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AGAR LISINA

HIERRO (LIA)
Alvarez Montes, Melissa del Carmen
Castro Valdivieso, Betty Alexandra
Cristóbal Astete, Jhazmín Romina
OBJETIVO

Demostrar si un microorganismo es capaz de descarboxilar


la lisina y producir H2S.
FORMULACIÓN
Fórmula por litro de agua purificada

● Digerido pancreático de gelatina…………5,0 g


● Extracto de levadura……………………………….3,0 g
● Dextrosa……………………………………………………..1,0 g Demostrar la reacción de
● L-Lisina……………………………………………………….10,0 g descarboxilación
● Citrato férrico de amonio……………………….0,5 g
Producción de H2S
● Tiosulfato sódico………………………………………0,04 g
● Púrpura de bromocrestol…………………………0,02 g
● Agar……………………………………………………………….13,5 g
FUNDAMENTOS
Descarboxilación de lisina H₂S
1. Todos los MO inoculados fermentan glucosa y 1. Todos fermentan glucosa y producen ácidos
producen ácidos
2. Condición ácida favorece la formación de H₂S
2. Concentración baja de glucosa -> Consumido en
las primeras horas 3. Se formará H₂S a partir del tiosulfato

3. Observará tubo de bisel púrpura y fondo amarillo 4. El H2S reacciona con sales de Fe para formar
FeS (precipitado negro insoluble)
4. Hay 2 posibilidades solo en el fondo
a) Si no descarboxila lisina: Prueba negativa -
amarillo
b) Si descarboxila lisina: Prueba positiva-
púrpura
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

A B
RESULTADO POSITIVO RESULTADO POSITIVO

Descarboxilación de lisina Descarboxilación de lisina


positivo, H₂S positivo positivo, H₂S positivo
CyD EyF
RESULTADO NEGATIVO RESULTADO NEGATIVO
Descarboxilación de Descarboxilación de
lisina negativo, sin lisina negativo,
Primero: Blanco (sin inocular) producción de H₂S producción de H₂S
G: Desaminación de lisina
REGISTRO DE RESULTADOS
Bisel
Fondo
Producción de H₂S
Producción de gas

¿Qué significa K/A + (-)?


K: Bisel alcalino (morado)
A: Fondo ácido (descarboxilación y desaminación
negativa)
+: Produce H₂S
-: Sin gas
PRECAUCIONES CON LA PRUEBA DE
LIA
➔ Los tubos cerrados completamente producirán ennegrecimiento total del
medio de cultivo.
➔ El ennegrecimiento por producción de H2S puede ocultar la reacción al fondo
del tubo.
➔ Esta prueba no es confirmatoria para la producción de gas.
➔ Todos los microorganismos sembrados en LIA deben ser fermentadores de
glucosa para interpretar la prueba de descarboxilación de lisina.
➔ Cuando la producción de aminas no es suficiente, se tomará una coloración
gris.
LISINA HIERRO AGAR

DESCARBOXILACIÓN DESAMINACIÓN DE
PRODUCCIÓN DE H2S
DE LISINA LA LISINA

POSITIVO NEGATIVA POSITIVO


POSITIVO NEGATIVA

PRECIPITADO
SUPERFICIE Y FONDO NEGRO Y FONDO
SIN
FONDOS ÁCIDO Y SUPERFICIE CAMBIOS ÁCIDO Y
ALCALINOS SUPERFICIE ALCALINA
SUPERFICIE
ALCALINA
ROJIZA
REFERENCIAS

1. Mac Faddin J. (2015). Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia


clínica. 3era ed. Editorial Panamericana. Buenos Aires. Argentina.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2020). Diagnóstico Microbiológico de Bailey & Scott. 12 ed.
Editorial Panamericana S.A. Argentina.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2018). Diagnóstico
Microbiológico. 5ta ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.

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