ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS IPN

LABORATORIO DE QUÍMICA
ORGÁNICA.

PRÁCTICA 3 Extracción en fase

sólida. Separación de colorantes
sintéticos

INTRODUCCIÓN

EFS (Extracción Fase Sólida) es una técnica que RESULTADOS

permite concentrar y separar un analito, catiónico o
aniónico de una matriz compleja, mediante una fase
Mancha Rf
sólida estacionaria. Como resultado, se elimina la
matriz interferente, no retenida y, el analito se
1 0.35
puede analizar con la mejor sensibilidad posible,
mediante la técnica analítica adecuada, evitando el
2 0.59
riesgo de las interferencias de matriz.
3 0.53

4 Amarillo 0.31

Rojo
0.42

1. Antecedentes del tema.

La microextracción en fase sólida (SPME), fue

desarrollada por Pawliszyn y colaboradores en 1990.
Fue desarrollada para facilitar la preparación de
muestras de manera más rápida, tanto en el laboratorio
como donde esté localizada el lugar de la toma de
muestra..
Se ha utilizado de forma rutinaria en combinación con
cromatografía de gases y espectrometría de masas.

OBJETIVOS DISCUSIÓN

➔ Separar una mezcla de colorantes
sintéticos usados en alimentos, tartrazina
y rojo numero 3, por extraccion en fase
solida, aplicando los conceptos de
cromatografia en fase
reversa.
➔ Comprobar la eficiencia de la separación
por medio de la cromatografía en capa
fina sobre la gel silice
Objetivos específicos:
Dado que cada componente de una mezcla
conserva sus propiedades, podemos separar una
mezcla en sus componentes aprovechando las
diferencias en sus propiedades. (Brown, 2003) La
eficiencia en esta separación radicó tanto en la
polaridad de los colorantes como la fase
estacionaria así como el disolvente que utilizamos
para la extracción de cada uno de los componentes
de la mezcla. Se puede definir entonces, a la
extracción como la separación de un componente
por acción de un solvente que lo disuelva
selectivamente. (Galagovky).
CUESTIONARIO
a) Definir los siguientes conceptos:
Eluir:Arrastrar mediante un líquido o fluido
sustancias adheridas o absorbidas en una columna
cromatografía
Eluyente:sustancia que se añade en una columna
cromatográfica para hacer eluir (mover) nuestro
producto de interés
Eluato:Producto o sustancia que se separa en un
proceso de elución
Adsorción: es la retención, adhesión o
concentración en la superficie de un sólido de
sustancias disueltas o dispersas en un fluido
Partición:es el reparto de los solutos entre una fase
móvil y una fase estacionaria que esta retenida en
un soporte
Exclusión:una fase estacionaria generalmente de
gel, va a seleccionar de acuerdo a los tamaños de
que tengan las partículas.
Intercambio iónico:es una reacción química
reversible, y se produce cuando un ion de una
disolución se cambia por otro ion de igual signo
(positivo o negativo) que está unido a una partícula
sólida inmóvil
Fluido supercrítico:es una sustancia a temperatura
y presión superiores a sus valores críticos, y que
tiene una densidad similar o superior a la densidad
crítica
b) Investigar los nombres, fórmulas y
propiedades de los colorantes artificiales
usados en alimentos y empleados en la práctica.
Tartrazina
Colorante artificial ampliamente utilizado en la
industria alimentaria, tiene un peso molecular de
534.3 gr.perteneciente a la familia de los colorantes
azoicos (contienen el grupo azo (-N=N-). Se
presenta en forma de polvo y es soluble en agua;
haciéndose de color más amarillo en tanto más
disuelta esté. Además, es empleada en bebidas,
purés instantáneos, papas fritas, repostería, sopas
instantáneas, helados caramelos,
chicles,mermeladas, yogurt, gelatinas, se trata del
colorante amarillo de las paellas (azafrán)
Rojo 3
Se usa principalmente como colorante de alimentos,
para tinta de impresora, como mancha biológica etc.
Puede Causar foto sensibilidad y puede ser
cancerígena, tiene un peso molecular de 634.5. Es
un xenoestrógeno, junto con otros colorantes
sintéticos para alimentos.
c) Discutir en base a las estructuras de los
colorantes, el orden de elución esperado de los
mismos en la cromatografía en columna y en la
cromatografía en placa fina.
d) Explicar si la relación de polaridades utilizada
para la fase estacionaria y para fase móvil
corresponde a la cromatografía en columna en
fase normal o en fase reversa.
e) Explicar. ¿Qué se entiende cuando la columna
de cromatografía empacada con gel de sílice de
fase reversa lleva en su etiqueta C12 ó C18 ?
PREGUNTA EXTRA
Colorantes FD&C
Actualmente los colorantes son el grupo de aditivos
en el que mayores diferencias se encuentran en las
legislaciones entre distintos países. Hay que
recordar que para que se pueda utilizar un colorante
alimentario (o cualquier aditivo), primero debe
figurar en la lista de los autorizados en general, y
segundo, debe estar autorizado para ese producto
concreto. Esto hace que algunos colorantes,
genéricamente autorizados, casi no se utilicen en la
práctica. Las aplicaciones que aparecen están BIBLIOGRAFÍA.
escogidas con criterios tecnológicos, y pueden ser
legales o no dependiendo de los países. ● https://www.fda.gov/media/96248/downlo
ad
Requisitos básicos ● http://www.scpscience.com/pdfs/Catalog
ues/Spanish/Solid_Phase_Extraction_sp.
Si el producto contiene colorantes, debe cumplir los pdf
requisitos para lo siguiente:
● Harris. (1992) Análisis Químico
Cuantitativo Ed. Iberoamericana, México.
• Aprobación. Todos los colorantes en los
● Willard, L. Merritt, Jr., Dean, J. A. y Settle,
cosméticos (o cualquier otro producto regulado por
F. A. Jr. (1991) Métodos Instrumentales
la Administración de Medicamentos y Alimentos
de Análisis. Ed. Iberoamericana, México.
[FDA, por sus siglas en inglés]) deben estar
● Bauer, Karin ; Gros, Leo and Sauer, Werner.
aprobados.
1992 Thin Layer Chromatography: An
Introduction. Hüthig Verlag. Germany. pp 45-
• Certificación. Una cantidad de colorantes deben 56
ser lotes certificados por la FDA si serán utilizados
en cosméticos (o en cualquier otro producto}

• Identidad y especificaciones. Todos los colorantes

deben cumplir los requisitos de identidad y
especificaciones establecidos en el Código de
Reglamentos Federales (CFR, por sus siglas en
inglés).

• Uso y restricciones. Los colorantes solo se deben

usar para los usos previstos establecidos en el
reglamento referente a ellos.

Por lo general, los colorantes certificados tienen

nombres de tres partes. Estos nombres

incluyen un prefijo, como FD&C (alimentos,

medicamentos y cosméticos), D&C

(medicamentos y cosméticos) o External D&C

(medicamentos y cosméticos de uso

externo), un color y un número. Un ejemplo es

“FD&C Amarillo n. °5”. Además, los

colorantes se pueden identificar en las

declaraciones de ingredientes cosméticos solo

por color y número, sin un prefijo (tal como “Amarillo

5”).