Biología Celular y Molecular 2022

GUÍA PRÁCTICA DE BIOLOGÍA

CELULAR Y MOLECULAR
2022

Mg. Jéssica Morales De Roca La Barrera

Blgo. Mblgo. Patricia Lara Lince

1
 Biología Celular y Molecular 2022

INDICE
Contenido Pags.
-Práctica N°1:
Identificación de ácidos nucleicos 7

-Práctica N°2:
Identificación de las propiedades de los carbohidratos 12

-Práctica N°3:
Identificación de proteínas 17

-Práctica N°4:
Microscopía 22

-Práctica N°5:
Observación de células eucariotas y procariotas 34

-Práctica N°6:
Las mitocondrias y el envejecimiento celular 38

-Práctica N°7:
Sangre 41

-Práctica Nª 8:
Organelas no membranosas 53

-Práctica N°9:
Transporte a través de la membrana 60

-Práctica N° 10
Ciclo celular y organización del material genético 66

2
 Biología Celular y Molecular 2022

PRESENTACIÓN

Teniendo presente la importancia de familiarizar al estudiante de ciencias de la

salud en la realización de experiencias, técnicas generales de laboratorio
clínico y manejo de equipos empleados en el estudio químico de muestras
biológicas, para iniciar al estudiante peruano en el camino de la investigación,
se ha elaborado el siguiente material que persigue estimular el raciocinio, el
análisis y el fortalecimiento de los temas desarrollados en la asignatura.

El presente manual pretende estimular la participación activa de los estudiantes

en la construcción de sus propios conocimientos, habilidades y actitudes
críticas, sobre la base de sus saberes previos.

3
 Biología Celular y Molecular 2022

NORMAS GENERALES DEL LABORATORIO

 
Normas generales de comportamiento y realización de prácticas.
1. El alumno tiene la obligación de leer y estudiar con anticipación las
experiencias a tratarse en la respectiva práctica. El fundamento teórico, si lo
desconoce, deberá buscarlo en los libros adecuados para poder realizar la
interpretación de sus resultados.
2. A la hora señalada para el comienzo de las prácticas el alumno deberá
estar conectado a la videoconferencia del curso.
3. Todo alumno deberá contar con su guía o protocolo de prácticas y una
libreta donde hacer las anotaciones que estime oportunas, así como una
calculadora.
4. Se valorará la actitud que cada alumno adopte durante la realización de las
prácticas, teniendo que realizar participaciones en la sesión, aspecto
determinante de la nota final.
5. Según la naturaleza de la práctica el alumno deberá realizar la entrega del
trabajo encargado en la guía en el tiempo establecido.

4
 Biología Celular y Molecular 2022

MATERIAL DE LABORATORIO

5
Biología Celular y Molecular 2022

6
 Biología Celular y Molecular 2022

Práctica N° 2
IDENTIFICACIÓN DE LAS PROPIEDADES DE CARBOHIDRATOS

Nombre:
Gaby Esmeralda
Código:

OBJETIVOS
-Analiza pruebas químicas sencillas para identificar carbohidratos en diferentes
tipos de muestras.

MARCO TEÓRICO
Los hidratos de carbono también llamados azúcares, glúcidos o sacáridos son
un grupo de biomoléculas cuya característica química es su naturaleza
polihidroxílica con otra función más oxidada, el grupo carbonilo de aldehídos y
cetonas. En estas funciones se centra su reactividad.
Las propiedades reductoras de los azucares son importantes para la
identificación de azúcares. El grupo carbonilo de los hidratos de carbono es
fácilmente oxidable por diversos reactivos, aunque el poder reductor de estos
compuestos depende de la entidad que el grupo tenga en la molécula, es
decir de la naturaleza mono-, di- o poli- sacárida del azúcar y la posición en que
se encuentren los posibles enlaces glicosídicos. El agente oxidante suave más
empleado en este tipo de reacciones es el catión Cu (II), cuyas sales son de
coloración azul. En todos los casos este ión se reduce a Cu (I), formándose
oxido cuproso, lo que origina turbidez en el medio de reacción, que concluye
con la aparición de un precipitado marrón-rojizo. Es esta aparición la que
indica que el glúcido tiene carácter reductor.
Existen diversas pruebas muy similares basadas en reacciones de reducción
como la prueba de Benedict, en la cual se utiliza el Cu (II) en medio alcalino,
favoreciendo la reacción de los monosacáridos reductores.

Según el resultado de su hidrólisis, los carbohidratos se pueden clasificar

"polisacáridos", formados por muchas unidades separables por hidrólisis,
"oligosacáridos", formados por unas cuantas unidades, y "monosacáridos", que
son las unidades elementales que no producen, por hidrólisis, unidades de
tamaño menor. Los polisacáridos dan un color específico en presencia de yodo
por su componente básicamente amilasa que se encuentra en la parte externa
del polímero a pesar de ser el componente menos abundante dando un color
azul. Si realizamos la prueba a la amilopectina únicamente obtendríamos una
coloración rojo violeta. La prueba es igualmente satisfactoria para el
glucógeno.

7
 Biología Celular y Molecular 2022

Fig. Estructura tridimensional de la glucosa

PROCEDIMIENTOS
Experiencia N°01: Reacción de Molisch por formación de furfurales o
hidroximetilfurfurales
-Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de solución de azúcar al 20%y agregarle 2
ml del reactivo de Molisch (0,5 g de alfa naftol en 10 ml de etanol 95%
almacenado protegido de la luz).
-Con pipeta Pasteur dejar resbalar por la pared del tubo 2 ml de ácido sulfúrico
concentrado (tener cuidado es causitico). Sin mezclar para que se forme capa
en el fondo del preparado.
-Observar positividad con formación de anillo violeta oscuro leve en la interfase.

Experiencia N°02: Determinación cualitativa de azúcares reductores.

- Rotular 5 tubos de ensayo como AG, G, F, A
- Adicionar a estos 10 gotas de agua destilada, solución de glucosa al 3%,
solución de fructosa al 3%, y solución de almidón al 2% respectivamente.
- Luego adicionar a cada tubo 2.5 ml de reactivo de Benedict.
- Agitar y calentar a ebullición durante 3 minutos.
- Dejar enfriar.
- Observar y anotar los resultados indicando en cada caso los resultados
positivos con un signo + y los negativos con un signo - en una tabla.
- Si las muestras presentan glucosa se observará un precipitado rojo ladrillo,
amarillo o verdoso, de acuerdo con la proporción en que se halle presente,
de acuerdo como se expone a continuación:
Color Resultado
Azul Negativo
Azul verdoso Ligeros vestigios
Verde ± 0.5%
Pardo verdoso 1%
Amarillo 1.5%

Experiencia N°03: Prueba de Seliwanoff

- Rotular 5 tubos de ensayo como G, F,M, L y S (glucosa, fructosa, maltosa,
lactosa y sacarosa)
- Adicionar a estos 3 ml de la respectiva solución de glucosa al 3%, solución
de fructosa al 3%, maltosa al 3%, lactosa al 3% y solución de sacarosa al
3% respectivamente.
- Luego adicionar a cada tubo 3 gotas de reactivo de Seliwanoff.
- Agitar y calentar a ebullición durante 8 minutos.
- Dejar enfriar, observar y anotar los resultados indicando en cada caso los
resultados positivos con un signo + y los negativos con un signo - en una

8
 Biología Celular y Molecular 2022

tabla. La reacción positiva se observa como un cambio de color al color

ámbar o coral en la solución resultante.

Experiencia N°04: Reacción de lugol para polisacáridos

-En un tubo de ensayo colocar 2 ml de la solución de almidón con pipeta
pasteur.
-Adicionar 5 gotas de lugol al tubo de ensayo.
Mezclar y observar cambio de color.
-Poner el tubo al fuego de un mechero por 5 minutos y observar cambio de
color.
-Enfriarlo al medio ambiente por 15 minutos y observar el color que presenta.

RESULTADOS DE LA PRIMERA ACTIVIDAD

9
 Biología Celular y Molecular 2022

REACTIVO
DE
MOLISH

Agregamos 2
En un tubo de
ml del
ensayo
reactivo de
colocamos 2 ml
Molisch en el
de solución de
mismo tubo
azúcar al 20%. de ensayo.

M E Z C L A M O S

Con una pipeta Se forma un anillo violeta

Pasteur con mucho oscuro en la interfase.
cuidado dejaremos
resbalar por la Así no se mezcla y se forma
pared del tubo un una capa al fondo
total de 2ml de
ácido sulfúrico.

RESULTADO FINAL

10
 Biología Celular y Molecular 2022

INTERPRETACIÓN (EXPLIQUE CÓMO JUSTIFICA EL RESULTADO

OBTENIDO EN BASE A LOS PARTICIPANTES DE LA REACCIÓN)
La reacción de Molisch es una reacción que tiene la propiedad de teñir a los
carbohidratos presentes en una disolución, como la que utilizamos en
nuestro experimento (solución de azúcar al 20%).
Es un método cualitativo el cual nos permite observar la presencia de
carbohidratos mas no la cantidad de glúcidos en la muestra, el anillo de color
verde aparece al momento de reaccionar el ácido sulfúrico y el α- Naftol lo
cual indica que no hay presencia de glúcidos, pero cuando se manifiesta un
anillo de color violeta en la interfase es muestra de que se tiene una solución
que contiene glúcidos como podemos observar en el resultado de nuestra
experiencia.

De esa manera, todos los azúcares por acción del ácido sulfúrico
concentrado se deshidratan formando compuestos furfúricos que reaccionas
positivamente con el reactivo de Molisch, a la vez se puede determinar si se
trata de un monosacárido ya que la reacción y precipitado de Cu2O es
inmediata o un disacárido si toma un tiempo más prolongado

RESULTADOS DE LA SEGUNDA ACTIVIDAD

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS DE LA SEGUNDA ACTIVIDAD

11
 Biología Celular y Molecular 2022

RESULTADOS DE LA TERCERA ACTIVIDAD

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS DE LA TERCERA ACTIVIDAD

RESULTADOS DE LA CUARTA ACTIVIDAD

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS DE LA CUARTA ACTIVIDAD

ACTIVIDADES
-Haga un esquema de la clasificación de los carbohidratos colocando a los
representantes de cada grupo.

12
 Biología Celular y Molecular 2022

-Señale:
Dos triosas……………………………………………………………………………..
Dos pentosas………………………………………………………………………….
Cinco aldohexosas……………………………………………………………………
Dos cetohexosas………………………………………………………………………
Dos disacáridos…………………………………………………………………………
Tres trisacáridos……………………………………………………………………….
Dos polisacáridos estructurales………………………………………………………
Dos polisacáridos con función energética………………………………………….

Indique ¿qué característica química poseen aquellos azucares con propiedad

reductora?

Señale que diferencias y similitudes encuentra entre el glucógeno, el almidón y

la celulosa para el hombre.

Señale 6 funciones que cumplen los carbohidratos

CUESTIONARIO
-¿Cuál es el fundamento de la prueba de Benedict? porque se da el viraje de
su color en base a los componentes que posee el reactivo y los componentes
de los carbohidratos que participan de la reacción?

-¿Qué se entiende por hidrólisis de las macromoléculas y particularmente por

hidrólisis de carbohidratos?.

-¿Qué se entiende por glicemia y quienes participan en su regulación?

-En la orina excretamos glucosa? Fundamente su respuesta

13