ABRIL ROCÍO MENDÍVIL ESQUER LAB.

BIOLOGÍA MOLECULAR
EXPEDIENTE: 219207974 Q.B.C.
PRÁCTICA 4 – AISLAMIENTO DE RNA TOTAL DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
“DIAGRAMA DE FLUJO”
Homogenización

Tejido omogeniza do puede

ser almacenado a -60 o -
80°C para posterior uso.

Homogeniza 50mg tejido en

1ml trizol por politron
Fase de separación

Remueve fase
acuosa con
micropipeta sin
tomar interfase

Incuba homegenizado Mezcla bien, incuba 3min tepm

5min temp amb y agg amb y centrifuga 13000 rpm
200μL cloroformo 15min 4°C. Centrifuga

Precipitación del RNA total

Agg 500μL de Centrifuga

isopropanol frío a 13000rpm 10min
fase acuosa, a 4°C
incubar temp
amb 10min

Lavado del RNA total

Descarta Descarta
Lava pellet con
sobrenadante sobrenadante
1ml etanol 75%
cuidando que eliminando
frío y centrifuga
el pellet no sea etanol con
8000rpm 5min
desechado micropipeta sin
4°C
tocar el pellet

Resuspende pellet en 100μL de agua libre de

RNasa y almacena a -80°C para usp posterior