Laboratorio de Análisis Instrumental – Universidad Santiago de Cali
CUANTIFICACION DE CALCIO PRESENTE EN LA LECHE, POR ESPECTROSCOPIA DE
ABSORCION ATOMICA
Stephany Bedoya, Francisco Molineros, Leidy Carolina Peña, David Valencia.
Práctica No 4. Universidad Santiago de Cali
Enviado abril 12 2022

Resumen
En la presente práctica podemos observar que se
realizaron la preparación de soluciones, estándares y la
muestra utilizada, para realizar la cuantificación de Ca
en el espectrofotómetro. Se inició preparando solución
de La al 1%, luego se realizó la preparación de la
solución estándar de calcio, en la que se empezó con
una solución patrón de calcio, para con esta preparar
una solución de calcio de 100ppm, para finalmente, a
partir de la solución de calcio de 100ppm y la solución
de La al 1%, preparar los estándares junto con el
blanco y realizar la curva de calibración, Luego se
preparó la muestra a partir de 10ml de leche
pasteurizada y 1ml de HCl concentrado, tomando el
sobrenadante de esta y adicionando solución de lantano
y agua destilada, pasaremos a cuantificar el Ca
presente en la muestra con el espectrofotómetro. En el
espectrofotómetro se realizó la lectura de los
estándares y la muestra por triplicado, sus resultados se
promediaron y se obtuvieron los siguientes: Estándar 1
(0.1128), estándar 2 (0.2117), estándar 3 (0,.3728),
estándar 4 (0.5377), estándar 5 (0.7197), muestra
diluida (0.1890), muestra concentrada (1.4631).
Palabras clave: Estándares, cuantificación de Ca,
espectrofotómetro.
Abstract
In this practice we can see that the preparation of
solutions, standards and the sample used to perform
the quantification of Ca in the spectrophotometer were
carried out. The preparation of the calcium standard
solution began with the preparation of a calcium
standard solution, which was used to prepare a
100ppm calcium solution, and finally, from the
100ppm calcium solution and the 1% La solution, to
prepare the standards together with the blank and
perform the calibration curve, Then the sample was
prepared from 10ml of pasteurized milk and 1ml of
concentrated HCl, taking the supernatant of this and
adding lanthanum solution and distilled water, we will
quantify the Ca present in the sample with the
spectrophotometer. In the spectrophotometer the
standards and the sample were read in triplicate, their
results were averaged and the following results were

obtained: Standard 1 (0.1128), standard 2 (0.2117),
standard 3 (0,.3728), standard 4 (0.5377), standard 5
(0.7197), diluted sample (0.1890), concentrated
sample (1.4631).
Keywords: Standards, Ca quantification,
spectrophotometer.
Introducción
El equipo consiste en una fuente de radiación, una
zona de muestra, un selector de longitud de
onda, un detector y un procesador de la señal y
de la lectura de salida. La fuente de radiación más
utilizada en espectroscopia de absorción atómica es
la lámpara de cátodo hueco, la cual consiste en un
cilindro relleno de un gas inerte dentro del cual se
encuentra un cátodo, constituido del metal a
analizar, y un ánodo. En la espectroscopia de
absorción atómica se usan atomizadores con o sin
llama para producir átomos libres del metal en el
haz de radiación. Como detector se emplea un
fotomultiplicador que produce una corriente
eléctrica, la cual es proporcional a la intensidad de
la línea aislada por el monocromador. Un
amplificador selectivo amplifica la señal
pasando luego a un dispositivo de lectura
que puede ser un voltímetro digital o un
registrador, entre otros.
La espectroscopia de absorción atómica se ha usado
para la determinación de más de 70 elementos. Las
aplicaciones en la industria incluyen muestras
clínicas y biológicas, materiales forenses,
alimentos, bebidas, agua y efluentes, análisis de
suelos, análisis de minerales, productos petrolíferos,
farmacéuticos y cosméticos. El objetivo de esta
práctica fue cuantificar el contenido de calcio
presente en la leche realizando la curva de
calibración de calcio, y el tratamiento de la muestra
para cuantificar el calcio en la leche.
Parte Experimental
Para determinar la cuantificación de calcio presente en
la leche, se realizó primero la preparación de la
 Laboratorio de Análisis Instrumental – Universidad Santiago de Cali

solución La al 1%, donde se debía preparar 100mL de

solución al 1%, mediante 1,1727g de La2O3 y se curva de calibracion Concentracion vs
adicionó a un balón aforado de 100ml, se le agrego 5,0 Absorbancia
0.8
mL de HCl concentrado y agua destilada hasta lograr la 0.7
dilución total, luego se realizó la preparación de la 0.6 f(x) = 0.0854103658536585 x + 0.0322164634146342
R² = 0.999307514201081

absorbancia
solución estándar de calcio, donde se debía pesar 0.5
0,2500g de CaCO3 seco y trasladarlo a un balón 0.4
0.3
aforado de 100mL, luego se adiciono HCL 0.2
concentrado y agua destilada hasta disolver 0.1
completamente el carbonato de calcio, por último se 0
realizó la preparación de la curva de calibración de 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
calcio y la cuantificación del Ca presente en la muestra concentracion(ppm)
de la leche, en el cual se realizó una muestra blanco y 5
estándar, donde se realizó la cuantificación del Ca Grafica 1. Curva de calibración de la Concentración vs
mediante el espectrofotómetro, realizando lecturas del Absorbancia
blanco y por triplicado para cada uno de los estándares.
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos de la
curva de calibración se relaciona la curva con su
Datos, calculo y resultados
coeficiente de relación (0.9993), calculado con la
Para la cuantificación de calcio presente en una
siguiente ecuación:
muestra de leche se realizó haciendo uso del método
espectrofotométrico de absorción atómica, la muestra
y=mx+b (1)
fue tomada de una leche colanta que según su etiqueta
tiene un porcentaje del 25% de calcio.
y=0.0854 x+ 0.0322
TABLA 1. Absorción por triplicado
y−0.0322
SOLUCION ABS- 1 ABS- 2 ABS- 3 x=
ESTANDAR 1 0,1121 0,1128 0,1135 0.0854
ESTANDAR 2 0,2059 0,2150 0,2144
ESTANDAR 3 0,3757 0,3710 0,3716 0.1890−0.0322
x=
ESTANDAR 4 0,5386 0,5372 0,5345 0.0854
ESTANDAR 5 0,7210 0,7164 0,7217
x=1.83 mg/l
En la tabla 1, se presenta las diferentes la absorbancia
de los estándares por triplicado.
Para hallar la concentración partimos de una muestra
TABLA 2. Curva de calibración de 10 mL aforada en un balón de 100 mL y de esa
solución se tomaron una alícuota de 10 mL y se aforo
Concentración (ppm) Promedio nuevamente en un balón de 100 mL por lo que su
absorbancia concentración de calcio se calculó posteriormente con
la siguiente ecuación:
1,00 0,1128
2,00 0,2117 C 1 V 1=C 2 V 2 (2)
4,00 0,3728
6,00 0,5377
( 1.83 ppm ) ( 100 mL )=C 2 ( 10 mL )
8,00 0,7197

Se realizó el grafico de los datos tabulados en la tabla

C 2=18.3 ppm
2, se obtienen los valores de Pendiente (0,0854) e
Intercepto (0,0322), teniendo una linealidad obtenida ( 18.3 ppm ) ( 100 mL )=C 2 ( 10 mL )
en la curva de calibración considera aceptable teniendo
un R2= 0,9993 C 2=183 ppm
 Laboratorio de Análisis Instrumental – Universidad Santiago de Cali

R//la longitud de onda usual es de 422.7.

Concentración en la Muestra: 183 ppm
2. Calcule la absortividad del calcio utilizando la
Luego se calculo el calcio en base a el porcentaje de línea de calibración, (se utiliza un quemador de
calcio en la etiqueta: 10 cm)
R// teniendo en cuenta la ley de Lambert-Beer,
25 % calcio ×1000 ml que nos dice que la absorbancia es directamente
=250 ml Cu
100 % proporcional a la concentración, por lo que se
calcula de la siguiente manera, despejando la
g ecuación A=ε ∙l ∙ c quedando:
250 ml ×1032 =258.000 gCu
ml A
ε=
l∙ c
Conclusiones
Absortividad de la curva de calibración

Concentración: 1 ppm
0.1128 −1 −1
ε= =0.01128 Lmol cm
10 ∙1

Concentración: 2 ppm
0.2118
ε= =0.01059 L mol−1 cm−1
10 ∙2

Concentración: 4 ppm
0.3728
ε= =0.00932 L mol−1 cm−1
10 ∙ 4

Concentración: 6 ppm
0.5368 −1 −1
ε= =0.00895 L mol cm
10∙ 6

Concentración: 8 ppm
0.7197
ε= =0.00899 L mol−1 cm−1
10∙ 8

Absortividad de la muestra diluida

Concentración: 1.8360 ppm

0.1890 −1 −1
ε= =0.01029 L mol cm
10∙ 1.8360

3. ¿De acuerdo con sus resultados cuál es el

porcentaje de Ca en la leche analizada?

Preguntas 4. ¿Por qué es necesario adicionar solución de

Oxido de Lantano a las muestras?
1. Cuál es la longitud de onda de resonancia del
calcio R// El óxido de lantano es necesario agregar a la
 Laboratorio de Análisis Instrumental – Universidad Santiago de Cali

muestra, para evitar la interferencia química durante empleando la técnica de espectroscopia

la cuantificación, el calcio con el fosfato forma el
fosfato de calcio, el cual se transforma en
pirofosfato de calcio, que es relativamente estable
en una llama aire/acetileno. Así la cantidad de
átomos libres de calcio generados en la llama será
menor que la obtenida con una solución de calcio
de igual concentración, pero sin presencia de
fosfato, provocando una disminución de la señal.
atómica. Recuperado de:
https://www.redalyc.org/pdf/3761/3761562790
09.pdf
3. AGQ Labs Chile S.A (2017). Análisis
químico, medir es comparar. Recuperado de:
https://agqlabs.cl/wp-content/uploads/Analisis-
quimico-medir-es-comparar.pdf

5. ¿El Cloruro de Potasio tiene el mismo efecto

que el lantano? Explique.

R// La interferencia química es cualquier alteración

en el número total de átomos libres formados por
unidad de volumen debido a la formación de
compuestos químicos termoestables (Slavin, 1978).
El cloruro de lantano evita las interferencias
químicas durante la determinación. Según Slavin
(1978), el efecto que produce el fosfato en la
determinación de calcio es un ejemplo de este tipo
de interferencia. El calcio con el fosfato forma el
fosfato de calcio, el cual se transforma en
pirofosfato de calcio, que es relativamente estable
en una llama aire/acetileno. Así la cantidad de
átomos libres de calcio generados en la llama será
menor que la obtenida con una solución de calcio
de igual concentración, pero sin presencia de
fosfato, provocando una disminución de la señal.
Este efecto es corregido con la adición de cloruro
de lantano, debido a que la adición del mismo logra
suprimir el efecto de fosfato, porque este atrae al
lantano por mayor afinidad que al calcio, de forma
tal que lo deja libre en solución para ser medido
totalmente.

Referencias

1. Silva Trejos, Paulina; Valverde Montero,

Erickaz (2010). Validación de la metodología
analítica para cuantificar el calcio mediante la
espectroscopía de absorción atómica de llama
y su cuantificación en alimentos de la canasta
básica costarricense. Recuperado de
https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/483
5829.pdf

2. López, Hernán; Oropeza, Ismael; Betancourt,

Catalina (2017). Determinación de la
concentración de calcio, magnesio y potasio en
leche líquida en tres marcas comerciales,