POTENCIAL DE LA MEMBRANA EN REPOSO

ext int

Vm = Vint - Vext
Neurona M. Cardaco M.Esqueltico M.Liso Glob.Rojo -70 mV -80 mV -80 mV -55 mV -11 mV

Metodos de medicin del potencial de reposo

- Tecnicas electrofisiologicas Por medio de microelectrodos intracelulares Patch Clamp

Pero, cual es el origen de dicha diferencia de potencial entre los medios intracelular y extracelular?

Para poder responder a esta pregunta:

Que caractersticas tiene la membrana plasmtica a travs de la cual se forma este potencial? Pensemos que caractersticas tiene la membrana plasmtica respecto a su permeabilidad a los iones. Como es la distribucin de iones a ambos lados de la membrana?

A ambos de la membrana plasmtica hay una distribucin asimtrica de componentes, includos iones.

 La bicapa lipdica es impermeable a iones. Hay protenas integrales que permiten el pasaje de iones.

En la movilizacion de los iones intervienen dos fuerzas

+ + + + +
+

Obedeciendo a estas furezas . Los iones pueden atravesar la membrana por protenas especficas, pero slo si la membrana lo permite.. => permeabilidad selectiva

. u oponindose a dichas fuerzas, los iones pueden pasar activamente por bombas, como por ejemplo la Na/K ATPasa

+ + + +

- +

+ + +

+ + +

Asimetra (estacionaria) en la composicin inica

Concentracin de iones dentro y fuera de la clula (en mM):

... y entonces, como se genera el potencial de membrana?

A FAVOR DE GRADIENTE
TRANSPORTE PASIVO

ESTOS FLUJOS SE COMPENSAN MANTENIENDO UN ESTADO ESTACIONARIO

[Na+] [K+] [Ca+] [Cl-] [A-]

10 140 0,00001 10 140

144 4 2 144 6

TRANSPORTE ACTIVO

CONTRAGRADIENTE

Pero los lquidos extra e intracelulares son soluciones electroliticas que cumplen desde el punto de vista macroscpico con el principio de electroneutralidad de las soluciones.

1er caso: Potencial tipo Nernst (Equilibrio!!!) PK>0; PCl=0

Para contestar a esta pregunta tenemos que evaluar que fenmenos electricos pueden ocurrir cuando difunde un electrolito a favor de su gradiente como consecuencia de una distribucin asimtrica de iones. Vamos a ver tres casos:

K+
K+ Cl-

K+

Cl-

Cl1

+ + + + + + + + + + + + + + + + + + +

K+

Cl-

Equilibrio termodinnico en la distribucin de un soluto

no cargado
+ + + +

Potencial Electroqumico: Energa libre de Gibbs (G) por mol de soluto

cargado
+ +

Ce = Ci
i-e= RT ln(Ci/Ce) = 0

Ce > Ci Vi > Ve
i-e= RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi - Ve) = 0

+ +

Potencial de equilibrio i-e= 0 RT ln(Ci/Ce) = - zF(Vi-Ve) - RT ln(Ci/Ce) = (Vi-Ve)

zF

Ecuacin de Nernst Potencial en el cual el flujo neto del ion es nulo Vi Ve = - RT/zF * ln (Ci / Ce) = RT/zF * ln (Ce / Ci)
R = 8.314 volts.coul/T.mol; F= 9.648 x 104 coul/mol; T temp absoluta; z (n cargas y polaridad)

Temperatura 25C y ion monovalente

Vi - Vext = 58 mV * log ([C]e / [C]i)

CONVENCIN Potencial de membrana (Vm) es medido como la diferencia de potencial entre el interior menos el exterior (Vint -Vext).

Ce

Ci

+ +

+ +

+ +

+ + + +

+ -

= RT lnC + zFV i-e= RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve) i-e= RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve) < 0

Ci < Ce

Ve C+e

Vi C+i

+ +

Vi < Ve

En el equilibrio ..

i-e= RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve) = 0

Ci = Ce Vi = Ve Ci < Ce Vi > Ve de modo que se anulen .

i-e= 0 RT ln(Ci/Ce) = - zF(Vi-Ve)

Podemos imaginar lo mismo con una membrana que posee canales permeables solamente a K+ ClK+

V = Vi Ve =

58 mV Ce log z Ci

Existira una separacion de cargas a nivel microscpico

D I E L E C T R I C O

Potencial de Injuria

V = Q/C

Q = carga neta acumulada en las placas. C = constante del capacitor o Capacitancia V = diferencia de potencial entre las placas

TEORIA DE BERNSTEIN
Na+

Potencial de equilibrio En una clula en reposo podramos pensar esto como el gradiente qumico impulsa un flujo hacia afuera

K+

V = Vi Ve = 60 mV

log

Ke Ki

[K+]

140 (-)

4 (+) el flujo instala un potencial elctrico; el potencial se opone al flujo

Cl-

Por que ocurre esto?

Potencial de membrana vs [K]o (en semilog) en axn gigante de calamar. La lnea recta representa la relacin predicha por la ecuacin de Nernst. Debido a que la membrana es tambien permeable a sodio los puntos experimentales se desvan de Nernst especialmente a bajo [K]o.

La membrana es permeable a varios iones (K, Na, Cl). Adems en el citosol hay un importante contenido de aniones impermeables.

2do caso: Potencial tipo Donnan (Equilibrio!!!)

Influencia de los iones no permeantes
Membrana permeable al agua y a los solutos pero no al anin orgnico.

K1/K2 = Cl2/Cl1
V = V2 V1 = 58 mV [ K ]1 log z [ K ]2
+ + + + + + + + + + + + + + + + -

Podemos hacerlo equivaler a una clula donde no funcionen las bombas y el sistema tienda al equilibrio

K+ K+

K+

Cl-

Pr

Cl-

+ + + + + + + + + + + + + + + + + +

K+ K+

+ + + + + + + + + + + + + + + + + -

K+

K+

+ + + + + + + + + + + + + + + + -

K+

K+
Cl-

presin osmtica: I > E KE/KI = ClI/ClE

K+
ClCl-

V = Vi Ve =

Pr

Cl-

Cl-

Pr I

58 mV [ K ]e log z [ K ]i

Pr -

V < 0 y Osm (lisis celular)

Pr

3er caso: Potencial de difusin (No Equilibrio) Pero el potencial tipo Donnan slo explica una pequea fraccin del potencial de membrana. Donnan predominara en una clula sin bombas que distribuyan los iones fuera del equilibrio. Por ejemplo con la Na/K ATPasa inhibida. Lleva a la lisis celular. En una clula viva la distribucin inica entre ambos lados de la membrana plasmtica NO est en Equilibrio!!!

C+
(mayor movilidad)

C+

(menor movilidad)

A-

A-

C+ A-

C+

+
A-

Podemos imaginar un fenmeno similar si tenemos dos compartimientos divididos por una membrana con permeabilidades diferentes para cada in.

9Este sistema NO est en equilibrio 9El V perdurar hasta que se homogenice el sistema (llegando al equilibrio) 9Como hacer para que este tipo de potencial se mantenga en el tiempo? Rta: necesitamos trabajo externo !!!

+ +

C+

C+ AC+ y A-

+ + A+ + W que mantiene + Estado Estacionario + +

La AHORA TRATEMOS DE APROXIMARNOS A LO QUE OCURRE EN UNA CELULA

+ + + Permeabilidad al K es la que domina + el Potencial Membrana + de + + Cl+ + + + -

K+ = 2.5 mM

K+= 140 mM
Na+ = 10 mM

Na+= 120 mM
+ +

ClExtra

Intra

Resumiendo: para el establecimiento del potencial de reposo necesitamos: 1) una distribucin inica fuera del equilibrio que servir de fuerza impulsora para el proceso de difusin (mantenida en estado estacionario por un sistema de bombeo contragradiente). 2) permeabilidades diferentes para cada uno de esos iones. El potencial es definido fundamentalmente por el in ms permeable: en reposo el K.

El estado estacionario es mantenido por la bomba Na/K

Estos conceptos se resumen en la ecuacin de Goldman, Hodgkin y Katz Vm= Vi Ve =

RT PK .[ K ]e + PNa . [ Na ]e + PCl . [Cl ]i ln F PK .[ K ]i + PNa .[ Na]i + PCl .[Cl ]e

Si asumisemos que PNa = P Cl = 0, entonces tenemos Nernst para K (Bernstein) RT PK .[ K ]e + PNa . [ Na ]e + PCl . [Cl ]i Vi Ve = ln F PK .[ K ]i + PNa .[ Na]i + PCl .[Cl ]e Por lo tanto la desviacin del comportamiento nernstiano es generada por la existencia de permeabilidades a otros iones. En la realidad tenemos situaciones intermedias en donde prevalece un in (en reposo: K+).
Vi Ve = RT PK .[ K ]e + PNa . [ Na ]e + PCl . [Cl ]i ln F PK .[ K ]i + PNa .[ Na]i + PCl .[Cl ]e

En reposo: PK= 1; PNa= 0.04; PCl= 0.045

Lo que se hace es relativizar las P absolutas respecto de la del K

Vm = 58 log =

[K+]o + (PNa/PK) [Na+]o + (PCl/PK) l [Cl-]i [K+]i + (PNa/PK) [Na+]i + (PCl/PK) [Cl-]o

En las clulas en las que el Cl- est en equilibrio no influye en el potencial de membrana, por lo tanto: Vm= Vi Ve =
RT PK .[ K ]e + PNa . [ Na ]e ln F PK .[ K ]i + PNa .[ Na ]i

Ante un Pot. Accin: PNa ~ 20 PK

Cambios en el potencial de membrana debido a diferentes soluciones extracelulares.

Normal : K=2.5; Test: K=10; osmolaridad y fuerza ionica constante

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Tenemos:
9Una batera (representada por los gradientes inicos) 9Una resistencia (representada por la permisividad que tiene la membrana al paso de los iones).

ANALOGO ELECTRICO

9Un capacitor (representado por la bicapa lipdica)

En realidad la membrana puede ser permeable a muchos iones ............

Intracelular

gK Vm

gNa
+

Extracelular

........ y dependiendo de las circunstancias una conductancia prevalecer sobre otra (ejemplo: gK en reposo)

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Y como se pueden cuantificar las corrientes que pasan por las conductancias (gK y gNa) ?

Pese a que la mayora de los iones estn lejos del equilibrio termodinmico, se puede calcular el potencial terico que necesitaramos para que cada in se encuentre en equilibrio. [ I ]e 58 mV V = Vi Ve = log z [ I ]i

Extracel(mM)

Intracel(mM) V eq (mV) 15 5 150 0.0001 +60 -80 * -94 +180

?
Segn la ley de Ohm, para calcular una corriente debemos conocer: 1. La fueza impulsora que impulsa la corriente (V) 2. La resistencia o conductancia por la que deben pasar los iones. Como es la fuerza impulsora expresada en unidades de potencial en un sistema electroqumico como la clula?

Na+ ClK+ Ca2+

145 100 4.5 1.8

*Consideremos que se distribuye pasivamente y por lo tanto se encuentra en equilibrio termodinmico. Cuanto ms lejos se encuentre el in del equilibrio, mayor ser la tendencia que tenga de entrar o salir de la clula.

Fuerza impulsora que moviliza al in i = Vm Vi

Vm: potencial de membrana; Vi: potencial de equilibrio de i

Fuerza electromotriz (driving force) En una clula en reposo

Corrientes Inicas Ii = gi (Vm - Ei)

50 mV

ENa

Los iones se mueven independientemente unos de otros

IK = gK (Vm - EK) INa = gNa (Vm - ENa)

-75 mV -90 mV

Vm ECl EK

ICl = gCl (Vm - ECl)

En Estado Estacionario I = 0

IK + INa + ICl = 0

Ii = gi (Vm - Ei)

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CONVENCION Corriente de membrana (I) es positiva cuando los iones positivos (cationes) fluyen desde el interior al exterior de la clula. Para cationes, la corriente saliente es positiva y la entrante es negativa

Planteando ahora la ecuacin

Para el Na: Vm-VNa = -80 mV (+60 mV) = - 140 mV INa = GNa (Vm-VNa) < 0 Por lo tanto tiende a entrar Para el K: Vm-VK = -80 mV (-94 mV) = + 14 mV IK = GK (Vm-VK) > 0 Por lo tanto tiende a salir

Para el Ca: Vm-VCa = -80 mV (+150 mV) = - 230 mV ICa = GCa (Vm-VCa) < 0 Por lo tanto tiende a entrar

Para aniones al revs.

Fuerza electromotriz (driving force) Ii = -gi (Vm - Ei) 50 mV ENa Vm

PROPIEDADES ELECTRICAS PASIVAS DE LA MEMBRANA PLASMATICA

-75 mV -90 mV

ECl EK

En una clula que ha sido excitada y ha aumentado su PNa

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Como recordaremos la membrana plasmtica acta como un capacitor.

Constante de Tiempo

Entonces: Que pasa cuando aplicamos un pulso cuadrado de corriente a travs de una membrana celular?

Circuito RC

V (t) = Er + I0 * R (1-e-t/RC)
I

Q
V = Q/C

r
V

Vmax = Er + I0R

Vt = V (1 e-t/)

Vt = V e-t/

V
TIEMPO

= CONSTANTE TEMPORAL

= RC e-1 = 0.37 1- e-1 = 0.64

0.64 Vmax
Er constante de tiempo

I0 R

Tpicas en neuronas y clulas musculares: 1-20 ms

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Conduccin pasiva o electrotnica

Las neuronas como cable

(SUBUMBRAL) QUE PASA SI APLICAMOS UNA CORRIENTE EN UN SECTOR DE UN AXN Y MEDIMOS LOS CAMBIOS DE POTENCIAL A UNA DADA DISTANCIA? LA CONSTANTE DE TIEMPO SOLA NO NOS EXPLICAR LO QUE OCURRE HAY UNA DEPENDENCIA CON LA DISTANCIA
(del orden de milimetros)

Por qu la conduccin electrotnica no alcanza grandes distancias? ...tratemos de imaginarnos un axn como un cable coaxil
Conductor externo ~ medio extracelular Conductor Interno ~ medio intracelular

Un cable coaxil puede transmitir una diferencia de potencial por una distancia considerable porque posee conductores metlicos y la resistencia entre ellos es muy alta. pero no es el caso de un axn.

aislante cond ext cond int Pero para un axn la resistencia del medio intracelular (axoplasma) es muy alta

rm ri

Ifuga

Ifuga

Ifuga

rm: resistencia de la membrana

(por unidad de longitud)

ri: resistencia del axoplasma

(por unidad de longitud)

Las neuronas transmiten seales elctricas a lo largo de sus proyecciones, pero la amplitud de la seal decae a medida que avanza en el espacio.

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Una inyeccin de corriente aplicada en un lugar del axn generar una diferencia de potencial que no llegar muy lejos ya que se ir disipando como corriente elctrica a travs de la membrana.

El potencial decae segn:

Vx=Vo e-x/
siendo la constante espacial (1-3 mm).

El voltaje que tenemos en diferentes porciones del axn entre el medio intra y extracelular se puede calcular por la ley de Ohm: V = I x R

Estrategias de los invertebrados y de los vertebrados para mejorar propagacin

disminuir con la resistencia especfica del axoplasma (por lo tanto aumentar con el radio del axn) aumentar con la resistencia de membrana
0.8 mm

Axon Gigante de Calamar ( radio axon y ri)

rm ri

rm: resistencia de la membrana

(por unidad de longitud)

ri: resistencia del axoplasma

(por unidad de longitud)

Nervio con Axones Mielinizados de Mamfero ( rm)

esprop.(rm/ri)1/2

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