Respuestas únicas y multigeneracionales de la masa corporal a

las concentraciones de oxígeno atmosférico en Drosophila melanogaster:

evidencia de roles de plasticidad y evolución
C. J. KLOK,AJHUBB&J. F. HARRISON
School of Life Sciences, Arizona State Univesity, Tempe, AZ, EE. UU.
Introducción
Basado en correlaciones históricas entre altas presiones
parciales de oxígeno atmosférico (aPO
2
) y la aparición
de animales gigantes en el registro fósil, varios Las
publicaciones de perfil han planteado la hipótesis de que
la aPO
2 elevada
permitió la evolución de animales gigantes, particularmente
insectos, en el Paleozoico tardío (Graham et al., 1995;
Dudley, 1998, 2000a,b; Berner et al., 2003). De manera similar,
los datos ecológicos han demostrado una correlación positiva
entre los niveles de oxígeno acuático y los tamaños corporales máximos
de muchas especies de invertebrados (Chapelle & Peck,
1999, 2004; Peck & Chapelle, 1999). Por lo tanto, la disponibilidad de oxígeno
puede ser un factor abiótico extremadamente importante que influye en
los patrones evolutivos y ecológicos
en el tamaño corporal adulto de muchos animales. Sin embargo, la
interpretación de estas correlaciones entre aPO
2
y el tamaño del animal a lo
largo del tiempo geológico y el espacio ecológico es
difícil debido a factores de confusión como la temperatura
, la calidad de los alimentos y las interacciones bióticas (Butterfield,
2009).
Las correlaciones históricas y entre entornos entre
la aPO
2
y el tamaño máximo podrían deberse en parte a
las respuestas plásticas del tamaño del organismo a la aPO
2
. La plasticidad
del desarrollo da como resultado una supresión hipóxica del
tamaño corporal y la tasa de crecimiento en el gusano de la harina Tenebrio molitor
(Loudon, 1988; Greenberg & Ar, 1996), pero reduce las tasas de crecimiento sin
afectar el tamaño corporal en el
saltamontes
Schistocerca americana (Harrison et al., 2006). La hiperoxia
(40 kPa) no afectó el tamaño corporal adulto en
experimentos de cría de una sola generación con T. molitor (Greenberg &
Ar, 1996) ni S. americana (Harrison et al., 2006). En la mosca del
vinagre, Drosophila melanogaster, el tamaño corporal adulto
disminuyó con la hipoxia y aumentó con la hiperoxia
durante los experimentos de crianza de una sola generación (Loudon,
1988; Greenberg & Ar, 1996; Frazier et al., 2001; Henry &
Harrison, 2004; Peck & Maddrell, 2005). ; Harrison et al.,
2006). Sin embargo, todos los estudios previos que examinaron los efectos de aPO
2
en D. melanogaster han utilizado protocolos de crianza en masa
que no han permitido una separación inequívoca de
la plasticidad del desarrollo de la fuerte selección que ocurre
dentro de una sola generación.
Correspondencia: C. Jaco Klok, Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad Estatal
de Arizona
, PO Box 874501, Tempe, AZ 85287-4501, EE. UU.
Teléfono: +1 480 727 7449; fax: +1 480 727 9440; e-mail: cjklok@asu.edu
ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504
2496 COMPILACIÓN DE REVISTAS ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA DE BIOLOGÍA
EVOLUTIVA
Palabras clave:
tamaño corporal;
hiperoxia;
hipoxia;
selección natural de laboratorio;
plasticidad fenotípica.
Resumen
Se ha planteado la hipótesis de que una mayor disponibilidad de oxígeno es
importante para permitir
la evolución de los invertebrados más grandes durante la historia de la Tierra y en
los entornos acuáticos. Probamos las
respuestas evolutivas y de desarrollo del tamaño corporal adulto de Drosophila
melanogaster a la hipoxia y la
hiperoxia. Las moscas criadas individualmente eran más pequeñas en hipoxia, pero
la hiperoxia
no tuvo efecto. En cada uno de los tres tratamientos con oxígeno (hipoxia, normoxia
o
hiperoxia) criamos tres líneas replicadas de moscas durante siete generaciones,
seguidas de cuatro generaciones en normoxia. En hipoxia, las respuestas se
debieron
principalmente a la plasticidad del desarrollo, ya que el tamaño corporal promedio
disminuyó en una
generación y volvió a los valores de control después de una o dos generaciones de
normoxia. En la hiperoxia, las moscas desarrollaron tamaños corporales más
grandes. La masa máxima de moscas se
alcanzó durante la primera generación de retorno de la hiperoxia a la normoxia.
Nuestros
resultados sugieren que los niveles más altos de oxígeno podrían hacer que las
especies de invertebrados
evolucionen a tamaños promedio más grandes, en lugar de simplemente permitir la
evolución de
especies gigantes.
doi: 10.1111/j.1420-9101.2009.01866.x Las correlaciones
históricas y entre entornos entre
la disponibilidad de oxígeno y el tamaño corporal podrían deberse a respuestas
evolutivas del tamaño de los animales al oxígeno
atmosférico .
Una aPO
2 más alta
podría conducir directa o indirectamente a
la selección natural, y los animales más grandes tendrían una mayor forma
física en atmósferas con más O
2
. Dudley (citado en
Berner et al., 2003) mostró aumentos en la masa corporal de
adultos de D. melanogaster criados durante cinco generaciones en
condiciones hiperbáricas que elevaron la aPO
2
a 23 kPa.
Sin embargo, este estudio examinó solo una única población
de moscas y no devolvió la población al 21% de
oxígeno, por lo que es posible que los efectos observados se
deban simplemente a la plasticidad o la deriva. Henry y Harrison
(2004) encontraron poca evidencia de cambios hereditarios en
la masa larvaria para dos líneas replicadas criadas durante seis
generaciones en 10 o 40 kPa aPO
2
. Zhou et al. (2008)
demostraron que las poblaciones de moscas derivadas de
líneas isogénicas agrupadas redujeron el tamaño corporal de los adultos en
respuesta a
muchas generaciones de atmósferas cada vez más hipóxicas
(reduciendo la aPO
2
de 8 a 4 kPa), pero aparentemente la
respuesta se debió a la plasticidad del desarrollo a medida que las
diferencias en el tamaño corporal las líneas de control no persistieron cuando
las moscas regresaron a la normoxia. Hemos demostrado que la
hipoxia restringe la evolución de tamaños corporales más grandes en
D. melanogaster artificialmente seleccionados para una gran masa adulta
(Klok y Harrison, 2009).
En este estudio, probamos la evolución y el desarrollo
Respuestas de plasticidad opmental del tamaño corporal adulto de
D. melanogaster a la hipoxia o hiperoxia. Nuestra prueba de
plasticidad del desarrollo utilizó moscas criadas individualmente,
expuestas desde el huevo hasta la edad adulta a 10, 16, 21, 24, 27, 31
o 40 kPa de aPO
2
. Estudios previos que utilizaron enfoques de crianza en masa
han demostrado que el tamaño corporal disminuye
linealmente en respuesta a la hipoxia (Peck & Maddrell, 2005).
Sin embargo, se desconoce la forma de la norma de reacción para las
respuestas del tamaño corporal a la hiperoxia. El aumento previamente
mostrado en la masa corporal en respuesta a la hiperoxia
(Frazier et al., 2001; Berner et al., 2003) para las moscas del
vinagre criadas en masa sugiere un efecto positivo en el desarrollo de la
hiperoxia sobre el tamaño. Sin embargo, dado que los niveles muy altos de
oxígeno son tóxicos (Fridovich, 1998), es probable que la
respuesta del tamaño corporal a la hiperoxia sea bifásica, con
una disminución del tamaño y la supervivencia en algún rango de
niveles altos de oxígeno. Nuestra prueba para las respuestas evolutivas de
la masa corporal adulta a aPO
2
fue criar nueve poblaciones
de moscas durante siete generaciones en 10, 21 o 40 kPa aPO
2
(tres poblaciones replicadas por tratamiento) seguido de
cuatro generaciones en 21 kPa. Si las respuestas del tamaño corporal a la
aPO
2
se deben a la evolución, el tamaño debería cambiar a lo largo de
varias generaciones y seguir siendo significativamente diferente
de las poblaciones ancestrales y de control incluso después de dos
o más generaciones de reversión a la normoxia. Si los
tamaños corporales convergen dentro de una o dos generaciones de regreso
al jardín común, condiciones de 21 kPa aPO
2
, esto
indicaría que los cambios de tamaño corporal observados a 10 o
40 kPa aPO
2
probablemente se debieron a plasticidad o
efectos parentales.
Materiales y métodos Reservas de
Drosophila y mantenimiento del cultivo antes
de los experimentos Se adquirieron cultivos de Drosophila amelanogaster de tipo
salvaje
consanguíneos (cepa Oregon R) de Carolina Biological Supply (
http://www.carolina.com). con 50 ml de medio de cultivo de Drosophila
estandarizado a base de levadura en incubadoras de baja temperatura VWR o
Percival a 25 Canda12L: 12 D de fotoperíodo. Durante las primeras cinco a siete
generaciones durante la expansión de los cultivos de laboratorio (no durante los
procedimientos de selección), el medio de crecimiento se trató con tetraciclina o
rifampicina en cada generación alternativa para eliminar posibles Wolbachia.
infecciones para evitar efectos impredecibles en las respuestas durante las
condiciones experimentales (Harcombe & Hoffmann, 2004; Jaenikeet al., 2006;
Koukouet al., 2006; de Crespigny & Wedell, 2007; Jaenike, 2007). Los tratamientos
con antibióticos cesaron dos generaciones antes del comienzo de los
procedimientos de selección. Durante el período preexperimental, las moscas se
mezclaron entre varias botellas para asegurar poblaciones de más de varios miles.
Protocolo de selección natural de laboratorio y control de oxígeno atmosférico Para
comenzar la generación 0 e iniciar las nueve poblaciones separadas (líneas de
réplica), se colocaron aproximadamente 80 moscas adultas (machos + hembras) de
uno a tres días de edad en cada una de las nueve botellas separadas, y se les
permitió poner huevos durante 5 días (ver Figura 1). Los experimentos preliminares
indicaron que este procedimiento mantuvo la densidad de larvas por debajo de lo
que causaría limitaciones de densidad en la masa corporal. Durante la generación 0,
todas las botellas se mantuvieron a 21 kPa aPO 2 . Para esta generación y las
siguientes, las moscas adultas recién emergidas (< 48 h de edad) se anestesiaron
con frío colocándolas en un refrigerador de laboratorio a 4 ± 1 C durante 1 h antes de
pesarlas (Gibert et al., 2001). Usamos anestesia fría en lugar de anestesia con CO 2
o N 2 para evitar exponer a las moscas a la anoxia aguda que podría, durante un
experimento diseñado específicamente para investigar los efectos de la aPO 2
variable en el tamaño corporal, introducir efectos importantes adicionales en los
genes de respuesta a la hipoxia. Para comenzar la generación1 y todas las
generaciones subsiguientes de cada una de las nueve líneas replicadas, se eligieron
aleatoriamente 30 hembras adultas y 20 machos adultos de la generación anterior y
se pesaron individualmente (microbalanza Mettler MX 5, precisión 0,001 mg; Mettler
Toledo, http://www. .us.mt.com). En cada generación para cada línea replicada,
después de pesar los cincuenta adultos, añadimos otras 30 a 40 moscas
seleccionadas al azar (incluidos machos y hembras) de la misma edad, de la misma
generación y de la misma línea replicada para obtener una muestra . tamaño total de
la población de 80 a 90 moscas. Al comienzo de la generación 1, las nueve líneas
replican Respuestas del tamaño del cuerpo al oxígeno en Drosophila 2497 ª 2009
LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504 REVISTA COMPILACIÓN ª 2009
SOCIEDAD EUROPEA PARA LA BIOLOGÍA EVOLUTIVA se dividieron entre tres aPO 2
de prueba , con tres líneas cada una en hipoxia (10 kPa aPO 2 ), hiperoxia (40 kPa
aPO 2 ) y normoxia (control líneas, 21 kPa aPO 2 ). Las líneas se mantuvieron en
estos aPO 2 s hasta la generación 7. Para las generaciones 8 a 11, todas las líneas
replicadas se devolvieron y se mantuvieron en 21 kPa aPO 2 (Fig. 1) para probar si
los posibles cambios en el tamaño eran el resultado de plasticidad fenotípica/del
desarrollo, o los resultados de la evolución: selección genética. Durante las
generaciones 0-11, las botellas de cultivo se mantuvieron en cámaras herméticas de
plexiglás (40 cm · 50 cm · 70 cm) alojadas dentro de un gabinete más grande con
temperatura controlada (Percival, Boone IO, EE. UU., 25 C). La aPO 2 en las cámaras
se reguló dentro de 1 kPa mediante un sistema de regulación de oxígeno
paramagnético ROXY-8 de Sable Systems (http://www.sablesys.com/roxy8.html) a
10, 21 y 40 kPa de aPO 2 durante las generaciones 1 a 7, y a 21 kPa aPO 2 durante
las generaciones 8–11. Este sistema permitió el monitoreo y registro continuos de
aPO 2 dentro de cada cámara. Las moscas experimentaron 21 kPa aPO 2 durante < 3
h (< 1 % del tiempo de generación) durante el pesaje y la clasificación entre
generaciones. Experimento de oxígeno múltiple, individuo único, generación única
Para probar los efectos del oxígeno en el desarrollo de la masa de moscas adultas ,
D. melanogaster se crió individualmente en siete tratamientos de oxígeno: 10, 16, 21,
24, 27, 31 y 40 kPa. Un cultivo madre de aproximadamente 2000 moscas adultas en
un recipiente grande (30,5 cm · 25,5 cm · 15,25 cm) puso huevos que se distribuyeron
al azar a los diferentes tratamientos. Se introdujeron bloques de medio de mosca de
la uva a base de levadura en este cultivo madre y se permitió que las moscas
depositaran sus huevos en estos bloques durante un período de 2 h. Se recolectaron
huevos individuales de estos bloques, se transfirieron a medio de crecimiento
estándar en viales de vidrio (2,5 cm de diámetro · 9,5 cm de alto) y se distribuyeron
entre los siete tratamientos con aPO 2 , con 55 huevos por tratamiento con aPO 2 .
Los viales se monitorearon cada 8 h para la etapa de desarrollo (huevo, larva, pupa,
adulto). Los adultos se recogieron dentro de las 8 h posteriores a la eclosión y se
pesaron. Análisis estadísticos Las moscas macho y hembra se analizaron por
separado debido a las diferencias significativas de dimorfismo sexual en el tamaño
del cuerpo. Probamos los efectos generales del oxígeno en la evolución de la masa
adulta de moscas mediante la prueba de interacciones significativas entre aPO 2 y la
generación con un ANOVA factorial (de dos vías). En este análisis usamos las masas
medias de cada línea replicada dentro de cada generación en un aPO 2 dado como
dato. Debido a que hubo una interacción significativa entre la aPO 2 y la generación
en la masa, luego probamos las diferencias en las masas corporales de las moscas
en una aPO 2 dada durante múltiples generaciones durante exposiciones a PO 2 o
después de regresar a la normoxia con ANOVA de una vía ANOVA, nuevamente
usando la masa media de cada línea replicada. adato. También usamos ANOVA
anidado ANOVA s para probar las diferencias en la masa corporal de las moscas en
diferentes aPO 2 s en generaciones específicas durante el protocolo de generación
múltiple, con líneas replicadas anidadas dentro de aPO 2 ; este enfoque nos permitió
abordar estadísticamente la posible variación en las respuestas de las diferentes
líneas replicadas. Los efectos de las exposiciones de generación única a aPO2 se
analizaron con ANOVA ANOVA unidireccional. En el experimento de cría individual de
una sola generación, la proporción de adultos que eclosionaron de los 55 huevos
transferidos a cada uno de estos eventos se analizó a mano usando una prueba G
(Sokal & Rohlf, 1995). Todos los demás análisis se realizaron con STATISTICA 8
STATISTICA 8 (http://www.StatSoft.com , Tulsa, OK, EE. UU.). Resultados Los
cambios en los tamaños corporales en respuesta a la exposición multigeneracional a
las masas adultas experimentales de aPO 2 Fly divergieron entre las generaciones 1
a 7 durante la exposición a 10 o 40 kPa, mostrando diferencias claras y significativas
en la masa (Fig. 2; Tabla 1). En general, hubo una interacción significativa entre la
aPO 2 y la generación tanto para moscas hembras como machos (Fig. 2). Las
moscas expuestas a 10 kPa disminuyeron en masa (ANOVA ANOVA de una vía para
las generaciones 0–7 – moscas hembras: F 7,16 = 36,978, P < 0,0001; moscas
machos : F 7,16 = 8,852, P < 0,0003) ; con el mayor más grande de las generaciones
de existencias superadas 21 21 21 21 21 21 21 21 10 10 21 21 21 21 40 40 21 21 21
21 21 21 21 21 21 21 10 10 10 21 21 21 40 40 40 10 10 21 21 21 40 40 40 40 40 40
F0 F1 F2 F3 a 7 F8 a 11 (retorno normóxico) Normoxia Oxígenos de prueba Normoxia
Fig. 1 Diseño experimental para experimentos multigeneracionales. Nueve líneas
repetidas pasaron por una generación de normoxia (21 kPa), tres réplicas cada una
pasaron por siete generaciones en una prueba de aPO 2 (10, 21 o 40 kPa) y
finalmente cuatro generaciones de normoxia. En cada generación, 80–90 adultos
(<48 h de edad) elegidos al azar de la generación anterior de esa línea fundaron la
nueva generación. De esos adultos elegidos al azar, se pesaron 30 moscas hembras
y 20 machos. 2498 CJ KLOK Y AL. ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009)
2496–2504 COMPILACIÓN DE REVISTAS ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA DE BIOLOGÍA
EVOLUTIVA (rango del 8% al 10%) en la generación 1 (Fig. 2). Las moscas expuestas
a 40 kPa mostraron una respuesta opuesta, aumentando en masa con el tiempo
(ANOVA ANOVA de una vía – moscas hembras : F 7,16 = 5,664, P < 0,002; moscas
machos: F 7,16 = 18,428, P < 0,0003 , Figura 2). Las masas parecieron estabilizarse
durante las generaciones 4-7. Las masas de las moscas de control expuestas a 21
kPa no cambiaron significativamente durante las generaciones 0–7 (ANOVA ANOVA
unidireccional: moscas hembra: F 7,16 = 1,69, P = 0,182; moscas macho: F 7,16 =
1,57, P = 0.214, y ver Fig. 2). Las masas divergentes para las moscas hembra y
macho criadas en hipoxia e hiperoxia también fueron significativamente diferentes
de las moscas de control criadas continuamente en 21 kPa (Tabla 1). Respuestas del
tamaño corporal al retorno a la normoxia después de múltiples generaciones de
hiperoxia o hipoxia Regreso a la normoxia después de múltiples generaciones de
hipoxia 7 y 8–F 2,6 = 115.59, P < 0.0001), pero aún eran significativamente más
pequeños que sus ancestros de la generación 0 criados normóxicos o las líneas de
control criadas continuamente en 21 kPa (ANOVA anidado ANOVA, Tabla 2). En la
generación 8, las masas de las moscas macho eran significativamente mayores que
las de los machos de la generación 7 criados hipóxicos ( ANOVA ANOVA
unidireccional –F 2,6 = 28,87, P < 0,0009) y eran equivalentes a las masas de sus
ancestros normoxicreados de la generación 0 y a las de las moscas de control
criadas continuamente. en 21 kPa (ANOVA ANOVA anidado, Tabla 2). Durante las
generaciones 9–11, las masas de moscas macho y hembra no fueron
estadísticamente diferentes de sus ancestros de la generación 0 (ANOVA ANOVA
unidireccional: moscas hembra : F 3,8 = 0,159, P = 0,92; moscas macho: F 3,8 = 1.58,
P = 0.269, y vea la Fig. 2) o las de control de moscas continuamente criadas en 21
kPa (ANOVA anidado ANOVA, Tabla 2). Regreso a la normoxia después de múltiples
generaciones de hiperoxia Durante la primera generación de retorno a la normoxia
(generación 8), las moscas de ambos sexos mostraron un fuerte y significativo
aumento de tamaño en comparación con la generación 7 (ANOVA de una vía ANOVA
para las generaciones 0, 7 y 7). 8 – moscas hembras : F 2,6 = 29,77, P < 0,0008,
moscas machos: F 2,6 = 26,98, P < 0,001, y ver Fig. 2). Las moscas en la tercera a
cuarta generación después del regreso a la normoxia (generaciones 10–11)
mantuvieron masas más grandes que sus antepasados ​de la generación 0 (ANOVA
de una vía ANOVA para las generaciones 0, 10 y 11 – moscas hembras: F 2,6 = 6,64,
P = 0,031; moscas macho: F 2,6 = 57.41, P < 0.0002, y ver Fig. 2). Las masas de estas
moscas también eran mayores que las de las moscas de control criadas
continuamente en 21 kPa (ANOVA anidado ANOVA, Tabla 2). Efectos de desarrollo
de la hipoxia o la hiperoxia en el tamaño corporal, la tasa de desarrollo y la
supervivencia hasta la edad adulta de moscas criadas individualmente Cuando se
criaron individualmente durante una generación, las moscas hipóxicas en el
tratamiento con aPO 2 de 10 kPa mostraron disminuciones en la masa corporal del
16,7 % para las hembras y del 12,8 % para las hembras . machos en comparación con
moscas criadas en el tratamiento de control con 21 kPa aPO 2 (ANOVA ANOVA de
una vía – moscas hembras: F 1,46 = 46,63, P < 0,0001; moscas machos: F 1,47 =
34,93, P < 0,0001). Las moscas del otro tratamiento hipóxico (16 kPa) no mostraron
diferencias significativas en relación con las del tratamiento de control (moscas
hembras: F 1,52 = 0,86, P = 0,86; moscas machos: F 1,39 = 0,62, P = 0,43) . Además,
todas las moscas criadas en tratamientos hiperóxicos no mostraron cambios
significativos en la masa en relación con el tratamiento de control (21 kPa) (moscas
hembras : F 4,43 = 1,23, P = 0,35; moscas machos: F 4,99 = 0,49, P = 0.74, y ver Fig.
3a). Tiempos de desarrollo para 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00
Masa, mg Moscas macho 0 1234567 8 9 10 11 Generaciones 0 12 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Generaciones 0.9 1.0 1.1 3 1.2 Masa 1 mg . kPa 21 kPa 40 kPa 10 kPa 21 kPa 40 kPa
(a) (b) Fig. 2 Las líneas replicadas siguieron diferentes trayectorias en diferentes
condiciones de aPO 2 (ANOVA factorial (bidireccional), aPO 2 x término de
interacción de generación; (a) hembras: F 22, 72 = 8,91, P < 0,0001; (b) machos: F 22,
72 = 15,23, P < 0,0001). Los recuadros rojos indican qué generaciones
experimentaron normoxia (Generaciones 0 y 8–11). Las medias y los intervalos de
confianza de 0,95 para las tres repeticiones en cada generación y aPO 2 se
calcularon usando la masa media de moscas para cada repetición como dato.
Respuestas del tamaño corporal al oxígeno en Drosophila 2499 ª 2009 LOS
AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504 COMPILACIÓN DE REVISTA ª 2009
SOCIEDAD EUROPEA PARA LA BIOLOGÍA EVOLUTIVA Las moscas criadas
individualmente, expresadas como tiempo hasta la pupa, parecían ser el recíproco
del tratamiento con aPO 2 en el tamaño corporal . Las moscas criadas en 10 kPa
puparon significativamente más tarde que las de todos los demás tratamientos con
aPO 2 (Fig. 3b), pero ninguno de los otros tratamientos difirió significativamente. En
normoxia eclosionaron 51 adultos de los 55 huevos iniciales. En comparación con la
normoxia, ni la aPO 2 hipóxica ni la hiperóxica tuvieron efectos significativos sobre la
eclosión (o supervivencia) del adulto. En adultos hipóxicos aPO 2 s46⁄55 y 44⁄55
encerrados en 10 y 16 kPa respectivamente (G = 1,981, gl = 2, P > 0,37), y en
hiperóxicos aPO 2 s51⁄55, 49⁄55, 50⁄55 y 51⁄55 adultos cerrados en 24, 27, 31 y 40 kPa
respectivamente (G = 1,894, df = 4, P > 0,75). Discusión La plasticidad del desarrollo
es el principal mecanismo de respuesta del tamaño adulto de D. melanogaster a la
hipoxia El tamaño corporal adulto de las moscas del vinagre disminuyó debido a la
plasticidad del desarrollo en respuesta a la hipoxia, pero no hubo evidencia de que la
hipoxia impulsara cambios evolutivos en el tamaño adulto (Figs. 2 y 3; Tabla 1). En
los ensayos de cría individual de una sola generación , el tamaño corporal disminuyó
significativamente en aproximadamente un 15% en 10 kPa aPO 2 , resultados
similares a los encontrados en estudios previos con enfoques de cría en masa
(Frazier et al., 2001; Peck & Maddrell , 2005). En los ensayos multigeneracionales,
tanto las moscas hembras como las machos redujeron su tamaño en
aproximadamente un 10 % en la generación 1 y luego mantuvieron masas
relativamente estables para las generaciones posteriores en 10 kPa aPO 2 . Ambos
sexos mostraron un fuerte aumento de masa al volver a 21 kPa. Para los machos, las
masas corporales fueron estadísticamente equivalentes a las moscas de control y
las moscas ancestrales de la generación 0 dentro de una generación de regreso a la
normoxia (Fig. 2a; Tabla 2). Hubo algunas pruebas muy débiles de los efectos
parentales o evolutivos de la hipoxia en las hembras, ya que el tamaño de sus
cuerpos se mantuvo significativamente más pequeño que el de las moscas
ancestrales o de control criadas continuamente en 21 kPa durante la primera
generación de retorno a la normoxia (Fig. 2; Tabla 2). Los resultados de Zhou et al.
(2008) también respaldan la hipótesis de que la plasticidad del desarrollo es el
principal mecanismo de respuesta de las masas de moscas (en mg) en las
generaciones 0, 1, 2 y 7. Se pesaron 30 $ + 20 # por repetición, con tres réplicas.
poblaciones por generación Moscas en la generación 0 Moscas en la generación 1
Moscas en la generación 2 Moscas en la generación 7 10 kPa $ 1,177 ± 0,005 a 1,056
± 0,011 a 1,045 ± 0,008 a 0,984 ± 0,106 a 21 kPa $ 1,166 ± 0,016 a 1,114 ± 0,037 b
1,114 ± 0,009 b 1,104 ± 0,017 b 40 kPa $ 1,179 ± 0,012 a 1,189 ± 0,009 c 1,254 ±
0,007 c 1,258 ± 0,008 c ANOVA anidado ANOVA $ F 2261 = 0,32; P < 0,73 F 2259 =
56,55; P < 0,0001 F 2261 = 208,02; P < 0,0001 F 2261 = 116,43; P <0.0001 10 kPa #
0.754 ± 0.005 AB 0.692 ± 0.007 A 0.693 ± 0.008 A 0.648 ± 0.006 A 21 kPa # 0.757 ±
0.008 A 0.758 ± 0.007 B 0.769 ± 0.008 B 0.753 ± 0.007 B 40 KPA # 0.7332 ± 0,005 C
0,848 ± 0,005 c 0,837 ± 0,007 c ANOVA anidado ANOVA # F 2171 = 4,05; P < 0,02 F
2171 = 159,33 ; P < 0,0001 F 2171 = 128,06 ; P < 0,0001 F 2171 = 199,84 ; P < 0,0001
Los superíndices indican diferencias significativas en las masas (prueba post hoc de
Tukey HSD) entre los grupos de prueba de oxígeno . Generación 0: 21 kPa aPO 2 ;
generaciones 1, 2, 7: prueba aPO 2 s. Tabla 2 Masas de moscas (en mg) para las
generaciones 8, 10 y 11, después del retorno a la normoxia. Se pesaron 30 $ +20 #
por repetición, con tres poblaciones de réplicas por generación Generación 8
(primera en 21 kPa) Generación 10 (tercera en 21 kPa) Generación 11 (cuarta en 21
kPa) 10 kPa $ 1.096 ± 0.011 a 1.172 ± 0.008 a 1.153 ± 0.010 a 21 kPa $ 1.151 ±
0.008 a 1.171 ± 0.008 a 1.139 ± 0.019 a 40 kPa $ 1.392 ± 0.011 b 1.273 ± 0.007 b
1.249 ± 0.010 b ANOVA anidado ANOVA $ F 2,46.4 = ; P < 0,0001 F 2261 = 64,84; P <
0,0001 F 2261 = 20,32; P <0.0001 10 kPa # 0.742 ± 0.008 A 0.786 ± 0.008 A 0.788 ±
0.009 A 21 kPa # 0.789 ± 0.006 b 0.784 ± 0.007 A 0.778 ± 0.007 A 40 kPa # 0.878 ±
0.007 C 0.851 ± 0.006 B 0.819 ± ANOVA $: F 2.171 = 104,25; P < 0,0001 F 2171 =
30,81; P < 0,0001 F 2.171 = 8,56; P < 0,0003 Los superíndices indican diferencias
significativas en las masas (prueba posthoc de Tukey HSD) entre los grupos de
prueba de oxígeno . 2500 CJ ​KLOK Y AL. ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22
(2009) 2496–2504 REVISTA COMPILACIÓN ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA PARA LA
BIOLOGÍA EVOLUTIVA tamaño corporal a la hipoxia en Drosophila; en su estudio, las
moscas se volvieron un 40 % más livianas después de > 32 generaciones en aire
cada vez más hipóxico (8–4 kPa aPO 2 ), pero exhibieron masas corporales
normales cuando se criaron en normoxia durante una sola generación. La falta de
una respuesta evolutiva a la hipoxia observada en este estudio no debería llevar a la
conclusión de que la hipoxia no puede causar una evolución de menor tamaño en
insectos u otros animales bajo otras circunstancias (Harshman & Hoffmann, 2000).
Las especies de insectos más grandes podrían ser más sensibles a la hipoxia y
exhibir una mayor respuesta evolutiva. La evolución en la naturaleza, cuando los
insectos deben volar y hacer frente a condiciones menos óptimas, también podría
impulsar una respuesta evolutiva más fuerte. Los tamaños de población más
grandes y la mayor variación en las poblaciones iniciales también podrían producir
una mayor respuesta evolutiva, aunque estas moscas Oregon R se consideran líneas
exogámicas. Se están dilucidando los mecanismos por los cuales la hipoxia reduce
el tamaño corporal de Drosophila (Gorr et al., 2006). Las moscas criadas en hipoxia
tienen menos células epiteliales en las alas (Peck & Maddrell, 2005). Estos efectos
del tamaño celular pueden deberse a los efectos mediados por el óxido nítrico o HIF
(factor inducible por hipoxia) en la división del ciclo celular (Wingrove & O'Farrell,
1999; Douglas et al., 2001; Reiling & Hafen, 2004; Douglas et al., 2005). Los aumentos
y disminuciones en la expresión de los dominios de prolil hidroxilasa (Fatiga),
enzimas que confieren sensibilidad al oxígeno en HIF, conducen a tamaños de
células más grandes y más pequeños, respectivamente (Frei y Edgar, 2004), y los
cambios en el tamaño de las células se correlacionan con los niveles de SIMA-
Drosophila HIF1a (Centanin et al. ,2005). Las disminuciones en el tamaño celular en
hipoxia también parecen estar reguladas por Scylla, un gen inducible por hipoxia que
regula negativamente la vía TOR (objetivo de la rapamicina) involucrada en los
efectos nutricionales sobre el tamaño celular y corporal (Reiling & Hafen, 2004). El
crecimiento durante la hipoxia también puede verse inhibido por la supresión de la
tasa metabólica y la disponibilidad de ATP (Zhou et al., 2008) y ATP insuficiente para
apoyar la alimentación (Frazier, 2007). Evolución de un tamaño corporal más grande
en respuesta a la hiperoxia No hubo evidencia de una respuesta de plasticidad del
desarrollo a la hiperoxia. En los ensayos de crianza individual de una sola generación,
no hubo efecto de ninguna de las mezclas de aire hiperóxicas sobre la masa corporal
(Fig. 3a), el tiempo de desarrollo (Fig. 3b) o la supervivencia adulta. Este resultado es
consistente con estudios previos de respuestas masivas de larvas a la hiperoxia
(Henry & Harrison, 2004), así como la falta de respuesta plástica del tamaño a la
hiperoxia en gusanos de la harina, T. molitor (Loudon, 1988) y saltamontes, S.
gregaria. (Harrison et al., 2006). Parece probable que con un alto nivel de oxígeno, el
tamaño corporal y la supervivencia de los adultos disminuyan debido a la toxicidad
del oxígeno, pero para D. melanogaster esto aparentemente ocurre por encima de 40
kPa aPO 2 . Por el contrario, el experimento multigeneracional arrojó evidencia clara
de que las moscas desarrollan tamaños corporales más grandes en respuesta a la
hiperoxia (Fig. 2). Para las mujeres, el tamaño del cuerpo aumentó constantemente
durante tres generaciones de hiperoxia y luego se estabilizó (Fig. 2a). En los machos,
el tamaño del cuerpo aumentó más fuertemente de la generación 0 a la 1 (Fig. 2b).
Las moscas regresaron y se criaron durante múltiples generaciones en normoxia
después de siete generaciones en hiperoxia retuvieron su tamaño corporal más
grande en relación con las moscas de control o la generación ancestral 0 (Fig. 2;
Tablas 1 y 2). Estos resultados sugieren que los hallazgos previos de tamaños más
grandes en una sola generación de poblaciones de cría de moscas en 40 kPa
(Fraziere et al., 2001) se debieron a efectos de selección durante una sola generación
en lugar de plasticidad del desarrollo. Las respuestas evolutivas a la hiperoxia
sugieren que el estado físico de las moscas mejoró al ser más grandes cuando la PO
2 es alta. La explicación de tal interacción entre 80 90 100 110 120 Tiempo hasta la
pupa,
6.136
10 16 21 24 27 31 40
Presión parcial de oxígeno, kPa
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
Masa, mg
Moscas hembras Moscas
machos
(a)
(b)
Fig. 3 Los análisis de varianza de una vía (medias gráficas ± 0,95
intervalos de confianza) muestran que La aPO
2
afectó significativamente las masas corporales
(a) de hembras y machos de Drosophila melanogaster criados
individualmente para una sola generación en 10, 16, 21, 24, 27, 31 o
40 kPa de aPO
2
, así como el tiempo hasta la pupación (b).
Respuestas del tamaño corporal al oxígeno en Drosophila 2501
ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504
COMPILACIÓN DE REVISTA ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA PARA LA BIOLOGÍA
EVOLUTIVA El oxígeno y el tamaño no están claros, pero son posibles
múltiples mecanismos .
La posibilidad más probable es que las moscas más grandes tengan más éxito
reproductivo en la hiperoxia, ya que en
el experimento de una sola generación criadas individualmente, la
supervivencia de las moscas en los diversos tratamientos hiperóxicos no se vio
afectada. machos En las hembras, los niveles más altos de oxígeno podrían mejorar
la fecundidad en los adultos grandes. Estos efectos de la fecundidad podrían
habilitarse si una aPO 2 más alta aumentara la producción de ATP, ya sea a través de
efectos directos sobre la PO 2 tisular , o al permitir que las larvas obtengan
alimentos de mayor calidad mediante un túnel más profundo en el medio de
crecimiento (TWAlbert, NBPierce, CJKlok, JF Harrison, inédito datos). Las moscas
podrían desarrollar tamaños más grandes en respuesta a esta condición energética
mejorada. Otra posibilidad es que los tamaños corporales más grandes en las
moscas puedan tener un efecto de dilución que resulte en una PO 2 interna más baja
y , por lo tanto, una disminución del daño oxidativo, lo que conduce a un mejor
rendimiento para las moscas más grandes y posiblemente también a una mayor
viabilidad para los huevos de las hembras más grandes. Tal relación podría ocurrir si
las moscas más grandes tienen mayores gradientes internos de PO 2 ya sea dentro
de la tráquea (debido a que las tráqueas son más largas) o dentro de las células (si
las moscas más grandes tienen células más grandes). Las moscas desarrollan
tráqueas de menor diámetro cuando se crían en 40 kPa PO 2 (Henry & Harrison,
2004), lo que es consistente con la hipótesis de que la prevención del daño oxidativo
es importante durante la hiperoxia. ¿Por qué el tamaño corporal de D. melanogaster
podría evolucionar en respuesta a la hiperoxia pero exhibir plasticidad de desarrollo
en respuesta a la hipoxia? Las investigaciones teóricas sugieren que la plasticidad
evolucionará si un estrés se experimenta comúnmente y ocurre solo durante una
parte de la vida útil (Gabriel, 2005); ambas características parecen probables para la
hipoxia en las moscas del vinagre. Las larvas, que viven y excavan túneles en la
materia orgánica en descomposición, muy probablemente experimentarán hipoxia.
De hecho, se ha documentado que los niveles de oxígeno de los insectos que viven
en materia orgánica en descomposición son tan bajos como 1 kPa (Holter &
Spangenberg, 1997) y algunos de los hongos y microbios que viven con las larvas de
D. melanogaster en este material podrido pueden desarrollarse anaeróbicamente
(Wingrove & O Farrell, 1999). Como consecuencia, D. melanogaster ha desarrollado
múltiples mecanismos fisiológicos para responder a la hipoxia, incluida la regulación
del crecimiento por oxígeno, el desarrollo traqueal compensatorio y la capacidad de
mantener tasas metabólicas estables durante la hipoxia leve (> 5 kPa aPO 2 )
(Wingrove & O'Farrell, 1999 ). ; Henry & Harrison, 2004; Gorr et al., 2006; Klok et al.,
2009). Por el contrario, es poco probable que D. melanogaster haya experimentado
hiperoxia en la historia evolutiva reciente. Hembras vs. machos Las moscas macho y
hembra difieren en varias de sus respuestas a la hipoxia y la hiperoxia. Los machos
disminuyeron de tamaño más dramáticamente durante la crianza hipóxica (Fig. 2), tal
vez porque las hembras están bajo una selección más fuerte para un tamaño grande.
Las hembras criadas durante múltiples generaciones en hipoxia mostraron alguna
evidencia de efectos parentales que los machos no mostraron, ya que el tamaño de
la hembra requirió dos generaciones , después de regresar a la normoxia, para
alcanzar la equivalencia con las hembras ancestrales (generación 0) o control
(continuamente normóxicas). criadas) hembras. Por el contrario, las moscas macho
criadas en condiciones hipóxicas alcanzaron la equivalencia con los machos
ancestrales y los machos de control dentro de la primera generación en normoxia
(Fig. 2 ) . Los machos también mostraron una fuerte respuesta de tamaño a la
hiperoxia durante la generación 1, mientras que las hembras no (Fig. 2). Estas
respuestas sexualmente dimórficas a la selección son comunes para Drosophila.
Cuando la selección ocurre según el tamaño del cuerpo, los machos y las hembras
responden de manera diferente (Karan et al., 1998, 2000). En casos similares de
selección por características específicas, como la selección por fecundidad (Reeve &
Fairbairn, 1999) o la selección por actividad locomotora adulta (Belgacem & Martin,
2006), los procedimientos de selección también tuvieron efectos diferenciales en
machos y hembras. Estas diferencias generalizadas entre machos y hembras que a
menudo se manifiestan en un dimorfismo de tamaño sexual variable enfatizan la
necesidad de incluir ambos sexos en los experimentos de selección para tener una
comprensión más completa de cómo responderá una población a un régimen de
selección dado. El tamaño aumenta al regresar a la normoxia desde la hiperoxia Un
patrón inesperado, pero consistente entre ambos sexos y entre las tres líneas
replicadas criadas en hiperoxia fue que las moscas alcanzaron las mayores masas
durante la primera generación en normoxia después de siete generaciones en
hiperoxia (Fig. 3) . Los mecanismos de este patrón no están claros. Como se señaló
anteriormente, se ha demostrado que la hiperoxia está asociada con el estrés
oxidativo y, por lo tanto, este aumento de tamaño podría reflejar de alguna manera el
alivio de tales costos, junto con los efectos previos de la selección de tamaño
grande. Tal vez estén involucrados los efectos de los padres; por ejemplo , la crianza
hiperóxica podría aumentar el tamaño de la descendencia al inducir huevos más
grandes. Los huevos más grandes generalmente se asocian con un tamaño corporal
más grande en los insectos (Berrigan, 1991; Blanckenhorn, 2000; Garcia-Barros,
2000). Los estudios futuros deben probar cuidadosamente los efectos maternos o
paternos de aPO 2 en el tamaño de la descendencia. Implicaciones de los efectos
históricos del oxígeno atmosférico en el tamaño de los insectos Estos son los
primeros datos que demuestran que los insectos pueden desarrollar tamaños
corporales más grandes en hiperoxia y, por lo tanto, son evidencia emocionante que
respalda la hipótesis de que la hiperoxia paleozoica estuvo involucrada en la
evolución de insectos gigantes. Un punto importante es que la hiperoxia facilitó un
tamaño más grande en un insecto muy pequeño. El mecanismo 2502 CJ KLOK ET
AL. ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504 COMPILACIÓN DE
REVISTAS ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA PARA LA BIOLOGÍA EVOLUTIVA propuesta
por Graham et al. (1995) para la facilitación hiperóxica del gigantismo animal fue que
la hiperoxia mejoraría el intercambio difusivo a lo largo de tráqueas más largas, lo
que permitiría a los animales alcanzar tamaños más allá de los establecidos por una
limitación biofísica. El modelo de Graham et al. podría sugerir que la hiperoxia sería
más importante para establecer el tamaño máximo del taxón, sin afectar
necesariamente el tamaño medio. Nuestros datos sugieren que la hiperoxia puede
estar asociada con la evolución de masas más pesadas en insectos de todos los
tamaños y, por lo tanto, la aparición de gigantes paleozoicos se asoció con un
cambio en la distribución total de tamaños de insectos en lugar de simplemente un
aumento en el tamaño máximo. Los sistemas de suministro de oxígeno tienen
costos en materiales, espacio y energía. Los insectos, incluidas las moscas del
vinagre, reducen su inversión en el sistema traqueal cuando los niveles de oxígeno
son más altos, presentando diámetros traqueales reducidos y una cantidad reducida
de traqueolas, lo que reduce potencialmente los costos de materiales y las
demandas espaciales del sistema traqueal (consulte la revisión de Harrison et al.,
2006). Por lo tanto , la hiperoxia podría permitir la evolución de un mayor tamaño de
insectos al reducir dichos costos, con múltiples generaciones requeridas para la
selección de las variantes capaces de aprovechar las mejores condiciones ofrecidas.
Si bien el aumento de tamaño inducido por la hiperoxia fue relativamente pequeño en
este estudio, ciertamente es posible que con una mayor diversidad genética y tiempo
se puedan lograr mayores aumentos de tamaño. Los insectos más grandes tienen
proporcionalmente más tráqueas (Lease et al., 2006; Kaiser et al., 2007) y , por lo
tanto, pueden ser aún más sensibles a las compensaciones asociadas con las
concentraciones de oxígeno atmosférico. Agradecimientos Damos las gracias a
Manoush Farzin, Tiffany Allen y Vanessa Avelar por su ayuda con el mantenimiento
de moscas y la recopilación de datos. Agradecemos a Alex Kaiser, Donna Folk, Allen
Gibbs, Tim Bradley, Ray Huey, Susan Bertram, Terri Markow y Ted Garland por sus
interesantes debates sobre la interpretación de datos y los procedimientos de
selección, a los miembros del laboratorio de Harrison y a dos revisores anónimos por
sus aportes . sobre el manuscrito. Esta investigación fue parcialmente financiada por
NSF IBN 0419704 para JFH. Referencias Belgacem, YH & Martin, JR 2006. La
interrupción de las vías de insulina altera el nivel de trehalosa y elimina el dimorfismo
sexual en la actividad locomotora en Drosophila. J. Neurobiol. 66: 19–32. Berner, RA,
Beerling, DJ, Dudley, R., Robinson, JM y Wildman, RA 2003. Oxígeno atmosférico
fanerozoico. año Rev. Planeta Tierra. ciencia 31: 105–134. Berrigan, D. 1991. La
alometría del tamaño y número de huevos en insectos. Oikos 60: 313–321.
Blanckenhorn, WU 2000. Efectos de la temperatura sobre el tamaño del huevo y sus
consecuencias en la aptitud de la mosca amarilla del estiércol Scathophaga
stercoraria. Evol. Ecol. 14: 627–643. Butterfield, NJ 2009. Oxígeno, animales y
ventilación oceánica: una visión alternativa. Geobiología 7: 1–7. Centanin, L.,
Ratcliffe, PJ & Wappner, P. 2005. Reversión de la letalidad y defectos de crecimiento
en moscas mutantes del sensor de oxígeno Fatiga por pérdida del factor alfa⁄Sima
inducible por hipoxia. EMBO Rep. 6: 1070–1075. Chapelle, G. & Peck, LS 1999. El
gigantismo polar dictado por la disponibilidad de oxígeno. Naturaleza 399: 114–115.
Chapelle, G. & Peck, LS 2004. Espectros de tamaño de crustáceos anfípodos : nuevos
conocimientos sobre la relación entre el tamaño y el oxígeno. Oikos 106: 167–175.
de Crespigny, FEC & Wedell, N. 2007. ¿Preferencias de pareja en Drosophila infectada
con Wolbachia? Comportamiento Ecol. Sociobiol. 61: 1229–1235. Douglas, RM, Xu, T.
& Haddad, GG 2001. La progresión del ciclo celular y la división celular son sensibles
a la hipoxia en embriones de Drosophila melanogaster. Soy. J. Physiol. Reg. Integrar
Comp. Fisiol. 280: R1555–R1563. Douglas, RM, Farahani, R., Morcillo, P., Kanaan, A.,
Xu, T. y Haddad, GG 2005. La hipoxia induce efectos importantes sobre la cinética del
ciclo celular y la expresión de proteínas en embriones de Drosophilamelanogaster .
Am.J. Fisiol. Regul.Integr. Comp.Physiol.288:R511– 521. Dudley, R. 1998. Oxígeno
atmosférico, insectos paleozoicos gigantes y la evolución del rendimiento locomotor
aéreo. Exp. J. Biol. 201: 1043–1050. Dudley, R. 2000a. La biomecánica del vuelo de
los insectos. Forma, Función, Evolución. Prensa de la Universidad de Princeton,
Princeton. Dudley, R. 2000b. La fisiología evolutiva del vuelo animal: perspectivas
paleobiológicas y actuales. año Rev. Fisiol. 62: 135–156. Frazier, MR 2007. Insectos
alpinos: fisiología y evolución en el aire frío y delgado. Tesis doctoral. Universidad de
Washington, Seattle. Frazier, MR, Woods, HA y Harrison, JF 2001. Efectos interactivos
de la temperatura de crianza y el oxígeno en el desarrollo de Drosophila
melanogaster. Fisiol. Bioquímica Zool. 74: 641–650. Frei, C. & Edgar, BA 2004. La
ciclina D⁄Cdk4 de Drosophila requiere prolil hidroxilasa Hif-1 para impulsar el
crecimiento celular. Desarrolle la Celda 6: 241–251. Fridovich, I. 1998.
Oxygentoxicity: aradicaexplanation. Exp. J. Biol. 201: 1203–1209. Gabriel, W. 2005.
Cómo selecciona el estrés para la plasticidad fenotípica reversible. J.Evol. Biol. 18:
873–883. García-Barros, E. 2000. Tamaño del cuerpo, tamaño del huevo y sus
relaciones interespecíficas con características ecológicas y de historia de vida en
mariposas (Lepidoptera: Papilionoidea, Hesperioidea). Biol. J. Linn. Soc. 70: 251–
284. Gibert, P., Moreteau, B., Petavy, G., Karan, D. y David, JR 2001. Tolerancia al coma
frío, una importante adaptación climática entre las especies de Drosophila. Evolución
55: 1063–1068. Gorr, TA, Gassmann, M. & Wappner, P. 2006. Detección y respuesta a
la hipoxia a través de HIF en invertebrados modelo. J. Fisiología de insectos . 52:
349–364. Graham, JB, Dudley, R., Aguilar, NM & Gans, C. 1995. Implicaciones del
pulso de oxígeno paleozoico posterior para la fisiología y la evolución. Naturaleza
375: 117–120. Greenberg, S. & Ar, A. 1996. Efectos de la hipoxia, normoxia e
hiperoxia crónicas sobre el desarrollo larvario en el escarabajo Tenebrio molitor. J.
Fisiología de insectos. 42: 991–996. Harcombe, W. & Hoffmann, AA 2004. Efectos de
Wolbachia en Drosophila melanogaster: en busca de beneficios para el estado físico.
J. Invertebr. Patol. 87: 45–50. Respuestas del tamaño corporal al oxígeno en
Drosophila 2503 ª 2009 LOS AUTORES. J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504
COMPILACIÓN DE REVISTA ª 2009 SOCIEDAD EUROPEA DE BIOLOGÍA EVOLUTIVA
Harrison, J., Frazier, MR, Henry, JR, Kaiser, A., Klok, CJ & Rascon, B. 2006. Responses
of terrestrial insects to hypoxia o hiperoxia. Respirar Fisiol. Neurobiol. 154: 4–17.
Harshman, LG & Hoffmann, AA 2000. Experimentos de selección de laboratorio
utilizando Drosophila: ¿qué nos dicen realmente? Tendencias Ecol. Evol. 15: 32–36.
Henry, JR & Harrison, JF 2004. Respuestas plásticas y evolucionadas de tráqueas y
masas larvales a contenido variable de oxígeno atmosférico en Drosophila
melanogaster. Exp. J. Biol. 207: 3559– 3567. Holter, P. & Spangenberg, A. 1997.
Consumo de oxígeno en escarabajos coprófilos (Aphodius, Geotrupes, Sphaeridium)
a bajas concentraciones de oxígeno y altas concentraciones de dióxido de carbono.
Fisiol. Entomol. 22: 339–343. Jaenike, J. 2007. Fighting back against male-killers.
Tendencias Ecol. Evol. 22: 167–169. Jaenike, J., Dyer, KA, Cornish, C. & Minhas, MS
2006. Refuerzo asimétrico e infección por Wolbachia en Drosophila. PLoS Biol. 4:
1852–1862. Kaiser, A., Klok, CJ, Socha, JJ, Lee, WK, Quinlan, MC y Harrison, JF 2007.
El aumento de la inversión traqueal con el tamaño del escarabajo respalda la
hipótesis de la limitación de oxígeno en el gigantismo de los insectos. proc. nacional
Academia ciencia EE. UU. 104: 13198–13203. Karan, D., Morin, JP, Moreteau, B. &
David, JR 1998. Tamaño corporal y temperatura de desarrollo en Drosophila
melanogaster : análisis de la norma de reacción del peso corporal. J. Therm. Biol. 23:
301–309. Karan,D.,Morin,JP,Gibert,P.,Moreteau,B.,Scheiner,SM& David, JR 2000. La
genética de la plasticidad fenotípica. IX. Arquitectura genética, temperatura y
diferencias sexuales en Drosophila melanogaster. Evolución 54: 1035–1040. Klok, CJ
& Harrison, JF 2009. La hipoxia atmosférica limita la selección de insectos de gran
tamaño corporal. PLoS UNO 4: e3876. doi:10.1371/journal.pone.0003876. Klok, CJ,
Kaiser, A., Lighton, JRB y Harrison, JF 2009. Presiones parciales críticas de oxígeno y
conductancias traqueales máximas para Drosophila melanogaster criada durante
múltiples generaciones en hipoxia o hiperoxia. J. Fisiología de insectos. doi:
10.1016/j.jinsphys.2009.08.004.
Koukou,K.,Pavlikaki,H.,Kilias,G.,Werren,JH,Bourtzis,K.& Alahiotisi, SN 2006. Influencia
del tratamiento con antibióticos y curado con Wolbachia en el aislamiento sexual
entre las poblaciones de jaulas de Drosophila melanogaster. Evolución 60: 87–96.
Lease, HM, Wolf, BO & Harrison, JF 2006. Variación intraespecífica en el volumen
traqueal en la langosta americana, Schisto- cerca americana, medido por un nuevo
método de gas inerte. Exp. J. Biol. 209: 3476–3483. Loudon, C. 1988. Desarrollo de
Tenebrio molito en niveles bajos de oxígeno. J. Fisiología de insectos. 34: 97–103.
Peck, L. & Chapelle, G. 1999. ¿Gigantismo de anfípodos dictado por la disponibilidad
de oxígeno? Respuesta. Ecol. Letón. 2: 401–403. Peck, LS y Maddrell, SHP 2005.
Limitación del tamaño por hipoxia en la mosca de la fruta
Drosophilamelanogaster.J.Exp.Zool.AComp.Exp. Biol. 303A: 968–975. Reeve, JP &
Fairbairn, DJ 1999. Cambio en el dimorfismo de tamaño sexual como respuesta
correlacionada a la selección de fecundidad. Herencia 83: 697–706. Reiling, JH &
Hafen, E. 2004. Los parálogos Scylla y Charybdis inducidos por hipoxia inhiben el
crecimiento al regular a la baja la actividad de S6K aguas arriba de TSC en
Drosophila. Los genes se desarrollan. 18: 2879–2892. Sokal, RR y Rohlf, FJ1995.
Biometría. Los principios y la práctica de la estadística en la investigación biológica.
WH Freeman, Nueva York. Wingrove, JA&O'Farrell, PH1999. El óxido nítrico contribuye
a las respuestas conductuales, celulares y de desarrollo a la falta de oxígeno en
Drosophila. Celda 98: 105–114. Zhou, D., Xue, J., Lai, JCK, Schork, NJ, White, KP y
Haddad, GG 2008. Mecanismos subyacentes a la tolerancia a la hipoxia en
Drosophila melanogaster: peludo como interruptor metabólico. Plós Genet. 4:
e1000221, doi: 10.1371/journal.pgen.1000221. Recibido el 24 de junio de 2009;
aceptado el 25 de septiembre de 2009 2504 CJ KLOK ET AL. ª 2009 LOS AUTORES.
J. EVOL. BIOL. 22 (2009) 2496–2504 COMPILACIÓN DE REVISTAS ª 2009 SOCIEDAD
EUROPEA PARA LA BIOLOGÍA EVOLUTIVA