El aceite de Eucaliptus se obtiene de las hojas frescas de Eucalyptus globulus Labill. y otras especies de Eucalyptus L´Heritier (Fam. Myrtaceae),ricos en1,8 cineol (C 10 H 18 O,154,25).
PREPARACION
Aceite volátil obtenido por arrastre de vapor de água y/o rectificación
CARACTERÍSTICAS
El aceite de Eucaliptus se presenta como un líquido amarillo pálido a incoloro con un olor característico, aromático, un poco alcanforado y sabor picante y refrescante a 1,8 cineol.
IDENTIFICACION
Cromatografía Proceder de acuerdo a lo descrito en cromatografía en capa fina
Fase estacionaria: cromatoplaca de sílica-gel GF 254
Fase móvil: Mezcla de Tolueno - Acetato de etilo (9:1 v/v).
Solución de la muestra: Disolver 0,01 g de la muestra a ser analizada en 1 mL de tolueno.
Solución de referencia: Disolver 3 µL de 1,8-cineol y 1,2 µL de α-terpineol en 300 µL de tolueno.
Revelador: Mezclar en el siguiente orden, 0,5 mL de anisaldehído, 10 mL de ácido acético glacial,
85 mL de metanol y 5 mL de ácido sulfúrico.
Procedimiento: Aplicar en la cromatoplaca, separadamente, en forma de banda, 10 L da Solución
de la muestra y 10 L de la Solución de referencia. Desarrollar el cromatograma por 10 cm. Retirar la cromatoplaca y secar al aire por 15 minutos. Nebulizar la placa con el revelador y calentar a 100- 105 °C durante 5-10 minutos.
Resultados: El esquema debajo presenta la secuencia de zonas presentes en el cromatograma
obtenido con la solución de referencia y la solución de la muestra. Otras zonas pueden ocasionalmente estar presentes. Parte superior da placa
1,8-cineol: zona zona
Marron rojizo Marron rojizo 1,8-cineol)
α-terpineol: Zona Marron rojizo Marron rojizo (α-terpineol)
Solucion de Solucion muestra
referência
Proceder de acuerdo a lo descripto en Cromatografia gaseosa. Utilizar cromatógrafo equipado
con detector de ionización de llama y equipo de registro adecuado; columna capilar de 30m de largo y 0,25 mm de diámetro interno, con polietilenglicol 20M como fase estacionaria con un film de 0,25 μm de espesor. La temperatura del injector se debe ajustar a 220 °C, la temperatura del detector a 250 °C. El programa de temperatura es el siguiente: Temperatura inicial 60 °C durante 5 minutos, con un gradiente de 5 °C por minuto de 60 °C a 200 °C , durante 28 minutos y se mantiene a 200 °C durante 5 minutos (total: 38 min), con nitrógeno purificado como gas portador (1 mL/minuto).
Solución de la muestra: Disolver 4 µL del aceite volátil de eucalipto en 200 µL de n-hexano.
Solución de referencia: Disolver. 0,5 mg de alcanfor,0,5 mg de sabineno, 1 L de -pineno, 0,5 L
de -pineno, 1 L de limoneno, 0,5 L de -felandreno y 5 L de 1,8-cineol en 1 mL de n-hexano. Almacenar refrigerado, en recipiente cerrado herméticamente y al abrigo de la luz.
Procedimiento: Injectar 1 μL de la Solución de la muestra en el cromatógrafo gaseoso, utilizando
uma relación de flujo de 1:50. Repetir procedimiento para la Solución de referencia. Registrar las concentraciones relativas obtenidas por integración electrónica por el método de normalización.
Examinar el perfil cromatográfico de la Solución de la muestra. Los picos característicos obtenidos
en la Solucion de la muestra deberán tener tiempos de retención similares a aquellos obtenidos en el cromatograma de la Solución de referencia o su identificación confirmada con cromatografía gaseosa acoplada a detector selectivo de masas, operando en las mismas condiciones que la cromatografía gaseosa con detector por ionización de llama.
Adecuabilidad del sistema
Resolución entre picos: Solución referencia. Mínimo 1,5 entre los picos del limoneno y 1,8-cineol.
Utilizando los tiempos de retención determinados a partir del cromatograma obtenido con la solucion referencia, localizar los compuestos en el cromatograma obtenido con la solución de la muestra. No considerar el pico de n-hexano.
Comprobar que la concentración relativa de los siguientes compuestos en el cromatograma obtenido
de la Solución de la muestra, cumple con lo especificado en la tabla 1 : Tabla 1. Composicion de aceite volátil de Eucaliptus
Densidad relativa. A 20 °C, mínimo, 0,906 e, máximo, 0,927.
Indice de refracción (5.2.29.4). A 20 °C, mínimo, 1,458, máximo, 1,470.
Determinação do poder rotatório (5.2.29.5). No mínimo, 0°, máximo, +10°.
Solubilidad en etanol. Disolver en probeta con tapa de 25 mL, 1 mL de muestra a ser analizada y adicionar con bureta, fracciones de 0,1 mL de etanol (80 por ciento v/v), hasta completa disolución del aceite. Luego, continuar la adición de etanol en fracciones de 0,5 mL hasta completar 20 mL, agitando energicamente a cada adición de etanol. La muestra es soluble en 5 volúmenes de etanol (80 por ciento v/v).
Aldehídos. En un tubo de vidrio con tapa esmerilada de 25 mm de diámetro y 150 mm de largo
conteniendo 10 mL de la muestra, agregar 5 mL de tolueno R y 4 mL de solución alcohólica de hidroxilamina R. Agitar enérgicamente y titular inmediatamente con hidróxido de potasio 0,5 M en etanol (60 por ciento v/v), hasta viraje del rojo al amarillo. Continuar la titulación, sin dejar de agitar, hasta coloracion amarilla nítida del indicador. Agitar durante 2 minutos y dejar en reposo. El punto final es obtenido cuando la coloración persiste en la capa inferior. La titulación toma aproximadamente en 15 minutos. Repetir la titulación en una segunda muestra de ensayo de 10 mL de la muestra y utilizar como solución de referencia para el punto de viraje la solución obtenida en la primera titulación al que se le agrego 0,5 mL de hidróxido de potasio 0,5 M en etanol 60 % (v/v). El gasto de hidróxido de potássio 0,5 M en la segunda titulacion no debe ser mayor a 2,0 ml.
Metales tóxicos y Arsénico. Cumple el test.
ENVASADO Y ALMACENAMIENTO
Envasar en recipientes herméticamente cerrados, al abrigo de la luz, del calor y de la humedad.
Cromatogra ma guía de la Soluçion referência contendo α-pineno, β-pineno, -felandreno limoneno, 1,8-cineol, sabineno y alcanfor.
