Micro PC1

CURSO : MICROBIOLOGIA PRACTICA
ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

CICLO : IV
SEMESTRE ACADEMICO : 2022-I
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-II
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”
ACREDITADA POR SINEACERE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV
LABORATORIO
MICROBIOLOGIA
DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA:
▪ LEGUA BARRIOS MIRIAM

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA
PROFESIONAL DE MEDICINAHUMANA
ACREDITADA POR SINEACE

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV
OBJETIVOS:
➢ Emplea metodologías en el aislamiento e
identificación de cocos Gram positivos y negativos:
➢ Genero Staphylococcus
➢ Genero Streptococcus
➢ Genero Neisseria
PRACTICA
N° 10
• IDENTIFICACIÓN DE COCOS
GRAM POSITIVOS:
GENERO
STAPHYLOCOCCUS.
Staphylococcus aureus
Estafilococcus gram positivos , habitantes

naturales de la flora nasal, boca , piel e intestinos Staphylococcus saprophyticus
Staphylococcus epidermidis
Estudiar bacteria sembrada en agar hipertónico de Chapman
Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus :
Estudiar comportamiento de la bacteria sembrada en AGAR SANGRE: se
observa características de las colonias
Staphylococcus aureus
Estudiar comportamiento de la bacteria sembrada en agar sangre
Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

Realizar un frotis de las placas sembradas y colorearlas con gram
PRUEBA DE COAGULASA
De la placa de agar sangre o agar hipertónico se siembra a un cultivo en caldo plasma
Prueba de catalasa
Prueba de susceptibilidad a la novobiacina
PRACTICA N° 11
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE
COCOS GRAM POSITIVOS:
GENERO Streptocococcus
Streptococcus observados en microscopios
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus cocos gram positivos, Streptococcus agalactiae

crecen en cadena o pares, su aislamiento requiere
medios enriquecidos
Streptococcus pyogenes
Observar el Streptococcus en el medio de caldo BHI
AGAR SANGRE TIPOS DE HEMOLISIS
comportamiento streptococcus frente a las
bacitracina y disco de optochin
Streptococos pneumonia
sensible a la optoquina
S. Pyogenes sensible a la
bacitracina
Sembrar la cepa bacteriana en :
Medio thioglicolato Caldo inulina

Sembrar la cepa para las pruebas:
Tubo con CLNA al 6.5 % Prueba de catalasa

Prueba de Sensibilidad de bilis: Desoxicolato de sodio
• Prueba de solubilidad de bilis en tubo.

IDENTIFICACION DE COCOS GRAM
NEGATIVOS : GENERO NEISSERIA
AGAR THAYER MARTÍN : observar las colonias
Agar Thayer Martín

AGAR CHOCOLATE : Observación de colonias
Agar chocolate
Realizar: Coloración gram
Prueba de CITOCROMO OXIDASA

coloración azul de metileno
https://youtu.be/l5c2eEnPHo8 cocos gram positivos( staphylococcus y streptococcus ) 8. 40 m
https://youtu.be/odABzg3Q92g identificación de estreptococos y enterococcus 13.17 m

Gracias
CURSO : MICROBIOLOGIA

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-I
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN
BAUTISTA FACULTAD DE CIENCIAS DE
LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE
MEDICINAHUMANA

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE
POR RIEV
Infecciones por cocos gram positivos: Genero Staphylococos;

Genero Streptococos ; Enterococo
Infecciones por cocos gram negativos: Neiseria
DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA

FILIAL ICA :
LEGUA BARRIOS MIRIAM JESUS

Staphylococos
Coco gram
positivo 0,5-
1 um
Catalasa
Ph 7.4 a 7.6
positivo
Resistentes al calor, Poseen tendencia agruparse en Fermentan

desecación y a cierto grado manitol, Genero
Coagulasa
racimo, la fermentación de manitol glucosa, Staphyloc
positivo
de desinfectantes, sensibles tiene significancia diferencial lactosa y ocos
a antibióticos maltosa
Resistentes
Forma parte de la flora Tiene importancia médica principalmente a la Inmóviles
normal del humano, sin penicilina
en el humano S. aureus,
causarle daño, S. saprophyticus y el S. epidermidis. Anaerobio
facultativo
Necesitan una puerta de entrada para el ingreso del

microorganismo( corte, traumatismo, fisura etc.).Se conservan
infecciosos por periodos prolongados
Producir proteínas
PATOGENIA Evadir la
fagocitosis
que median la
adherencia
Ocasionar
destrucción tisular
Toxinas estafilocócicas
Enzimas Enterotoxinas* Toxina 1 *

Citotoxinas estafilocócicas (serán 18)
Alfa hialuronidasa De la A a la R Síndrome del Shock

tóxico
Beta Fibrinolisina
Lipasas
Delta
Lipasa
Gamma termoestable
* Superantígenos
Leucocidina
Clasificación
Staphylococos
aureus
Genero Mas de 30
Staphylococos especies
Staphylococos
epidermidis
Staphylococos
saprophyticus
Staphylococos aureus
Tienen
Leucocidinas: producen lisis de polimorfonucleares y macrófagos
Hemolisinas( alfa, beta y gamma ), lisan glóbulos rojos
Bacteria anaerobia facultativa. Exotoxinas Exfoliativas es toxina del sindrome de la piel escaldada
Gram positiva Toxina del sindrome del shock toxico
Coagulasa y catalasa positivo Enterotoxinas: toxinas causantes de la intoxicación alimentaria
No esporulada
Mide de 0.5 – 1 um de diámetro
Semejantes a racimos de uvas
Utilizan un medio diferencial, la alta concentración de NaCl (7.5 %)
En células viejas se tiñen como SON ORGANISMOS OSMOTOLERANTES y osmofilos . El manitol es y
gram negativo cultivo produce ácidos produciendo un viraje de rosado a amarillo cuyo
Son Resistentes a la penicilina indicador es rojo de fenol, esto lo realiza esta cepa patógena
diferenciándolas de las otras
factores de patogenicidad:
PRINCIPALES CARACTERISTICAS
Son integrantes habituales en zonas húmedas

como pliegues inguinales , Colonizan la piel y
mucosas
Se localizan en
• Fosas nasales
• Perineo
• Axilas
Dentro de sus factores de patogenicidad:
Adhesinas
Capsula
Peptidoglicano
Acido teicoico
Proteina A
Membrana citoplasmatica
1.- INFECCIONES LOCALES Y CONTINUAS
1.-. EN LA PIEL
• Foliculitis: inflamación del folículo piloso
• Forunculos
• “Carbunco”, “Antrax”: es una acumulación de forúnculos.
• Impétigo: se caracteriza
por la formación de
pequeñas ampollas
llenas de pus (pústulas).
2.-OTRAS INFECCIONES
• Mastitis: Los patógenos Foliculitis Forúnculo
viven y se multiplican en la glándula mamaria y la piel del
pezón,
• Infecciones urinarias -cistitis
3.- INFECCIONES MAS PELIGROSAS
• Septicemia, Endocarditis, Neumonía, amigdalitis,
meningitis, sepsis puerperal
• Osteomielitis:enfermedad del hueso en crecimiento,
Pioartritis o Artritis séptica
IMPÉTIGO CARBUNCO”, “ANTRAX

3.- INFECCIONES ASOCIADAS A TOXINAS
Toxinas Exfoliativas
-Sindrome de la piel escaldada , enfermedad Ritter von
Rittershain
• Se da en neonatos y niños menores de 4 años
Actúa como una proteasa , separa la epidermis de la capa
granular desprendimiento de la piel
Toxina del sindrome del shock toxico. Toxina pirogena TSST - 1

Es un Superantígeno
Tiene una unión no específica de la toxina a los receptores desencadena
la liberación de grandes cantidades de IL-1,IL2, TNF dando una
respuesta inmune excesiva
Induces fiebre, vómitos, shock, erupción de la piel, descamación cutánea
y daños a órganos internos , ocasionando fallo multisistémicos
A
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Gram positiva
coco en racimos
B C
a)MUESTRAS
b)FROTIS Y COLORACIÓN
c)CULTIVO: AS/MH Medio manitol salado catalasa positiva
d)PRUEBAS BIOLÓGICAS: CATALASA (+), A:manita negativa agua y O2
COAGULASA, DNAsa B y C : manita positiva
e)PRUEBAS SEROLÓGICAS Y DE TIPIFICACIÓN
f)ANTIBIOGRAMA
positiva
DNAsa
coagulasa
positiva
g)FAGOTIPACIÓN
Staphylococus epidermidis
• Se puede cultivar en agar sangre donde no produce
hemolisis.
MEDIOS DE • Es selectivo en agar manitol salado, y no produce halo
CULTIVO EN amarillo. No fermenta manitol.
• Pruebas Bioquímicas: catalasa y ureasa positivo, coagulasa
LABORATORIO y oxidasa negativo., fermenta glucosa lactosa y maltosa
• PCR
Gram positivo, cocos agrupados en
• Tinción Gram
racimo, inmóvil, anaerobio
facultativo, sensible a la
novobiocina,
Es un organismo mesófilo,
crece entre 15 y 45 grados,
optimo de 30 – 37 grados
Soporta concentraciones de
sal de 7. 5 %, pero prolifera
mal cuando la concentración
llega al 10%
Características de Staphylococcus epidermidis
• Causa infecciones urinarias
intrahospitalarias, osteomielitis,
endocarditis, bacteremia en
¿QUÉ CAUSA? inmunosuprimidos, infecciones de
dispositivos médicos( catéter ,válvulas,
implantes ) .
• Se ha reportado resistencia microbiana y

IMPORTANCIA por la expresión del gen mecA que
codifica la proteína PBP2a que es
CLÍNICA proteína fijadora de penicilina le confiere
resistencia a la meticilina.
• Cuando la bacteria forma la biopelícula

va aumentar la resistencia a los
FACTORES DE antibióticos y comprende 3 periodos:
PATOGENICIDAD adhesión, acumulación y dispersión.
• Glicocálix de protección, adherencia a
superficies metálicas y plásticas
• El antibiótico de elección Vancomicina ,

TRATAMIENTO un fármaco del grupo de los
glicopeptidos
Staphylococcus saprophyticus
• Se puede cultivar en agar sangre donde no
produce hemolisis.
MEDIOS DE • Es selectivo , crece en agar manitol salado, No
CULTIVO EN fermenta manitol., color rosado en el medio
Gram positivo, cocos agrupados en racimo, inmóvil, • Pruebas Bioquímicas: catalasa y ureasa positivo,
anaerobio facultativo, no formador de espora LABORATORIO coagulasa y oxidasa negativo.,
resistente a la novobiocina,
Es un organismo mesófilo, crece entre 15 y 45

grados, optimo de 30 – 37 grados
Soporta concentraciones de sal de 7. 5 %, pero

prolifera mal cuando la concentración llega al
10%
Características de Staphylococcus saprophyticus
• Causa infecciones urinarias en mujeres
jóvenes sexualmente activas, cistitis,
¿QUÉ CAUSA? pielonefritis, uretritis, infección por
sondas, prostatitis en ancianos
• Es integrante de la flora normal del tracto

HABITAD genito urinario, sobre todo en el área
periuretral, piel
• Receptores oligosacáridos específicos de

células de la uretra
FACTORES DE • Ureasa invasión de tejido vesical
PATOGENICIDAD • Proteína fibrilar asociada a la superficie
de la célula
• Adhesinas, proteínas de superficie M
• Las cepas son resistentes a la

novobiocina
TRATAMIENTO • Se da Sulfametoxazol + trimetoprima,
oxacilina, Nitrofurantoina, cefalotina,
norfloxacina
Estreptococos
Características Estreptococos
Bacterias en forma esférica agrupada en cadenas
Son catalasa – negativa crecen en medios enriquecidos como agar sangre , pueden ser aerobio o anaerobio
Son capaces de fermentar carbohidratos produciendo ácido láctico y también son catalasa negativos a diferencia de los estafilococos.
se presenta microscópicamente como células esféricas u ovoides de 0.6-1.0 µm de diámetro y se agrupa en pares o cadenas de longitud
variable en muestras clínicas, o cuando crece en medios líquidos enriquecidos con suero o sangre.
Son, al igual que el resto de los estreptococos, Gram positivos, inmóviles, no formadores de esporos, catalasa negativos y, facultativamente
anaerobios.
Cuando crece en medios sólidos con sangre se observa alrededor de las colonias grises de 1-2 mm de diámetro un halo de hemólisis beta
(pueden existir cepas que no la exhiban, pero es excepcional).
Estreptococo: factores de virulencia
❑Cápsula de ácido hialurónico
Proteína M
▪ La proteína M protege a la
bacteria de la fagocitosis
▪ determina virulencia
▪ inhibe migración leucocitaria
❑ Estreptolisina O y S • La proteína M induce:
❑ Proteína M • - Una respuesta inflamatoria
en el huésped que contribuye
❑ Hialuronidasa a las complicaciones inmunes
❑ Estreptoquinasa • - Síndrome de shock tóxico
estreptocócico
Tipos de Streptococos
Streptococos pyogenes
Factores de Enfermedades que Diagnostico y
Características
patogenicidad causan tratamiento
• . es una bacteria Gram- • Capsula. • Erisipela • produce grandes zonas (halo) de
positiva que crece en beta-hemólisis, con completa
• Proteína M • Celulitis rotura de eritrocitos y la
cadenas de cuatro a diez • Estreptocinasa • Fiebre puerperal. recuperación de hemoglobina
células
• Estreptodornasa • Bacteriemia • Coloración gram: positivos
• En su pared celular expresa el • Pruebas inmunológicas porque
antígeno grupo A de • Hialuronidasa • Pioderma estreptocócica
poseen sensibilidad moderada y
la clasificación de Lancefield • Exotoxina pirógena • Sindrome del choque toxico especificidad
• Parte de la flora normal de la • Estreptoquinasa • Glomerulonefritis aguda • Reacción en cadena polimerasa
orofaringe
• Pared celular • Fiebre reumática • Catalasa negativo
• Posee capsula y pared constituida
por carbohidratos, proteínas y • Acido hialuronico • Fascis necrosante • Sensible a la bacitracina
acido lipoteicoico • Estreptolisina O y S • enfermedades supurativas y • TRATAMIENTO
• Es microaerófilo no supurativas. • Sensible a penicilina, eritromicina
o cefalosporina
• Otitis
• Mastitis
• La faringitis estreptocócica
Streptococos agalactiae
Factores de Diagnostico y
Características
patogenicidad Habitad
tratamiento
• . es una bacteria Gram- • Hemolisinas
positiva que crece en • Capsula de polisacáridos • Forma parte normal de • Cultivo en sangre
cadenas de cuatro a diez • Acido lipoteicoico la flora gastro intestinal, produce beta hemolisis
células desde donde coloniza la • catalasa y oxidasa
• Hialuronidasa
• En su pared vagina y tracto genital negativo
• Adherencia
celular expresa el antígeno
grupo B de la clasificación de • Estreptolisinas • Pueden colonizar al • Puede crecer en medios
Lancefield • DNAsa recién nacido mientras simples aunque
• Anaerobio facultativo • Neuraminidasa pasa por el canal de enriquecidos con sangre
• Resistente a la bacitracina y • Proteasa parto favorecen su
cotrimoxazol • Pili • Puede causar infección crecimiento
• Forma parte normal de la • Toxina que afecta la intrauterina • Se siembra en medios
flora gastro intestinal, desde permeabilidad vascular selectivos y caldos
donde coloniza la vagina y enriquecidos
tracto genital
Streptococos pneumonae
Factores de Enfermedades que Diagnostico y

Características
patogenicidad causan tratamiento
• Forma ovoide • Capsula • En niño es el principal • En agar sangre es Beta
• generalmente diplococos. • Pneumolisinas causante de Neumonía y hemolítico
• No forma endospora • Adhesinas Meningitis • Oxidasa negativo
• Sensible a la optoquina y • IgA1 proteasa • Septicemias • Catalasa negativo
soluble en bilis • Neuraminidasa • Otitis media • Crecen a 37 grados en
• Forma parte de la flora • Capsula polisacarida • Infecciones oculares medios enriquecidos
normal de las vías aéreas • Proteasa para IgA • Sinusitis • Prevención : hay vacuna
superiores ( nasofaringe • Bacteremia
• Proteínas de superficie pspA
humana ) y aparato
y psaA
digestivo y genital
• Patógeno casi
exclusivamente humano
• Son aerobios facultativos
Enterococos
Enterococcus
Son cocos gram positivos Pueden colonizar la piel y las
Los cocos crecen en condiciones mucosas del tracto respiratorios
(parejas o cadenas cortas) aeróbicas y anaeróbicas. superior y genital del ser humano.
Crecen a temperaturas de 10 a Facultativo. Habitan el tracto
45 pero la optima es 37 grados intestinal de seres humanos, - temperatura: 10-45ºC
No móviles animales e insectos - PH: 4,6-9,9
Tras un periodo de incubación de

24 horas, las colonias cultivadas
en agar sangre son grandes y Poco exigentes para cultivar. Los
- Presente en concentraciones enterococos muestran una
elevadas de cloruro de sodio de pueden ser:
- No hemolítico resistencia inherente a muchos de
6.5 y sales biliares.
los antibióticos de uso común.
- Alfa hemolíticas
- Beta hemolíticas
Tratamiento La eliminación de los enterococos de

Se hallan ampliamente distribuidos la sangre y los tejidos esta mediada
- Oxacilina en la naturaleza , en plantas, suelo y por el flujo de entrada rápido de
aguas neutrófilos y por la opsonización de
- cefalosparina las bacterias.
Caracteristicas de los Enterococcus
• Citolisina
Factores de • Producción de radicales libres superóxidos

• Producción de sustancias de agregación
virulencia • Flagelos, fimbrias, ureasas, hemolisinas,

proteínas de membrana, no producen
toxinas solubles
• Faringitis aguda
• Infecciones cutáneas y sistémicas
• Endocarditis
Patología • Fiebre reumática
• Fiebre escarlatina
• Infecciones de los tejidos
• Glomerulonefritis aguda
• Catalasa y oxidasa negativo

Pruebas de • Coloración gram : positivos
• Crecen en presencia de bilis al 40 % hidrolizan
laboratorio la esculina
• en agar sangre dan gamma hemolisis
El tratamiento de las infecciones graves necesita la combinación de un amino-
glucósido con un antibiótico capaces de inhibir la síntesis de la pared celular. Prevención y
control
Algunos antibióticos que actúan en la pared, no tienen actividad en los • Las infecciones
enterococos. requieren una
restricción
cuidadosa del uso
Aparte mas de un 25% de los enterococos son resistentes a los de antibióticos y
aminoglucósidos y a la vancomicina. tener una adecuada
practica de control
Por ejemplo:
de infecciones.
-sensibilidad ampicilina y resistencia aminoglucósidos (ampicilina y daptomicina)
-resistencia ampicilina y sensibilidad aminoglusidos (aminoglusidos y vancomicina)
-ambos son resistentes: daptomicina, linezolid combinado a agentes activos.
Neisseria
Neisseria meningitidis
Neisseria Meningitidis
Neisseria meningitidis es una bacteria Gram negativa aeróbica inmóvil, no esporulada, usualmente encapsulada y piliada.
Se clasifica en serogrupos de acuerdo con la reactividad inmunológica de su polisacárido capsular. El meningococo tiene
la capacidad para intercambiar material genético encargado de la producción de la cápsula
Manifestaciones clínicas:
- Cefalea
- Meningeos
- Vómitos
- Fiebre
- Rigidez de nuca
Muestra : secreciones de uretra liquido cefalorraquídeo,
sangre, faringe , conjuntiva
exudado nasofaríngeo , recto endocervix
Coloración: gram negativo diplococo intracelular
Cultivo: agar chocolate , Thayer Martín
Pruebas: oxidasa positiva
Reacción fermentación : glucosa y maltosa
Crecen mejor a 35 – 37 C
Oxidasa y catalasa positivos
Diagnóstico de laboratorio de N. meningitidis
▪ Gram:
▪Oxidasa: (+)
Género Neisseria
▪ Catalasa: (+)
agar chocolate Thayer Martín
▪ ONPG: (-)
N. meningitidis
▪ -Glutamil-Transferasa: (+)
▪DNasa: (–)
▪Utilización de azúcares: G (+), M (+), L (-), S (-)
Caracteristicas de la Neisseria gonorreae “ gonococo ”
Diplococcus inmóviles Muere con rapidez a causa de la
no esporulados, carece de capsula desecación , luz, calor húmedo
Invade exclusivamente mucosas
mucho desinfectantes .
Su tamaño es de 0.6 a 1 um Aerobios estrictos provistas de epitelio a los que se fija
Único huésped conocido es el
por estructuras filamentosas o pilis
Poseen metabolismo oxidativo Tiene hombre, que le causa gonorrea
requerimientos nutricionales complejos
Factores de virulencia:
Pili o fimbrias : adherencia Se siembra en medios selectivos
: Thayer Martín en atmosfera Los microorganismos se visualizan a
Proteína de la membrana externa: porinas IA y IB microscopio de luz, microscopio de luz,
con 5 % de CO2. se incuba a 35
- 37 grados, agar chocolate, como diplococos intracelulares dentro de los
Proteína de adherencia OPA neutrofilos
agar sangre
Lipooligosacaridos LOS : daño celular
Oxidasa positivo Fermentación de

carbohidratos, fermenta solo glucosa
Serología : Elisa IgG y IgM, Coagulación
Inmunofluorescencia
PCR
Gonococo
En el caso del hombre
En la mujer la infección se
Se presenta uretritis , con pus propaga de la uretra a la vagina
cremoso y amarillo y micción y a la cérvix dando lugar a
dolorosa , el proceso puede
extenderse hasta la próstata y al exudado mucopurulento puede
epidídimo pudiendo causar extenderse hasta las trompas de
esterilidad Falopio provocando un proceso
inflamatorio, fibrosis y
Puede producir estenosis uretral obliteración de las trompas
Referencia bibliográfica
• LIBRO: Introducción a la Microbiología tortora, Gerard J; Ed.

12; Edit. Medica Panamericana, 2017, Argentina/ buenos Aires
• LIBRO: Microbiología Médica, Jawetz. Melnick, Adelberg.; Ed.

25; Edit. Mcgraw-hill interamericana, 2010
Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-II
LABORATORIO


OBJETIVOS:
➢ Demostrar la actividad antibacteriana de los
antibióticos.
➢ Reconocimientos de Toxinas y Enzimas
Bacterianas
PRACTICA N” 09
PRUEBA DE
SENSIBILIDAD A
K/K K/A
ANTIBIOTICOS
METODO DE DIFUSION EN
AGAR ( SEGÚN KIRBY – BAUER)
. Es el mas usado, sencillo y practico

. Permite analizar un gran numero de antibióticos al
mismo tiempo y bajo las mismas condiciones
. Permite entregar un resultado cualitativo : resistente a
sensible
Preparación de la muestra para antibiograma
Siembra en medio miuller hillton
Colocando los discos de antibiotico
Resultados después de incubar 24 horas
Medición de los halos
TOXINAS K/A
K/K
TOXINAS
ENDOTOXINA
Forma parte de la membrana externa de
la pared celular de las bacterias gram
negativas
Son lipopolisacáridos presentes en las
gram negativas , se Localizan dentro de la
pared celular de la bacteria y son
liberadas por lisis
Son Termoestable K/A
K/K
No hay vacunas disponibles para ellas
Son Inespecífico
Son Moderadamente toxico
EXOTOXINAS
Es una proteína producida dentro de
bacterias patogénicas mas común en
bacterias gram positivo como resultado de
crecimiento y metabolismo.
Son proteínas secretadas por bacterias
Las exotoxinas se localizan en ambas
bacterias gram positivas y negativas
Son lábiles al calor
hay vacunas disponibles K/K K/A
Son específicos para una cepa particular de
bacterias
Son altamente toxicos
CARACTERISTICAS DE EXOTOXINA Y ENDOTOXINA
ENFERMEDADES PRODUCIDAS POR
BACTERIAS PRODUCTORAS DE EXOTOXINAS
ENZIMAS
BACTERIANAS
K/K K/A
ENZIMAS BACTERIANAS
Son catalizadores biológicos producido por

un organismo.
Como características de estas enzimas :
- Tienen alto poder catalítico
- Alto grado de especificidad por los
sustratos
K/K K/A
CONDICIONES QUE AFECTAN
LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
- concentracion de la enzima
- concentracion del sustrato
- PH
- Temperatura
K/A
Enzimas constitutivas Enzimas adaptativas Enzimas reprimibles:

CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS
K/K K/A
NATURALEZA Y MECANISMO DE ACCION ENZIMATICA
https://youtu.be/TLaY6rFwIJA antibiograma por el método de kirby Bauer 4.57 m
Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-I
MEDICINAHUMANA

POR RIEV
FACTORES DE PATOGENECIDAD
TOXINAS Y ENDOTOXINAS
DEFENSAS DEL ORGANISMO FRENTE A LAS INFECCIONES
DOCENTE RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA

FILIAL ICA :
FACTORES DE
PATOGENECIDAD
PRINCIPIOS DE ENFERMEDAD Y
EPIDEMIOLOGÍA
A pesar de que el sistema inmune permite controlar las
enfermedades transmisibles en la mayoría de las personas, éstas
pueden continuar siendo susceptibles a diversos microorganismos
patógenos, de esta manera, para que se pueda mantener la
condición de salud, las defensas del organismo deben ser capaces
de controlar los mecanismos de patogenicidad de los
microorganismos.
PATOGENICIDAD
se refiere a la capacidad de un organismo parásito de causarle
daño al huésped.
VIRULENCIA es el grado de patogenicidad del microorganismo.
Determina la severidad de la enfermedad, estimada por la
reducción en la salud física del hospedero luego de la infección
bacteriana.
MECANISMOS DE PATOGENECIDAD FACTORES DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD
INVASIVIDAD ADHESINAS:
habilidad para invadir tejidos Flagelos
Colonización Fimbrias
Producción proteínas extracelulares Cápsulas
Evasión a la respuesta inmune Lipopolisacáridos
TOXICIDAD Proteínas integrales de membrana
habilidad para producir toxinas Polisacáridos extracelulares
Endotoxinas Ac. Teicoicos
RECEPTORES
Exotoxinas
• Gangliósidos o globósidos
HIPERSENSIBILIDAD • Fibronectina
Inducción a la respuesta inmune exagerada - Toxinas
Inducción a la respuesta inmune equivocada - Enzimas
- Esporas
- Biopelículas , biofilms o Slime
ACCÍON PATÓGENA
Para poder manifestar su acción patógena los

microorganismos deben ser capaces de realizar
los sgtes pasos:
I. Adherencia
II.- Colonización
III.- Penetración
IV.- Multiplicación
V.- Invasión
VI.- Capacidad lesional
ADHESION
I.- ADHERENCIA ADAPTACION
FACTORES DE ADHERENCIA: MULTIPLICACION
ADHERENCIA REVERSIBLE ➢ Adhesinas

Inespecífica ➢ Fimbrias
➢ Lipopolisacáridos (LPS)
➢ Ácidos teicoicos y
lipoteicoicos
➢ Componentes Pared
celular
Interacción RECEPTOR ➢ Glicocalix
LIGANDO ➢ Capsula
Especifica
MECANISMOS DE
DEFENSA
II.- COLONIZACION
INNATOS ADAPTATIVOS O
Factores solubles (lisosomas, INDUCIBLES
complemento, proteína de Factores solubles
fase aguda) y células (anticuerpos) y células
(fagocitos, NK) (linfocitos T)
VIRULENCIA
Hospedero
susceptible
INFECCION
FACTORES DE AGRESIÓN
• Enzimas: Mucinas ,
glucosidos, neuronidasas
• Bactericinas CLINICA
• Proteasas
SUB CLINICA ENFERMEDAD
• Factores de superficie: INFECCIOSA
cápsula, antígeno de en la
pared
PORTADOR
Microorganismo
III.- PENETRACIÓN
Penetran atravesando barreras : por vía :aéreas,

cutánea, mucocutánea, sanguínea,etc.
Ingreso intraceluLar por endocitosis,
En el caso de Vibrio cholerae emplea una toxina
para penetrar
En Yersinia pestis penetración pasiva por un vector,
lesión en Clostridium tetani
En el caso de Salmonella penetración activa, ya
que induce a cambios de la célula para ingresar
El grado de multiplicación desencadena la infección
Requerimiento de factores que ayudan a un mayor grado de
velocidad de crecimiento , extracelular o intracelular (
citosólica, lisosomal, vacuolar)
DESTRUCCION TISULAR
Los productos generados como consecuencia del crecimiento
bacteriano, especialmente de la fermentación, dan lugar a la
producción de ácidos, gases y otras sustancias que son tóxicas
para los tejidos.
Estas bacterias liberan enzimas degradativas que disgregan
los tejidos, proporcionando así el alimento para el
crecimiento de los microorganismos y facilitando la extensión Estas bacterias anaerobias fabrican
de las bacterias enzimas (p. ej., fosfolipasa C,
colagenasa, proteasa, hialuronidasa),
varias toxinas y ácido y gases
derivados del metabolismo
bacteriano, destruyen el tejido
V.- INVASION Producción de proteínas extracelulares que promueven la invasión
(Invasinas)
BACTERIANA Vías de difusión por vía sanguínea, linfática, nerviosa, continuidad
Enzimas que producen

hemolisis y leucolisis
Lecitinasas
Hemolisinas
Coagulasa
Factores de diseminación
Hialuronidasa Enzimas digestivas
Colágenas extracelulares
Neuraminidasa Proteasas
Estreptoquinasa Lipasas
Estafiloquinasa Nucleasas
Evasión de las defensas del hospedero
Defensas fagociticas Defensas inmunes
• Evitando el contacto con

fagocitos • Mimetismo molecular
• Sobreviviendo dentro del • Persistencia de un
fagocito patógeno en sitios
• Productos bacterianos inaccesibles a la respuesta
que dañan y matan al inmune
fagocito antes y después • Variación antigénica
dela ingestión
Pueden ingresar por la PIEL a través de aberturas cutáneas.
Cuando la piel esta intacta es impenetrable por los
microorganismos. Las mucosas son la puerta de entrada mas Pueden ingresar por el TUBO
fácil y utilizada por los microorganismos infecciosos , ( vías DIGESTIVO con los alimentos o agua
MODO DE respiratorias, aparato digestivo, aparato genito urinario y la o por los dedos contaminados
ENTRADA conjuntiva), son inhalados por nariz o boca, en las gotas de
DEL humedad o polvo
MICROORGANISMO
AL HUESPED
Pueden ingresar por el APARATO

GENITOURINARIO, durante la Pueden ingresar por vía respiratoria
actividad sexual y causar una ITS.
Los patógenos cuentan con
medios de fijación a los tejidos La capsula de los patógenos
La probabilidad de enfermedad
del huésped que es la adherencia bacterianos resiste a las defensas
aumenta a medida que se
lo puede hacer mediante las del huésped porque altera la
incrementa la cantidad de
adhesinas que se ubican en el fagocitosis, previene la adhesión
patógenos y de la virulencia de
glucocálix del microorganismo o de la célula fagocitaria a la
estos
en estructuras como: Pili, bacteria
fimbrias y flagelos
PATOGENICIDAD
DEL
MICROORGANISMO Las coagulasas son enzimas que
coagulan el fibrinógeno en la
La pared celular contiene La virulencia de las bacterias sangre.
sustancias químicas que es facilitada por la El fibrinógeno es convertido en
permiten la virulencia de la producción de enzimas fibrina por el higado
bacteria extracelulares( exoenzimas) La fibrina protege a la bacteria
contra la fagocitosis
INFECCION VS ENFERMEDAD
LA INFECCIÓN
es la invasión o colonización del organismo por
parte de microorganismos patógenos lo cual puede
producir o no daño al huésped.
ENFERMEDAD
se presenta cuando el huésped es dañado de
alguna forma por la presencia del agente infeccioso.
Es decir, una infección puede estar presente sin que
existan síntomas de una enfermedad; por ejemplo,
la infección por VIH.
TIPOS DE INFECCIONES
Las infecciones bacterianas no aparentes (infecciones
subclínicas) pueden ser de dos tipos:
1. Infecciones durmientes:
2. Infecciones latentes:
TIPOS DE TRANSMISION
TRANSMISIÓN POR CONTACTO 1. TRANSMISIÓN A TRAVÉS DE VEHÍCULOS
la transmisión se produce a través del aire, el agua, alimentos
DIRECTO
contaminados, la sangre y otros fluidos corporales contaminados.
son transmitidos de una persona a otra por
2. TRANSMISIÓN A TRAVÉS DE VECTORES
contacto físico entre la fuente y el huésped
Los artrópodos constituyen el principal grupo de vectores que
susceptible.
transportan agentes patógenos de un huésped a otro.
INDIRECTA
Se produce a través de: 3. TRANSMISIÓN A TRAVÉS DE LA PLACENTA
Objetos inanimados contaminados (fómites) (Transplacentaria)
Animales infectados. Algunos agentes causantes de enfermedades pueden ser
Aerosoles (gotas de saliva) transmitidos por vía placentaria de madre a hijo. Como ejemplo
de enfermedades bacterianas transmitidas a través de la
placenta tenemos la sífilis y entre las virales la rubéola
PERIODOS DE LA ENFERMEDAD
Período de incubación
Es el tiempo que transcurre desde la infección
inicial y la aparición de cualquier signo o
síntoma.
Período prodrómico
Es un tiempo corto que sigue al período de
incubación en algunas enfermedades.
Periodo de la enfermedad
Período de declinación. Este período puede
durar desde menos de 24 horas hasta varios
días
Período de convalecencia
En este período el paciente se recupera y
vuelve a la normalidad.
TOXINAS Y
ENDOTOXINAS
Son componentes bacterianos
que dañan directamente los
tejidos o bien ponen en marcha
actividades biológicas
destructivas
Las toxinas y las actividades de otras sustancias

similares se deben a la acción de diversas
enzimas degradativas que ocasionan la lisis
celular y de proteínas que se unen a receptores
especíﬁcos que inician reacciones tóxicas en un
tejido diana especíﬁco
Por otra parte, la endotoxina y

las proteínas superantígeno
promueven una estimulación
excesiva o inapropiada de las
TOXINAS respuestas innatas o

inmunitarias
TOXICIDAD
ENDOTOXINAS
Toxina que permanece ligada a la bacteria
y solo cuando el microorganismo muere
este se lisa, y la toxina se libera
Lipopolisacárido en la membrana externa

de la pared celular Solo presentes en gram
negativos
Actividad biológica LPS: Toxicidad lípido A

Inmunogenicidad
Ag O
Son menos potentes
Estableces al calor y se liberan por lisis

bacteriana
E
X Las toxinas citolíticas incluyen
las enzimas capaces de romper
entre las que se encuentran la membrana, como la
O Tanto las bacterias gram
positivas como las gram
enzimas citolíticas y
proteínas de unión a
alfa-toxina (fosfolipasa C)
producida por Clostridium
negativas son capaces de receptores que alteran una
T fabricar EXOTOXINAS función o destruyen la célula
perfringens que rompe la
esfingomielina y otros
fosfolípidos
O
X La hemolisis se inserta
pueden inducir la salida de
I En los eritrocitos y otras
membranas celulares y las
iones y el agua de las
células y alterar las Muchas toxinas son
rompen.
N Las toxinas generadoras de
poros, como la
funciones celulares o
inducir la lisis de la célula
dímeros formados por
una subunidad A y una
subunidad B(toxinas AB).
A estreptolisina O
S
LAS EXOTOXINAS A SU VEZ SE DIVIDEN EN TRES CATEGORÍAS
TOXINAS
SUPERANTIGENOS Que estimulan grandes cantidades de células inmunes
dando lugar a una inflamación
Denominadas por estar formadas por dos subunidades, A y B,

siendo B el elemento que se suele unir a un receptor celular
TOXINAS A-B del hospedador y así permite que A atraviese la membrana de
la célula diana logrando dañarla
TOXINAS Provocan la degradación integral de la membrana

CITOLITICAS citoplasmática provocando la lisis celular.
DEFENSA DEL
ORGANISMO FRENTE A
INFECCIONES
MICROBIANAS
1.Barreras primarias, externas,
MECANISMOS DE DEFENSA DE
inespecíficas o innatas
LOS ORGANISMOS
Atendiendo al Atendiendo a la
Según su posición modo de aparición, acción que tienen
en el cuerpo las barreras de las barreras de
defensas defensa
Inespecíficas
1. Innatas Adquiridas
● Externas: piel,
mucosa etc. 2. específicas
● Internas:
macrófago, linfocito
ÓRGANOS LINFÁTICOS PRIMARIOS
TIMO • BOLSA CLOACAL (BURSA
MEDULA OSEA DE FABRICIO): AVES
ÓRGANOS LINFÁTICOS SECUNDARIO
• TEJIDO LINFOIDE
GANGLIO LINFÁTICOS BAZO ASOCIADO A MUCOSAS
Células del sistema inmune
Antígeno y anticuerpo
LOS ANTÍGENO : Es cualquier sustancia extraña que, La unión antígeno-anticuerpo es específica, cada
introducida en el interior de un organismo, provoque una anticuerpo reconoce y se une a un determinado
respuesta inmunitaria, estimulando la producción de antígeno. Esta unión se realiza por medio de
anticuerpos uniones intermoleculares entre el antígeno y la
Los anticuerpos son proteínas pertenecientes al grupo de zona del anticuerpo, y da lugar al complejo
las gamma-globulinas o inmunoglobulinas, antígeno-anticuerpo según el modelo llave-
cerradura.
LAS REACCIONES ANTÍGENO-ANTICUERPO TIENEN DIVERSAS
CONSECUENCIAS Y EXISTEN VARIOS TIPOS DE REACCIONES:
AGLUTINACIÓN NEUTRALIZACION
PRECIPÍTACION OPSONIZACIÓN
En las reacciones Si el antígeno es una
En este caso el antígeno se El anticuerpo puede recubrir al
de aglutinación, un anticuerpo sustancia tóxica, la unión
encuentra disuelto (es soluble), y al antígeno para que sea
puede unirse a la vez a dos con el anticuerpo provoca
unirse los anticuerpos a los reconocido por los fagocitos,
antígenos, así mismo cada
antígenos se forman unos macro su neutralización, de esta reacción se
complejos moleculares, formándose antígeno (es particulado) puede
modo que no puede llama opsonización , y es como
como una red tridimensional que unirse a varios anticuerpos y
ejercer su efecto tóxico. si los antígenos fueran más
debido a su tamaño precipita. formar un entramado de
"sabrosos" para ser fagocitados.
complejos antígeno-anticuerpo.
RESPUESTA ESPECÍFICA CONTRA EL ANTÍGENO A LA EXPOSICIÓN BACTERIANA
• Las bacterias después de realizar un proceso, dejan de fagocitar y se mueven hacia los ganglios
linfáticos para procesar y liberar sus antígenos y presentarlos ante los linfocitos T.
• Los linfocitos T CD4 se activan mediante

una combinación de:
• Péptido antigénico.
• Señales coestimuladoras.
• IL-6 y otras citosinas producidas
por la DC.

• LIBRO: Microbiología Médica, Jawetz. Melnick, Adelberg.; Ed.

25; Edit. Mcgraw-hill interamericana, 2010
Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-II

OBJETIVOS:
➢ Demostrar la utilización de medios de cultivo
➢ Demostrar los tipos de siembra
➢ Demuestra el comportamiento bacteriano en
los medios bioquímicos.
LABORATORIO

PRACTICA N° 6
MEDIOS DE CULTIVO
SIMPLES, ENRIQUECIDOS,
SELECTIVOS Y
DIFERENCIALES.
LIQUIDOS
DE ACUERDO A SU
CONSISTENCIA
SEMISOLIDOS
SOLIDOS
TIPOS DE MEDIO
DE CULTIVO
SIMPLES
SEGÚN SU ENRIQUECIDOS
UTILIZACION SELECTIVOS
DIFERENCIALES
MEDIOS DE CULTIVO DE ACUERDO A SU
CONSISTENCIA
LIQUIDOS SEMISOLIDO SOLIDOS
Medio SIM Medio Sabourau/Mueller

Caldo selenito hilton
MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU UTILIZACION
Simples o
Enriquecidos Selectivos diferenciales
comunes
Agar sangre/agar Manitol salado/mac Tsi/Lia/Citrato/Sim

Agar nutritivo conkey
chocolate
PRACTICA N° 7
SIEMBRA
BACTERIANA. MEDIOS
DE AISLAMIENTO.
SEGURIDAD Y MATERIALES PARA SIEMBRA
EN EL LABORATORIO
Cabina de bioseguridad Cepa y tipos de asas bacteriológicas
Estría
Estría y agotamiento
TIPOS DE Inoculación
SIEMBRA
Puntura
Puntura y estría
Siembro la muestra
ESTRIA
ESTRIA Y AGOTAMIENTO
INOCULACION
PUNTURA
PUNTURA Y ESTRIA
TIPOS DE SIEMBRA
ESTRIA ESTRIA Y PUNTURA Y

INOCULACION PUNTURA
AGOTAMIENTO ESTRIA
Las principales características morfológicas que presentan las colonias son:
• FORMA :
• ELEVACIÓN :
• BORDE :
• SUPERFICIE :
• TAMAÑO :
• CONSISTENCIA :
• CROMOGENESIS :
IDENTIFICACION DE TIPOS DE COLONIAS
PRACTICA N° 8
METABOLISMO
BACTERIANO
I. -ACCION SOBRE LOS CARBOHIDRATOS
.- reacciones de oxidacion- fermentación de azucares
. Medio: TSI Agar hierro triple azúcar (Agar hierro de Klingler)
Posibles resultados
• Indicador de pH: Rojo de fenol

• medio es de color rojo ladrillo
• Consistencia: Solido en pico de flauta
• Sustrato : lactosa , sacarosa y glucosa
• Resultados:
• 1.- K/A
• 2.- A/A
• 3.- K/K
B. PRODUCCION DE ACIDOS
1.- PRUEBA DE VOGUES PROSKAUER ( VP )
• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo RM/VP)

• Indicador de pH: Reactivo de Barret (KOH + Alfa
Naftol)
• Consistencia: Liquido
• Lectura: alfa naftol 12 gotas y 4 de KOH
2.- PRUEBA DEL ROJO DE METILO ( RM )
PRODUCCION DE LOS ACIDOS MIXTOS
• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo

RM/VP)
• Indicador de pH: Rojo de metilo
• Consistencia: Liquido
II.- ACCION SOBRE LAS PROTEINAS
. PRUEBA DE PRODUCCION DE INDOL
• Medio: Medio SIM o caldo peptonado

• Indicador de pH: Reactivo de Kovacs
(alcohol amílico + HCL + p- dimetil amino
benzaldehído)
• Consistencia: Semisólido
Medio liquido
III.- UTILIZACION DEL CITRATO COMO UNICA
FUENTE DE CARBONO
PRUEBA : AGAR CITRATO DE SIMMONS
• Color : verde
• Medio: Citrato de Simmons
• Sustrato : citrato de sodio
• Indicador de pH: Azul de bromotimol
• Consistencia: Medio Solido inclinado (pico de
flauta)
IV.- HIDROLISIS DE LA UREA
PRUEBA : DE LA UREASA
• Indicador de pH: Rojo de fenol

• Medio: agar urea de christensen
• Sustrato : urea
• Medio: solido inclinado
V. PRUEBA DE LA CATALASA
• Cepas Control: S. aureus, Streptococcus ó Enterococcus

• Solución de Peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3%
2 1
VI. PRUEBA DE LA CITOCROMO – OXIDASA
• Cepa control: sembrada en Agar nutritivo

• Reactivo de oxidasa
VII. PRUEBA DE LA HEMOLISINA : AGAR SANGRE
• Cepa bacteriana
• Placas con Agar sangre de carnero
Hemólisis tipo Alfa Hemólisis tipo Beta
AGAR LISINA HIERRO (LIA)
• Medio: Base de descarboxilasa de Moller

• Color : lila
• Indicador : Púrpura de bromocresol
• Sustrato : lisina y glucosa
K/K K/A
Escherichia coli Shigella Salmonella Proteus

mirabilis
VIII. PROTOCOLO
Pruebas bioquímicas Medio de cultivo Reactivo y/o indicador Lectura
TSI
(fermentación, H,S)
VP
Voges-Proskauer
MR
Rojo de Metilo
INDOL
CITRATO
CATALASA
UREASA
CITOCROMO OXIDASA
LIA
Agar Lisina Hierro
HEMOLISINA
https://youtu.be/lDVOlCiJtMI métodos de siembra 5.51m
https://youtu.be/H1-IpZ8T-_U medios de cultivo selectivos y diferenciales 6.27m
https://youtu.be/miga09gVMyY técnicas básicas en el laboratorio preparación medios 7.11m
https://youtu.be/ioZv-PIAC_8 preparación de medios de cultivo 3.26m
https://youtu.be/-TnHCd4sY24 técnicas básicas de microbiología siembra y aislamiento de bacterias 13.46 m
https://youtu.be/8mN_nxJkdZA PRUEBA BIOQUIMICA 11.22 m
https://youtu.be/L8Tfvzs0KjI identificación bioquímica de microorganismos 9.20 m

Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-I
MEDICINAHUMANA

POR RIEV
METABOLISMO BACTERIANO, NUTRICIÓN Y CRECIMIENTO, ACCIÓN

ANTIMICROBIANA: AGENTES FÍSICOS, QUÍMICOS Y QUIMIOTERÁPICOS.
RESISTENCIA ANTIMICROBIANA
SEDE ICA :

METABOLISMO BACTERIANO.
NUTRICIÓN Y CRECIMIENTO
Metabolismo Bacteriano
▪ Es el conjunto de reacciones y
transformaciones químicas que tiene lugar en
un microorganismo.
FUNCIONES:
• Obtener energía química del entorno,
almacenarla, para utilizarla en funciones
celulares
• Convertir los nutrientes exógenos en
unidades precursoras de los componentes
macromoleculares de la célula bacteriana
• Formar y degradar moléculas necesarias
para funciones celulares específicas, ejm:
movilidad y captación de nutrientes
ENZIMAS
➢ Las enzimas funcionan como catalizadores, acelerando la velocidad de procesos y
reacciones metabólicas que se producen en los organismos vivos.
➢ Son vitales para la vida y sirven a una amplia gama de funciones importantes en el
cuerpo, tales como ayudar en la digestión y en el metabolismo
TIPOS DE ENZIMAS
Enzimas Intracelulares : Sintetizan el material celulary degradan los nutrientes
Enzimas Extracelulares : Efectúan cambios precisos en los nutrientes del ambientes

externo para que puedan ser transportados al interior de la célula.
Metabolismo bacteriano
Reacciones Reacciones
anabólicas catabólicas
Degradan biomoléculas nutrientes y al

fabrica biomoléculas tienden a unir mismo tiempo produce, liberando energía
moléculas, son reacciones de biosíntesis ( ATP)
y consumen energía
ejm: Respiración celular
ejm: Fotosíntesis
Fermentación
Síntesis de ADN
Glucolisis
Síntesis de glúcidos
desaminación
Síntesis de lípidos
FOTOSINTESIS PROCESO DE ANABOLISMO
EJEMPLO DEL PROCESO DE
CATABOLISMO
Proceso metabólico por medio del cual
las sustancias complejas se degradan a
sustancias mas simples con liberación
de energía ( Se obtiene ATP )
La glucólisis, ruta
metabólica común a
todos los organismos
CATABOLISMO AEROBICO CICLO DE KREBS
Ciclo de Krebs
O
Ciclo del ácido
tricarboxílico (ATC)
FOSFORILIZACION OXIDATIVA : TRANSPORTE DE ELECTRONES
FERMENTACION
NUTRICION BACTERIANA ABSORCIÓN DE NUTRIENTES
➢ Cada organismo debe encontrar en su ambiente todas • La membrana citoplasmática es la
las sustancias requeridas para la generación de encargada de la adsorción selectiva de
energía y la biosíntesis celular. nutrientes
➢ Los elementos o sustancias químicas de este • Se da procesos pasivos (glicerol, agua,
CO2, O2)
ambiente que son utilizados para el crecimiento de las
• Procesos activos (permasas, bombas de
bacterias son denominados nutrientes o Na o Ca, sideróforos (proteínas especiales
requerimientos nutricionales. encargadas de “secuestrar” el hierro)
➢ En el laboratorio, las bacterias crecen en medios de
cultivo que son diseñados para proveer todos lo
nutrientes esenciales para el crecimiento bacteriano
MACRONUTRIENTES
Dióxido de Carbono (CO2)
• No aporta Hidrógeno ni energía.
Carbono (C): Necesario para la construcción de moléculas • Los organismos pueden
orgánicas. Las moléculas que contienen carbono, aportan a su agruparse dependiendo de la
vez hidrógeno y oxígeno. Es utilizadas como fuente de energía fuente de carbono en:
(reacciones de óxido-reducción).
Nitrógeno (N): Necesario para sintetizar aminoácidos, purinas,
pirimidinas, algunos hidratos de carbono y lípidos, cofactores
de enzimas y otras sustancias. AUTÓTROFOS HETERÓTROFOS
Azufre (S):Necesario para la síntesis de sustancias como los
aminoácidos cisteína y metionina, algunos hidratos de carbono,
biotina y tiamina. Fuente de azufre es el sulfato.
Usan el CO2
Fósforo (P):Presente en los ácidos nucleicos, fosfolípidos,
como Usan nutrientes
nucleótidos como el ATP, varios cofactores, algunas proteínas y fuente de energía
otros componentes celulares. Fuente es el fosfato inorgánico. Orgánicos como
Fuente de
carbono
ORGANISMOS y energía
FOTOSINTÉTICOS.
TIPOS NUTRICIONALES MACRONUTRIENTES
Tipos nutricionales Tipos nutricionales
Los microorganismos pueden clasificarse El metabolismo es realizado mediante la
dependiendo de la fuente de Hidrógeno o utilización de dos fuentes de energía: energía
electrones: libre de las oxidaciones químicas y radiación.
QUIMICAS Y RADIACION
LITOTROFOS ORGANOTROFOS
Obtienen energía a partir

Emplean la luz
de la oxidación de
como fuente de
compuestos orgánicos
energía.
Obtienen electrones Utilizan sustancias o inorgánicos.
O hidrógeno de orgánicas como
Compuestos Fuente de
inorgánicos. Electrones.
QUIMIÓTROFOS FOTÓTROFOS
MICRONUTRIENTES
Elementos traza:
Manganeso, cinc, cobalto, molibdeno, níquel y
cobre.
• Necesarios en muy pequeñas cantidades.
• Son parte de enzimas y cofactores.
• Facilitan la catálisis de reacciones.
• Ayudan a mantener la estructura de la membrana.
CONDICIONES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
Todo organismo vivo requiere de condiciones PRESIÓN

especificas para poder vivir, como son el No afecta a microorganismos de la
requerimiento de: superficie terrestre.
Presión de 1 atmósfera.
▪ oxígeno En el océano puede alcanzar 600 – 110
(aerobios/anaerobios/microaerófilos/facultativos) atm, y Tº es de 2 – 3º C.
▪ temperatura (psicrófilos/ mesófilos/ termófilos// Barotolerantes: un aumento de la presión
les afecta negativamente.
termorresistentes) Barófilos : crecen a presiones elevadas.
▪ pH (El pH regula el desarrollo de las bacterias)
▪ presión osmótica , siendo éstos variable según
el tipo de microorganismos que se estudien.
PH
Solutos y actividad del agua
Osmotolerantes : pueden crecer en una
amplia concentración osmótica.
Halófilas : necesitan niveles elevados
de cloruro de sodio, condiciones hipertónicas.
Temperatura Concentración de oxígeno
Aerobio Anaerobio Anaerobio Microaerófilo Anaerobio

estricto facultativo aerotolerante
CRECIMIENTO BACTERIANO
es la multiplicación o división de la célula bacteriana
CICLO DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

Este ciclo de crecimiento consta de 4 fases, cada una de estas es muy
variable en tiempo. Depende del medio de cultivo y de los propios
requerimientos nutricionales (oxígeno, carbono y nitrógeno) de la bacteria.
Logarítmica o Muerte o
Latencia o rezago
exponencial Estacionaria
declinación
CURVA DE DESARROLLO BACTERIANO EN MEDIO DE CULTIVOS
Acción antimicrobiana:
Agentes físicos, químicos y
quimioterapicos
La acción de los agentes físicos y químicos pueden ser de dos formas
ESTERILIZACION AGENTES FISICOS
DESINFECCION AGENTES QUIMICOS
EFECTO DE LOS ANTIMICROBIANOS

Bacteriostaticos: Uniones reversibles por
disminución en la concentraciòn.
Bactericidas: unión fuerte

no se eliminan por dilución
Bacteriolitico: Descenso en el numero de

células
Agentes físicos
AGENTES
CALOR RADIACION
MECANICOS
• SECO • LUZ • Filtración

• -flameado ULTRAVIOLETA
• Aire caliente( horno)
• Radiaciones
• ultrasonidos
• incineración
• HUMEDO ionizantes
• Pasteurización
• Ebullición
• Vapor de agua ( autoclave )
AGENTES QUIMICOS
➢ AGENTES QUIMICOS
Líquidos (desinfectantes)
➢ DESINFECTANTES:
Gaseosos
Oxido de etileno ➢ ANTISEPTICOS:
Peróxido de hidrogeno ➢ QUIMIOTERAPICOS:
MECANISMO DE ACCION
Desnaturalización de proteínas
Oxidación
Reacción de sustitución
Alteración de la permeabilidad
QUIMIOTERAPICOS
Biosintesis de pared
Membrana celular
MECANISMO
DE ACCIÓN Sintesis de proteinas
Sintesis
ácidos nucleicos
CLASIFICACION DE LOS ANTIBACTERIANOS
ORIGEN: Naturales o biológicos
Sintéticos
Semisintéticos
EFECTO: Bactericida ▪PARED CELULAR: Penicilinas Cefalosporinas

Bacteriostático
ESPECTRO DE ACTIVIDAD: ▪SINTESIS PROTEICA:Macrólidos-Cloramfenicol,
Amplio Aminoglucósidos, Rifampicinas
Intermedio
Reducido ▪MEMB. CELULAR: Polimixina B – Colistina ,
ESTRUCTURA QUIMICA: Anfotericina B-Nistatina , Ketoconazol
Beta-Lactámicos (Penicilinas, Cefalosporinas)
Macrólidos (eritromicina) Polipéptidos ▪ALTERACIONES DNA: Quinolonas- Metronidazol
(Colistina)
Rifamicinas (Rifampicina) ▪MEMB. CELULAR: Polimixina B – Colistina ,
Aminoglucósidos (Gentamicina) Anfotericina B-Nistatina , Ketoconazol
Quinolonas (Norfloxaxina)
Sulfonamidas (Sulfamidas) ▪ANTIMETABOLITOS: Sulfas – Trimetoprima
Fenicoles (CMP)
Tetraciclinas
Glucopéptidos ( Vancomicina)
Resistencia
antimicrobiana
Qué es resistencia bacteriana? Uso apropiado de los antimicrobianos
Como se adquiere la resistencia Con el uso apropiado de los
La resistencia antimicrobiana es el bacteriana?
fenómeno biológico natural por el antimicrobianos obtenemos un
A través de la mutación de su máximo efecto clínico- terapéutico y al
cual una bacteria no se ve
material genético o adquiriendo ADN mismo tiempo se reduce la
afectado por un antibiótico,
de otras bacterias codifican las propagación de la resistencia
volviéndose inmunes a esos
propiedades de resistencia. microbiana.
antibióticos,
Tipos de resistencia
RESISTENCIA ADQUIRIDA:
RESISTENCIA INTRÍNSECA:
mutaciones •trasmisión de material

genético extracromosómico
(cambios en la secuencia de procedente de otras
bases de cromosoma) bacterias.
MECANISMOS DE
RESISTENCIA
BACTERIANA
MECANISMOS DE RESISTENCIAS BACTERIANA
INACTIVACIÓN DEL ANTIBIÓTICO MODIFICACIÓN DE LA PERMEABILIDAD

POR ENZIMA DE LA MEMBRANA BACTERIANA
MECANISMO POR EXPULSIÓN


Bibliografías
http://www.google.com.mx/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=5&ved=0CDs
http://medicinaupv.files.wordpress.com/2011/04/4-clase-11-de-abril-fisiologia-
bacteriana.pdf
Libro: fundamentos de microbiologia y parasitologia medica
Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-II
LABORATORIO
MICROBIOLOGIA

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
EL MICROSCOPIO
Microscopio Óptico Compuesto
Tiene dos secciones o sistemas:
1.- Sistema óptico
2.- Sistema mecánico
Sistema Óptico: Sistema mecánico:

Ocular Soporte o Base.
Objetivo o lente Platina.
Tubo Cabezal o Revolver.
Condensador o diafragma Pinzas o Sujetadores.
anular Tornillos de Enfoque o
Lámpara o espejo cóncavo Tornillo Micrométrico.
COLORACION
SIMPLE
Material para la preparación de la tinción simple
1. Tomar el asa bacteriológica y esterilizar 2. Preparar una lamina portaobjeto con una gota de suero fisiológico y la mezcla
al calor bacteriana, luego fijarla al calor
3. Cubrir el frotis con unas gotas del colorante y 5. Colocar la lamina en el microscopio
dejar actuar por 5 minutos. Lavar con agua y 4. Agregar una gota de aceite de cedro a
la muestra enfocarla y observarla
dejar secar
1. S. aureus CON UNA COLORACION SIMPLE CON AZUL DE METILENO
Resultado : Los microorganismos se observaran de color azul intenso

1. Colocar una gota de 2. Agregar una gota
tinta china sobre la de la mezcla
lámina portaobjetos bacteriana
3. Cubrir la preparación
con una laminilla
cubreobjeto
4. Observar con lente

de menor y mayor
aumento.
imagen de Cryptococcus con tinta china
COLORACIÓN
AZUL DE
LACTOFENOL
1.- Colocar una gota del colorante

sobre la lámina portaobjetos
2.- Colocar una muestra de

un cultivo de hongo sobre
el colorante
3.- Cubrir con una laminilla 4.- Observar con lente de menor
cubreobjetos y mayor aumento
imagen del hongo aspergillus con azul de lactofenol
COLORACION
GRAM
PASO 1. fijación de la muestra una gota de suero y una gota de la muestra y se fija al calor
PASO 2. cubrir el frotis con violeta de genciana y luego agregar 1- 2 gotas de solución de bicarbonato
de sodio, dejar actuar por 2 minutos y enjuagar
PASO 3.Cubrir con Lugol por 1 min y PASO 4. Decolorar con alcohol acetona
enjuagar aproximadamente por 30 segundos, luego enjuagar
PASO 5. Teñir con Safranina por 1 min y PASO 6. Colocar la lamina en el microscopio
enjuagar. Luego secar la muestra enfocarla y observarla
IMAGEN DE BACILOS GRAM IMAGEN DE COCOS GRAM
NEGATIVAS POSITIVAS
COLORACION
ZIEHL NEELSEN
PASO 1. fijación de la muestra una gota de suero y una gota de la muestra y se fija al calor
PASO 2. cubrir el frotis con fuscina fenicada diluida, calentar hasta emisión de vapores sin dejar de
evaporar, dejar actuar por 5 minutos, luego lavar con agua corriente el exceso de colorante
PASO 3. agregar alcohol acido a la muestra por 30 PASO 4. agregar azul de metileno a la muestra
segundos, luego lavar con agua corriente por 2 minutos
PASO 5. lavar repetidas veces con agua corriente PASO 6. Secar la muestra y observar al
para eliminar el exceso de colorante microscopio con una gota de aceite de inmersión
IMAGEN DE Mycobacterium
tuberculosis ZIEHL NEELSEN
https://www.youtube.com/watch?v=SHtYccisU10 LA TINCION DE GRAM 6.30 m
https://www.youtube.com/watch?v=HANr6xMdqjA COLORACION CON ZIEHL NEELSEN 5.20m
https://www.youtube.com/watch?v=noPCVsWgpy8 TINCION SIMPLE 4.14 m

Gracias

CICLO : IV
CICLO : IV
SEMESTRE: 2022-I
MEDICINAHUMANA

POR RIEV
PIONEROS DE LA MICROBIOLOGÍA. CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS.

MORFOLOGÍA BACTERIANA. ESTRUCTURAS EXTERNAS E INTERNAS DE
LAS BACTERIAS. FLORA NORMAL DEL CUERPO

FILIAL ICA : LEGUA BARRIOS MIRIAM JESUS
INTRODUCCIÓN A LA
MICROBIOLOGÍA
MÉDICA
• ¿ Qué es la microbiología?
• La microbiología es la ciencia que trata de los seres
vivos pequeños, cuyo tamaño se encuentra por de bajo
del poder resolutivo del ojo humano
• ¿Qué son los microorganismos?

• Organismos microscópicos difícil de ser observados a
simple vista. Sino se emplea un instrumento…..
son algas, hongos, bacterias y protozoarios.
“ Virus “, “ Priones”
• Microbiología se subdivide en ramas
✓ Bacteriología ,Micología, Virología, Parasitología
• En su estudio para evidenciarlo se emplean.
✓ Microscopio
✓ Técnicas de cultivo puro en laboratorio
✓ Técnicas serológicas
✓ Técnicas moleculares
¿ Cómo afectan nuestra vida?
Un pequeño grupo de estos microorganismos causan
enfermedades que pueden causar la muerte en muchos
casos así como infeccione leves
Ej. Cólera, fiebre tifoidea, hepatitis A,Covid-19
• ¿Qué utilidad Brinda la Microbiologia en el campo
Laboral a la humanidad?
PIONERO A LA MICROBIOLOGÍA
Hechos de Importancia en Microbiología
ZACARIAS JANSSEN ANTON VAN LEEUWENHOEK
ROBERT HOOKE
Robert Koch 1843 - 1910 HANS CHRISTIAN GRAM
LOUIS PASTEUR
Joseph Lister 1824 - 1912 ALEXANDER FLEMING
EDWAR JENNER
VACUNA CONTRA LA VIRUELA (1796)
TEORIA CELULAR JOSÉ GREGORIO HERNANDEZ
IGNAZ SEMMELWEIS (1818 – 1865

Karl Woese
(1928)
Gioconda San Blas - Venezuela EL DESARROLLO DE LA MICROBIOLOGIA POSMODERNA
MICROBIOLOGIA MODERNA
➢Usando los microbios

✓George Beadle y Edward Tatum
demostraron que los genes 1977: Carl Woese – descubrimiento
codificaban enzimas celulares de los Archaea
(1942) 1981: Primer reporte del SIDA
✓Oswald Avery, Colin Macleod, y 1983: Luc Montagneir –
Maclyn McCarty demostraron que el descubrimiento del HIV
DNA era el material hereditario 1995: Craig Venter – primera
(1944). secuencia completa de un genoma.
✓François Jacob y Jacques Monod
descubrieron el rol del mRNA en la
síntesis proteica (1961).
CÉLULAS PROCARIOTAS Y
EUCARIOTAS
DEFINICIÓN DE CÉLULA
¿QUÉ ES LA CÉLULA?
Es la unidad fundamental anatómica de la vida, es la

estructura mas pequeña del cuerpo/ capaz de realizar los
procesos: respiración, movimiento digestión y reproducción;
aunque no todas pueden realizar estas funciones. La mayoría
de las células son invisibles al ojo humano
(Organismos Unicelulares) (Organismos Pluricelulares)

ESTRUCTURA Y MORFOLOGÍA
BACTERIANA
PROCARIOTAS
Organismos unicelulares
Miden 0.2 u – 50 u
ARQUEOBACTERIAS BACTERIAS
Son las bacterias típicas

fósiles vivientes Adaptadas a cualquier ambiente
Pyrococcus furiosus
Autotrofas Heterotrofas
BACTERIA
• Organismos unicelulares y microscópicos
• Carecen de núcleo u organelos limitados por membranas.
• Pared celular a base de carbohidratos
• Organismos unicelulares y microscópicos
• Carecen de núcleo u organelos limitados por membranas.
• Pared celular a base de carbohidratos.
Son muy pequeñas,
0.5 y 3 micrómetros (µm) de longitud
Modo variable de obtener la energía y el alimento.
Se encuentran en
el aire
el suelo
el agua
Se pueden encontrar en algunos alimentos o viviendo en simbiosis
con plantas, animales y otros seres vivos.
DIFERENCIAS ENTRE PROCARIOTAS Y EUCARIOTA
CARACTERES BIOLÓGICOS PROCARIOTAS EUCARIOTAS
MEMBRANA NUCLEAR NO SI
CROMATINA Un Varios
Cromosoma Cromosomas
RETÍCULO-ENDOPLASMÁTICO NO SI
LISOSIMA Y GOLGI NO SI
RIBOSOMAS SI (70S) SI (80)
PLASTOS AUTÓNOMOS (MITOCONDRIAS,
CLOROPLASTOS) NO SI
CITOESQUELETO NO SI
AGRUPACIONES BACTERIANAS
ESTRUCTURA DE LA CELULA
MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
Es muy delgada de 5-10 nm observable con

microscopio electrónico
Carecen de esteroles como colesterol, pero
poseen moléculas penta-Cíclicas
denominadas
Hepanoides, ubicadas dentro la bicapa. Posee
Proteínas periféricas constituye el 20-30%,
ubicadas poco Firme en la membrana interna y
Proteínas Integrales,
insoluble en agua, no se extrae fácilmente con
lípidos.
No contiene colesterol excepto los Mycoplasma
✓ LAS BACTERIAS SE PRESENTAN
TAMBIÉN EN FORMA DE BACILOS
(ESTRUCTURA SIMILAR A UNBASTÓN).
✓ ESPIRILOS: EN FORMA DE
ESPIRAL
✓ VIBRIOS: FORMA SIMILARA UNA

COMA.
Pared Celular • Protección física.
• Prevención de lisis osmótica.

• Ausente en Micoplasmas.
• 10 – 40% peso bacteriano.
• Superficie externa cubierta de proteinas
• Lugar de acción antibióticos β-lactámicos
GRAM NEGATIVO
PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS ÁCIDO ALCOHOL
RESISTENTES
• Esta propiedad depende esencialmente de la

presencia, en su pared celular de unos lípidos
llamados ácidos micólicos.
• un peptidoglucano especial (la diferencia más
importante es que en vez de N-acetil murámico existe
N-glucolil- murámico);
• un arabinogalactano de gran peso molecular.
• Ambos polímeros se encuentran enlazados a través
de fosfodiéster entre una unidad de murámico y una
de las arabinosas. Pero a su vez, este esqueleto se
une covalentemente a los ácidos micólicos
OTRAS ESTRUCTURAS
ESTRUCTURA GRAM COMPOSICIÓN FUNCIÓN
+ - QUÍMICA
Cápsula + - Polisacárido -Patogenicidad

-Protección a la
fagocitosis.
Glicocalix + - -Adherencia a la
superficie celular.
Pilis o Glicoproteína
fimbrias + - Adherencia a superficie celular
Flagelos + - Proteina Motilidad

ESTRUCTURAS ASOCIADAS :
FLAGELOS
• Apéndices filamentosos helicoidales.
• Movilidad bacteriana.
• Presentes solo en bacilos.
• Formado por: cuerpo basal, un gancho y un filamento
externo (flagelina).
• Buenos inmunógenos.
• Antígenos flagelares se denominan antígenos “H”.
• Disposición:
• Peritrica, Monotrica, Lofótrica y Anfitrica
FLORA NORMAL DEL CUERPO
SITIOS COLONIZADOS
FLORA MICROBIANA NORMAL EN EL SER HUMANO
• Piel - Piel y mucosas
- Intestino delgado
Se pueden encontrar ácaros en glándulas sebáceas y
folículos pilosos; levaduras lipofilicas se encuentran en el - Intestino grueso
cuero cabelludo. La bacteria representativa es el - Vagina
Staphylococcus epidermides. - Tracto urinario inferior
- Estómago
• Mucosas. SITIOS ESTERILES
- Pleura
La nasofaringe es el hábitat natural de bacterias y virus,
- Meninges
como Estreptococos y Estafilococos. Raros son bacilos - Pericardio
gram negativos. - Peritoneo
- Utero
- Sistema circulatorio

12; Edit. Medica Panamericana, 2017, Argentina/ buenosAires
• https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717
-95022017000401214&lng=en&nrm=iso&tlng=en
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CURSO : MICROBIOLOGIA PRACTICA

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

ACREDITADA POR SINEACERE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV

▪ LEGUA BARRIOS MIRIAM

ACREDITADA POR SINEACE

Estafilococcus gram positivos , habitantes

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

Streptococcus cocos gram positivos, Streptococcus agalactiae

Medio thioglicolato Caldo inulina

Tubo con CLNA al 6.5 % Prueba de catalasa

• Prueba de solubilidad de bilis en tubo.

Agar Thayer Martín

Prueba de CITOCROMO OXIDASA

https://youtu.be/odABzg3Q92g identificación de estreptococos y enterococcus 13.17 m

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

ACREDITADA POR SINEACE

Infecciones por cocos gram positivos: Genero Staphylococos;

DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA

LEGUA BARRIOS MIRIAM JESUS

Resistentes al calor, Poseen tendencia agruparse en Fermentan

Necesitan una puerta de entrada para el ingreso del

Enzimas Enterotoxinas* Toxina 1 *

Alfa hialuronidasa De la A a la R Síndrome del Shock

Son integrantes habituales en zonas húmedas

IMPÉTIGO CARBUNCO”, “ANTRAX

Toxina del sindrome del shock toxico. Toxina pirogena TSST - 1

• Se ha reportado resistencia microbiana y

• Cuando la bacteria forma la biopelícula

• El antibiótico de elección Vancomicina ,

Es un organismo mesófilo, crece entre 15 y 45

Soporta concentraciones de sal de 7. 5 %, pero

• Es integrante de la flora normal del tracto

• Receptores oligosacáridos específicos de

• Las cepas son resistentes a la

Bacterias en forma esférica agrupada en cadenas

❑Cápsula de ácido hialurónico

Factores de Enfermedades que Diagnostico y

Tras un periodo de incubación de

Tratamiento La eliminación de los enterococos de

Factores de • Producción de radicales libres superóxidos

virulencia • Flagelos, fimbrias, ureasas, hemolisinas,

• Catalasa y oxidasa negativo

Oxidasa positivo Fermentación de

• LIBRO: Introducción a la Microbiología tortora, Gerard J; Ed.

• LIBRO: Microbiología Médica, Jawetz. Melnick, Adelberg.; Ed.

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

ACREDITADA POR SINEACERE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV

DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA:

▪ LEGUA BARRIOS MIRIAM

ACREDITADA POR SINEACE

. Es el mas usado, sencillo y practico

Son catalizadores biológicos producido por

Enzimas constitutivas Enzimas adaptativas Enzimas reprimibles:

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

ACREDITADA POR SINEACE

DOCENTE RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA

Para poder manifestar su acción patógena los

I.- ADHERENCIA ADAPTACION

FACTORES DE ADHERENCIA: MULTIPLICACION

ADHERENCIA REVERSIBLE ➢ Adhesinas

Penetran atravesando barreras : por vía :aéreas,

Enzimas que producen