SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD DE LOS

LABORATORIOS DE DOCENCIA

MANUAL DE LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y

MICOLOGÍA MÉDICAS
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parcialmente y tomar la muestra a partir de la base del absceso. Para un absceso

cerrado, la superficie se desinfecta con etanol al 70% seguido con solución de
iodo; luego se aspira con aguja y jeringa. Además, se toma una muestra de la
pared del absceso. Durante la cirugía se obtienen del mismo modo.
Nunca debería tomarse material de un absceso utilizando hisopo ya que la
cantidad de muestra será inadecuada y se contaminará con microorganismos no
significativos.
Si se sospecha de anaerobios como causa probable (p.ej. en cerebro, pulmón,
abdomen y tracto genital femenino) la muestra es un aspirado que se debe
transportar al laboratorio en la jeringa o en un recipiente con medio de transporte
anaeróbico.
La tinción de Gram se efectúa rutinariamente en el laboratorio si se sospecha que
la infección es fúngica o micobacteriana deben realizarse también tinciones con
KOH o Ziehl-Neelsen.
Quemaduras. El tejido desvitalizado, necrótico, quemado es un medio fértil al
crecimiento de bacterias y hongos. Desafortunadamente la superficie de las
quemaduras puede estar densamente colonizada con microorganismos
potencialmente patógenos que no son significativos para la infección del paciente.
Los cultivos cuantitativos son útiles para discriminar entre la infección invasiva y la
colonización. Sin embargo, estos cultivos son inútiles a menos que la densa carga
de organismos superficiales se retire antes de tomar la muestra. Además, deben
de tomarse muestras para exámenes histológicos y microbiológicos. Ninguna
prueba por sí misma es suficiente. Generalmente no se necesitan cultivos de
anaerobios o micobacterias. Si se recibe esta solicitud el microbiólogo consultará
con el médico antes de procesar la muestra.

Tejido
Muestras quirúrgicas y de biopsia. Son muestras difíciles de obtener y muchas
veces no es posible tener una segunda muestra.
Microbiólogo y médico deberán trabajar juntos para asegurar la correcta toma de
muestra y la realización de pruebas relevantes. Tome una muestra tan grande
como sea posible a partir de cada área infectada. Si hay múltiples focos colecte de
áreas representativas para exámenes histopatológicos y cultivos. El principal
problema con las muestras de biopsia es su tamaño insuficiente. Las tinciones y
cultivos para bacterias aerobias y anaerobias, micobacterias y hongos no pueden
realizarse con una pequeña cantidad de tejido.
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Microbiólogo y médico deben acordar que pruebas son las más apropiadas antes
de procesar la muestra. Para muestras muy pequeñas, las tinciones por lo general
se omiten y se utiliza el cultivo en caldo para recuperar bacterias y hongos.
Aunque esto no es lo ideal, es mucho mejor que inocular 10 a 12 placas de medio
y realizar tres diferentes tinciones microbiológicas.
Biopsia de la piel. Es una de las técnicas de diagnóstico más sencillas, y más
recompensadas en la práctica médica por el fácil acceso y la variedad de técnicas
para el estudio de la muestra extraída. (p.ej. inmunofluorescencia o microscopia
electrónica).
La selección del sitio de la biopsia se basa principalmente en el estado de la
erupción y lesiones tempranas son usualmente más típicas, esto es especialmente
importante en las lesiones de erupciones vesiculosas (p.ej. pénfigo, herpes simple)
en las cuales la lesión deberá tener no más de 24 hs. Sin embargo, lesiones más
tardías (2-6 semanas) son frecuentemente más características en lupus
eritematoso discoide.
Una técnica común para obtener la biopsia para diagnóstico es usar un punzón de
3-4 mm, cuchillo tubular como tirabuzón, el cual mediante movimientos de rotación
entre pulgar e índice corta a través de la epidermis, la dermis y el tejido
subcutáneo; la base se corta con tijeras.
Para los nódulos, sin embargo, una gran cuña deberá extraerse; además sin
importar el tamaño deberá bisectarse, una mitad para histología y la otra mitad en
un recipiente estéril para cultivos bacterianos o micóticos.
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PRÁCTICA No. 1

Familia Micrococcaceae

Objetivo.

Realizar el diagnóstico microbiológico de los géneros bacterianos: Micrococcus,

Stomatococcus, Planococcus y Staphylococcus que causan infecciones de la piel
y del músculo esquelético.

Fundamento teórico

Ubicada en la sección 12 comprende los géneros: Micrococcus, Stomatococcus,

Planococcus y Staphylococcus. Sin embargo el análisis genético y la composición
de la pared celular muestran que los géneros de esta familia no están
estrechamente relacionados.
Las pruebas de oxidación-fermentación de la glucosa, crecimiento en altas
concentraciones de cloruro de sodio y sensibilidad o resistencia a la lisostafina
(200 µg/ml), eritromicina (0.04 µg/ml), bacitracina (0.04 U) y furazolidona (100
µg/ml) son de gran utilidad en la separación de los tres géneros de la familia que
parasitan al hombre (Tabla 1.1.)
De los cuatro géneros de la familia los cocos móviles llamados Planococcus no
han sido aislados de humanos, los Micrococcus y los Stomatococcus pueden
colonizar al humano pero raramente se asocian a enfermedad.
Los microorganismos de esta familia, se caracterizan por dividirse en más de un
plano en forma de paquetes o racimos, miden de 0.5 a 3.5 µm de diámetro,
grampositivos; pueden ser móviles o inmóviles, anaerobios facultativos, catalasa
positivos; producen ácido sin gas a partir de la glucosa. Sus requerimientos
nutricionales son variables, todas las cepas crecen en presencia de NaCl 5%,
muchos crecen en concentraciones de 10 a 15%.