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Transporte a través de la

membrana celular

Departamento de Biofísica
ESFUNO Facultad de Medicina
Objetivos

• Analizar parte de las funciones de las


membranas celulares.
celulares.
• Estudiar el pasaje de sustancias a través de la
misma..
misma
• Expresar en forma cuantitativa las leyes que
gobiernan dicho pasaje.
pasaje.
Membrana celular
Lípidos (fosfolípidos y colesterol).
colesterol).
Carbohidratos..
Carbohidratos
Proteínas de membrana (intrínsecas y extrínsecas)
extrínsecas)..
• Una de las principales funciones de las
membranas biológicas es la compartimentación
compartimentación..

• Las proteínas de membrana son las


macromoléculas que determinan el grado de
especialización de esta
esta..
• Formación de canales iónicos

• Transporte activo de iones


y metabolitos

• Comunicación intercelular

• Generación de segundos mensajeros de las distintas vías metabólicas


Definiciones básicas
PERMEABILIDAD

Es la capacidad que posee una membrana (sea


ésta natural o artificial), de permitir el pasaje de una
sustancia a través de ella.

• Impermeables
• Semipermeables
• De permeabilidad selectiva (MEMBRANAS BIOLOGICAS)

• Sin selectividad
FLUJO
Cantidad de sustancia (moles o gramos) que atraviesa una
determinada sección perpendicular a la dirección del
desplazamiento por unidad de tiempo

Δn
J= (mmol/seg)
Δt
DENSIDAD DE FLUJO
Flujo que atraviesa la sección por unidad de área

J Δn
m= = (mmol/seg.cm2)
A A . Δt
Equilibrio Químico
Químico
Es el estado al que llega un sistema después de
cierto tiempo sin que actúen fuerzas exteriores,
manteniéndose invariable con el tiempo.

R T lnC (1) > R T lnC (2) R T lnC (1) = R T lnC (2)


μ = R T lnC
Estado Estacionario
En contraposición al anterior, podemos definirlo como
un estado de no equilibrio el cual se mantiene constante
en el tiempo. Esto requiere aporte de energía.

R T lnC (1) > R T lnC (2)


m = mo f

mo : Cte. ( m = m o si C= 1M y f = 0)
R : Cte. de los gases (julio / grado.mol)
T : Temperatura absoluta (º Kelvin)
z : Carga / ion
F : Cte. de Faraday ( carga de un mol de iones
monovalentes 96500 coul.)
m : julio/mol
m  m
1 2

m = m
1 2
ECUACIÓN DE NERNST

μ1 = μ2

μ0  RTlnC1  zFφ1 = μ0  RTlnC 2  zFφ 2


ECUACIÓN DE NERNST

μ1 = μ2

μ0  RTlnC1  zFφ1 = μ0  RTlnC2  zFφ 2


ECUACIÓN DE NERNST

μ1 = μ2

RTlnC1  zFφ1 = RTlnC 2  zFφ 2

zFφ1 – zFφ2 = RTlnC2 – RTlnC1


ECUACIÓN DE NERNST

μ1 = μ2

zFφ 1 – zFφ
RTlnC = RTlnC2 – RTlnC
1 2zFφ1 = RTlnC 2  zFφ
1 2

zF(φ1  φ 2 ) = RT(lnC 2  lnC1 )

C2
zF(φ1  φ 2 ) = RT ln
C1
ECUACIÓN DE NERNST

μ1 = μ2

C2
zF(φ1  φ 2 ) = RT ln
C1

RT C2 RT C2
(φ1  φ 2 ) = ln ε= ln
zF C1 zF C1


Consecuencias de la ley de Nernst
Un ion puede estar en equilibrio electroquímico
aun cuando su concentración no sea la misma en
ambos compartimientos.

Si C1 = C2, ε=0, ln (1)=0 RT C2


ε= ln
zF C1
Concentración fisiológica y potenciales de equilibrio
para los iones Na+, K+ y Cl-.

Na+ K+ Cl-

[ ]ext
120 2.5 110
(mmol/l)
[ ]int
15 140 3
(mmol/l)
Potencial de
equilibrio +50 -100 -90
(mV)
Fibra muscular esquelética de rana
Clasificación de transporte

Transporte pasivo: Se produce a favor de gradiente electroquímico


1) Difusión simple
2) Difusión facilitada

Transporte activo: Se produce en contra de gradiente


electroquímico
1) Transporte activo primario: utiliza la energía proveniente del
metabolismo celular (Hdrólisis de ATP). Bomba de Na+-K+.
2) Transporte activo secundario. Utiliza la energía de otro soluto que
se transporta a favor de gradiente electroquímico (transportes
acoplados: cotransporte y contratransporte)
Transporte PASIVO
Producido por la diferencia de potencial
electroquímico de la especie transportada.
Incluye: a) Difusión simple
b) Transporte facilitado

a) DIFUSIÓN SIMPLE

Transporte neto de una sustancia sin carga eléctrica neta desde la zona más
concentrada a la zona más diluída de una disolución.
Cuando la partícula posee carga eléctrica neta el movimiento se produce
desde la zona de mayor potencial electroquímico hacia otra con menor
potencial electroquímico y el proceso se denomina electrodifusión libre.
C(mM)

X(cm)
C(mM)

Si el gradiente de concentración es
C2 a cte, la densidad de flujo entre
dos puntos será proporcional a la
b diferencia de concentración (C)
C1
e inversamente proporcional a la
distancia (x).

X1 X2
X(cm)
Primera Ley de Fick

D = coeficiente de
Difusión (cm2/seg)
Primera Ley de Fick

D = coeficiente de
Difusión (cm2/seg)

c c

x x

La ley de Fick es aplicable en un medio homogéneo, (D = cte)


Flujo a través de la membrana

C1 C2
c1 c2
Flujo a través de la membrana

C1 C2
c1 c2

Coeficiente de partición (k): razón de


concentraciones entre la bicapa y la fase acuosa.
Indica cuan fácil se “disuelve” una sustancia
química en la membrana.

k > 1 soluto liposoluble k < 1 soluto hidrosoluble


Flujo a través de la membrana

C1 C2 Δx = a = espesor de membrana
c1 c2
P (permeabilidad de la membrana)
- composición, estructura de membrana
- espesor de membrana
- especie química que difunde

Para una membrana y un soluto determinados,


k, a y son ctes
EN RESUMEN

En la membrana celular, la difusión simple se produce


a través de la bicapa lipídica y obedece a la expresión:

M = P (C1 –C2)

que deriva de la primera ley de Fick.


M

Difunden según esta ecuación sustancias


liposolubles. k desempeña un papel importante

Transporte de iones a través de la membrana


por difusión simple es despreciable
ΔC
b) TRANSPORTE FACILITADO

Permite el transporte PASIVO de iones y sustancias hidrosolubles


Se da por sitios específicos: - canales
- transportadores

Los 2 mecanismos no son excluyentes

Un canal con múltiples estados conformacionales puede


aproximarse al comportamiento cinético de un transportador

Disminuyen la barrera de energía para que exista un flujo


apreciable de moléculas cargas o polares
Transportadores
Estructuras proteicas con uno o más sitios de unión, que
exponen alternativamente uno o varios sitios de unión a un
lado y otro de la membrana

Etapas:

1- atrapar ión y despojarlo de las moléculas de hidratación


2- cruzar el ión
3- liberarlo y rehidratarlo en la otra orilla

Mecanismos: encerrar el ión, brindado refugio con cubierta


hidrofóbica (ej: antibiótico valinomicina, transporta K+).

Transporte mediante cambios conformacionales


Canales
Importancia: participan en diversos procesos celulares
(Excitabilidad, regulación del volumen celular, etc)
Definición:
Son proteínas transmembrana que poseen un poro cuya apertura
es controlada por voltaje, ligando, mecánicamente, y permite el
flujo de iones a través de la membrana
Presentes en tejidos excitables y no excitables, involucrados
en procesos de señalización
Canales:

 Na+ y K+: participan en la generación del potencial de


acción
 Ca++: transmisión de señales. Acoplamiento excitación-
contracción
 Acetilcolina: placa neuromotora
Transporte ACTIVO

Incluye todos los mecanismos de transporte que no son


producidos por la diferencia de potencial electroquímico

La energía libre para el transporte puede provenir de procesos


metabólicos directamente, o del transporte de otra especie a
favor de su gradiente

Primario: bomba de Na+/K+, con importante


función electrogénica
T Activo
Cotransporte (mismo sentido)
Secundario
Contratransporte
+
LA BOMBA DE Na+- K DE LA MEMBRANA CELULAR
ES UNA ATPasa :

3 Na+
MEDIO Sitio de unión del K+
EXTRACELULAR y de la Ouabaina

CITOPLASMA

+
Sitio de unión del Na

ATP
ADP + Pi
+
2K

+ + +
ATP(i) + H 2 O + 3 Na+ (i) + 2 K (e) ADP(i) + P(i) + 3 Na (e) + 2 K (i)
Mg++
LOS TRANSPORTES MEDIADOS POR PROTEINAS SATURAN

K
[A] + [S] [AS]
J = Jmax * [S] / (Km + [S])

K: cte de equilibrio
A: sitio de unión
S: ligando

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