Taller 6.

Extracción de ADN de Candida albicans

Biología Molecular–LAB. 2021-20

Nota: Esta entrega se revisará con el sistema SafeAssign TM. Por lo que deben tener en cuenta las reglas de citación APA
para evitar sanciones (RGEP Art 109 y Art. 114)

El siguiente Taller corresponde a un 2% de la nota de la asignatura.

Esta práctica será el primer paso del nuevo artículo científico que usted y su grupo deben
escribir. Para ayudarles a realizar una correcta introducción y que puedan crear sus propias
hipótesis, deben responder las siguientes preguntas. Tenga en cuenta que todo esto lo
debe integrar en la introducción de su segundo articulo científico.

Preguntas Teóricas (Recuerde citar y referenciar) (3.0)

Para plantear preguntas de investigación debemos primero conocer nuestro sistema biológico de
interés, por ello, los invitamos a consultar información sobre Candida albicans, ERG11 y la
resistencia a azoles.

Pueden comenzar resolviendo las siguientes preguntas:

1. Mencione las generalidades biológicas de Candida albicans (especificar sobre el ciclo de vida y
las características estructurales celulares). (0.6)

Candida albicans es el nombre de un hongo, el cual es un patógeno para los humanos que causa múltiples
enfermedades en la mucosa gastrointestinal, genital, infecciones en los vasos sanguíneos (Sudbery, 2011), y
desordenes en nuestro cuerpo, tiene una tasa de mortalidad considerablemente alta (Wang, 2015). Ya que
este penetra el epitelio y endotelio para poder ingresar a los tejidos en busca de un mejor entorno y así
generar enfermedad (Sudbery, 2011). Esta se caracteriza por ser resistente a las drogas o algunos agentes
antifúngicos en ambiente clínico (Wang, 2015). Este es un hongo polimorfo o también llamado pleomorfo,
es decir, tiene la capacidad de multiplicarse al pasar de los años cambiando su morfología, funciones
biológicas o maneras reproductivas a modo de respuesta en cuanto a las condiciones ambientales
presentes en su entorno (Sudbery, 2011).

2. ¿Cuál es la importancia clínica de C. albicans? (0.6)

C. albicans es una levadura presente principalmente en las mucosas de las cavidades oral, vaginal y también en el tracto
gastrointestinal. En condiciones normales esta es totalmente inofensiva, el problema está cuando esta se presenta en un
ambiente inmunocomprometido y acá es donde se ven las enfermedades micóticas oportunistas. Para el caso de la C.
albicans se debe tratar rápido ya que la resistencia a los medicamentos es exponencial. Se debe orientar el tratamiento
antifúngico hasta que se disponga de los resultados de sensibilidad in vitro. (Lobaina. 2009)
 3. ¿Cuáles son los mecanismos de control fúngico contra C. albicans? (0.6)

Hoy en día se conocen 3 tipos de agentes antifúngicos, los cuales son usados para hacer medicamentos para tratar
infecciones, los cuales son azoles, polienos y equinocandinas.
Los azoles y polienos son producidos por microorganismos naturalmente; el primero funciona por medio de un mecanismo
activo similar al de los polienos, este consiste en impedir la síntesis de los componentes de la pared celular fúngica
(manoproteínas, quitina, esfingolípidos y sordarinas) (Zida, A., 2017). El segundo interactúa con ergosterol y forma canales
transmembranales disminuyendo los componentes vitales citoplasmáticos de Candida albicans (Zida, A., 2017); y, por
último, las equinocandinas impiden la síntesis del componente principal de la pared celular fúngica(1,3-b-D-glucano)
debilitándola para la lisis (Zida, A., 2017).

4. ¿Cuáles son los mecanismos de resistencia a azoles reportados en la literatura para Candida
albicans? (0.6)

Los azoles impiden la producción de una encima que sintetiza el ergosterol, el cual es uno de los principales componentes de
la pared celular fúngica, como consecuencia afecta a la estructura y función de la membrana celular de Candida albicans.
Uno de los mecanismos hace referencia a la regulación o alteración del gen que codifica la enzima, el ERG11, al mutar altera
los sitios de unión de la enzima por lo que la imposibilita de enlazarse con azoles (Pristov, K. E., & Ghannoum, M. A., 2019).
El otro mecanismo implementa varias bombas transmembranales encargadas de soltar medicamento para bajar la actividad
inhibitoria en las enzimas, y así no debilitaría la pared celular (Pristov, K. E., & Ghannoum, M. A., 2019). Y por último, este
mecanismo se da por diferentes mutaciones presentadas en Candida albicans, dichas mutaciones presentes en su pared
celular y varios productos tóxicos que interrumpan la acción de los azoles y mantenga la estructura y función de su pared
celular fúngica (Pristov, K. E., & Ghannoum, M. A., 2019

5. Teniendo en cuenta las características estructurales y celulares de Candida, realice un

diagrama de flujo del proceso de extracción de ADN. Tenga en cuenta las modificaciones con
respecto al protocolo que usamos para extraer ADN humano. (0.6)

Preguntas del Articulo (2.0)

Teniendo en cuenta todo lo consultado en el punto anterior, es momento de aplicar el método

científico. Para esto, analicen las siguientes preguntas y respóndanlas de manera detallada:

1. Plantee el problema de investigación y la justificación de su investigación: ¿Qué problema va

a investigar? ¿Por qué esto es importante? ¿Cuál es el efecto sobre el estado del conocimiento
actual? ¿Por qué alguien debería financiar su investigación? (1.0)

El problema de investigación que nuestro grupo ha decidido investigar son los factores de riesgo que se puedan predecir en
pacientes críticos con C. albicans. La importancia que radica en este tema de investigación es que al saber cuales son los
factores predicadores de riesgo en pacientes críticos infectados con este hongo se podría ayudar a prevenir que los
pacientes empeoren su estado de salud, y aplicándoles tratamientos que ayuden a evitar estos factores de riesgo.
Reduciendo así la tasa de mortalidad de infecciones causada por C. albicans, dado que en estos momentos en Colombia
existe una mortalidad que oscila entre el 40% y el 60%. Por lo mencionado anteriormente, sentimos que esta investigación
sería un gran avance sobre el estado del conocimiento actual, dado que, aunque ya haya investigaciones al respecto, al
parecer no han sido efectivas, por lo que en todo el mundo se siguen viendo tasas altas de muertes por C. Albicans.
Deberían de financiar nuestras investigaciones ya que es un problema que podría salvar a muchas personas que sufren de
enfermedades graves y se infectan con este hongo y no se les suministra un buen tratamiento el cual les podría ayudar a
curarse o evitar que se empeoren.
 2. Plantee el objetivo general de su artículo: ¿Qué busca entender con
esta investigación? ¿Cuál/cuáles son las hipótesis que pueden enunciar para explicar su
pregunta? (1.0)

El objetivo principal de nuestra investigación es la de utilizar los conocimientos aprendidos en la

clase de Laboratorio de biología molecular y los investigados por nuestra cuenta para ver cuales
son las proteínas afectadas por la C. albicans para así determinar cuáles son los factores de riesgos
que se podrían predecir y tratar a tiempo. La hipótesis que se podrían enunciar es que muy
seguramente se encontraran factores de riesgos que afectan la infección por C. albicans los cuales
pueden ser prevenidos, lo que lograría bajar la mortalidad por la infección en una alta proporción.