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IX EPRODUCCION DE ARGOPECTEN PURPURATUS

Argopecten purpuratus “Concha de abanico” , es un bivalvo pectinido que


habita en el Pacifico suroriental a lo largo de la costa del Perú y Chile, su distribucion
abarca desde Paita Perú (5ºS) hasta Valparaiso, Chile (33ºS). – esta especie vive , en las
aguas costera entre los 5 a 30 m de profundidad, (Cantillanez, 2000) su clasificacion
taxonomica es la uiente:

Phylum : Molusca
Clase : Bivalva

Sub-clase : Lamenlinobranchia
Orden : Filibranchia

Super familia : Pectinacea

Familia : Pectinadae
Genero : Chlamys

Especie : Argopecten purpuratus.


1HABITAT:

En el Perú existen numerosos bancos naturales de esta especie, tales como los de
Bahía de Sechura y lobos de Tierra en Piura , Bahía de los Chimús y el Dorado en
Chimbote , Bahía de Guaynuna en Casma y Bahía de Independencia y Paracas en
Pisco. Se encuentran en aguas costeras entre 3 a 30 m, con fondos variables; fondo
blando , arena endurecida, de conchuela con algas y cascajo, las Conchas de abanico
vive normalmente en bahías protegidas del oleaje a temperatura entre 14 a 20ºC. esta
especie requiere de agua bien oxigenada y con una salinidad de 34.4 a 34.9 por mil
incluyendo este parámetro en el desarrollo, alimentación y reproducción. Esta especie
tiene dos valvas en forma orbicular , siendo una de ellas mas convexa que la otra ,las
valvas presentan expansiones laterales denominadas orejas que poseen además de 23 a
25 estrías y presentan anillos de crecimiento representado por líneas concéntricas.

Esta especie es Hermafrodita, es decir posee los dos sexos masculino y femenino en
una misma especie , pero funcionalmente son insuficientes
,siendo la producción de gametos (óvulos y espermatozoides ) en forma alternada, su
ciclo reproductivo es continuo. La gónada que contiene ambos
sexos es llamada coral , la cual tiene una coloración anaranjada (parte femenina) y
blanco (parte masculina). (Foto. Nº 1 y 2 )

Foto Nº 1 Argope cte n purpuratus Foto Nº 2 Argope cte n purpuratus

Fuente: fondepez, 2005

Actualmente se vienen desarrollando actividades de cultivo de Argopecten


purpuratus en las bahías de Guaynuna, los Chimús y el Dorado, estas
actividades de crianza de moluscos demandan la colección de semillas y su
confinamiento para su posterior engorde. Sin embargo, continua extracción de
semillas desde los bancos naturales, pueden en determinado momento hacer colapsar al
recurso, sobre todo en épocas frías, donde la reproducción
de Argopecten p. se atenúa. Por tal motivo se hace necesario estudios de
reproducción y desarrollo de este molusco en condiciones de laboratorio.

El éxito en la industria de la acuicultura depende en gran medida de la disponibilidad de


juveniles de alta calidad que puedan crecer rápidamente hasta un tamaño comercial.
Existen muchos factores, tanto endógenos como exógenos, que afectan tanto el
desempeño de las larvas como el de los juveniles tempranos y tardíos. Son tres etapas
principales en las cuales puede manifestarse el efecto de esos factores:

• Desarrollo de las gónadas y gametos


• Desove y fecundación
• Desarrollo y crecimiento de la progenie
Considerando que los factores endógenos son más difíciles de manejar
experimentalmente, los esfuerzos destinados a controlar la producción de semillas se
han dirigido a los de naturaleza exógena, principalmente a aquellos que se refieren a la
dieta y temperatura.

9.2 FACTORES EXÓGENOS QUE AFECTAN EL CICLO REPRODUCTIVO

Entre los factores exógenos más significativos se pueden nombrar: la


temperatura, el alimento, fotoperiodo, salinidad, etc.

Efecto del alimento

Numerosos estudios han sido enfocados a analizar el efecto de las dietas y sus diferentes
componentes nutricionales tanto sobre la maduración gonadal como sobre el desarrollo
larval en los bivalvos. Aunque estos aspectos serán revisados en otra presentación
podemos señalar que nuestro grupo ha realizado estudios para mejorar el
acondicionamiento de reproductores de
Argopecten purpuratus en los cuales hemos demostrado que una dieta mixta
de microalgas y enriquecida en lípidos insaturados permite mejorar los resultados en la
maduración y porcentajes de desove (Martinez e tal., 2000a).

Efecto de la temperatura

La temperatura del agua es el factor ambiental que se cita más frecuentemente afectando
la reproducción de los bivalvos. El patrón de ciclo reproductivo y los cambios que lo
acompañan son afectados por la temperatura dependiendo de la historia térmica de las
especies y de su distribución regional. Sastry (1979), ha establecido que el crecimiento
gonadal y la gametogénesis en varias especies de bivalvos, se correlacionan
positivamente con cambios estacionales de la temperatura, en algunos casos con la
declinación de la temperatura en el otoño o con su incremento en primavera y verano.
Se ha discutido por mucho tiempo, la validez del concepto «día-grado» (Dº) (Grubert y
Ritar, 2005) utilizado para predecir la duración del período de acondicionamiento
reproductivo. Sin embargo, el número de días-grados, por sí solo, no es un buen
predictor del tiempo requerido para alcanzar una condición apta para desovar pues es
dependiente de la condición fisiológica inicial de s reproductores (Lannan et al., 1980),
de la disponibilidad y calidad del alimento durante el acondicionamiento y de otros
factores ambientales (Sastry, 1979). Existen estudios que muestran que aumentos en la
temperatura del agua no dan por resultado necesariamente una mejoría en el
desempeño reproductivo
de los bivalvos. En Ostrea chilensis , temperaturas bajas mostraron ser
importantes en estimular tanto la ovogénesis temprana como la
espermatogénesis (Jeffs
e t al., 2002). Sin embargo, Chavez-Villalba e t al.
(2002) examinando el efecto de esta variable sobre el acondicionamiento reproductivo
de Crassostrea gigas ; detectaron que efectivamente se acelera el crecimiento de los
ovocitos entre 16 y 22 ºC pero, a 25 ºC decrece
significativamente. En los estudios en ostión A. purpuratus , citados
anteriormente (Martínez e t al., 2000a), además de probar dietas, se ensayaron dos
temperaturas para el acondicionamiento de reproduc y se
encontraron mejores resultados, tanto en porcentaje de maduración como en respuesta a
estímulos desovantes, en aquellos individuos mantenidos a 16 ºC que en aquellos a 20
ºC. Con el fin de profundizar acerca de este efecto positivo, observado a temperatura
más baja, se realizó otro estudio en el que se evaluó la influencia de cambios en la
temperatura, aplicados durante el proceso de acondicionamiento reproductivo, sobre el
desarrollo gonadal y calidad de la progenie en este bivalvo (Martínez y Pérez, 2003).
Los individuos fueron acondicionados bajo diferentes regímenes de temperatura: 15 ºC
constante (15 ºC), 19 ºC constante (19 ºC), a 15 ºC en una primera etapa y luego 19 ºC
(15 [19 ºC) y finalmente a 19 ºC en la pri etapa y luego 15 ºC (19 [15 ºC). Los
resultados obtenidos mostraron que los reproductores de Argopecten purpuratus ,
mantenidos a la menor temperatura, durante todo el proceso de acondicionamiento,
presentaron el mayor porcentaje de desove, liberaron más gametos y de mayor tamaño,
de todos los mientos experimentales.

9.3 FACTORES ENDÓGENOS QUE AFECTAN LA GAMETOGENESIS


En última instancia, son factores endógenos los que determinan la respuesta a las
variables ambientales en las distintas etapas del ciclo reproductivo en los bivalvos. Estos
ciclos son el resultado de interacciones complejas entre factores endógenos y exógenos
y para asegurar un buen desempeño reproductivo no sólo se requiere tener conocimiento
acerca de las múltiples variables ambientales en juego sino también en cómo afectan o
se ven afectadas por factores propios de los individuos. Entre dichos factores endógenos
debemos considerar aquellos inherentes a la biología de la especie, como serían su
estrategia reproductiva, su genética misma y los relacionados con la regulación de sus
funciones. Luego de alcanzar cierto estado fisiológico, en un organismo expuesto a las
condiciones ambientales adecuadas, se inicia el crecimiento de la gónada y la
gametogénesis. Aunque se conoce bastante menos respecto a los factores endógenos que
regulan el proceso reproductivo, no podemos ignorar que los seres vivos son sistemas
estructurales, funciona les y autorregulados que poseen mecanismos de adaptación
frente a señales que reciben del medio externo o interno. Esas señales eden traducirse
en otros (primeros mensajeros) que lleguen hasta el tejido cuya función será regulada .
Este primer mensajero puede tratarse de hormonas o neurotransmisores. En las
respuestas a esos mensajes se manifiestan tres elementos básicos: el receptor, un
elemento transductor y el elemento efector o amplificador que originará la respuesta
intracelular. El receptor, componente macromolecular ubicado en la membrana
plasmática de la célula blanco, es un elemento bifuncional que actúa discriminando
entre determinadas seña les o mensajes.

Al producirse la interacción con el receptor, éste sufre un cambio


conformacional que inicia la respuesta celular posibilitando su unión al elemento
transductor. Este último es ahora capaz de transducir la información a un sistema
enzimático que genera un segundo mensajero intracelu lar, el cual puede regular la
actividad de las proteínas (enzimas u otras) y afectar así funciones celulares
específicas. Los segundos mensajeros más conocidos son los nucleótidos cíclicos
(Adenosín monofosfato cíclico [cAMP] y Guanosín monofosfato cíclico [cGMP]), el
ion calcio, las prostaglandinas, e inositol trifosfato y el diacilglicerol. En nuestro
interés de conocer el control del ciclo
reproductivo en los moluscos bivalvos, hemos tomado este esquema como base. Dado
que no existen órganos endocrinos diferenciados en moluscos marinos se ha partido de
la base que el sistema nervioso participa en la regulación central de la función
reproductiva. Se sabe que el tejido nervioso mantiene el control y la regulación a través
de compuestos biológicamente activos. Estas moléculas, de diferentes estructuras
químicas, además de cumplir su función en la trasmisión de impulsos nerviosos estarían
regulando funciones de otra naturaleza, una de las cuales sería la reproducción. Así,
hemos estudiado los distintos niveles de las aminas dopamina, noradrenalina y
serotonina en distintos momentos del ciclo reproductivo de A. purpuratus ,
especie que siempre hemos usado como modelo para estudiar el control endógeno de la
reproducción en moluscos bivalvos. También hemos estudiado los segundos mensajeros
descritos en el esquema de la Figura 1, entre ellos el AMP cíclico (cAMP), las
prostaglandinas (PGs), el inos trifosfato (IP3). De estos estudios podemos decir que los
niveles de estos compuestos cambian durante dicho ciclo confirmando nuestra hipótesis
que uno de los mecanismos de control posibles es a través de la regular la movilización
de sustratos que aportan energía para el desarrollo de los gametos. Estos resultados han
sido publicados y están resumidos en Román e t al. (2001).

9.4 DESARROLLO GONADAL

En la mayoría de los bivalvos, la madurez sexual depende del tamaño del animal más
que de su edad, y el tamaño que alcanzan en la madurez sexual varía de una especie a
otra y según la distribución geográfica. La producción de óvulos y esperma es un
proceso denominado gametogénesis, cuyo inicio depende de varios factores, como el
tamaño del bivalvo, la temperatura y la cantidad y calidad de alimento que recibe. La
gónada está compuesta por conductos ciliados ramificados desde donde se abren
numerosos sacos o folículos. La proliferación de las células germinales recubren la
pared del folículo da lugar a los gametos. Aunque el desarrollo la gónada es un
proceso continuo, se pueden distinguir varias fases de ptivas; descanso, desarrollo,
madurez, desove parcial y desove completo. Cuando las gónadas o el tejido gonadal han
alcanzado la plena madurez, son les de ver y ocupan
gran parte del cuerpo blando del animal. Los gonaductos que transportan los gametos
hasta la cavidad corporal se desarrollan, aumentan de tamaño y se pueden observar a
simple vista en la gónada.

Se han empleado varios métodos en los bivalvos para determinar el momento en que
alcanzan la madurez y están listos para desovar. El método más preciso consiste en
cortar secciones histológicas de la gónada (Foto Nº 3 ), pero es costoso, lleva mucho
tiempo y requiere el sacrificio del animal. La técnica alternativa, utilizada con más
frecuencia, es de tomar un frotis de la gónada o extraer pequeñas muestras de las
gónadas de varios individuos y observarlas bajo el microscopio. En la vieira, a veces se
utiliza el índice gonadal (peso de la gónada dividido por el peso de las partes blandas,
multiplicado por 100). Generalmente en los criaderos se sigue una rutina estricta para
preparar a los adultos para el desove y la mayoría de los técnicos de criadero aprenden
enseguida a reconocer cuándo ha alcanzado el animal la madurez y está listo para el
desove con un examen macroscópico de la gónada.

A veces se utiliza el término «virgen» para referirse a aquellos bivalvos que han
alcanzado el tamaño de madurez sexual y desovan por primera vez. Aunque estos
animales alcanzan la madurez sexual, el número de gametos producidos es limitado y a
veces no todos son viables. Durante las puestas posteriores el número de gametos
producidos aumentará considerablemente.

El período de desove en poblaciones naturales varía según la especie y situación


geográfica. Existen varios factores ambientales que pueden inducir el desove, de los
cuales cabe mencionar la temperatura, los estímulos químicos y físicos, las corrientes de
agua o una combinación de éstos y otros factores. La presencia de esperma en el agua a
menudo estimula el desove de animales de la misma especie. En ambientes tropicales,
algunas especies de bivalvos mantienen sus gametos maduros durante todo el año y
desovan cantidades limitadas durante los doce meses. En las zonas templadas, la puesta
suele estar limitada a un período concreto del año. Muchos b vos desovan en masa, y
el período de puesta es muy corto, durante el que expulsan casi todo el contenido de
la gónada. Otras especies de bivalvos durante más
tiempo, incluso durante varias semanas, y se les conoce como «desovadores parciales»,
ya que van liberando unos cuantos gametos un período
más largo, con uno o dos valores máximos durante ese tiempo. En otras especies puede
haber más de un desove bien diferenciado al año, mientras que en las especies
hermafroditas, el esperma se expulsa antes o después de los óvulos, minimizando así la
posibilidad de autofecundación.

Foto N 3 Desarrollo gonadal (ovocitario) en Argopecten purpuratus


A En crecimiento B Maduros

Fuente:

9.5 ESTADIOS DE MADUREZ SEXUAL


Los estadios de madurez sexual, La evolución reproductiva se estudia a partir de
reparaciones microscópicas de la gónada, determina estadios
principales:
a)-gonada en reposo o vacia b)-
gónada en desarrollo
c)-gónada madura
d)-gónada en periodo de puesta

a) Gónada en reposo o inactiva.- son animales vírgenes o animales que han


completado el desove.
b) Gónada en desarrollo:
Estado 1 comienza la gametogénesis, no son visibles los gametos maduros. Estado 2
aparecen los primeros gametos maduros. El tamaño de la gónada es
1/3 del que tendrá cuando este totalmente madura.
Estado 3 hay un incremento general de la masa de la gónada siendo aproximadamente la
mitad de la masa que tendrá cuando este madura.
Estado 4 La gónada tiene 2/3 o mas del que será su tamaño final , la gametogénesis
continua pero los folículos contienen principalmente gametos maduros.
c) Gónada madura.
Estado 5 totalmente madura, puede haber en cantidades reducidas , los ovocitos, dentro
de los folículos, estan apretados unos contra otros, teniendo conformación poligonal,
Las gónadas masculinas están istendidas, llenas de espermatozoides.
d) Gónada en periodo de puesta:

9.6 SELECCIÓN DE REPRODUCTORES


La selección de reproductores se orienta básicamente a la obtención de ejemplares
adultos con características deseables y acondicionamiento para liberar gametos de buena
calidad. Las características deseables es más difícil de explicar porque dependen de
varios aspectos , generalmente son características que tienen relación con característica
morfológicas como: apariencia externa general, forma, tamaño, color, peso.
Estas características tratan se satisfacer al consumidor , pero hay otras tanto o mas
importantes y buscan satisfacer al cultivador como:
-Rápido crecimiento
-alta tasa de conversión alimentaria
-Resistencia a enfermedades
-Tolerancia a cambios ambientales (ºT, salinidad, Oxigeno etc)
-Capacidad reproductiva
9.7 ACONDICIONAMIENTO DE REPRODUCTORES

Para acondicionar a los reproductores se emplean práct mente los mismos métodos que
para todos los bivalvos. En el ámbito local, los criaderos suelen contar con sus propios
stocks de producción para el engorde en el mar. Estos stocks se guardan en las mejores
condiciones posibles, con gran caudal de agua y a baja densidad, en equipos de engorde
mantenid correcto estado. Muchas veces se trata de las crías de generaciones
anteriores, procedentes
del criadero y seleccionadas por sus características deseables, como por ejemplo, el
índice de crecimiento, la forma de la concha o su coloración.

Fig. Nº 1 Acondicionamiento de Reproductores

Fuente:

Una vez se sacan los adultos del mar se les lleva al criadero y allí se les restriega y se
lava la concha meticulosamente para retirar los organismos de la epifauna
(incrustaciones) y sedimentos adheridos.

Foto Nº 4 Reproductores maduros Foto Nº 5 limpieza de reproductores

Fuente: Fondepez, 2005


Luego se colocan en tanques similares a los que se pueden ver en la Fig 1. Las almejas,
así como las especies de vieiras (p. ej. Pecten ziczac) que en la naturaleza
normalmente se encuentran semienterradas en el sustrato, se alimentan más eficazmente
si se mantienen en un sustrato adecuado. En tanques del tipo ilustrado, las vieiras
pueden enterrarse en bandejas de 10 cm de profundidad rellenas de arena gruesa o arena
de concha triturada, a una profundidad suficiente del sustrato sobre un filtro ba arena
(Ilustración ). Las bandejas están separadas del fondo del tanque de acond ionamiento
cuando contienen bivalvos que no requieren sustrato, p. ej. ostras, mejillones y algunas
especies de vieiras (Ilustraciones 2).

Foto N 6 Tanques de acondicionamiento de reproducotres de Argopecten p.

Fuente : reproduccion de moluscos,FAO 1989

Tanto la salinidad como la temperatura deberían ser la apropiadas para las especies que
se estén acondicionando. Los bivalvos que se cultivan habitualmente siguen un
desarrollo reproductor y los gametos maduran a salinidades superiores a 25 PSU
(unidades prácticas de salinidad, equivalentes a partes por mil) y a temperaturas que
oscilan entre los 16 y 24 °C. Sin embargo, cada especie tiene sus valores óptimos para
estos parámetros. La almeja japonesa y el ostión japonés, por ejemplo, responden mejor
a temperaturas de agua de entre 22 y 24 °C. El ostión japoné iciona en
un rango más amplio de salinidades (15 a 34 PSU), mientras que la almeja japonesa
prefiere salinidades superiores, de entre 25 34 PSU con un valor
óptimo de alrededor de 30 PSU. La ostra virgínica, Crassostrea virginica, se
acondiciona a salinidades mucho más bajas. Como sería esperar en mar abierto, las
especies de aguas más profundas requieren condiciones más frías y una salinidad
cercana a la oceánica.

La velocidad del caudal de agua a través de los tanques de acondicionamiento debería


superar los 25 ml por minuto por adulto. Además, en un tanque con capacidad para 120
ó 150 l no debería mantenerse más de 5 kg de peso vivo de biomasa de stock . Sería
aconsejable no reciclar el agua ni reutilizarla en tanques tan pequeños cuando la
densidad de carga es muy alta. Cuando se emplea como stock a los bivalvos de fuera de
la zona más cercana, es conveniente desviar el agua que sale de los tanques a tanque
de tratamiento para evitar transferir patógenos y parásitos a la zona circundante. Es
conveniente tratar el efluente con >100 mg por l de cloro libre, un desinfectante o un
esterilizante de igual eficacia (p. ej. ozono) durante un período mínimo de 24 horas
(preferiblemente 48 horas) antes de devolverlo al mar.

Los criaderos suelen contar con una sala independiente para el acondicionamiento de
reproductores o en su defecto los tanques de acondicionamiento se ubican en una zona
tranquila de la instalación donde el stock no sea sometido a frecuentes perturbaciones.
La mayoría de las especies cierran las valvas de sus conchas como respuesta a las
sombras y a la vibración. Cuanto menos se les moleste más tiempo pasarán
alimentándose.

Los criaderos pequeños y medianos suelen tener de entre 5 a 20 tanques de


acondicionamiento para poder acomodar a las varias especies que se crían y para
permitir la introducción regular del nuevo stock, mantener la rotación y garantizar un
aporte continuo de larvas. Los criaderos grandes pueden tener muchos tanques pequeños
o pocos pero de gran tamaño. Cuando se necesita una producción constante de semilla
de una especie en cular a lo largo de un período prolongado del año, se trae nuevo
stock para comenzar el proceso de acondicionamiento cada semana o cada quince días.
De esta manera, los adultos están disponibles para desovar cada semana.
9.8 ALIMENTACIÓN DE LOS REPRODUCTORES

Durante el acondicionamiento suelen emplearse, las especies de algas marinas


cultivadas como principal alimento. Otras fuentes alternativas son el fitoplancton
natural que prolifera de forma extensiva en tanques o estanques en el exterior, o en
forma de pastas que se encuentran disponibles en el mercado.

Las especies de algas útiles que pueden cultivarse intensivamente a gran


escala son Tetraselmis
(varias especies, incluyendo T. chuii, T. te trahele y T.
suecica),
Is ochrysis galbana (y el clon T-Iso), Pavlova lutherii, Chaetoceros
m uelleri
(antes denominada C. gracilis Thalassiosira pseudonana y T.
),
weisfloggii y
S keletonem a (esta lista no es de ninguna manera
costatum
exhaustiva). Es preferible emplear una mezcla, proporcional, de estas especies que una
dieta basada en una única especie. Hay que tener precaución de no
alimentar con especies relativamente indigestas (p. ej. Chlorella sp.) o, con
especies que se sabe carecen de los ácidos grasos más saturados (p. ej.
Dunaliella te rtiolecta).

Un ejemplo de las consecuencias de emplear una dieta deficiente es la baja producción


de larvas de adultos de Ostrea edulis cuando se mantienen en agua filtrada y sólo se les
alimenta con Dunaliella te rtiolecta . Se sabe que Dunaliella carece de los ácidos grasos
muy insaturados C20 y C22, que se consideran esenciales desde el punto de vista
nutritivo. En este se mantuvieron
grupos de 60 adultos en tanques que recibían un flujo continuo de agua de mar sin filtrar
o bien de agua de mar filtrada a un tamaño de partícula de 2 µm (el sistema de tanques
experimental aparece en la fotografía inferior derecha de la Ilustración 5C). A tres de
estos grupos se les dió una ración diaria del 3% basada en el peso seco inicial de la
carne de las ostras, en forma de Dunaliella
sola o en combinación con Tetraselmis suecica o con T-Iso. Se mantuvieron
grupos de control en el caso del agua filtrada circulante y del agua de mar sin filtrar
sin adición de algas cultivadas.
CÁLCULO DE RACIONES ALIMENTICIAS PARA EL ACONDICIONAMIENTO

La ración alimenticia necesaria para los reproductores se basa en el peso seco de la


carne de los adultos, que normalmente oscila entre el 2% y el 4% del peso seco medio
de carne de los adultos al comienzo del período de acondicionamiento en peso seco de
algas suministradas día. Las raciones que sobrepasan el 6% no suponen un éxito en el
acondicionamiento, sino que hacen que los bivalvos crezcan con vigor como respuesta a
una ali entación más rica y a temperaturas elevadas de acondicionamiento, a expensas
del desarrollo reproductor.

Se trata de un proceso simple en el que hay que determ el peso seco de la carne de los
bivalvos de peso vivo conocido traídos al criadero para su acondicionamiento. Para
calcular la ración es necesario obtener datos abriendo una muestra al azar de 10 ó 12
individuos, retirando los tejidos blandos del cuerpo y pesando la carne después de
secarlos a un peso constante en un horno (de 60 a 80 ºC de 48 a 72 horas). La ecuación
que a continuación se detalla sirve para determinar el peso seco por adulto las algas
necesario para una ración diaria al 3%.

g de ración por día por adulto = 3 x peso seco medio de la carne (g)/100

Así, una ración al 3% para un adulto de un peso seco de la carne de 0,75 g asciende a
0,0225 g de peso seco de algas por día. La lta de los datos
sobre peso seco para las diferentes especies de algas Cuadro 1 -
Sección 3.1) muestra que 1 millón de células de seco Tetraselmis tienen un peso
(orgánico) de aproximadamente 0,2 mg.

Suponiendo que el 50% de la ración diaria al 3% (= 1,5%) se vaya a dar a los


reproductores en forma de Tetraselmis y que la biomasa total del peso seco de la carne
del stock sea 50 g (convertido a mg en la ecu ón de abajo), entonces:

Ración (1,5%) por día (en millones de células) = [(1,5x (50x1 000))/100]/0,2
= 3 750 millones de células

Si, por ejemplo, la densidad de cosecha de Tetraselm is un día en particular es


de 1,5 millones de células por ml, entonces el volumen requerido para dar al stock una
ración de 1,5% será 3 750/1,5 = 2 500 ml, ó l. El cálculo de la ración restante es
similar para las otras especies que forman parte de la dieta. Si en lugar de, o además de,
Tetraselm is , se utiliza Chaetoceros m uelleri a una densidad de cosecha de 7 millones
de células por ml, entonces el volumen necesario para una ración de 1,5% será 3,57 l.
Chaetoceros m uelle ri tiene un peso seco aproximado de 0,03 mg por millón de
células.

9.9 INDUCCION AL DESOVE

Ejemplares que alcancen desarrollo gonadal propicio (FotoNº7B),son colocados en


tanques de bajo volumen (tanques de 100 litros)(Foto Nº 7C). Se produce una elevación
de la temperatura con calentadores individuales hasta alcanzar los 26 o 27ºC. Esto es
suficiente para estimular el desove entre 3 a 7 horas mas tarde. La fecundidad puede
variar entre 500 a 4 000 000de óvulos por animal. Espermios y óvulos son obtenidos
por separado. Posteriormente son unidos en otro tanque similar (máximo en un tiempo
de una hora).

Foto Nº 7 A) Reproductor maduro C) inducción al desove por Schok termico

Fuente: Cultivo de moluscos Silva 1987


Se conoce que la concha de abanico es una especie hermafrodita, que libera gametos al
medio acuático (mar), en donde se lleva a cabo la fecundación, proceso embriológico,
desarrollo de la larva, asentamiento larval y la metamorfosis, se concoce también las
condiciones ambientales y la alimentación, tanto en la etapa larvaria como en los
adultos, esto hace posible llevar a cabo la reproducción de Argopecten purpuratus;
desove, fecundación y cultivo larvario. El desove requiere saber identificar bien los
animales maduros y en condiciones de desovar, ya sea provenientes del a iente natural
o previamente acondicionados en Hatchery; de tal manera encuentren en
las mejores condiciones de evacuar gametos viables y en cantidades adecuadas a las
necesidades. La fecundación, se hace necesario conocer las condiciones ambientales que
requieren los gametos asi mo las características de los gametos y sus concentraciones
y la proporciónes para una buena fecundación.

En la mayoría de las especies de bivalvos de interés comercial, los gametos se expulsan


al medio exterior, donde tiene lugar la fecundación. El esperma es expulsado a través de
la abertura o sifón exhalante en un chorro fino y constante (Foto Nº 8A ) La expulsión
de los óvulos es más intermitente y se emiten en nubes desde la abertura exhalante o
sifón ( Foto Nº 8B ).

Foto Nº 8 Espermiacion (A) y desove (B) de Argopecten purpuratus

Fuente: Alvarado- Alvarez , 1996


En especies como las vieiras (Argopecten ) o las ostras, las hembras baten las valvas
para expulsar los óvulos, despegando así los que se han quedado adheridos a las
branquias. En muchas especies, las gónadas se encuentran vacías después del desove y
es imposible distinguir a mple vista el sexo de cada individuo. Se conoce esta fase como
la de descanso. En los desovadores parciales, puede que la gónada nunca llegue a
vaciarse del todo.

En esta presentación profundizaremos en algunos puntos de la regulación del


desove de
A. purpuratus, estudios del control de esta etapa del ciclo
reproductivo nos han llevado a proponer un método de fecundación que podría incidir
positivamente en el cultivo de este bivalvo y otros de características reproductivas
similares. Respecto al desove, hemos demostrado que las monoaminas: serotonina,
dopamina y noradrenalina cambian su contenido en la gónada durante este proceso
como también sucede con los segundos mensajeros medidos. Existen numerosos
estudios indicando que la serotonina es en general un inductor efectivo del desove. No
obstante, esta inducción en pectínidos gonocóricos, requiere mayores dosis para liberar
gametos femeninos que para la expulsión de los masculinos (Matsutani, 1990) y en
los
hermafroditas funcionales A. irradians (Gib bons y Castagna, 1984), P. ziczac
(Vélez
e t al., 1990), y A. purpuratus (Martínez e t al., 1996) sólo induce
liberación de espermatozoides y no de ovocitos. Con respecto a otras amina no se han
logrado resultados exitosos excepto en casos aislados usando dosis
muy altas de ellas. Nuestros ensayos en A. purpuratus (Martínez e t al., 1996)
mostraron que noradrenalina y dopamina al igual que la serotonina, no inducen
liberación de ovocitos pero, si se las inyecta mezcladas con prostaglandina E2, logran en
un porcentaje significativo esta liberación.

Al permitir un control más estrecho de la fecundación, otra posibilidad es que cada


adulto se transfiera a un pequeño recipiente de agua de mar filtrada a la temperatura
necesaria en cuanto empiece a desovar (Foto Nº 9 ). Se marca el recipiente indicando la
hora y un número de referencia para facilitar el seguimiento de este adulto en particular
a lo largo de sus actividades de
desove. A medida que los adultos desovan y nublan el agua con los gametos, se les
traslada a un recipiente nuevo y limpio, previo aclarado con agua filtrada. Se marca el
recipiente nuevo indicando la hora de transferencia y el mismo número de referencia del
adulto. Se observa con atención cada vaso que contiene un adulto que esté expulsando
esperma para detectar enseguida el comienzo de la liberación de óvulos, que suele
ocurrir de forma repentina. Cuando un adulto cambia a la producción de huevos se le
retira inmediatamente y se le transfiere a otro recipiente después del aclarado, marcando
con el mismo número de referencia y la hora de la transferencia. Cuando se ha
expulsado un número suficiente de huevos, se retiran los adultos de los vasos antes de
que vuelvan a producir esperma. De esta manera, los huevos y el esperma de cada
adulto se acumulan por separado, y se identifican por su número específico de referencia
y tiempo de producción.

Foto Nº 9 Proceso de espermiacion (F) y desove por schok termico (E)

Fuente: Disalvo y Alarcon, 1984


D – Se observan los moluscos con atención para identificar las que empiezan a
desovar en la bandeja de agua templada. Los reproductores que desovan se aclaran con
agua de mar filtrada y se les transfiere individualmente a vasos de precipitados
marcados que contienen entre 0,5 y 1 l de agua de mar dentro de otras bandejas que
actúan como baños de agua templada la temperatura de desove.

E – Después de expulsar el esperma, las vieiras cambian bruscamente y


comienzan a liberar óvulos de color naranja. Inmediatamente después de este cambio es
necesario retirar las vieiras, aclararlas y devolverlas a vasos limpios con agua de mar
filtrada para continuar la liberación los óvulos. Si la producción de los óvulos es rápida
y prolífica, a menudo se añade esperma de otras vieiras en este momento.
F – Los óvulos de buena calidad, determinada por un examen microscópico, se
ponen juntos en cubos de 10 l. Cabe destacar la utilización de una rasera circular de
plástico para agitar suavemente el contenido del cubo y mantener los óvulos
fecundados en suspensión. El cubo puede contener entre 5 y 10 millones de huevos – «a
ojo de buen cubero».

9.10 PROCEDIMIENTOS PARA LA FECUNDACIÓN


Antes de la fecundación, si no se ha hecho anteriormente, se mizan suavemente las
suspensiones de óvulos utilizando un cedazo de tamaño apropiado (luz de malla de 90
µm o mayor) sostenido de tal manera que el cedazo se encuentre debajo del nivel del
agua en un cubo o recipiente de mayor volumen, para eliminar restos fecales
contaminantes de los adultos antes de añadir el esperma, reduciendo así el riesgo de
una proliferación posterior de bacterias y de otros microorganismos durante la fase
siguiente del proceso del cultivo.
El método utilizado para fertilizar los huevos es esencialmente el mismo para las
especies monoicas que para las dioicas, con la excepción de los bivalvos hermafroditas,
con los que se debe tomar especial precaución para asegurar la fecundación cruzada de
los óvulos con esperma de adultos distintos del lote en cuestión. Por este motivo, los
lotes de óvulos de los distintos adultos se
guardan por separado y se fecundan por separado con esperma recién liberado de 3 ó 4
machos a un cociente de 2 ml de esperma por l de suspensión de óvulos. Después de
añadir el esperma, se dejan posar durante 60 a 90 minutos antes de agregarse –si es
necesario– a los huevos fecundados de otros adultos.

9.11 DESARROLLO EMBRIONARIO


Dentro del mismo período de tiempo, a la temperatura adecuada para la especie, los
huevos fecundados empezarán a dividirse, al principio si en dos células iguales y luego
de manera desigual en 4 células cuando se observa una célula grande, recubierta de 3
células mucho más pequeñas. Sin embargo, el primer signo de una fecundación exitosa,
antes de que comience la división celular, es la extrusión del óvulo del primer cuerpo
polar, que tiene una estructura pequeña en forma de bóveda (FigNº 2). Se puede evaluar
el porcentaje de óvulos con desarrollo normal con la ayuda de un microscopio de baja
potencia (aumento de x20-40). Las tasas de fecundación invariablemente superan el
90%, suponiendo que los óvulos estén completamente duros.
Fig Nº2 Desarrrollo embrionario en Argopecten purpuratus

Fuente:

Fig Nº 2: Primeras etapas en el desarrollo de los óvulos; A – espermatozoides


nadando alrededor de un óvulo redondeado; B – extrusión del primer cuerpo
polar después de la fecundación; C – fase de dos células que también muestra el
segundo cuerpo polar; D – fase de cuatro células; E – fase de ocho células. Los óvulos
de la mayoría de los bivalvos ovíparos alcanzan tamaños de entre 60 y 80 µm, según la
especie. El tiempo transcurrido desde la fecundación hasta las distintas fases de
desarrollo depende de la especie y de la temperatura.
9.12 DESARROLLO LARVARIO
Tanques para embriones y larvas
Los huevos fecundados siguen desarrollándose en tanques como los que aparecen en las
Ilustraciones 50 y 52 hasta que llegan a la fase de larva veliger D de concha completa,
llamada así por la característica forma en D de las valvas de la concha (Ilustración 51).
Las larvas D de los distintos bivalvos cultivados comercialmente se parecen mucho
entre sí .Existe un amplio abanico de tanques circulares o semicuadrados (cuadrados de
esquinas redondeadas) que se pueden utilizar para el desarrollo embrionario y larvario
(Ilustración 52). Es aconsejable construirlos de polietileno o de fibra de vidrio con
material nuevo y no reciclado (también llamado PRV, plástico reforzado con vidrio,
o fibra de vidrio). Los tanques que se utilizan por primera vez
se llenan de agua de mar y se dejan de 2 a 4 meses, ca ando el agua semanalmente. Esto
permite la eliminación de sustancias tóxicas del material plástico nuevo que se lixivian a
la superficie y que pueden ser perjudiciales para las larvas. Se puede reducir este
tiempo de remojo con agua de mar empleando otro procedimiento más rápido, que
consiste en limpiar los tanques de fibra de vidrio con vapor. Los tanques de fondo plano
o los de fondo cónico con una pendiente pequeña (p. ej. con el fondo casi plano) son los
más utilizados para el desarrollo embrionario (Ilustración 52). Los tanques de fondo
cónico de pendiente muy pronunciada son menos apropiados porque los primeros
embriones son inmóviles y tienen tendencia a quedarse agregados en el fondo del cono.
Foto Nº 11 Tanques de incubación de larvas de Argopecten purpuratus

Fuente:
Tratamiento del agua:
Los tanques de cultivo se llenan de agua de mar filtrada a un tamaño de partículas de 1 a
2 µm (Ilustración 53A) y se calientan a la temperatura necesaria (normalmente entre 18
y 24 ºC; excepto para las especies de aguas frías que requieren una temperatura más
baja). Algunos criaderos desinfectan el agua después de la filtración fina pasándola por
una unidad de luz ultravioleta (UV) (Ilustración 53B), pero el valor de este método es
cuestionable a menos que se utilice correctamente y a discreción.
El mantenimiento de las unidades de UV tiene que realizarse siguiendo las
recomendaciones del fabricante, debiéndose guardar un registro de las horas de uso de
las lámparas. Es necesario sustituir las lámparas cuando éstas alcancen las horas de uso
recomendadas, momento en el que conviene limpiar la funda de sílice de cuarzo que
separa la lámpara de la circulación del agua, utilizando un trapo suave mojado en
alcohol. Además, estas unidades están diseñadas para desinfectar agua dulce y no
son tan eficaces a la hora de eliminar o inmovilizar las bacterias marinas u otros
microorganismos.
A veces conviene filtrar el agua y llenar los tanques de cultivo 24 horas antes de ser
utilizados. Esto ocurre con más frecuencia en los criaderos ubicados cerca de estuarios
contaminados por residuos industriales o domésticos o por la lixiviación a través de
estratos geológicos metalíferos (y restos de minería) en la cuenca de captación, que
puede contener cantidades elevadas de metales pesados. El paso siguiente consiste en
tratar el agua con 1 mg por l de EDTA (sal sódica –como la que se usa en la
preparación del medio de cultivo de algas) y 20 mg por l de metasilicato sódico y luego
airearla vigorosamente durante 24 horas. El tratamiento previo ayuda a complejar los
metales pesados y volverlos inocuos durante las primeras fases del desarrollo larvario de
los bivalvos. No es necesario filtrar el agua después del tratamiento previo, aunque sí
apagar la aireación durante el desarrollo embrionario.
Cultivo de embriones
Los embriones se almacenan en los tanques de cultivo unas 2 horas después de la
fecundación a la densidad adecuada. Las larvas D que han completado su desarrollo se
recuperan unas 24 a 48 horas más tarde, en función la especie y la temperatura
del agua . Se utiliza poca o ninguna aireación durante el desarrollo embrionario. muchas
especies de vieira una densidad alta inicial de similar tipo produce un desarrollo
anormal y por este motivo los números generalmente se restringen de 10 000 a 15 000
huevos fecundados por l de volumen de tanque en especies de aguas más templadas. En
las especies de vieiras de aguas frías las densidades de huevos se basan con mayor
frecuencia en la superficie de los tanques más que en el volumen del tanque, donde la
densidad máxima no debe superar los 1 000 por cm2.el primer estadio larval en aparecer
son las larvas trocoforas ( 12 horas) y tienen las siguientes características.

Talla de 70 um.
• Color anaranjado.
• Las primeras formas larvarias móviles, no consumen alimento
• Una corona de cilios móviles conocida como prototroca está
centrada en el polo animal y realiza eventualmente la ción de locomoción de la
larva.

Foto Nº A), B) larvas trocoforas C) y D) larvas D

Fuente: Cultivo de moluscos FAO, 1997


Foto Nº 12 Larvas D Foto Nº 13 Larvas umbonadas

Fuente:
A las 24 horas después de la fecundación aparen las larvas D (Foto Nº ), miden un
promedio de 95 micrones de longitud y 79 micrones de altura valvar es un nadador
activo comienza a alimentarse, aparece la primera valva larval , la característica mas
importante es la aparición es el velo que lo mantiene durante todo el estado de veliger
Alos 5 a 6 dias aparece la larva umbonada mide aproximadamente 161 micras de
longitud y 144 micras de alyura valvar, se cracteriza por la elevacion dorsal en la valva.
(Foto Nº 13)

Manejo de cultivos larvarios


Los cultivos larvarios requieren un mantenimiento diario. Funcionan
normalmente como sistemas estáticos de agua, es decir, sin un intercambio continuo
de agua, aunque algunos criaderos utilizan sistemas de cultivo de circulación
continua . Las concentraciones de células alimenticias deben mantenerse a un nivel
suficiente para propiciar una actividad alimentaria eficiente. Para evitar la acumulación
de metabolitos potencialmen ivos, los tanques requieren cambios
completos de agua a intervalos regulares durante el desarrollo larvario desde la fase D
hasta el inicio de la metamorfosis. La frecuencia con que se hagan los cambios
depende del número y talla media las larvas cultivadas. El agua se cambia a
intervalos de 48 horas ó 3 veces cada semana:

- a densidad mayor de larvas en fases iniciales (15 000 20 000 por l a <120
µm),
- a densidad menor de larvas en fases finales (<5 000 por litro desde 150 a 200
µm) o,
- a unas 2 000 por litro desde 250 a 300 µm.
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ESTUDIOS DEL DESOVE
En esta presentación profundizaremos en algunos puntos de la regulación del desove de
A. purpuratus porque nuestros estudios del control de esta etapa del ciclo reproductivo
nos han llevado a proponer un método de fecundación que podría incidir positivamente
en el cultivo de este bivalvo y otros de características reproductivas similares. Respecto
al desove, hemos demostrado que las monoaminas: serotonina, dopamina y
noradrenalina cambian su contenido en la gónada durante este proceso como también
sucede con los segundos mensajeros medidos. Existen numerosos estudios indicando
que la serotonina es en general un inductor efectivo del desove. No obstante, esta
inducción en pectínidos gonocóricos, requiere mayores dosis para liberar gametos
femeninos que para la expulsión de los masculinos (Matsutani, 1990)
y en los hermafroditas funcionales A. irradians (Gib bons y Castagna, 1984), P.
ziczac
(Vélez e t al., 1990), y A. purpuratus (Martínez e t al., 1996) sólo induce
liberación de espermatozoides y no de ovocitos. Con respecto a otras aminas, no se han
logrado resultados exitosos excepto en casos aislados usando dosis
muy altas de ellas. Nuestros ensayos en A. purpuratus (Martínez e t al., 1996)
mostraron que noradrenalina y dopamina al igual que la serotonina, no inducen
liberación de ovocitos pero, si se las inyecta mezcladas con prostaglandina E2, logran en
un porcentaje significativo esta liberación.
Se sabe que la gametogénesis en el ovario de moluscos bivalvos se detiene con la
formación de ovocitos en profase I de la meiosis y se reinicia posterior mente, una vez
que se rompe la vesícula germinativa. Esta ruptura de la vesícula (germinal vesicle)

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