Determinación de elementos minerales: calcio y

hierro en alimentos
Objetivo
● Determinar el Calcio en muestras de alimentos utilizando un método
complejométrico, analizando las bondades del método y su aplicación en la práctica.
● Determinar Hierro en muestras de alimentos utilizando un método
espectrofotométrico, analizando las bondades del método y su aplicación en la
práctica.
Justificación
-Determinación de calcio
El calcio se precipita como oxalato insoluble en las soluciones amoniacales a pH 4 (para
impedir interferencias de los iones fosfato), el cual se disuelve en ácido sulfúrico y el ácido
oxálico que se libera es valorado con una disolución de permanganato de potasio de
concentración conocida.
-Determinación de Calcio en el Alimento método volumétrico
Cuando se añade a una muestra conteniendo Calcio, ácido
etilendiaminotetracético (EDTA) o su sal, los iones se combinan con el EDTA. Se Puede
determinar Calcio en forma directa, añadiendo NaOH para elevar el pH de la muestra entre
12 y 13 unidades.
-Determinación de Hierro método espectrofotométrico
En un análisis espectrofotométrico, la ortofenantrolina reacciona con él, originando
un complejo de color rojo característico que absorbe notablemente en las regiones del
espectro visible de alrededor de 505 nm. El no presenta absorción a esa longitud de onda y
debe ser reducido a mediante un agente reductor apropiado, como el clorhidrato
de hidroxilamina. La reacción es cuantitativa y reproducible en un amplio intervalo de pH,
siendo el óptimo entre 6 y 9.
Normas
➢ NMX-F-026-SCFI-2008. ALIMENTOS-GRASAS VEGETALES O ANIMALES
–DETERMINACIÓN DE CONTENIDO DE METALES (Cromo, cobre, fierro, níquel
y manganeso) –MÉTODO DE PRUEBA
Objetivo y campo de aplicación
Esta norma establece el procedimiento de prueba para la determinación del contenido de
metales en aceites y grasas vegetales o animales crudas o refinadas que puedan contener
trazas de metales que pueden estar presentes en la forma de compuestos metálicos
solubles.
Aparatos
Espectrofotómetro de absorción atómica con corrección de fondo tipo Zeeman o
Smith-Hieftje, equipado con sistema de horno de grafito y lámparas de cátodo hueco o de
descarga sin electrodos apropiadas.
Longitud de onda
Límites

https://caisatech.net/uploads/XXI_2_MXD_C10_NMX-F-026-SCFI-2008_R0_18JUN2008.pd
f

➢ Norma Oficial Mexicana NOM-131-SSA1-2012, Productos y servicios. Fórmulas

para lactantes, de continuación y para necesidades especiales de nutrición.
Alimentos y bebidas no alcohólicas para lactantes y niños de corta edad.
Disposiciones y especificaciones sanitarias y nutrimentales. Etiquetado y
métodos de prueba
Objetivo y campo de aplicación
Esta norma establece las disposiciones y especificaciones sanitarias, nutrimentales y de
etiquetado que deben cumplir:
- las fórmulas para lactantes,
- las fórmulas para lactantes con necesidades especiales de nutrición,
- las fórmulas de continuación,
- las fórmulas de continuación para necesidades especiales de nutrición, y
- los alimentos y bebidas no alcohólicas para lactantes y niños de corta edad.
Así como los métodos de prueba.
Esta norma es de observancia obligatoria para las personas físicas y morales que se
dedican al proceso y/o importación de los productos objeto de la misma, que van a ser
comercializados en el territorio nacional.
Límites
https://www.dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5267447&fecha=10/09/2012

Metodología

Propiedades físicas y químicas de los reactivos a utilizar

Para la determinación de calcio
➔ ácido clorhídrico concentrado

https://quimica.unam.mx/wp-content/uploads/2017/05/HDS-Acido-clorhidrico-NOM-0
18-2015-MARY-MEAG-Hoja-de-datos.pdf

➔ ácido nítrico concentrado

 http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=183&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

➔ ácido cítrico 30%

http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=855&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

➔ Cloruro de amonio 5%
 http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=1051&p_edit=&p_version=2
&p_lang=es

➔ Verde de bromocresol al 0.04%

C21H14Br4O5S
PM: 698.01
polvo blanco o ligeramente amarillo. Muy ligeramente soluble en agua, soluble en
alcohol y en soluciones alcalinas. Cambia de color amarillo a azul en un intervalo de
pH 4 a pH 5.4

➔ Oxalato de amonio concentrado

http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=1036&p_edit=&p_version=2
&p_lang=es

➔ ácido sulfúrico 10%

 http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=362&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

➔ Amoniaco

http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=414&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

➔ Permanganato de potasio 0.2M

 http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=672&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

Para la determinación de hierro

➔ Fenantrolina
Fórmula molecular: C12H8N2 X H2O
PM:198.22
Aspecto: sólido blanco o amarillo claro
Punto de fusión:94°C
Punto de ebullición:93.5
Solubilidad en agua: 2.69 g/L
Reactividad: agente reductor
Estabilidad: estable en condiciones normales, higroscópico.
Incompatibilidad: ácidos fuertes y agentes oxidantes fuertes

➔ Clorhidrato de hidroxilamina

➔ Amoniaco
● Fórmula: NH3
 ➔ Sulfato de amonio ferroso
● Formula : H8FeN2O8S2 · 6H2O
● Peso molecular : 392,14 g/mol
● Aspecto: Sólido
● Olor: Sin datos disponibles
● Punto de fusión: 100°C
● Estable bajo las condiciones de almacenamiento recomendadas
● Condiciones a evitar: Luz/Aire
● Materiales incompatibles: ácidos fuertes, agentes oxidantes fuertes

Cálculos y preparaciones de los reactivos

Para la determinación de calcio. Método 1
➔ ácido cítrico 30%
%m/v= (m/v)*100
m=30 g
➔ Cloruro de amonio 5%
%m/v=(m/v)*100
m=5 g
➔ Verde de bromocresol al 0.04%
%m/v=(m/v)*100
m=0.004 g

➔ ácido sulfúrico 10%

%v/v=(v soluto/100 ml)*100
V soluto=10 ml
➔ Permanganato de potasio 0.2M
M=m/v*PM
m=MxVxPM
 m=(0.2 mol/L)(0.1 L)(158 g/mol)=3.16 g

Para determinación de hierro

➔ Permanganato de potasio 0.1 N
M=m/v*PM
m=MxVxPM
m=(0.1 eq/L)(0.1 L)(158 g/eq)= 1.58 g
Cálculos y preparación de la muestra
NA

Precauciones
- Utilizar equipo de protección como guantes, bata, gafas de laboratorio.
- Para los ácidos fuertes utilizar la campana de extracción
- En la preparación de disoluciones con ácido, colocar primero una cama de agua y
después adicionar el ácido, nunca agregar agua al ácido.
- No comer, no beber y no fumar durante el trabajo experimental

Medidas emergentes
➔ ácido clorhídrico concentrado
● Use el equipo de protección personal adecuado. Evite el contacto directo con la piel,
ojos y ropa. No coma, fume o beba cuando manipule este producto. En caso de que
la ventilación no sea apropiada, utilice un respirador para vapores.
● En caso de exposición:

● En todos los caso buscar atención médica de inmediato

● Si la sustancia está involucrada en un incendio, utilice equipo de respiración
autónoma (ERA), traje completo, guantes y botas. Usar agua en forma de neblina
para enfriar los contenedores expuestos al fuego. Evite que el agua utilizada entre
en contacto con el medio ambiente, como puede ser alcantarillas o tierra.
● En caso de derrame o fuga accidental: No permita que la sustancia entre en
contacto con el drenaje. Recupere el líquido cuando sea posible, neutralice con una
sustancia alcalina y después absórbase con un material inerte.

➔ ácido nítrico concentrado

http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=183&p_edit=&p_version=2&p_lang=
es

➔ ácido cítrico 30%

● Usa equipo de protección personal adecuado, el área de trabajo debe contar con
sistema de ventilación adecuado, regaderas y lavaojos. Los contenedores deben
disponer de válvulas de seguridad para evitar la sobrepresión.

➔ Cloruro de amonio 5%

➔ Verde de bromocresol al 0.04%

● Usar equipo de protección adecuado
● En caso de inhalación: Proporcionar aire fresco
● En caso de contacto con los ojos: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios
minutos.
● En caso de ingestión: Enjuagarse la boca.
● En todos los casos consultar a un médico
● En caso de incendio: Coordinar las medidas de extinción con los alrededores agua
pulverizada, espuma, polvo extinguidor seco, dióxido de carbono (CO₂)
● En caso de vertido accidental: Mantener el producto alejado de los desagües y de
las aguas superficiales y subterráneas. Recoger mecánicamente.Colocar en
recipientes apropiados para su eliminación. Ventilar la zona afectada.

➔ Oxalato de amonio concentrado

➔ ácido sulfúrico 10%

➔ Amoniaco
 ➔ Permanganato de potasio 0.2M
● Usar el equipo de protección adecuado.
● En caso de inhalación: Proporcionar aire fresco
● En caso de contacto con la piel: lávese inmediata y abundantemente con mucho
agua. Necesario un tratamiento médico inmediato, ya que auterizaciones no tratadas
pueden convertirse en heridas difícil de curar.
● En caso de contacto con los ojos: aclarar inmediatamente los ojos abiertos bajo
agua corriente durante 10 o 15 minutos y consultar al oftalmólogo. Proteger el ojo
ileso.
● En caso de ingestión: Lavar la boca inmediatamente y beber agua en abundancia.
Enjuáguese la boca con agua (solamente si la persona está consciente). Llamar al
médico inmediatamente. En caso de tragar existe el peligro de una perforación del
esófago y del estómago (fuertes efectos cauterizantes).
● En caso de incendio: Emplear medidas coordinadas de lucha contra incendios en el
entorno agua, espuma, espuma resistente al alcohol, polvo extinguidor seco, polvo
ABC

Para la determinación de hierro

➔ Fenantrolina
● Usar equipo de protección personal como gafas herméticas, guantes, botas de
caucho natural, traje impermeable, respirador de vapor y aparato de respiración
autónomo.
● En caso de indigestión: En caso de pérdida del conocimiento, nunca dar a beber ni
provocar el vómito
● Contacto ocular: : Lavar los ojos con abundante agua por al menos durante 15
minutos, levantando los párpados superior e inferior para retirar cualquier
acumulación en estas superficies hasta recibir atención médica. Si se usan lentes de
contacto, estos se deben retirar de los ojos
● En caso de inhalación: Trasladar la persona al aire fresco. Retirar las prendas
ajustadas y si respira con dificultad suministrar oxígeno. Si no respira administrar
respiración artificial boca a boca
● En todos los casos acudase inmediatamente al médico (si es posible, muéstrele la
etiqueta).
● En caso de derrame: no tocar el producto derramado. Aspirar o barrer el material y
depositarlo en recipientes apropiados con cierre hermético, cerrados, limpios, secos
y etiquetados. Evitar la generación de polvo.
● En caso de incendio: Utilizar polvo químico seco, dióxido de carbono, agua en forma
de aerosol o niebla y espuma antialcohol.

➔ Clorhidrato de hidroxilamina

http://www.ilo.org/dyn/icsc/showcard.display?p_card_id=709&p_edit=&p_version=2&
p_lang=es

➔ Amoniaco

➔ Sulfato de amonio ferroso

● Uso de equipo de protección adecuada
● En caso de inhalación: Proporcionar aire fresco
● En caso de contacto con la piel: Es necesario un tratamiento médico inmediato, ya
que auterizaciones no tratadas pueden convertirse en heridas difícil de curar
● En caso de contacto con los ojos: aclarar inmediatamente los ojos abiertos bajo
agua corriente durante 10 o 15 minutos y consultar al oftalmólogo. Proteger el ojo
ileso.
 ● En caso de ingestión: Lavar la boca inmediatamente y beber agua en abundancia
● En todos los casos acudir inmediatamente al médico.
● En caso de incendio: Coordinar las medidas de extinción con los alrededores agua
pulverizada, espuma, polvo extinguidor seco, dióxido de carbono (CO2)
● En caso de vertido accidental: Absorber con una substancia aglutinante de líquidos
(arena, harina fósil, aglutinante de ácidos, aglutinante universal). Colocar en
recipientes apropiados para su eliminación.
Desarrollo de la técnica
Para calcio. Método 1
1. Calcinar a 500°C 5 g de muestra, lavar las cenizas en un vaso de 250 ml con 40 ml
de ácido clorhídrico concentrado y 60 ml de agua. Adicionar 3 gotas de ácido nítrico
concentrado y hervir durante 30 minutos. Enfriar y transferir a un matraz volumétrico
de 250 ml, aforar, mezclar y filtrar.
2. Transferir 10 ml a un vaso de 250 ml, aforar, mezclar y filtrar. Transferir 10 ml a un
vaso de precipitados de 250 ml, agregar 1 ml de solución de ácido cítrico 30%, 5 ml
de solución de cloruro de amonio 5%, diluir a 100 ml con agua y llevar a ebullición.
3. Adicionar 10 gotas de solución de verde de bromocresol y 30 ml de solución
saturada de oxalato de amonio caliente ( si se forma un precipitado disolverlo con
ácido clorhídrico concentrado), neutralizar muy lentamente con solución de
amoniaco con agitación constante hasta que el indicador cambie de color (cambio de
pH 4.4 a 4.6).
4. Colocar el vaso a baño maría durante 30 minutos, dejar enfriar y filtrar en un matraz
volumétrico de 100 ml, adicionar 50 ml de ácido sulfúrico 10% y aforar con agua.
5. Calentar el filtrado de 70 a 80°C y titular con permanganato de potasio 0.2 M hasta
color rosa persistente.

Para hierro
1. Preparar una curva de calibrado tal como se describe en la práctica 11.2
2. Pesar una cantidad de muestra que contenga entre 0.1 y 0.5 mg de hierro en un
crisol de cenizas calcinado y tarado.
3. Hacer cenizas a 525°C
4. Disolver las cenizas con una pequeña cantidad de ácido sulfúrico diluido (aprox 1:5)
y filtrar sobre vaso de pp de 100 ml; lavar rápidamente con pequeñas porciones de
agua destilada hasta completar un volumen total no superior a 50 ml.
5. Transferir a un matraz aforado de 1 litro, enrasar y homogeneizar; 1 ml de esta
disolución madre contiene 0.1 mg de hierro ( si no se ha pesado exactamente la
cantidad indicada, efectuar la corrección oportuna).
6. Preparar disoluciones de trabajo, transfiriendo a vasos de precipitados de 100 ml
con 50 ml de agua destilada exenta de hierro, porciones de 0 ml (blanco), 1 ml, 2 ml,
3 ml, 4 ml y 5 ml de disolución madre, junto con 5 ml de solución de clorhidrato de
hidroxilamina y 2 ml de solución reactivo de ortofenantrolina.
7. Comprobar y corregir el pH (entre 6 y 9), ayudándose, si ello fuera necesario, de
amoniaco o de ácido sulfúrico.
8. Transferir las disoluciones de trabajo a matraces aforado de 100 ml, enrasar y
homogeneizar.
9. Esperar un tiempo mínimo de 1 hora y leer las absorbancias a 505 nm frente al
blanco.
 10. Construir un gráfica representando en abscisas las concentraciones en mg/L y en
ordenadas la absorbancia (las disoluciones de trabajo de 1,2,3,4 y 5 ml de disolución
madre corresponde respectivamente a concentraciones de 1,2,3,4 y 5 mg/L)

Obtención de la curva de calibrado

1. Disolver 0.702 g de sulfato ferroso amónico, con ayuda de unas gotas de ácido
sulfúrico concentrado, en un Erlenmeyer de 250 ml.
2. Añadir, con una bureta, disolución de permanganato de potasio hasta coloración
rosa persistente.
3. Transferir a un matraz aforado de 1 L, enrasar y homogeneizar; 1 ml de esta
disolución madre contiene 0.1 mg de hierro ( si no se ha pesado exactamente la
cantidad indicada, efectuar la corrección oportuna).
4. Preparar disoluciones de trabajo, transfiriendo a vasos de precipitados de 100 ml
con 50 ml de agua destilada exenta de hierro, porciones de 0 ml (blanco), 1 ml, 2 ml,
3 ml, 4 ml y 5 ml de disolución madre, junto con 5 ml de solución de clorhidrato de
hidroxilamina y 2 ml de solución del reactivo de ortofenantrolina.
5. Comprobar y corregir el pH (entre 6 y 9), ayudándose, si yo fuere necesario de
amoniaco o de ácido sulfúrico.
6. Transferir las disoluciones de trabajo a matraces aforados de 100 ml, enrasar y
homogeneizar
7. Esperar un tiempo mínimo de 1 hora y leer las absorbancias a 505 nm frente al
blanco.
8. Construir un gráfica representando en abscisas las concentraciones en mg/L y en
ordenadas la absorbancia (las disoluciones de trabajo de 1,2,3,4 y 5 ml de disolución
madre corresponde respectivamente a concentraciones de 1,2,3,4 y 5 mg/L)

Cronograma

Actividad 04-Mar-2022 11-Mar-2022

Determinación de calcio

Calcinación, lavado de la X
muestra y adición de HCl

Transferir la muestra al vaso X

de pp, agregar C₆H₈O₇ 30%,
NH4Cl 5%, diluir y ebullir.

Adición de verde de X
bromocresol y (NH4)2C2O4

Baño maría, filtrar, adicionar X

H₂SO₄ 10% y aforar

Calentar y titular con KMnO₄ X

0.2 M

Cálculos de resultados X
 Determinación de hierro (espectrofotometría)

Disolver sulfato ferroso X

amònico con H₂SO₄

Añadir KMnO₄ con bureta X

Transferir a matraz aforado X

y homogeneizar

Preparación de dln (0 ml, 1 X

ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml y 5 ml)

Corregir pH (6-9) X

Transferir dln a matraces X

aforados y enrasar

Leer abs 505 nm X

Construir gráfica Co (mg/l) X

vs. dil

Tarar el crisol X

Pesar la muestra en un X
crisol

Calcinar la muestra 525ºC X

Disolver con H₂SO₄ y filtrar X

Transferir muestra a matraz X

aforado y aforar.

Preparación de disoluciones X

Corregir pH (entre 6-9) X

Transferir a matraces X
aforados y enrasar

Leer abs 505 nm X

Construir gráfica Co (mg/l) X

vs. dil

★ Determinación de Calcio

Fundamento y manejo de equipo: NA

Diagrama de flujo
 ★ Determinación de hierro por espectrofotometría.

Fundamento del equipo (espectrofotómetro)

Un espectrofotómetro es un aparato que
se usa para determinar cuál es el haz de
radiación electromagnética o luz y así
identificar, calificar y cuantificar cómo es
su energía. También permite determinar
cuál es su eficiencia, sensibilidad,
resolución y rango espectral.
Su funcionamiento se basa en la luz de la
lámpara especial que posee, que es
seguida por medio de un conector que
selecciona y separa la luz de la longitud
de onda, para luego pasar por una
muestra. La intensidad de la luz que sale
de esa muestra es captada y se compara
con la intensidad de la luz que incidió en
esa muestra, con esa información se
puede calcular la transmitancia, la cual dependerá de la concentración de la sustancia.

Diagrama de flujo
Comparación de métodos.

Determinación de calcio:comparación de métodos

Método 1. Manual Método 2. Volumétrico Método 3. Espectroscopia

con EDTA de absorción atómica

- Emplea 5 g de - Usa 2.5 g de - Empleo de

muestra alimento espectrofotómetro
- El indicador es verde - Utiliza indicador azul de absorción
de bromocresol de hidroxinaftol atómica
- Se valora con - Emplea EDTA - El tamaño de
permanganato de - Se basa en que el muestra varía
potasio. EDTA se combina dependiendo del
- Se basa en la con el calcio . El alimento
precipitación de calcio es - Se toman 3
calcio como oxalato determinado de muestras
insoluble en forma directa, - La digestión de las
soluciones añadiendo NaOH muestras se realiza
amoniacales de pH 4 para elevar el pH de en un horno de
. la muestra a 12 y 13, microondas
- Se usan pH ácidos y que de esta forma - Se emplea una
el Mg no interfiera, solución de
además se utiliza un concentración de
indicador que solo (1000+/-1)mg/mL al

Determinación de hierro: comparación
Método 1. Manual
➔ Se usa una cantidad de
muestra que contenga
entre 0.1 y 0.5 mg de
hierro
➔ Los reactivos se utilizan
a diferentes
concentraciones
➔ Más precisa
➔ Utiliza
espectrofotómetro
➔ Se realiza una curva
estándar
➔ La muestra se calcina a
525°C en la mufla
Bibliografía
Método 2
Para calcio
Método volumétrico
combina con calcio. 5% de 𝐻𝑁𝑂3
- Se utilizan pH
básicos
Método 2. Método 3. Determinación
por espectrofotometría
➔ Se utilizan 2.5 g de ➔ Uso de
muestra espectrofotómetro
➔ Menos precisa ➔ No especifica el
➔ Compara la tamaño de muestra
intensidad de color ➔ empleo de mufla
de la muestra con para calcinar la
varios estándares muestra a 550 °C
➔ No se utiliza mufla, ➔ Empleo de diversos
en su lugar, la reactivos
muestra es ➔ Emplea pHmetro
calcinada utilizando
un mechero y tripie.
Para hierro
1. Pesar una muestra de 2.5 g del alimento en el crisol
2. Coloque un crisol con alimento sobre un triángulo de porcelana sostenido por un
arillo o tripie, caliente con mechero.
3. Continúe calentando hasta que la muestra de alimento se haya vuelto ceniza (blanco
grisáceo). No permita que la ceniza salga del crisol
4. Retire el mechero y deje el crisol en el triángulo de porcelana mientras se enfría
5. Comience a calentar el otro alimento hasta tener cenizas
6. Retire el mechero y deje el crisol en el triangulo de porcelana hasta que se enfria
7. Cuando se haya enfriado la primera muestra, transfiera todo el residuo de cenizas a
un vaso de pp de 50 ml. Añada 5 ml de de HCl 2M al vaso y agite vigorosamente
durante 1 min. Agregue 3 ml de agua destilada
8. Prepare un sistema de filtración que incluya soporte de anillo o soporte para embudo
y el embudo. Coloque un papel filtro en el embudo y un tubo de ensayo bajo este
último para recoger el filtrado
9. Vierta la mezcla del vaso de pp al embudo de filtración y recoja el filtrado en el tubo.
10. Agrugue 2.5 ml de dln de KSCN 0.01 M al tubo de ensayo. Sello con el tapón e
invierta con cuidado el tubo para mezclar la disolución
11. Compare el color rojo resultate con lo estándares
12. Anote las concentraciones aproximadas de hierro presentes en el amuestra, con
base a los estándares

http://www.ingenieriaquimica.buap.mx/SGC/ANALISIS/Documentos/analisis/QUIMICA
%20ANALITICA/ACT-TE-INQM%2013-03.pdf

Método 3
Para calcio:
 1. La selección de la muestra se realizó de acuerdo con la Encuesta Nacional de
Nutrición. El muestreo de los productos industrializados, como arroz, leche, quesos,
pastas, tortillas, pan, entre otros.
2. Para cada prueba se tomaron 3 muestras, para los alimentos de origen agrícola el
tamaño de muestra fue de (0.1-0.2)kg
3. Para el caso de las carnes el tamaño de muestra fue de (0.1-0.5)kg
4. La muestras se cocinan de manera habitual pero sin agregarles ningún aditivo y de
ser el caso empleando agua desionizada
5. Posteriormente las muestras se homogenizan y se liofilizan
6. La digestión de las muestras se realiza en un horno de microondas
7. La muestra patrón de calcio se prepara a partir de una disolución patrón de
(1000+/-1) mg/mL al 5% de 𝐻𝑁𝑂3
8. Se llevó al espectrofotómetro la muestra blanco y después la muestra patrón
9. Cada muestra se midió en el espectrofotómetro a 422.7 nm

Para hierro:

1. En crisoles colocar las muestras de los alimentos

2. Llevar los crisoles a la mufla durante 5 horas a una temperatura de 550 °C
3. Se añade 5 mL de HCl concentrado a cada crisol y se verte el ácido en las paredes
del crisol.
4. El ácido se evapora por calentamiento de los crisoles en baño maría controlando la
temperatura con un termómetro a 90°C ± 5 por un tiempo de 1 h aproximadamente,
sin dejar que ebulla la solución.
5. Se redisuelve el residuo restante mediante la adición de 2 mL de HCl concentrado,
teniendo cuidado de que la solución no se derrame fuera del crisol.
6. Se evaporan los residuos durante 5 minutos tapando los crisoles con sus respectivas
tapas en baño maría.
7. Se dejan enfriar los crisoles hasta que alcanzan la temperatura del laboratorio y se
transfieren cuantitativamente el digestado a un matraz volumétrico de 50 mL y se
afora con agua destilada
8. Para las muestras controles y blancos de análisis se miden 15 mL con una bureta de
50 mL y se trasvasa a un matraz volumétrico de 100 mL
9. Para las muestras de alimento se miden 10 mL con una bureta o de 50 mL y se
trasvasa a un matraz volumétrico de 100 mL.
10. Se añade a cada uno de los matraces 1 mL de la solución clorhidrato de
hidroxilamina al 10%, se agita vigorosamente tres veces el matraz y se deja reposar
durante 5 minutos.
11. Se añade a cada uno de los matraces 5 mL de la solución buffer de acetato de
sodio/ácido acético glacial, ajustándolos a un pH de 3.01 con la ayuda de un
pHmetro.
12. Se agrega a cada uno de los matraces 6 mL de la solución orto-fenantrolina al 0.1%,
se afora con agua destilada, luego se invirten tres veces y se dejan reposar por 30
minutos tiempo que obtiene la máxima coloración el complejo ferroína.
13. Se enciende previamente el espectrofotómetro mientras alcanza sus parámetros
óptimos.
14. Se ajusta la línea base del usuario por medio de la lectura del solvente que se utiliza
en todo el análisis.
15. Luego se realizan las lecturas de los blancos de análisis, muestras control y
muestras de alimentos en el Espectrofotómetro UV/Vis a 511 nm
16. Se calcula la concentración de Fe total en mg/L (ppm) de la solución ácida digeridas
de las cenizas utilizando los datos de la curva de calibrado de los tres lotes,
utilizando la siguiente ecuación: 𝐴𝑐 = 𝑎 + 𝑏[𝐹𝑒]𝑑