COMPACTACIÓN DE LA CROMATINA

El genoma nuclear humano comprende 46 moléculas de ADN lineales.

El largo sumado de éste ADN es más de 1,5metros. El diámetro del núcleo
es de aproximadamente 10 micrómetros.
El ADN no está “desnudo” en el núcleo, sino que debe asociarse a proteínas
(histonas) para poder compactarse.
El ADN contiene varios niveles de compactación que reducen su tamaño.
A la asociación del ADN con proteínas se la conoce como cromatina.
Eucromatina son las zonas menos condensadas, y heterocromatina son las
zonas más condensadas. Toda la cromatina se condensa previamente a la
división celular.
La heterocromatina no posee actividad transcripcional, es decir, que los
genes localizados en éstas zonas son inactivos y por lo tanto no transcriben
a nada funcional.
La eucromatina es el material cromosómico activo en la expresión genética
durante la división celular.
El ciclo celular

Durante la división se visualizan cromosomas individuales. Los cromosomas

metafásicos son la forma más condensada de la cromatina.

Las histonas

Las histonas son proteínas básicas conservadas a lo largo de la evolución. Al

ser básicas poseen aminoácidos básicos sobre todo lisina y arginina.
En las histonas existe una parte globular y colas en las que se encuentra la
lisina.
Las histonas son propias de los eucariotas no estando presentes en los
procariotas.
Existen 5 tipos de histonas: H1, H2A, H2B, H3 y H4. La masa total de
histonas es aproximadamente igual al ADN en la célula.
Las histonas tienen un pH básico.
Las histonas H2A y H2B forman un dímero. Dos H3 y dos H4 forman un
tetrámero. Dos dímeros H2A-H2B y un tetrámero H3-H4 forman un
octámero.
H1 no forma parte del octámero, organiza el ADN a la entrada y salida del
octámero.

El nucleosoma es una estructura que comprende el octámero de histonas,

donde se enrollan aproximadamente 200 bases de ADN. El ADN da 1 y ¾
vuelta al octámero.
Los nucleosomas constituyen el primer nivel de organización del ADN.
La unión entre el octámero y el ADN se hace a través de las colas de las
histonas. Éstas poseen lisina que es positiva, la que se une a los esqueletos
pentosa fosfato del ADN que son negativos. Si se acetilan las colas se
neutralizan y sueltan al ADN dejando al nucleosoma más flojo. Los sectores
de ADN que corresponde a zonas transcripcionalmente activas tienen a las
histonas acetiladas, mientras que los sectores de ADN que no son
transcripcionalmente activos, tienen histonas desacetiladas. La acetilación y
desacetilación de histonas es cíclico, las histonas se acetilan y luego se
desacetilan dependiendo de la necesidad de expresión de ese gen.

El segundo nivel de compactación del ADN es el solenoide, a la fibra de

10nm se le une la histona H1 que provoca un plegamiento helicoidal de la
cadena. La histona H1 tiene un dominio de unión al octámero y un domino de
unión al ADN.
El plegamiento de fibra de 10nm en fibra de 30nm requiere la fosforilación
de H1, la descondensación de solenoide a fibra de 10nm requiere la
desfosforilación de las histonas.
El solenoide se une a proteínas cromosómicas o no histónicas, que luego se
unen entre sí para formar el scaffold. El solenoide queda convertido en
bucles de cromatina de aproximadamente 300nm.
La unión de el scaffold al solenoide se hace en sitios denominados sars o
mars. El scaffold comienza luego un plegamiento que conduce a una forma
compactada del ADN que se denomina cromátida. Solo en mitosis es posible
observar al ADN compactado.
CROMOSOMAS

Los cromosomas son el mayor grado de empaquetamiento que alcanza la

molécula de ADN. Un cromosoma es el material genético compactado, y se
forman cuando la célula va a pasar por un estado de división.
Los cromosomas se duplican al comienzo de la división celular. Debido a ésta
duplicación es que aparece con la forma de una X, que aparece constituída
por dos partes idénticas denominadas cromátidas que se unen a través de un
centrómero. Los elementos separados por el centrómero hacia arriba y
hacia debajo de cada cromátida reciben el nombre de brazos (corresponden
a la mitad de una cromátida).
Es en la metafase cuando las cromátidas están duplicadas (cromátidas
hermanas) y unidas a nivel del centrómero. Luego, durante la anafase sólo
presenta un juego de cromátidas.
Cinetocoro es una estructura proteica, ahí se une el huso mitótico.
Telómero es el extremo de cada cromosoma, brinda estabilidad a los
cromosomas.
Huso mitótico: conjunto de microtúbulos.
Tipos de cromosomas:

Autosómicos: son aquellos que definen todas las características del

individuo, menos el sexo. Son 44 en el humano.
Sexuales: definen el sexo del individuo. Hay dos tipos : X e Y. Corresponden
al par de cromosomas número 23, XX= mujer, XY= hombre.

Morfología:

Según la forma del cromosoma, se clasifican en:

Metacéntrico: brazos iguales, el centrómero está en el medio
Submetacéntrico: un brazo más corto que el otro
Acrocéntrico: un brazo mucho más grande que el otro
Telocéntrico: tiene un solo brazo. No existe en humanos.

Citogenética: técnicas de estudio de los cromosomas

La citogenética analiza la cantidad y morfología de los cromosomas.

Bandeo cromosómico

Tratamiento desnaturalizante o enzimático del cromosoma y posterior

tinción.
Cada cromosoma revela un patrón específico de bandas claras y oscuras.
Bandeo G: tratamiento con tripsina.
Bandas claras: zonas activas, replicación temprana. Ricas en GC
Bandas oscuras: zonas inactivas, replicación tardía. Ricas en AT
Bandeo R: patrón opuesto al bandeo G
Bandeo C: heterocromatina constitutiva
Técnicas de localización cromosómica

Fish: es una técnica de hidratación insitu en la que se usan sondas

fluorecentes. Si se quiere saber la posición de un determinado gen en el
cromosoma se puede utilizar una sonda complementaria del gen que tenga
fluorescencia y que se una al gen cuando se desnaturaliza parcialmente al
cromosoma. Luego se condensa el cromosoma y se puede observar la
fluorescencia y se puede ubicar en el lugar donde se encuentra el gen
dentro del cromosoma.
Mediante esta técnica se pueden realizar bandeos que involucren a varios
genes de un mismo cromosoma.
Una sonda es un fragmento de ácido nucleico complementario de lo que se
está buscando.