FISICOQUÍMICA - BIOLOGÍA-

PRÁCTICA 3

CALORIMETRÍA INDIRECTA BIOLÓGICA

RESPIROMETRÍA

Grupo: 2 B Equipo: 1

Nombre(s): Yareli Paredes Mendoza

I. OBJETIVO GENERAL. Para medir las cantidades de oxígeno y/o anhídrido carbónico resulta fundamental
informarse de varios aspectos de los procesos bioenergéticos que ocurren en el interior de los sistemas
biológicos

II. OBJETIVOS PARTICULARES. Analizar el metabolismo basal de un insecto a través de la tasa respiratoria
(calorimetría indirecta).

III. PROBLEMA. Cuantificar el consumo de O2 en diferentes insectos para calcular su metabolismo basal.

A.1. CUESTIONARIO PREVIO.

1. ¿Qué es un gasómetro y para qué se utiliza?

Aparato que sirve para medir el volumen de un gas
2. ¿Qué establece la Ley de Hess?
Es un método indirecto de calcular el Calor de Reacción ó Entalpia de Reacción, enuncia lo
siguiente cuando los reactivos se convierten a productos, el cambio de entalpía es el mismo,
independientemente de que la reacción se efectúe en un paso o en una serie de pasos.
3. ¿Cómo relacionas la Ley de Hess en Biología?
Se utiliza para calcular el calor de algunos seres vivos así observar cuando se obtiene en una reacción.
4. Realiza un esquema de la Ley de Hess aplicada a moléculas biológicas

5. Enuncia el primer principio de la termodinámica

Un sistema termodinámico puede intercambiar energía con su entorno en forma de trabajo y
de calor, y acumula energía en forma de energía interna. La relación entre estas tres
magnitudes viene dada por el principio de conservación de la energía.
6. Investiga y explica el siguiente balance energético de un animal
∆Qnutrientes incorporados = ∆Qcatabolitos + ∆Qliberado +∆Q equivalente del W realizado
 7. ¿Cómo escribirías el balance cuando es neutro?
Sería tanto los nutrientes incorporados fueran igual a los liberados y no habría un aprovechamiento.
8. ¿Cómo lo escribirías si el animal come una mayor cantidad de energéticos o sea que fuera positivo?
Sería que obtiene nutrientes incorporados y estos al catalizarse lo hace de una manera rápida
9. ¿Y cómo propondrías dicho balance para el caso de la respiración?
Prácticamente por el ingreso de energía al cuerpo en este caso el oxígeno al entrar debe de catalizarse
para su mejor aprovechamiento y con ello hay una liberación de otras sustancias.

A.2. PROPUESTA DEL DISEÑO EXPERIMENTAL Llevar a cabo una discusión grupal, identificar las variables
involucradas y plantear la hipótesis para proponer el diseño del experimento que pueda conducir a la resolución
del problema planteado (considerar que en el laboratorio se dispone del material indicado en el punto A3).
Anotar la propuesta en el Cuadro 1.
Para simplificar la cuantificación del metabolismo de insectos y la realización de esta práctica se partirá de la
suposición de que el insecto de estudio solo consume glucosa, y por lo tanto el cociente respiratorio es de uno.
Así el registro indirecto del Vo2 se efectuará a través de la transformación del CO2 (gas) en bicarbonato de sodio
(NaHCO3, cristales) al combinarse con el
NaOH. No perder de vista que esta simplificación se lleva a cabo con fines didácticos y debido a
limitaciones técnicas, por lo tanto los resultados conllevan una “pequeña imprecisión” de entrada.

Cuadro 1. Variables, hipótesis y propuesta del diseño de experimento.

Las variables son: el tiempo y consumo energetico.

Hipotesis nula: el tamaño de los ejemplares es independiente al consumo energetico.

Hipotesis alternativa: el tamaño de los ejemplares es dependiente al consumo energetico.

A.3 Materiales y Reactivos

Material Aparatos

1 pipeta de 0.01mL (1/100), 1 balanza analítica.

1 caja de Petri de plástico,
1 aguja de disección, Reactivos
1 jeringa de 5.0mL sin aguja,
1 manguera de hule, 5.0mL de azul de metileno al 0.5%,
1 pinza, 5.0mL de hidróxido de sodio
1 cronómetro, saturado,
1 regla, 1 frasco de vaselina
1 torunda de algodón,
4 insectos diferentes.
A.4. METODOLOGÍA EMPLEADA.

Cuadro 2. Metodología empleada

1. Se pesaran los 4 ejemplares en la balanza para obtener una mejor precisión.
2. Se arma el siguiente dispositivo utilizando una jeringa de 5.0mL, una pipeta de
0.01mL, una manguera de hule, un algodón con NaOH a altas concentraciones y un insecto (Fig.).
3. Se unen la punta de la pipeta y la punta de la jeringa con una manguera de plástico (sellándose a unión con un
poco de vaselina si es preciso) y con el émbolo retraído hasta el extremo de la jeringa para dejar el espacio libre
interior.

Fig. Dispositivo para efectuar la respirometría

4. Se coloca al insecto en la cámara de la jeringa lo más cercano a la punta, auxiliándose con la aguja de
disección.
5. Se introduce una pequeña malla de plástico para evitar que el insecto se ponga en contacto con la solución
saturada de hidróxido de sodio, dejando dos terceras partes de la jeringa libres de la parte anterior.
6. Se coloca posteriormente un algodón empapado de una solución de hidróxido de sodio saturada en la parte
final de la jeringa .
7. Se cierra la jeringa colocando el émbolo lo más salido que se pueda.
8. Se toma con la pipeta Paster una gota de azul de metileno al 0.5% y se le coloca en la entrada de la parte
posterior de la pipeta. Es mejor colocar la gota en este lugar para poder registrar inmediatamente los registros de
O2 consumido por el insecto ayudándose con una regla.
9. Se mide el volumen de oxígeno consumido por el insecto cada 5 o 10 segundos. Esta
medición se puede cuantificar por el desplazamiento del azul de metileno en la pipeta. Como la pipeta no posee
graduaciones desde la base se requiere de la regla en forma paralela a la pipeta
para poder deducir desde el principio la cantidad de mililitros de O 2 respirado / mL por el insecto. El
procedimiento se repite con los insectos restantes.

10. anotar los datos obtenidos de cada ejemplar en la bitácora de laboratorio.

A.5. DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS

 1) Peso de los ejemplares

Peso Ejemplar
0.6359 Grillo
0.5574 Chinche
0.0314 Araña
1.06 Cucaracha

 2) Cuantificar los valores del consumo de O2 del insecto seleccionado a diferentes tiempos y agrupar los
datos en una tabla.
 RESULTADOS DE CHINCHE

T(s) Vo2 (ml)

15 0.05
30 0.8
45 1.3
60 1.6
75 2

RESULTADOS DE GRILLO

T(s) Vo2 (ml)

15 0.3
30 0.6
45 0.10
60 0.12
75 1.4

RESULTADOS DE LA CUCARACHA

T(s) Vo2 (ml)

15 10
30 11.1
45 12
60 19
75 21

RESULTADOS DE LA ARAÑA

T(s) Vo2 (ml)

15 0.2
30 0.4
45 0.5
60 2.5
75 3
  2) Graficar Vo2 vs t para observar la variación en el consumo de O2.

f(x) = NaN x + NaN

R² = 0 RESULTADOS DEL CONSUMO DE
RESULTADOS DEL CONSUMO DE OXIGENO
OXIGENO DEL GRILLO
DE LA CHINCHE
1.6
12
1.4 1.4
10 1.2
8 1
0.8
6 f(x) = 0.172 x − 0.0120000000000001
0.6 0.6
4 0.4
0.3
0.2 0.12
2 0.1
0
0 1 2 3 4 5
0 2 4 6 8 10 12

f(x) = NaN x + NaN f(x) = NaN x + NaN

R² = 0 RESULTADOS DEL CONSUMO DE R² = 0 RESULTADOS DEL CONSUMO DE
OXIGENO OXIGENO
DE LA ARAÑA DE LA CUCARACHA
12 12
10 10
8 8
6 6
4 4
2 2
0 0
0 2 4 6 8 10 12 0 2 4 6 8 10 12

 3) Trazar la curva utilizando el método de regresión por mínimos cuadrados y

Obtener los valores de los parámetros de la función (A y B).

Regresión de la chinche de 3.9210526

Regresión del grillo de 2.1588567

Regresión de la cucaracha de 4.463219489

Regresión de la araña de 16.5283343

  4) Calcular la cantidad de calorías consumidas por el insecto en base al volumen de oxígeno consumido
(metabolismo basal o pendiente).

Log Qo2

Log T corporal grillo chinche araña cucaracha

Log02= log A± B. log (T corporal)

Q02= A (T corporal) B= 0.12

 5) Calcular también el valor del coeficiente de correlación lineal.

 6) Tabular los valores de las tasas metabólicas de los otros insectos obtenidas por los otros equipos vs
los pesos de los diferentes insectos.

 7) Graficar las tasas metabólicas vs los pesos.

0.6359 Grillo
0.5574 Chinche
0.0314 Araña
1.06 Cucaracha

 8) Rectificar la curva (log-log o semi-log).

 9) Analizar el tipo de función y parámetros obtenidos del metabolismo basal pertenecientes a los
insectos estudiados (valores de A y B).
 10) Encontrar la función que describe la dependencia del metabolismo con respecto al tamaño corporal.

A.7. ANÁLISIS DE RESULTADOS -- DISCUSIÓN

DISCUSIÓN
1. ¿Cuál fue la función obtenida en la relación Vo2 vs tiempo y qué tipo de ecuación se obtuvo para la
tasa metabólica del insecto estudiado?
2. ¿Cómo fue el grado de relación entre la variable dependiente e independiente en el caso de Vo2 vs
tiempo? Ya que conforme trascurría el tiempo el invertebrado tendía a hacer un gasto mayor de
oxigeno que al principio.
3. Analiza el grado de dispersión de los datos y su relación con los errores de medición para la relación
Vo2 vs t. hay un margen de error porque al realizar la toma de datos trascurría demasiado rápido o
lento que algunos valores.
4. Mencionar que significa la pendiente en esta relación Vo2 vs t.
Esta nos permite determinar el consumo de oxigeno con respecto al tiempo trascurrido.
5. Comparar los pesos de los insectos y las tasas metabólicas. A mayor tamaño del ejemplar mayor
será su consumo de oxígeno en este caso su tasa metabólica es dependiente al tamaño.
6. ¿Qué relación (función) se obtuvo entre el peso y las tasas metabólicas de todos los insectos?
Determinar las tasas metabólicas de los ejemplares con su peso ya que aquí hay una gran
dependencia entre esto
7. ¿Qué significa la pendiente obtenida (Tasa metabólica vs peso)? La determinación del consumo
energético con respecto a su peso.

8. Mencionar si se cumplieron los objetivos de la práctica

Se han cumplido los objetivos ya que se midieron las cantidades de oxígeno y que ocurren en el
interior de los sistemas biológicos
9. Mencionar si se acepta o rechaza la hipótesis alterna.
Se acepta la hipótesis alternativa ya que es dependiente el peso de los ejemplares con el consumo
energético
10. ¿Qué tipo de unidades se utilizaron?
De longitud y volumen.
11. ¿Qué simbología le corresponde a estas unidades? cm y Vo2
12. ¿Qué tipo de errores se cometieron? Ya que no se había colocado la malla para impedir que las
sustancias cayeran a los ejemplares, y uno de ellos murió.
13. ¿Con qué incertidumbre se trabajó en cada una de las mediciones?
14. ¿Qué tipo de hipótesis se formuló?
 Hipotesis nula: el tamaño de los ejemplares es independiente al consumo energetico.

Hipotesis alternativa: el tamaño de los ejemplares es dependiente al consumo energetico.

A.10. BIBLIOGRAFÍA.

 Ball D., Fisicoquímica, Editorial Thomson, (2004) Lange, N.,

 Manual de Química. McGraw-Hill(1998). Laidler , K.,
 Fisicoquímica, 1a. Edición CECSA, , 1997.