PRACTICA #2: AMINOACIDOS: PROPIEDADES QUIMICAS

PRACTICE #2: AMINO ACIDS: CHEMICAL PROPERTIES

MAYERLY MOLINA ASCANIO

DIANA PAOLA RINCON VILLAMIZAR

NATALY JOHELY ORTEGA HERRERA

XIMENA TATIANA JAIMES HERRERA

FIGURA TOMADA POR:

MAYERLY MOLINA ASCANIO

INTRODUCCION

RESUMEN

ESTUDIANTES DE BIOQUIMICA
ESTUDIAN INGENIERIA AGRONOMICA EN LA UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
1: DETERMINACION DE PI EN 2 2,51
AMINOACIDOS PUROS 3,5 7,92
4 8,56
Se realizó una titulación la cual en la
4,5 8,81
bureta se colocó NaOH, en el vaso de
5 9,11
precipitado lisina. (Figura 1).
5,5 9,31
6 9,41
6,5 9,56
7 9,62
NaOH 7,5 9,8
8 10,07
8,5 10,15
9 10,39
9,5 10,51
Lysina 10 10,67
10,5 10,78
11 10,97
11,5 11,16
PH metro 12 11,31
12,5 11,54
13 11,65
Figura 1: titulación 13,5 11,78
La titulación se inició agregando 3 gotas 14 11,89
de fenolftaleína, (su función es la de un 14,5 11,96
indicador de pH que en disoluciones 15 12,06
ácidas permanece incoloro, pero en Tabla 1: ml de NaOH en la lisina
disoluciones básicas toma un color rosado 2 IDENTIFICACION DE
con un punto de viraje entre pH=8,2 y COLORACION DE AMINOACIDOS
pH=10.) a la lisina, esto para indicar
mejor el pH de la sustancia, luego se fue En esta práctica se utilizó una muestra de
agregando 0,5 ml de NaOH a vaso maíz, el cual contiene Usina y
precipitado donde se encuentra la lisina. triptófano. El componente químico
principal del grano de maíz es el almidón,
A medida que se le agregaba NaOH la al que corresponde hasta el 72-73 por
mezcla se fue haciendo color violeta, y se ciento del peso del grano. Otros hidratos
obtuvieron los siguientes resultados: de carbono son azúcares sencillos en
(Tabla 1) forma de glucosa, sacarosa y fructosa.

En este proceso se realizaron 3 muestras,

ml NaOH PH
una en cada tubo de ensayo, en el primero
0 1,9
se agregó muestra patrón, que es una
0,5 2,09 mezcla de 4 aminoácidos (tirosina, valina,
1 2,2 lisina, y triptófano), una muestra blanco y
1,5 2,36 la muestra de maíz macerado.(figura 2)

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Figura 2: maíz macerado
Se procede a agregarle 5 gotas de ninhidrina
a la mezcla patrón y a la muestra blanco, a la
muestra de maíz macerado se le agrega
ácido sulfúrico (ácido fuerte).se procede a
llevar las tres muestras a baño maria.(figura
3)
Figura 3: muestras en baño maria
A los 10 minutos se retira del baño maria la
muestra blanco y la muestra patrón.
La muestra de maíz se deja 30 minutos, la
muestra blanco y patrón se dejan 10
minutos, hasta que esta última de una
coloración violeta. (Figura 4)
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Figura 4: muestra patrón calentada en baño
maria después de 10 minutos.
Pasado los 30 minutos se procede a retirar
del baño maria la muestra de maíz
macerado, se procede a filtrar y se obtiene
un líquido sin grumos. (Figura 5)
Figura 5: se filtra la muestra de maíz
Se procede a colocar este resultado en baño
maria 5 minutos, luego se le agregan 10
gotas de ninhidrina y se deja en baño maria
hasta que de una coloración violeta, lo cual
indica la presencia de aminoácidos.
La muestra final no se logra obtener el color
violeta por falta de tiempo. (Figura 6)
 Se escogió un extremo del papel para
proceder a colocar las muestras de los
aminoácidos con un capilar
(Lys,Tirosina,Valina,Triptofano)repetición de
5 veces y dejar secar en cada repetición.

Figura 6: muestra final del proceso realizado

al maíz.

IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS LIBRES

MAIZ POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
Se realiza la marcación en la parte superior e
inferior de 2cm del borde del papel que esta
sobre la placa de silica gel.
Figura 8: Aplicación de las diferentes
muestras
Se procede a mezclar estos cuatro
aminoácidos en un tubo de ensayo y a
aplicarlos con un capilar en la placa de silica
gel.

También se aplica al papel la muestra

problema en este caso maíz y kumis.

Figura 7: Marcación del papel

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Figura 9: Aplicación de la mezcla de los
aminoácidos

Esta cámara cromatografía donde se va a

introducir la placa de silica gel contiene
butanol, amónico, agua (12:3:5)

Figura 12: Calentamiento de la placa

Figura 10: Se introdujo la placa a la cámara

cromatografíca.

Se saca la placa de la cámara y dejar secar a

temperatura ambiente y atomizar con
ninhidrina.

Figura 13: se observan los resultados finales

Figura 11: Se saca la placa de la cámara

Calentar la placa y el papel cromatografico a

150º durante 2 a 3 minutos.

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 Z

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RESULTADOS Y DISCUSION 1: DETERMINACION DE PI EN
AMINOACIDOS PUROS.

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El aminoácido lisina tiene un pH de 9,91,
el cual es básico, al agregarle
fenolftaleína se mantuvo su pH y al ir
agregando 0,5 ml de NaOH esta se tornó
de color fucsia, lo cual nos indica que su
pH es básico (figura )
En la determinación de punto isoeléctrico
del aminoácido puro (lysina) se obtuvo
los siguientes resultados (TABLA 1).
14 ml NaOH VS PH
12
10
8 aminoácidos,
PH
Al realizar el procedimiento requerido de
estas 3 muestras en los tubos de ensayo se
obtuvieron los siguientes resultados
(figura)
En el tubo de ensayo 1 (mezcla patrón) se
obtuvo un color violeta el cual nos indica
la presencia de aminoácidos.
En el tubo 2 (agua con ninhidrina) no se
obtuvo color violeta, lo cual nos indica
que no hay presencia de aminoácidos
En el tubo 3 (maíz macerado) está esta
muestra con ácido sulfúrico, aquí aún le
falta parte del proceso para determinar los

2 Tubo 3 (muestra de
Tubo 1 (muestra
0 patrón) maíz macerado)
1 3 5 7 9 11 ML
13 NaOH
15 17 19 21 23 25 27 29

Tubo 2 (muestra
TABLA 1: blanco)

NaOH

Lysina

FIGURA:
PH metro
Al filtrar el maiz se procedio a colocarlo
en baño maria para que este se redujera y
nos diera el color violeta el cual nos
FIGURA:
indica presencia de aminoacidos. En este
2: IDENTIFICACION DE procedimiento falto dejar la muestra mas
COLORACION DE AMINOACIDOS tiempo en baño maria para que se
observara mejor este color violeta , pero

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por falta de tiempo se procedio a dejarla Sexta muestra: (maíz) Esta muestra
asi (figura ) obtuvo 2 manchas, en la mancha 1 si
reacciono al yodo y tuvo una corrida de 1
cm. la Mancha 2 también reacciono al
yodo y tuvo una corrida de 6.2 cm.
Séptima muestra: (Maíz) si reacciono al
yodo y tuvo una corrida de 5.9 cm
Octava muestra: (maíz) si reacciono al
yodo y tuvo una corrida de 6 cm
Muestra de maíz
desnaturalizada Se procede a aplicar ninhidrita para que
se evidencien más los aminoácidos que no
reaccionaron al yodo. (Figura)

FIGURA:
3: IDENTIFICACION DE
AMINOACIDOS LIBRES POR
Figura:
CROMATOGRAFÍA.
Después de aplicar ninhidrina a la placa
Después de realizar la cromatografía se
silica gel se obtuvo los siguientes
obtuvo los siguientes resultados.
resultados
Primer aminoácido: (lysina) no reacciono
Las muestras de los aminoácidos se
con el yodo
tornaron de color violeta, lo cual nos
Segundo aminoácido: (tirosina) si indica la presencia de aminoácidos. Se
reacciono al yodo y tuvo una corrida de 7 observa mejor la reacción del aminoácido
cm 1 (lysina) y el aminoácido 3(valina)
(figura)
Tercer aminoácido: (valina) no reacciono
con el yodo
Cuarto aminoácido: (triptófano) si
reacciono al yodo y tuvo una corrida de
6.2 CM
Quinto aminoácido: (mezcla de
aminoácidos) si reacciono al yodo y tuvo
una corrida de 7.4 CM

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Figura:
conclusiones

La desnaturalización de proteínas seda

por cambios bruscos del medio donde
esta se encuentra. Los factores tales como
temperatura, pH, sales ,ácidos minerales
fuertes y metales pesados afectan las
interacciones dela estructura terciaria de
la proteína demanera reversible o
irreversible disminuyendo así la
solubilidad de la misma.

 
El desdoblamiento de la proteína nosolo
desnaturaliza su estructura, sinoque
inactiva considerablemente lafunción
biológica que tiene la misma,por ejemplo,
el impacto de lastemperaturas altas que
estén porencima de los 40°C o los 50°C
hacenque la proteína sometida se
vuelvainstable e inactiva

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