DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

UNT
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
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MICOLOGÍA

UNIDAD I - SEMANA III

SESIÓN PRÁCTICA:

FERMENTACIÓN ALCOHOLICA
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OBJETIVO:

➢ Determinar la producción de alcohol a partir de glucosa por

Saccharomyces cerevisiae mediante un proceso de fermentación.
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MATERIALES:
➢ 01 cultivo de Saccharomyces cerevisiae
➢ 01 matraz con 100 mL de Caldo Glucosa Fosfato (10%
glucosa).
➢ 01 frasquito de boca ancha con 02 pastillas de KOH cada
uno.
➢ 01 frasquito de boca ancha con Yodo resublimado.
➢ 01 pliego de papel de filtro.
➢ 02 tubos de ensayo de 13 x 100 mm.
➢ 01 Equipo de destilación.
➢ 01 Mechero.
➢ Asa bacteriológica.
➢ Encendedor.
➢ Plumón marcador.
CALDO GLUCOSA FOSFATO (10% Glucosa)
Componentes:
• K2HPO4 5.0 g
• Glucosa 100.0 g
• Extracto de levadura 7.0 g Colonias de Saccharomyces cerevisiae en agar
• Agua destilada 1000 mL Sabouraud.
pH 6.0 ± 0.2 a 25°c
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PROCEDIMIENTO:

➢ Sembrar S. cerevisiae en Caldo Glucosa Fosfato.

➢ Incubar a temperatura ambiente durante 92 horas.
➢ Filtrar los caldos, juntar en un matraz y destilar.
➢ Colectar el destilado en un matraz de 100 mL.

Matraz
conteniendo el
caldo glucosa
fosfato
fermentado.

Matraz colector del

destilado
Matraz conteniendo Caldo Glucosa
Sistema para destilación de alcohol.
Fosfato (10% Glucosa) inoculado con
Saccharomyces cerevisiae e incubado por
92 horas a Temperatura ambiente.
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➢ Colocar 5 mL del destilado en un tubo de ensayo de 13 x 100 mm y 5 mL de agua destilada en otro

tubo de ensayo de 13x100 mL (control).
➢ Agregar una pastilla de KOH a cada tubo de ensayo y agitar hasta disolver.
➢ Agregar pequeños pedazos de Yodo resublimado a cada tubo de ensayo y agitar hasta disolver.
➢ Dejar en reposo durante 10 a 15 minutos y hacer la lectura respectiva.
➢ La formación o presencia de una turbidez primero y luego del reposo de un precipitado amarillo
indica reacción positiva (Reacción de Lieben) por la formación de yodoformo.

REACCIÓN QUÍMICA

CH3 H

CH2OH + 6KOH + 4I2 COOK + CHI3 + 5IK + 5H2O

Yodoformo
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RESULTADOS:

A B

Tubos positivo y negativo a la presencia de alcohol. A: Tubo Control

negativo. B: Tubo de muestra positiva a la presencia de alcohol
(Reacción de Lieben).
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FUNDAMENTO:

El Yodoformo (CHI3) o Triyodo metano se obtiene por la acción del yodo sobre una solución alcohólica de
potasio. Es una sustancia sólida amarilla muy soluble en alcohol y éter, de olor penetrante. Es un excelente
antiséptico (Reacción de Lieben)
La reacción del yodo sobre el alcohol para preparar el yodoformo es tan sensible que se utiliza para reconocer
mínimas cantidades de alcohol o de acetona en líquidos orgánicos (IACOBUCCI).

El yodoformo (sólido cristalino amarillo), precipita cuando el acetaldehído reacciona en condiciones similares
con yodo en una solución alcalina. Esta reacción con una solución alcalina de yodo, llamada también ensayo de
yodoformo, se usa para descubrir acetaldehído o metilcetonas potenciales. La estructura es necesaria porque la
escisión en medio básico ocurre solo después de formarse CI3C . El etanol da reacción positiva al ensayo, porque
el propio reactivo oxida etanol a acetaldehído:
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