UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA

UNAN – LEÓN

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

FARMACIA

Análisis farmacéutico III

Tema: ¨ Separación, Identificación y Cuantificación de Acetaminofén y Cafeína en

tableta de Panadol Ultra por Cromatografía Líquida de Alta Resolución (H.P.LC) ¨.

Lic. César Peralta.

Integrantes:
 Fátima Joselyna González Bermúdez.
 Valering del Socorro Gallo Guerrero.
 Katherine Teresa Guido González.
 Julieth Carolina Martínez Berríos.
 Wilber Enrique Palma Alvarado.
 Katherine de los Angeles Gomez González.
 Higinio Leopoldo Lopez Suazo.
 José Antonio Bravo Hernández
 José Matías Mairena Hernández.
 Tammy Fiorella Navarrete Ugarte
 Cindy Nayelhi Mangas Lira
 Luis Ernesto Grillo Hernández
14 de junio del 2019
¡A La libertad por la Universidad¡
 Introducción

Debido a su rapidez y sensibilidad así como su amplio espectro de aplicaciones, a partir de su

desarrollo la cromatografía de gases se ha ido utilizando cada vez más que las técnicas de
cromatografía de líquidos. La cromatografía de líquidos tiene un potencial de aplicaciones
debido a que 85% de los compuestos conocidos no son lo suficientemente volátiles o estables
como para ser separados por cromatografía de gases.

Debido a la riqueza de conocimientos de la cromatografía especialmente la de gases gracias a

esto se ha desarrollado HPLC (High Perfomance Liquid Chromatography) que rivaliza con la
anterior ya que se pueden hacer separaciones y mediciones en cuestión de minutos.

HPLC también conocida como cromatografía liquida de alta presión es un tipo de cromatografía
en columna usada para separar componentes de una mezcla basándose en las diferentes tipos
reacciones químicas entre las sustancias analizadas y la fase estacionaria soportada en una
columna cromatográfica, esta es una rama del Análisis farmacéutico que estudia las separaciones
de mezclas a través de distintas interacciones entre sus componentes con el sustrato.

En el siguientes informe en este informe presentamos los resultados obtenidos en la práctica de

laboratorio donde se realizó la técnica de Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) en
tabletas de Panadol Ultra con el fin de separar, identificar y determinar las concentraciones
exactas de los componentes o sustancias que la constituyen los cuales son Acetaminofén y
Cafeína.

Objetivos
 Separar una mezcla de Acetaminofén, cafeína en tabletas utilizando la técnica de
Cromatografía Liquida de Alta Resolución.
 Identificar Acetaminofén, cafeína utilizando la técnica HPLC.
 Determinar la cantidad encontrad de Acetaminofén, cafeína por tableta y el porcentaje
recuperado según lo declarado.
 Familiarizarse con la técnica analítica de HPLC.
 SOLUCION MADRE DEL ESTANDAR DE LA CAFEINA

32.5mg × 1ml = 13mcg/ml

50ml 50ml

Polvo de Pesar
Cafeína 32.5mg

Llevar a un
Tomar una alícuota balón de 50 y
de 1ml aforar con el
diluente.

Llevarlo a un
balón de 50ml
y aforar con el
diluente
 SOLUCION MADRE DEL ESTANDAR DEL ACETOMINOFEN

125mg× 2ml = 100mcg/ml

50ml 50ml

Polvo de Pesar 125mg

Acetaminofé
n

Tomar una alícuota Llevar a un

de 2ml balón de 50 y
aforar con el
diluente.

Llevarlo a un
balón de 50ml
y aforar con el
diluente

Resaltamos que las alícuotas tomadas tanto para la

cafeína (1ml) y Acetaminofén (2ml), se llevaron a un
mismo balón de 50ml y procedimos a aforar con el
diluente metanol más Ácido Acético en proporciones
de 95:5
 PROCEDIMIENTO DEL DILUENTE

Se preparó 320ml del diluente del Metanol y Ácido Acético en proporciones de 95:5

Metanol Ácido Acético

95 100ml 5 100ml
X 320ml X 320ml
X= 304 ml metanol X= 16 ml de ácido acético

Se midió en una Se llevó a un beaker

probeta 304 de de 500ml, ambos
Metanol y 16 de diluentes
Ácido Acético

Se tapó con
papel aluminio
y se procedió a
utilizar
 Esquema de la Muestra de Panadol Ultra

Recopilar material Pesar y pulverizar no menos de

prima. 10 tabletas.

Transferir una cantidad pesada

De la solución anterior
de la muestra con exactitud
transferir una alícuota de
equivalente a 250mg de
2ml a un frasco volumétrico
Acetaminofén a un frasco
de 50ml, diluir con mezcla
volumétrico de 100ml. Disolver
de solvente, agitar. Filtrar
con 75ml de mezcla de
con filtro de jeringa
solvente, agitar por 10 minutos
0.45um. Traer propuesta de
y diluir a volumen con mezcla
cálculos.
de solvente.

De la solución
Realizar 2 lecturas y anotar los
anterior inyectar
parámetros Cromatográficos.
20Ul.

Fin.
 Cálculos de preparación de la muestra

Declarado por el producto:

Acetaminofén: 500mg
Cafeína: 65mg
500 mg -------- 658.6mg
250mg ---------- x
X: 329.3mg
250 mg X 2ml
100ml 50ml
X: 0.1 mg/ml: 100 mcg/ml
Cafeína
65mg -------- 658.6mg
X ---------- 329.3mg
X: 32.5 mg
32.5mg x 2ml
100ml 50 ml
X: 0.013 mg/ml: 13mcg/ml
 Resultados

Nombre comercial: Panadol Ultra GSK.

Laboratorio: GlaxoSmithKline (GSK)

Ingredientes activos: Acetaminofén 500mg Cafeína 65mg.

N° de Lote: 167008998.

Fecha de vencimiento: Octubre de 2020.

Forma Farmacéutica: Capletas.

Sistema Cromatográfico.
Fase Móvil: Agua: Metanol: Ácido Acético Glacial (69: 28: 1).

Colummna: 250 mm x 4 mm.

Fase estacionaria: Bio – Sil ODS 10.

Método de detección: Ultravioleta 275 nmm

Flujo: 1.5 mL / min.

Volumen de inyección: 20 µL.

}
 Parámetros cromatográficos de la solución estándar
N° de Componentes Tiempo Anchura # platos Área del Simetría Resolución
inyección de del pico teóricos pico
retención
1 Acetaminofén 1.882 0.2926 661.92 1919.022 -- 3.3575
Cafeína 2.936 0.3331 1,243.03 1711.7952 --
9
2 Acetaminofén 1.886 0.2945 656.19 2029.0124 -- 3.3575
5
Cafeína 2.949 0.3387 1,212.93 1815.8156 --
7
3 -- -- -- -- -- -- --
-- -- -- -- -- -- --

Cálculos del # de platos

 Cálculos de Resolución
Ecuación
2(TRB−TRA )
R:
WA +WB
Inyección N°1
2(2.936−1.882)
R: :3.3690
0.2926+ 0.3331
Inyección N° 2
2(2.949−1.886)
R: :3.3575
0.2945+0.3387
 Cálculos de # de platos
Ecuación

N :16 ( TRW ) 2

Estándar (Inyección N°1)

N :16 ( 0.2926
1.882
) : 661.92 Acetaminofén
2

N :16 (
0.3331 )
2,936
: 1,243.03 Cafeína
2
Estándar (Inyección N°2)

N :16 ( 0.2945
1.886
) : 656.19 Acetaminofén
2

N :16 (
0.3387 )
2.949
: 1,212.93 Cafeína
2

Parámetros cromatográficos de la solución muestra

N° de Componentes Tiempo Anchura # platos Área del Simetría Resolución
inyección de del pico teóricos pico
retención
1 Acetaminofén 1.881 0.3001 628.58 1308.7475 --- 3.2834
6
Cafeína 2.956 0.3547 1,111.26 533.81897 ---

 Cálculos de resolución
Ecuación
2(TRB−TRA )
R:
WA +WB
2(2.956−1.881)
R: : 3.2834
0.3001+0.3547
Muestra (Inyección N°1)

N :16 ( 0.3001
1,881
) : 628.58 Acetaminofén
2

N :16 (
0.3547 )
2.956
: 1,111.26 Cafeína
2

 Porcentaje recuperado y mg por tableta

Peso total= 6,586 mg

Peso promedio = 6,586 mg/ 10 tab= 658.6 mg

658.6 mg
∗250 mg=329. 3 mgde polvo a pesar
500 mg
 65 mg
∗329.3 mg=32.5 mg de cafeína presenteen el polvo
658.6 mg

329.3 mg
∗2 ml
100 ml
Concentración deAcetaminofen= =0.13172mg/ml=131.72 µg /ml
50 ml

32.5 mg
∗2 ml
100 ml
∗1000 µg
50 ml
Concentración de Cafeína= ∗¿ 13 µg /ml
1g

Area de la muestra
[Muestra]= ∗[ Standar]
Areadel estándar

1308.74
[ M . Acetaminofén ] = ∗100 µg /ml=69.83 µg /mlConcentración práctica de la muestra
1874.02

533.82
[ M . Cafeína ] = ∗13 µg /ml=3.93 µg /ml Concentración práctica de la muestra.
1763.8

% Recobro
69.83 µg /ml
Acetaminofén= ∗100 %=53.01 %
131.72 µg/ml
3.93 µg /ml
Cafeína= ∗100 %=30.23 %
13 µg / ml
mg 500 mg
cantidad en de acetaminofén= ∗53.01 %=265.05 mg
tab 100 %
mg 65 mg
cantidad en de Cafeína= ∗30.23 %=19.65 mg
tab 100 %
 Análisis de los resultados
 La muestra cumple con el parámetro de la forma de los picos ya que los picos no
presentaron ruptura alguna y mucho menos al formarse las curvas tuvieron
deformaciones mostrando una estructura suave.
 La muestra de acetaminofén cumple con el parámetro del tiempo de retención ya que es
menor del 2.0%, con un tiempo de retención de 1.88%. en el caso de la muestra de
cafeína este no cumple con el parámetro ya que es mayor al 2.0%, con un tiempo de
retención de 2.95%.
 En el parámetro de simetría la muestra utilizada cumple con el parámetro que debe de ser
no menos de 2, lo cual la simetría de la muestra es de 3.2834 siendo mayor de 2 como se
presenta en el parámetro establecido.
 En el parámetro del número de platos teóricos, la muestra de acetaminofén no cumple
con el parámetro ya que este estipula que no deben ser menor de 1000, lo cual el número
de platos teóricos de acetaminofén es de 628.58 lo cual está por debajo del parámetro. En
el caso de la muestra de cafeína este si cumple ya que está por encima del parámetro con
1,111.26, cumpliendo el parámetro estipulado.

A través de los resultados obtenidos de la prueba, logramos separar, identificar y cuantificar los
componentes de la muestra los cuales eran acetaminofén y cafeína a través de la forma y el área
debajo de los picos, y su tiempo de retención en la fase estacionaria.
 Conclusión
La Cromatografía Liquida de Alta Resolución es una técnica que permite separar, aislar e
identificar los componentes de una mezcla de compuestos químicos, es una técnica muy usada
por tener una capacidad de separación bastante elevada, además de que posee una rapidez y
reproducibilidad de los análisis.

En el laboratorio cumplimos los objetivos de la práctica con éxito, los cuáles eran separar,
identificar y cuantificar acetaminofén y cafeína presentes en las tabletas de Panadol ultra
utilizando la técnica analítica cromatografía liquida de alta resolución, todo esto fue posibles
gracias a que tuvimos el apoyo del licenciado encargado del laboratorio y del trabajo en equipo
que como grupo realizamos siempre para poder llevar a cabo la práctica y obtener resultados los
esperados.

Recomendaciones

 Mantener el orden en el laboratorio.

 Hacer un uso adecuado de las materias primas, así como de los reactivos.
 Tener precaución con los equipos que se utilicen, ya que estos se podrían dañar si no se
tiene el conocimiento requerido.
 Mantener una actitud positiva y no dejarse influenciar por los puntos negativos del
laboratorio, sino tener el entusiasmo de aprender y de adquirir habilidades que nos
ayuden en un futuro.

Bibliografía
 Química Analítica de Gary Christian, sexta edición, 2009.
 Análisis Químico Cuantitativo de Daniel Harris, tercera edición, 2006.
 Clarke´s Analysis of Drugs and Poison.
 Farmacopea de los Estados Unidos. USP 39 / NF 34.