Unidad 2

Semana 7

Biotransformación: Fase I
Mg. Leonardo Humberto Mendoza Carbajal
Facultad de Ingeniería – Carrera Profesional de Ingeniería Ambiental
leonardo.mendoza@upn.pe
INTERÉS

¿Qué funciones tiene el

Hígado?

¿Qué consecuencias
traería una enfermedad
hepática?

¿Se podría vivir en el

Hígado?
AGENDA

1. Biotransformación de xenobióticos
a. Activaciones e inactivaciones
b. Bioactivación y detoxificación
c. Compuestos biodegradables y
persistentes
d. Bioacumulación y biomagnificación
e. Reacciones de fase I: oxdicaciones,
reducciones, hidrólisis
2. Evaluación
Eugenomic.com
LOGRO DE SESIÓN DE APRENDIZAJE

Al término de la clase el estudiante resuelve un

cuestionario sobre el proceso de biotransformación de
un xenobiótico, incluyendo los detalles de la Fase I y
sus procesos, mostrando dominio técnico.
 ¿Para qué
biotransformar un
xenobiótico?
 Rutas del Xenobiótico en el organismo

1.- Exposición
2.- Absorción
3.- Distribución
4.- Biotransformación
5.- Eliminación
 Modificación que sufre todo xenobiótico en su paso
4. Biotransformación
a través del organismo

• Objetivo: transformarlos en • Transformaciones enzimáticas de los

compuestos más
hidrosolubles que puedan
ser excretados.
• Las reacciones de biotransformación
generan metabolitos inactivos, más
polares e hidrosolubles para su
eliminación.
xenobióticos en el organismo, resultando
otro(s) producto(s).
• Los XBs que son objeto de estas
transformaciones y acaban degradándose se
denominan BIODEGRADABLES (en el
ambiente).
• Se pueden efectuar en varios órganos: piel,

• Sin embargo, en algunos casos se intestino, riñón, pulmón, hígado, etc.

generan metabolitos con mayor • Biotransformaciones mediante reacciones
actividad biológica, más reactivos y en enzimáticas localizadas especialmente en lo
consecuencia con propiedades tóxicas microsomas hepáticos, con la importante
participación de las isoenzimas Cit P450.
4. Biotransformación

Puede eliminarse sin alteración.

Pro-tóxicos, tóxico o no tóxico.

Experimenta transformaciones que facilitan la

eliminación.

Experimenta modificaciones estructurales que

aumentan o disminuyan su cualidad tóxica.

Responsables: Enzimas metabolizantes de XBs

4. Biotransformación T-6

Todos los organismos tienen un

conjunto de enzimas que les
otorgan su capacidad
metabolizadora o
biotransformadora.

Los organismos tienen diferente

capacidad Biotransformadora
 4. Biotransformación

Ejemplos de reacciones
de Biotransformación:
 4. Biotransformación Biotransformaciones del malation

El insecticida
organofosforado Malation
es biotransformado y/o
degradado de forma
diferente en insectos que
en mamíferos
4. Biotransformación

Otros compuestos no de degradan y se convierten

en PERSISTENTES, lo que permite su
Bioacumulación

PERSISTENCIA:
El tiempo que permanece un XB en el
medio manteniendo su estructura y su
actividad biológica.
 Biomagnificación de DDT a través de una cadena trófica acuática

Aves
124 ppm
Peces pequeños Peces grandes
1.04 ppm 4.83 ppm
Zooplancton
Fitoplancton .123 ppm
.025 ppm

Huevos en nido
124 ppm
4. Biotransformación Activación o desactivación
 4. Biotransformación Detoxicación

Las biotransformaciones que conllevan un

descenso de la actividad biológica de los
XBs son reacciones de detoxicación o
bioinactivaciones.
•Desactivación de grupos funcionales
•Desactivación de electrófilos
•Desactivación de nucleófilos
•Detoxicación de radicales libres

La detoxicación de compuestos lipofílicos requiere su conversión a polares (entrada de grupos

funcionales) y después aumentar su hidrosolubilidad.
 4. Biotransformación

Bioactivación

Bioactivación es toda biotransformación

que produce un compuesto más tóxico o
más reactivo. En general:
• Formación de electrófilos
• Formación de nucleófilos
• Formación de radicales libres
• Formación de reactivos red-ox

La introducción de grupos más polares

aumenta la hidrosolubilidad y, a veces, la
reactividad, lo que genera “metabolitos
reactivos”

Hidroxilación de aminas aromáticas, formación

de epoxis, etc.
4. Biotransformación Bioinactivación

Bioinactivación de organofosforados
Los derivados “oxo” de los organo-tio- fosforados suelen ser mas reactivos y mas tóxicos.
La hidrólisis por esterasas suelen desactivarlos.

.- la oxidación activa y la hidrólisis desactiva

activación desactivación
4. Biotransformación Fases I y II
Biotransformación:
Fase I
 Biotransformación: Fase I

• Compuesto tóxico puede convertirse en uno menos tóxico o en otro más tóxico que el original.
• Las reacciones químicas incluyen: oxidación, reducción e hidrólisis.

Ox: Alcohol DHasa - Aldehído Dhasa - Aldehído Oxidasa - CYP P450-

Monooxigenasas FAD - Monoamino oxidasa - mieloperoxidasa -

Oxido Nítrico Sintetasa - S-oxidasa - Xantina oxidasa - Amidasas

Reacciones de
Fase I
Red: Azoreductasas - Nitroreductasas - N-oxido reductasa
(=funcionalización)
introducen o exponen
un grupo funcional del Hid: Aril esterasas - Carboxil esterasas - Colinesterasa - Epox Hidratasa
Xb original
Biotransformación: Fase I Oxidaciones

Monoxigenasas dependientes de CYP450

Monoxigenasas dependientes de FAD

Enzimas responsables de
Oxidaciones de Fase I
Oxidaciones no microsomales

Deshidrogenasas

MonoAminoOxidasas

Diaminoxidasas

Peroxidasas
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

• Grupo de enzimas con actividad monooxigenasa

• El Cyt P es una hemoproteina que presente en animales, plantas, Componentes
levaduras y bacterias.
• En mamíferos, algunas enzimas están involucradas en síntesis de
•Citocromo P450, una
esteroides
cadena de 35-40 KDa
• Con muchas isoenzimas (hemoproteina)
• Sin embargo, la gran mayoría de MO oxida a xenobióticos
•Cit P450 reductasa
Sinónimos (flavoproteina, FAD, FMN)
1. Monooxigenasas dep. Cit P450
2. Oxidasas Función Mixta, OFM (Mixed Function Oxidases, • Citocromo b5
MFO)
3. Enzimas microsomales
4. Enzimas metabolizantes de drogas
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

Citocromo P450 son una

hemoproteína
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

Reacciones catalizadas por CytP450

• Cataliza la mayoría de las oxidaciones de XBs.
• En las reacciones intervienen:
- O2 molecular
- NADPH • Hidroxilación de compuestos aromáticos y alifáticos

Y siempre se produce: • Formación de epoxis sobre dobles enlaces

• La reducción de un átomo del O 2 hasta H 2 O • N-hidroxilación de aminas aromáticas

• La incorporación de un átomo de O al sustrato
• Desalquilación en O-, N-, S-alquilos
R H + N A D P H + H+ + O 2 - - - R-OH + N A D P + H 2 O
• Desulfuración oxidativa del paration
Los sustratos pueden ser muy variados y poco
específicos: endógenos y compuestosXBs. • Reacciones de reducción en ausencia de O2
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

•H alifática

•H. aromática

•N-hidroxilación

•Epoxidaciones
 Biotransformación: Fase I Oxidaciones

Monoxigenasas dependientes de CYP450

Hidroxilación del Benzopireno

Interacción con

https://www.interempresas.net/Produccion-Aceite/Articulos/229774-Caracteristicas-y-particularidades-de-los-benzopirenos.html
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

N-hidroxilación de aminas

2-acetil amino-
fluoreno (2-AAF)

anilina
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

Formación de epoxis en
insaturaciones
 Monoxigenasas dependientes
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
de CYP450

Formación de metabolitos reactivos

 Monoxigenasas
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
dependientes de FAD

Reacciones catalizadas por Monoxigenasas dependientes de

FAD
• Enzimas que catalizan la oxidación de XBs orgánicos
que contienen heteroátomos
• Proteínas monoméricas
• Llevan un nucleótido de FAD
• Asociadas a RE
• Sinónimo: FMO (Flavin-containing Monooxygenase)
• Presentan diversas isoformas (FMO1, FMO2, etc.)

- N-Oxidación de aminas
- S-oxidación de tioles y disulfuros
- P-oxidación de fosfinas, fosfonatos,
- Desulfuración de tio- y ditio-carbamidas
- Otras oxidaciones (iones)
 Monoxigenasas
Biotransformación: Fase I Oxidaciones
dependientes de FAD

Algunas reacciones son catalizadas

por ambas MO: éstas y las de Cyt
P450
 Monoxigenasas
Biotransformación: Fase I Oxidaciones Ciclo catalítico
dependientes de FAD
Biotransformación: Fase I Oxidaciones

Monoxigenasas dependientes Monoxigenasas

de CYP450 dependientes de FAD

Actúan sobre xenobióticos Actúan sobre xenobióticos

Similitudes Radican en RE y se aíslan en la fracción Radican en RE y se aíslan en la fracción
microsomal microsomal
Inhibición: con anticuerpos
Inhibición: desactivadas por calor (50°C)
Diferencias Son inducibles: xenobióticos hacen variar su
No son inducibles
actividad
 Oxidaciones no
Biotransformación: Fase I Oxidaciones microsomales

Oxidación no-
microsomal del
alcohol etílico

Fracción soluble
Isoenzimas hepáticas
Biotransformación: Fase I Reducción

GRUPOS FUNCIONALES PROCESOS PRODUCTOS

Reducción de aldehidos

Reducción de cetonas
Re d u c ta s a s
aldehidos, cetonas nitro, azo, Reducción de sulfóxidos

Reducción de disulfuros
metales….
DT -diaforasa Reducción de alquenos

DDT -de hi dro cl orin asa

Azo-reducciones

Nitro-reducciones
Biotransformación: Fase I Reducción

Deshalogenación reductora del DDT a DDE

DDT-Dehidroclorinasa, fracción soluble, requiere glutation
reducido, es estereoespecífica (pp’-DDT).
DDT-DESHIDROCLORINASA

La actividad de esta enzima está relacionada con la

resistencia al DDT en insectos
 Catalizadas, en general, por Hidrolasas,
Biotransformación: Fase I Hidrólisis
en fracciones soluble y microsomal.

E st e ra s a s
Hidrolizan ésteres: organofosforados, carbamatos, etc
Hidrólisis de ésteres: ESTERASAS
Esterasas Hidrólisis de amidas. AMIDASAS

Carboxilesterasas (ésteres)
Non-carboxylesterases

Acetilcolinesterasa (ACh)
paraoxonasa/arilesterasa
 Biotransformación: Fase I Hidrólisis Esterasas

El insecticida organofosforado
Malation es biotransformado
y/o degradado de forma
diferente en insectos que en
mamíferos
Biotransformación: Fase I Hidrólisis Epoxi hidrolasas

Los derivados epoxi son electrofílicos reactivos con biomoléculas y tóxicos

Hidrólisis de epóxidos por acción de la epoxi-hidrolasa.

Epóxido

Éter cíclico formado por un átomo de

oxígeno unido a dos átomos de
carbono, que a su vez están unidos
entre sí mediante un solo enlace
covalente
Biotransformación: Fase I Hidrólisis Epoxi hidrolasas

F o r m a c i ó n d e d e r i va d o s
c a rc i n ó ge n o s d e l b e n z o p i r e n o
CONCLUSIONES – RETROALIMENTACIÓN
ACTIVIDAD

Para verificar lo aprendido resolveremos un

cuestionario en la plataforma Blackboard
Ultra. Seguir las indicaciones:

- Consta de cinco preguntas con alternativas

múltiples y/o para desarrollar.
- Duración: 20 minutos (salvo indicación
expresa del docente en clase).
- Otras indicaciones serán dadas por el
docente.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

• Murray, R. K., Bender, D. A., & Botham, K. M. (2010). Harper: bioquímica ilustrada. McGraw-Hill.

• Murialdo, R. 2016. Ecología, ecosistemas, ecotoxicología: conceptos fundamentales pp. 577