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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE QFB

Laboratorio de Bioquímica Metabólica

TEMA. METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS: CATABOLISMO


Práctica No. 1:
Velocidad de absorción de glucosa por el intestino de rata

Dra. Abril de los Ángeles Aguilar Tirado

Martes 23/agosto/2021
15:00 – 18:00 h
Preguntas guía:

- ¿Qué es la digestión?

- ¿Qué es la absorción?

- ¿Qué es catabolismo?

- ¿Qué es una enzima?

- ¿Qué es un sustrato?

- ¿Qué es un mecanismo de transporte?


Metabolismo
Conjunto de reacciones químicas catalizadas enzimáticamente que de forma regulada y coordinada tienen lugar
en las células vivas.

- Se divide en:
- Catabolismo → fase degradativa
- Anabolismo → fase constructiva o biosintética

Catabolismo
Proceso por el que los nutrientes (carbohidratos, lípidos y proteínas) provenientes del medio ambiente o de
los depósitos celulares pueden ser degradados a moléculas sencillas como ácido láctico, CO2 o urea.

Se realiza con liberación de la energía inherente en los nutrientes, parte de la cual se conserva en forma de
ATP.

Anabolismo
Las moléculas precursoras se unen para formar componentes moleculares de las células como polisacáridos,
ácidos nucleicos, proteínas y lípidos.

Puesto que este proceso aumenta la complejidad de la estructura, requiere energía libre, que es proporcionada
por la hidrólisis del ATP.

El catabolismo y el anabolismo tienen lugar simultáneamente en las células.


Etapas del Catabolismo
Carbohidratos

Constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la superficie terrestre,


representando aproximadamente el 75% de la materia orgánica existente.

Son las primeras biomoléculas que se forman a partir de la energía luminosa por medio de la
fotosíntesis, de modo que son esenciales en la homeostasis o equilibrio global del planeta.

Además, son la forma más versátil y rápida de producir energía en las células.

Los hidratos de carbono se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos y glúcidos.

Estos términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la composición
Cn(H2O)n.

Aunque tales denominaciones subsisten, no todos los glúcidos tienen sabor dulce, ni
responden a tal composición.
En los animales, los hidratos de carbono son esenciales desde el punto de vista
energético; muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro o
los eritrocitos, obtienen su energía principalmente de la glucosa.

Pero sus funciones no se restringen a ser fuente de energía, sino que forman
parte de muchas estructuras celulares y tisulares.

Entre ellas se encuentran no sólo los ácidos nucleicos, sino muchas


biomoléculas de composición compleja con funciones muy diferentes, como
son las glicoproteínas, los glicolípidos (llamados glicoconjugados) y los
proteoglicanos que son esenciales para el reconocimiento, la adhesión, la
unión celular específica y el sostén de la arquitectura de los animales
superiores.
Digestión
Descomposición de sustancias alimenticias naturales en formas más eficientes de asimilación.

Cambios químicos:

Enzimas hidrolasas del tracto digestivo → Catalizan la hidrólisis de:


A) Proteínas → Aminoácidos
B) Almidones → Monosacáridos (glucosa)
C) Triacilgliceroles → monoacilgliceroles, glicerol y ácidos grasos.
D) Ácidos nucleicos → nucleobases, nucleósidos y pentosas.

También existe asimilación de minerales y vitaminas.

Los polisacáridos de la pared celular de los vegetales y la lignina de la dieta no pueden ser
digeridos por las enzimas presentes en los mamíferos, constituyendo la fibra dietética que forma
la mayor parte del volumen de residuos generados por la digestión.
La digestión inicia en la cavidad oral.

Saliva:
- 99.5% de agua
- Favorece la disolución de moléculas para la acción de hidrolasas.
- Contiene mucina (glucoproteína) → Lubricante en la masticación y deglución
- pH 6.8
- Contiene amilasa → realiza la hidrólisis de almidón y glucógeno a maltosa y otros
oligosacáridos, actuando sobre los enlaces a (1→4) glucosídicos.
o La amilasa salival se inactiva a pH de 4.0 o menor.

Masticación:
- Subdivide los alimentos aumentando la solubilidad y facilita el medio para la acción
enzimática.
Acción de las enzimas digestivas:
Reducir los productos digestibles a formas que puedan ser absorbidas y asimiladas.
Resumen esquemático de las
actividades del tracto gastrointestinal

Las actividades del tracto gastrointestinal incluyen la


ingestión, la digestión mecánica, la digestión química
(enzimática), la impulsión, la absorción y la defecación.

Los puntos en que se produce la digestión química también


son sitios de producción o recepción enzimática o de otras
secreciones producidas por
los órganos secundarios.

Toda la mucosa del tracto GI


segrega mucosidad, que protege y lubrica.
Digestión del almidón en el
intestino delgado.

La amilasa pancreática digiere el


almidón en maltosa y pequeños
oligosacáridos.

Las enzimas del borde en cepillo


(maltasa, dextrinasa y
glucoamilasa) las digieren en
glucosa, que es absorbida por
las células epiteliales.
Enzimas de los procesos digestivos

Fuente de Método de Productos


Enzima Sustrato
secreción activación finales o acción
Glándulas Ion cloruro. Almidón Maltosa más
Amilasa salival
salivales pH 6.6. – 6.8 Glucógeno glucósidos
Amilasa Almidón Maltosa más
Páncreas pH 7.1
pancreática Glucógeno glucósidos
Fructosa,
Sucrasa pH 5.0 – 7.0 Sucrosa
glucosa
Maltasa pH 5.8 – 6.2 Maltosa Glucosa
Intestino Glucosa,
Lactasa pH 5.4 -6.0 Lactosa
delgado galactosa
Trealasa Trealosa Glucosa
Isomaltasa o
Glucósidos 1:6 Glucosa
glucosidasa 1:6
Defectos en los procesos digestivos:

- Ulceración (Exceso de HCl gástrico)

- Aclorhidria (Disminución en la secreción de HCl)

- Deficiencia nutricional por mala absorción de nutrientes.


Absorción en el tracto gastrointestinal:
- Paso de nutrientes a la vena porta hepática o a los vasos linfáticos.

Intestino delgado
- Sitio principal de absorción.
- Casi el 90 % de los alimentos ingeridos se absorbe a su paso por este órgano.
- Lleva a cabo la absorción de agua.

Vías de transporte de los materiales absorbidos:


A) Sistema porta hepático
Los conduce directamente al hígado, transportando nutrientes hidrosolubles.

A) Vasos linfáticos
Los conduce a la circulación mediante el conducto torácico y transporta nutrientes
liposolubles.
Carbohidratos
- Son absorbidos como monosacáridos.
- Los productos de la digestión de carbohidratos son absorbidos en el yeyuno y pasan a la circulación
del sistema venoso porta en forma de monosacáridos, principalmente hexosas (glucosa, fructosa,
manosa y galactosa) y como azúcares pentosas (ribosa).

Oligosacáridos:
Compuestos derivados de almidones que producen de 3 a 10 unidades de monosacáridos por
hidrólisis.

Disacáridos:
Compuestos por dos monosacáridos.
Oligosacáridos y disacáridos son hidrolizados mediante enzimas de la superficie mucosa del
intestino delgado, que pueden incluir la amilasa pancreática adsorbida a la mucosa.
Mecanismos responsables de la absorción de monosacáridos:

A) Transporte activo en contra del gradiente de concentración

B) Difusión facilitada que va en sentido del gradiente de concentración.

La absorción activa de glucosa se impulsa por la bomba sodio-potasio.


El borde en cepillo del enterocito contiene varios sistemas de transporte.
Un transportador de glucosa dependiente de sodio (SLGT1) enlaza a la glucosa y al Na+ y los transporta a
través de la membrana plasmática de las células intestinales.
- Tanto la glucosa como el sodio son liberados en el citosol permitiendo al transportador llevar más
“carga”.
- El Na+ es transportado en sentido de su gradiente de concentración y al mismo tiempo provoca que el
transportador lleve glucosa en contra del gradiente de concentración.

La energía libre requerida para este proceso activo se


requiere de la hidrólisis del ATP unido a la bomba de sodio
que libera Na+ desde la célula en intercambio por K+.
La glucosa y la galactosa son
absorbidas por el cotransporte
unidireccional SGLT en la membrana
apical de la célula de absorción
(derecha).

La glucosa también se absorbe junto


con el agua a través de la ruta
paracelular (entre células) mediante
arrastre por solvente.

La fructuosa se absorbe por


separado mediante difusión
facilitada.

La mayor parte de la fructuosa se


convierte en glucosa dentro de la
célula epitelial.

Los monosacáridos atraviesan la


membrana basal de la célula por
difusión facilitada (izquierda) y se les
absorbe luego en los capilares
sanguíneos de las vellosidades.
Medición
en glucómetro
Administración
por vía oral (po)
Administración por
vía intraperitoneal
Ubicación del estómago e intestino delgado en la rata Wistar
Rapidez de absorción de glucosa

Am x 5 x 100
Cantidad de glucosa restante (mg) =
Ast

Cantidad de glucosa absorbida (mg) = Cantidad de glucosa administrada - Cantidad de glucosa restante

Am = Absorbancia de la muestra
Ast = Absorbancia del estándar (glucosa)
Volumen del líquido de lavado = 100 mL
Dilución = 5 mL

Cantidad de glucosa absorbida (mg)


x 100 g = Rapidez de absorción de glucosa
Peso de la rata (g)
Nota: El resultado se expresa como cantidad de glucosa
absorbida (mg) por cada 100 g de peso de rata, durante un
tiempo de 60 minutos.
Resultados
Velocidad
Glucosa Glucosa Glucosa absorción
Absorbancia Glucosa
Muestra inicial final absorbida (mg/100 g
(510nm) restante (mg)
(mg/mL) (mg/mL) (mg) de rata por
hora)

Blanco
Glucosa 50 %
Glucosa 50% +
Glibenclamida
Glucosa 50 % +
ácido yodoacético
Estándar
Control
Un transportador de glucosa dependiente de sodio (SLGT1) enlaza a la
glucosa y al Na+ y los transporta a través de la membrana plasmática de las
células intestinales.

Tanto la glucosa como el sodio son liberados en el citosol permitiendo al


transportador llevar más “carga”.

El Na+ es transportado en sentido de su gradiente de concentración y al


mismo tiempo provoca que el transportador lleve glucosa en contra del
gradiente de concentración.

La energía libre requerida para este proceso activo se requiere de la


hidrólisis del ATP unido a la bomba de sodio que libera Na+ desde la célula
en intercambio por K+.
El transporte activo de la glucosa es inhibido por:

- Ouabaína (glucósido cardiaco): inhibidor de la bomba de sodio


- Floricina: inhibidor de la reabsorción de glucosa en el túbulo renal.

Existe también un transportador independiente de sodio, GLUT 2, que facilita el transporte de


azúcares fuera de la célula.

La hidrólisis de polisacáridos, oligosacáridos y disacáridos es veloz, por lo que los mecanismos de


absorción de glucosa y fructosa, como consecuencia se saturan rápidamente.

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