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Cromatografía y Extracción de Metabolitos

Este documento describe los procedimientos para realizar cromatografía de capa fina y extraer pectina, goma, mucílago y almidón de materiales vegetales. Se detallan los materiales, reactivos, pasos y observaciones para la cromatografía de la emetina y la extracción de estos compuestos mediante infusión, digestión y solventes. El objetivo es identificar metabolitos por cromatografía y extraer y comparar estos compuestos usando diferentes métodos.

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Cromatografía y Extracción de Metabolitos

Este documento describe los procedimientos para realizar cromatografía de capa fina y extraer pectina, goma, mucílago y almidón de materiales vegetales. Se detallan los materiales, reactivos, pasos y observaciones para la cromatografía de la emetina y la extracción de estos compuestos mediante infusión, digestión y solventes. El objetivo es identificar metabolitos por cromatografía y extraer y comparar estos compuestos usando diferentes métodos.

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DEPARTAMENTO DE QUÍMICA FARMACÉUTICA

UNIVERSIDAD DEL VALLE DE GUATEMALA

Práctica No. 3 y 4: Cromatografía y extracción de Pectina, Goma, Mucílago y Almidón

La cromatografía de capa fina se caracteriza por ser un método muy fácil y requiere poca inversión. Es un
método de separación fisicoquímico, y se basa en la diferencia de polaridades de las moléculas presentes
en una mezcla y su afinidad a la fase estacionaria o móvil. Sin embargo, tiene la desventaja que los
factores de retención o pueden ser falsos positivos debido a la presencia de componentes secundarios
similares al metabolito de interés.

Otros métodos de extracción de material vegetal permiten obtener activos o compuestos (metabolitos
primarios y secundarios), los cuales permiten caracterizar dicho material vegetal. Entre los más comunes
están: maceración, decocción, infusión, digestión, destilación por arrastre de vapor, soxhlet, etc. Para
efectos de esta práctica utilizaremos los métodos de: separación por solventes, digestión, infusión.

I. Objetivos

a) Identificar metabolitos presentes en plantas por medio de cromatografía de capa fina


b) Practicar los métodos de extracción sencillos: separación por solventes, digestión, infusión
c) Extraer almidón, pectina, mucílago y goma de materiales vegetales y comparar los
diferentes extractos.

II. Pre-lab

1. Investigar ejemplos de plantas en Guatemala que contengan:


-Pectina –almidón –mucílago –goma –emetina -mentol

2. Usos en la industria de: -Pectinas –Almidones –Mucílagos -Gomas

3. saber diferenciar y explicar las siguientes técnicas de extracción: -Cromatografía –


Infusión -Extracción por solventes -Digestión

*Realizar los cálculos necesarios para preparar las siguientes soluciones (esto si va escrito
en el cuadernito). -ácido sulfúrico al 5% en etanol -ácido sulfúrico 3 N -goma arábiga al 10%

III. Materiales

 estufa con agitador y calor


 palanganas para baño maría
 termómetro
 agitador magnético
 Beakers 50, 100, 250 mL
 placas de sílica para cromatografía capa fina y la cámara de revelado
 horno
 papel filtro
 embudo para filtrar (con el triángulo y base de metal para sostener el embudo)
 gasa para filtrar
 pipetas de 1,5,10 mL y bulbos
 licuadora (si tiene 2 mejor)
 cápsula de porcelana (para secar material en horno)
 espatulas
 embudo buchner con matraz

IV. Reactivos y soluciones

 metanol
 hidróxido de amonio
 tolueno
 acetato de etilo
 dietilamina
 reactivo de dragendorff
 emetina
 ácido acético
 ácido sulfúrico
 etanol
 diclorometano
 anisaldehído
 ácido acético glacial
 goma arábiga

V. Procedimiento

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA:


a) EMETINA:
 Extraer mezclando 0.5 g de raíz de ipecacuana pulverizada con 10 mL de metanol.
Alcalinizar con hidróxido de amonio. Calentar en baño maría a 60 °C por 5 min.
 Agitar vigorosamente y enfriar. Filtrar y luego evaporar en baño maría hasta 1 mL-
Aplicar una pequeña cantidad sobre la placa cromatográfica.
 Fase móvil: tolueno-acetato de etilo-dietilamina (70:20:10)
 Agente revelador: dragendorff
 Tomar reactivo de dragendorff justo antes de usarlo y diluirlo agregándole 10 mL de
acetato de etilo y 5 mL de ácido acético. ASerjar placa cromatográfica, secar, luego
asperjar con una pequeña cantidad de ácido sulfúrico al 5% en etanol la placa.
Colocar en horno a 110 °C por 10 min.
 Investigar el Rf del estándar y comparar con muestra.

EXTRACCIÓN DE MATERIALES VEGETALES:


a) INFUSIÓN:
 Calentar 300 mL de agua sin llevar a ebullición.
 Colocar cada bolsita de té en un beaker diferente.
 Verter 100 mL sobre material cuando el agua esté caliente y mantenerlo tapado 15
minutos.
 Anote características organolépticas de las 3 infusiones
Infusión Color Olor Viscosidad Turbidez
1
2
3

b) AISLAMIENTO DE ALMIDÓN DE PAPA:


 Remover cáscara de 2 papas, partirla y pesar 200 g. colocarla en la licuadora para
reducirla a pulpa. Agregar 40 mL de agua para facilitarlo.
 Filtrar con gasa la mezcla y agregar 20 mL al residuo de papa reducida que queda
en gasa, filtrar y exprimir el residuo.
 Repetir lavado, colectar el filtrado en un beaker y esperar a que el almidón
sedimente alrededor de 1 hora. Decantar sobrenadante, adicionar agua y agitar.
Esperar a que el almidón sedimente.
 Decantar otra vez y filtrar para remover residuo de agua.
 Colocar almidón obtenido en cápsula de porcelana (previamente tarada) y secarlo
al horno a 50 °C. Pesar y calcular el porcentaje de almidón obtenido.
Descripción Resultado
Cápsula de porcelana vacía
Cápsula con masa de almidón húmeda
Masa seca de almidón
Porcentaje en muestra?

c) AISLAMIENTO DE MUCÍLAGO
 Phsyllium plantago: pesar 10 g de muestra y añadir 90 mL de agua. Calentar a 60
°C 2 horas en baño maría. Filtrar al vacío con embudo de buchner y colectar el
filtrado. Repetir proceso sin calentar
 Semillas de fenogreco: pesar 10 g de semillas y hacer el procedimiento anterior.
NO SE HACE PROCESO SIN CALENTAR.
 Anotar diferencias
Mucílago Color Olor Consistencia
Phsyllium plantago
Se observa diferencia con calor? Cuál?
Fenogreco

d) AISLAMIENTO DE GOMAS
 Pesar 10 g de goma arábiga y diluir en 100 mL con suave calentamiento.
 Deje reposar y observe resultados.
 Realice el mismo procedimiento con la Goma xanthan

Goma Color Olor Consistencia


Arábiga
Xanthan
Cuáles son las diferencias?
e) AISLAMIENTO DE PECTINA
 Tomar dos naranjas y remover el pericarpio. Pesar 25 g y licuarlo con 100 mL de
agua destilada
 Transferirlo a un beaker y agregar 1.5 mL de ácido sulfúrico 3 N. Calentar la
mezcla a 90°C, agitando ocasionalmente. Mantener la digestión durante 15 min en
temperatura de 85-90°C
 Filtrar extracto con gasa y exprimir el tejido para colectar solución. Repita la
digestión con el residuo por 15 min. Filtrar de nuevo y combine extractos
 Colocar en embudo de buchner papel filtro y llevar a cabo el filtrado de los
extractos al vacío.
 Observe resultados

f) CARACTERIZACIÓN
 Observar resultados al ensayar cada extracto con 1 mL de cada solución. Las
diferentes reacciones permiten caracterizar y diferenciar las sustancias.
i. Alcohol etílico
ii. Acetato de plomo al 10%
iii. Acetato básico de plomo al 10%
iv. Cloruro férrico al 20%

Extracto Alcohol etílico Acetato de Acetato básico Cloruro férrico al


plomo al 10% de plomo al 10% 20%
Goma
Pectina
Mucílago

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