Practica 6

Coprocultivo

I. Introducción
El coprocultivo, al igual que el urocultivo, no está indicado de forma rutinaria. La mayoría
de las gastroenteritis agudas aparecen como procesos autolimitados y de curso benigno, en
las que la única actitud recomendada es la de tratamiento sintomático y observación. Será
en las enteritis graves en las que esté indicado un estudio microbiológico, tanto para tratar
con antimicrobianos específicos contra el agente causal como para evitar o bloquear la
difusión del microorganismo.

II. Indicaciones para el estudio microbiológico

Razones clínicas
a) Gravedad del proceso (Pus, moco, sangre en heces, deshidratación, fiebre elevada)
b) Susceptibilidad del paciente (Granulopenia, SIDA, Hospitalización, Síndrome
hemolítico urémico, edades extremas de la vida)

Razones epidemiológicas
a) Brotes epidémicos (hospitales, guarderías, banquetes)
b) Sospecha de patógenos con potencial epidémico (cólera)
c) Diarrea del viajero

III. Procesamiento
a) El coprocultivo se realiza en los tres primeros días de la diarrea, ya que muchos
organismos entéricos mueren si no se cultivan con rapidez, y porque es en este período
en el que se encuentran en número significativo en las heces.
Para un correcto examen deberá cumplirse los siguientes parámetros:

54
b) La muestra deberá ser de cantidad suficiente (tamaño de una nuez) recogerse en un
envase estéril (hisopado excepcionalmente para neonatos)
c) Enviarlo al laboratorio en menos de dos horas a temperatura ambiente en el caso de un
estudio bacteriológico o de parásitos
d) Si el examen es para rotavirus el envío será inmediato y a una temperatura de entre 2 y
8 grados centígrados
e) En el estudio básico de una enteritis deberia incluir necesariamente el estudio de
Campylobacter y Salmonella, ya que estos son los patógenos más frecuentes en el
paciente grave adulto, a parte del rotavirus en el lactante
f) En el paciente susceptible deberíamos indicar, además del estudio básico, otros estudios
dirigidos a priorizar los microorganismos responsables, así por ejemplo en el paciente
hospitalizado durante más de tres días investigaremos Clostridium difficile
g) Los medios a utilizar en un estudio básico de heces varían de unos laboratorios a otros,
pero es necesaria la utilización de medios selectivos, como Hectoen (dirigido a Shigella,
Yersinia o Salmonella) o Agar Yersinia, y otros menos selectivos como MacConkey (E.
coli, Shigella, Aeromonas, Yersinia), XLD (Shigella) o Agar Salmonella (Salmonella,
Shigella)

IV. Interpretación del resultado

Cualquier crecimiento de los enteropatógenos previamente mencionado se valorará como
positivo y se informará de la especie así como de su antibiograma

V.Reporte
En nuestro medio tradicionalmente se utiliza el medio de SS a menos que la búsqueda de
gérmenes sea específica.
En cultivos negativos (SS) reportar “No se aisló Salmonella ni Shigella”
En caso de ser positivo reportar la bacteria aislada y su antibiograma

55
VI. Citología de moco Fecal
En condiciones normales, las heces no suelen contener células epiteliales, ni leucocitos, ni
eritrocitos. En la deposición mucosa de los que sufren alergia intestinal se observa un
exceso de eosinófilos. La presencia de células epiteliales es un indicador de irritación
gastrointestinal. La observación microscópica del moco fecal en fresco con azul de
metileno o wright tiene utilidad para evaluar la celularidad de la muestra y la posible
presencia de parásitos. Aunque la positividad de la citología de moco fecal es relativamente
baja en la mayoría de las diarreas agudas que son de etiología viral, al igual que el bajo
porcentaje del aislamiento en coprocultivos

Procedimiento
Se realiza mediante la tinción del Azul de metileno amortiguado (AMA) ó por tinción de
Wright
Se toma una pequeña porción de la muestra (de preferencia del moco presente en la
muestra) y se realiza un extendido en un portaobjeto.
A este extendido se le adiciona una gota del colorante y se cubre con el cubreobjeto.
Se deja reposar de 2 a 5 min y se observa a microscopio con aumento de 100x. En
caso de duda se puede repetir la tinción tomando el moco de otra parte de la
muestra.
Esta técnica se debe realizar antes de la maceración con agua destilada o solución
salina.
Resultado / Reporte
Se realiza un conteo de 100 células y se informa el porcentaje de células observadas.
En caso de no encontrarse leucocitos en la muestra se informará como “No se
observó celularidad”.
En caso de encontrarse un número mínimo de leucocitos polimorfonucleares en la
muestra se informa como “Escasos polimorfonucleares” o “Escasos mononucleares”
dependiendo de la celularidad observada.
En casos de encontrase las células necesarias para realizar el conteo, reporta de la
siguiente manera: “Polimorfonucleares ________ %” “Mononucleares
___________ %”

56
VII.Fehling

Los azúcares son rápidamente absorbidos por la porción superior del intestino delgado. Sin
embargo, pueden permanecer en el intestino y causar diarreas, ocasionadas por la presión
osmótica de los azúcares no absorbidos en el intestino, enviando los líquidos y los
electrolitos al intestino. La malabsorción de carbohidratos es una de las mayores causas de
diarrea líquida y de desequilibrio electrolítico observado en pacientes con síndrome de
intestino delgado corto. Como resultado de la fermentación bacteriana, las heces pueden
llegar a ser ácidas con una alta concentración de ácido láctico. La medición del pH
demuestra éste proceso. Los azúcares no absorbidos son determinados como sustancias
reductoras. Aunque la sucrosa no es un azúcar reducido, está sujeto a la hidrólisis ácida en
el intestino, y es también medido como una sustancia reductora.
La actividad de la lactasa en humanos declina con la edad y es controlada genéticamente.
Esta influencia es expresada fenotípicamente como síndrome de malabsorción de lactasa
por muchos factores no congénitos tales como: adaptación nutricional a la ingesta de
alimentos diarios, ritmo circadiano biológico de la actividad de las enzimas, cambios
hormonales en el organismo, funciones gastrointestinales tales como la motilidad y los
componentes nutricionales de la digestión.

Azúcares Reductores
La muestra ideal para este estudio debe ser de reciente emisión. Se le adiciona a la muestra
agua destilada o solución salina 0.85% y se macera. Con una pipeta Pasteur, se toma de 3 a
5 ml de la muestra macerada y se coloca en un tubo de vidrio de 15 x 1.5 cm. En un tubo de
vidrio, se procede a realizar la prueba utilizando 20 gotas del sobrenadante y siguiendo
posteriormente las indicaciones del fabricante del kit de reacción. El tubo debe ser lo
suficientemente grande debido a que se produce una fermentación.
El resultado se reporta en el formato de “Coproanálisis”. El color de la reacción, se coteja
con el bloque de color proporcionado por el fabricante. Tomando en consideración el color

57
de la reacción que más se acerque al bloque de colores, se anota el resultado sustituyendo el
valor numérico con el de cruces.

VIII. Sangre Oculta en heces fecales

Se realiza siguiendo las instrucciones proporcionadas en el instructivo de la prueba
comercial (ejemplo Hematest para sangre oculta en heces fecales). Esta prueba se realiza
por duplicado en las tarjetas de reacción. El resultado se reporta en el formato
“Coproanálisis” de acuerdo a la intensidad visual del color azul observado en el intervalo
de los 2 min posteriores a la realización de la prueba y va desde “positiva +” hasta “positiva
+++”

IX. Cuestionario
Elabore un cuadro comparativo de agentes productores de diarreas (bacterianas y virales) y
su método de identificación

58