad aguda (oral). Arco. Toxicol. 69, 659-670.

(8) Documento de orientación sobre toxicidad oral aguda de la OCDE (2000). Salud ambiental y seguridad
Serie de monografías sobre pruebas y evaluación n.º 24.

(9) Documento de orientación de la OCDE (2000) sobre el reconocimiento, la evaluación y el uso de signos clínicos como puntos
finales humanitarios para animales de experimentación utilizados en la evaluación de la seguridad Serie de monografías
de seguridad y salud ambiental sobre pruebas y evaluación n.º 19.

(10) OCDE (1998) Sistema Integrado Armonizado de Clasificación de Peligros para la Salud Humana y los Efectos Ambientales
de las Sustancias Químicas, aprobado por la 28ª Reunión Conjunta del Comité de Productos Químicos y el Grupo de
Trabajo sobre Productos Químicos en noviembre de 1998, Parte 2, p. 11 [http://webnet1.oecd.org/oecd/pages/home/
displaygeneral/0,3380,EN-documents-521-14-no-24-no-0,FF.html].

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OCDE/OCDE 423
(11) Lipnick RL, Cotruvo, JA, Hill RN, Bruce RD, Stitzel KA, Walker AP, Chu I; Goddard M, Segal L,
Springer JA y Myers RC (1995) Comparación de los procedimientos de toxicidad aguda ascendente
y descendente, LD50 convencional y dosis fija. Fd. química Toxicol 33, 223-231.

(12) Chan PK y AW Hayes. (1994). Cap. 16. Toxicidad aguda e irritación ocular. Principios y Métodos de
Toxicología. Tercera edicion. AW Hayes, Editor. Raven Press, Ltd., Nueva York, Estados Unidos.

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423 OCDE/OCDE
ANEXO 1

DEFINICIONES

La toxicidad oral aguda se refiere a los efectos adversos que ocurren después de la administración oral de una dosis única de una
sustancia o dosis múltiples administradas dentro de las 24 horas.

Muerte tardía significa que un animal no muere o parece moribundo dentro de las 48 horas, sino que muere más tarde durante el
período de observación de 14 días.

La dosis es la cantidad de sustancia de ensayo administrada. La dosis se expresa como el peso de la sustancia de ensayo por unidad
de peso del animal de ensayo (p. ej., mg/kg).

GHS: Sistema de Clasificación Globalmente Armonizado de Sustancias y Mezclas Químicas. Una actividad conjunta de la OCDE (salud
humana y medio ambiente), el Comité de Expertos en Transporte de Mercancías Peligrosas de la ONU (propiedades físico-químicas) y
la OIT (comunicación de peligros) y coordinada por el Programa Interinstitucional para la Gestión Racional de los Productos Químicos
(IOMC ).

Muerte inminente: cuando se espera el estado moribundo o la muerte antes del próximo tiempo planificado de observación.
Los signos indicativos de este estado en roedores podrían incluir convulsiones, posición lateral, recumbencia y temblor (consulte el
Documento de orientación de punto final humano (9) para obtener más detalles).

LD50 (dosis oral letal media) es una dosis única derivada estadísticamente de una sustancia que se puede esperar que cause la muerte
en el 50 por ciento de los animales cuando se administra por vía oral. El valor LD50 se expresa en términos de peso de la sustancia de
ensayo por unidad de peso del animal de ensayo (mg/kg).

La dosis límite se refiere a una dosis en un límite superior en la prueba (2000 o 5000 mg/kg).

Estado moribundo: estar en un estado de muerte o incapacidad para sobrevivir, incluso si recibe tratamiento (consulte el Documento de orientación de
puntos finales humanitarios (9) para obtener más detalles).

Muerte predecible: presencia de signos clínicos indicativos de muerte en un momento conocido en el futuro antes del final previsto del
experimento; por ejemplo: incapacidad para alcanzar el agua o la comida. (Consulte el documento de orientación Humane Endpoint (9)
para obtener más detalles).

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OCDE/OCDE 423
ANEXO 2

PROCEDIMIENTO A SEGUIR PARA CADA UNA DE LAS DOSIS DE INICIO

OBSERVACIONES GENERALES

Para cada dosis inicial, los esquemas de prueba respectivos que se incluyen en este Anexo describen el
1. Procedimiento a seguir.

Anexo 2 a: La dosis inicial es de 5 mg/kg bw

Anexo 2 b: La dosis inicial es de 50 mg/kg bw
Anexo 2 c: La dosis inicial es: 300 mg/kg bw
Anexo 2 d: La dosis inicial es: 2000 mg/kg bw

Dependiendo del número de animales sacrificados o muertos en condiciones humanitarias, el procedimiento de prueba sigue el indicado
flechas

9/14
 423
mg/
kg
peso
corporal Corte
LD50 SGA
-GHS:
Sistema
de
Clasificación
Globalmente
Armonizado
(mg/
kg
bw)-0,1,2,3:
Número
de
animales
moribundos
o
muertos
en
cada
paso-por
paso
se
utilizan
tres
animales
de
un
solo
sexo
(normalmente
hembras) >
0-5
1 Categoría
5 2-3 ANEXO
2a:
PROCEDIMIENTO
DE
PRUEBA
CON
UNA
DOSIS
INICIAL
DE
5
MG/
KG
DE
PESO
CORPORAL
2-3
3
animales
3
animales
5
mg/
kg
5
mg/
kg
5
mg/
kg
comienzo
0-1 0-1
25
Categoría
2
>
5
-50
30 2-3 2-3
3
animales
3
animales 50
mg/
kg
50
mg/
kg 3
animales
50
mg/
kg
50
0-1 0-1
Categoría
3
>
50
-300
200
10/14 OCDE/
OCDE
2-3 2-3
3
animales
300
mg/
kg
3
animales
300
mg/
kg
3 300
mg/
kg
animales
-Pruebas
a
5000
mg/
kg
bw:
ver
Anexo
3 -ÿsin
clasificar
:
300
500
1000
0-1 0-1
3 Categoría
4
>
300
-2000
2
2-3 2000mg/
kg
2-3 2000mg/
kg 3
animales
2000mg/
kg
3
animales
3
animales
2000
>
2000
-5000Categoría
5
0-1 0-1
1
2500
5000
Desclasificado
Categoría
5
o
0 00
ÿ
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 mg/
kg
peso
corporal Corte
LD50 SGA
-GHS:
Sistema
de
Clasificación
Globalmente
Armonizado
(mg/
kg
bw)-0,1,2,3:
Número
de
animales
moribundos
o
muertos
en
cada
paso-por
paso
se
utilizan
tres
animales
de
un
solo
sexo
(normalmente
hembras) >
0-5
1 Categoría
ANEXO
2b:
PROCEDIMIENTO
DE
PRUEBA
CON
UNA
DOSIS
INICIAL
DE
50
MG/
KG
DE
PESO
CORPORAL
5 2-3
2-3
3
animales
3
animales
3
animales
5
mg/
kg
5
mg/
kg
5
mg/
kg
en
el
1er3
(a
los
50)
paso
Categoría
2 0-1 0-1
>
5
-50
25
30
2-3 2-3
3
animales
3
animales 50
mg/
kg
50
mg/
kg
50
mg/
kg 3
animales
comienzo
otro
50
0-1 0-1
Categoría
3
>
50
-300
OCDE/
OCDE
200
2-3 2-3
300
mg/
kg
3
animales
300
mg/
kg
3
animales
3 300
mg/
kg
animales
-Pruebas
a
5000
mg/
kg
bw:
ver
Anexo
3 -ÿsin
clasificar
:
11/14
300
500
1000
0-1 0-1
Categoría
4
3 >300
-2000
2 2-3 2000mg/
kg
2-3 2000mg/
kg 3
animales
2000mg/
kg
3
animales
3
animales
2000
Categoría
5
0-1 0-1
>
2000
-5000
1
2500
Desclasificado
Categoría
5
o
5000
0 00
ÿ
423
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 423
mg/
kg
peso
corporal Corte
LD50 SGA
-GHS:
Sistema
de
Clasificación
Globalmente
Armonizado
(mg/
kg
bw)-0,1,2,3:
Número
de
animales
moribundos
o
muertos
en
cada
paso
-por
paso
se
utilizan
tres
animales
de
un
solo
sexo
(normalmente
hembras) Categoría
>
0-5
1
ANEXO
2c:
PROCEDIMIENTO
DE
PRUEBA
CON
UNA
DOSIS
INICIAL
DE
300
MG/
KG
DE
PESO
CORPORAL
5 2-3
2-3
3
animales
en
el
1er
paso 3
(a
los
50)
3
animales
5
mg/
kg
5
mg/
kg
5
mg/
kg
Categoría
2
>
5
-50
0-1 0-1
25
30
2-3 2-3
otro
3
animales
3
animales 50
mg/
kg
50
mg/
kg 3
animales
50
mg/
kg
50
Categoría
3
0-1 0-1
3
(en
300)
en
el
1er
paso
>
50
-300
200
2-3 2-3
3
animales
300
mg/
kg
300
mg/
kg
3
animales
3 300
mg/
kg
animales
-Pruebas
a
5000
mg/
kg
bw:
ver
Anexo
3 -ÿsin
clasificar
:
comienzo
otro
300
12/14 OCDE/
OCDE
>
300
-2000
0-1 0-1
Categoría
4
500
3
1000
2
2-3 2000mg/
kg
2-3 2000mg/
kg 3
animales
2000mg/
kg
3
animales
3
animales
2000
Categoría
5
>
2000
-5000 0-1 0-1
1
2500
5000
Categoría
5o
Desclasificado
0 00
ÿ
Machine Translated by Google
 mg/
kg
peso
corporal Corte
LD50 SGA
-GHS:
Sistema
de
Clasificación
Globalmente
Armonizado
(mg/
kg
bw)-0,1,2,3:
Número
de
animales
moribundos
o
muertos
en
cada
paso-por
paso
se
utilizan
tres
animales
de
un
solo
sexo
(normalmente
hembras)
1 Categoría
>
0-5
ANEXO
2d:
PROCEDIMIENTO
DE
PRUEBA
CON
UNA
DOSIS
INICIAL
DE
2000
MG/
KG
DE
PESO
CORPORAL
5 2-3
2-3
3
animales
3
animales
5
mg/
kg
5
mg/
kg
5
mg/
kg
en
el
1er 50)
paso 3(alos
Categoría
2
>
5
-50
25
0-1 0-1
30
2-3 2-3
3
animales
3
animales 50
mg/
kg
50
mg/
kg 3
animales
otro 50
mg/
kg
50
Categoría
3
>
50
-300
0-1 0-1
en
el
1er
paso
3
(en
300)
OCDE/
OCDE
200
13/14
2-3 2-3
3
animales
300
mg/
kg
3
animales
300
mg/
kg
3 300
mg/
kg
animales
-Pruebas
a
5000
mg/
kg
bw:
ver
Anexo
3 -ÿsin
clasificar
:
otro
300
Categoría
4
>
300
-2000
0-1 0-1
500
(en
2000)
en
el
21er
paso
3
(en
2000)
en
el
1er
paso
1000
2-3 2000mg/
kg
2-3 2000mg/
kg 3
animales
2000mg/
kg
3
animales
3
animales
>
2000
-5000
comienzo
Categoría
5
otro
2000
0-1 0-1
1
2500
Categoría
5
o
Desclasificado
5000
0 00 423
ÿ
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google

423 OCDE/OCDE

ANEXO 3

CRITERIOS PARA LA CLASIFICACIÓN DE SUSTANCIAS DE PRUEBA CON DL50 ESPERADA

VALORES SUPERIORES A 2000 MG/KG SIN NECESIDAD DE ENSAYOS

que 1. tienen
Losuncriterios
peligro para
de toxicidad
la categoría
agudaderelativamente
peligro 5 están
bajo
destinados
pero que,a en
permitir
determinadas
la identificación
circunstancias,
de sustancias
pueden
depresentar
prueba
un peligro para las poblaciones vulnerables. Se prevé que estas sustancias tengan una LD50 oral o dérmica en el rango de
2000-5000 mg/kg o dosis equivalentes para otras vías. La sustancia de ensayo debe clasificarse en la categoría de peligro
definida por: 2000 mg/kg<DL50<5000 mg/kg (Categoría 5 en el GHS) en los siguientes

casos:

a) Si se dirige a esta categoría por cualquiera de los esquemas de prueba del Anexo 2a-2d, con base en la mortalidad
incidencias;

b) si ya se dispone de pruebas fiables que indican que la LD50 se encuentra en el rango de valores de la Categoría
5, u otros estudios en animales o efectos tóxicos en humanos indican una preocupación aguda para la salud
humana.

c) Mediante extrapolación, estimación o medición de datos si no se justifica la asignación a una categoría más
peligrosa, y

hay información confiable disponible que indica efectos tóxicos significativos en humanos, o
se observa mortalidad cuando se analizan hasta valores de Categoría 4 por vía oral, o cuando
el juicio de expertos confirma signos clínicos significativos de toxicidad, cuando se analizan hasta
valores de Categoría 4, excepto para diarrea , piloerección o apariencia descuidada, o cuando el juicio
de expertos confirme información confiable que indique el potencial de efectos agudos significativos de
los otros estudios con animales.

PRUEBAS A DOSIS SUPERIORES A 2000 MG/KG

animales deReconociendo
la Categoría 5la
(5000
necesidad
mg/kg)de
2.proteger
y solo debe
el bienestar
considerarse
de loscuando
animales,
exista
se una
desaconseja
gran probabilidad
la realización
de que
delos
pruebas
resultados
en de
dicha prueba tengan una relevancia directa para proteger a los seres humanos o a los animales. sanidad animal (10). No se deben
realizar más pruebas a niveles de dosis más altos.

Cuando se requiere una dosis de prueba de 5000 mg/kg, solo se requiere un paso (es decir, tres animales). Si
3. el primer animal dosificado , entonces la dosificación procede a 2000 mg/kg de acuerdo con los diagramas de flujo en
muere Anexo 2. Si el primer animal sobrevive, dos animales más son dosificados. Si solo uno de los tres animales muere, ,
se espera que el valor LD50 supere los 5000 mg/kg. Si ambos animales mueren, la dosificación procede a 2000 mg/kg.

14/14