Diapositiva Unidas 1

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE
MACHALA
CARRERA DE ALIMENTOS
BIOLOGÍA MOLECULAR
Ing. Estefanía Chérrez Neacato. Mgs.

OBJETIVO
 Describir las características generales sobre ácidos

nucleicos (ADN y ARN) y genes mediante estudio
descriptivo de cada uno para la compresión de los mismos
como la base de la biología molecular.
CONTENIDO
 Historia de la revolución molecular.
 Ácidos nucleicos ADN y ARN
 Estructura y función de los genes.
periodo Genética y Biología Molecular
1940 - 1980 se aplica en
basada en
emplea Ingeniería
estudia
Genética
Genética Modelos
Proteínas
estudia
Acidos como
nucleicos
Transmisión
Drosophila
forman
de Hongos
tienen Bacterias
Genes Caracteres Virus
Información
de
para
Síntesis
DOGMA CENTRAL
Sentido clásico para transformar la información genética en algo observable
Es decir que los “genes” produzcan sus efectos
A nivel molecular se da así:
 MECANISMOS DE COMO SE REPLICA, TRANSCRIBE Y TRADUCE A PROTEÍNAS

genoma
célula
cromosomas
genes
Los genes contienen
las instrucciones
para crear proteínas
proteínas
Las proteínas actúan

individualmente o en
complejos para realizar
varias funciones celulares
Glosario biología molecular
ADN: ácido desoxirribonucleico. Es la molécula portadora la información genética, que posibilita su

transmisión de una generación a la siguiente.
ARN: ácido ribonucleico: Es la molécula portadora la información genética, que posibilita su transmisión de
una generación a la siguiente
Gen: Unidad básica de la herencia que consiste en un segmento de ADN que codifica una proteína
específica o un segmento de una proteína (o una molécula de ARN) con una característica o función
determinada.
Purina: Es una base nitrogenada, un compuesto orgánico heterocíclico aromático. La estructura de la purina
está compuesta por dos anillos fusionados, uno de seis átomos y el otro de cinco. Dos de las bases de los
ácidos nucleicos, adenina y guanina, son derivados de una purina. En el ADN, estas bases se unen con sus
pirimidinas complementarias, la timina y la citosina, a través de enlaces de hidrógeno.
Glosario biología molecular
Pirimidina: Es un compuesto orgánico, similar al benceno, y a la piridina pero con dos átomos de nitrógeno que
sustituyen al carbono en las posiciones 1 y 3. La pirimidina tiene tres derivados que forman parte de los ácidos
nucleicos: la timina, la citosina y el uracilo; las tres tienen un grupo carbonilo (C=O) en el carbono 2; las dos
primeras forman parte del ADN donde se aparean con sus purinas complementarias, mientras que la última
está presente solo en el ARN. En el ADN, adenina (A) y guanina (G) se emparejan con timina (T) y citosina (C),
respectivamente, y en el ARN adenina se une a uracilo (U) y la guanina a citosina.
Fenotipo: rasgos observables en un organismo, incluyendo su morfología, fisiología y conducta a todos los
niveles de descripción. Determinado por el genotipo y el medio.
Genotipo: Es el conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores.
Alelo: variante o versiones de como se expresa un gen. Cada gen tiene dos alelos que se sitúan en el mismo
locus o lugar del cromosoma. Un individuo hereda dos alelos para cada gen, uno del padre y el otro de la
madre.
Historia de la genética
Observación de
Monje checo
fenotipos de guisantes
Cruzó plantas que

Las características
diferían en solo un
fenotípicas las llamó
caracter (p.ej. color de
“caracteres”
semillas)
El padre de la genética
Gregor Johann Mendel
(1822 - 1884)
Se dio cuenta de que en Los “caracteres” hoy se conocen
sus experimentos los de forma universal con el
“caracteres” siempre término genes y las versiones
ocurrían en variantes diferentes de un gen responsables
con proporciones de un fenotipo particular se
numéricas simples llaman alelos
https://www.youtube.com/watch?v=cVl-86Sic-0
1865: Publicación del artículo de Gregor

Mendel: “Experiments on Plant
Hybridization”
1869: Friedrich Miescher:

Aisló varias moléculas ricas en fosfatos, a las cuales
llamó nucleínas (actualmente ácidos nucleicos), a
partir del núcleo de los glóbulos blancos (vendas de
pus de los soldados) y descubrió lo que hoy
conocemos como DNA.  Primer purificado de
ADN
Friedrich Miescher
(1844-1896)
Redescubridores de las Leyes de Mendel
Realizó grandes aportaciones a la terminología genética actual

asignando términos griegos en Genética
• el término genética fue acuñado en una carta dirigida a Adam

Sedgwick (zoólogo)
• la denominación de los factores mendelianos como alelomorfos
• los conceptos de homocigoto y heterocigoto
1902: publicó "Los principios mendelianos de la herencia: una

defensa", con la traducción de los trabajos originales de Mendel William Bateson
sobre hibridación, publicados en 1865 (1861-1926)
Walther Flemming Eduard Strasburger Edouard Van Beneden

(1843-1905) (1844-1912) (1846-1910)
1880-1890: Walther Flemming, Eduard Strasburger y

Edouard Van Beneden describen la distribución
cromosómica durante la división celular.
• Trabajando con tintes de basófilo encontró

una estructura que denominó “cromatina”
• Investigó también el proceso de la división Walther Flemming

celular y la distribución de los cromosomas (1843-1905)
en el núcleo hermano, proceso que

denominó “mitosis” (mitos=hilo en griego)
• Hipotetizó por primera vez que todos los

núcleos celulares provenían de otro núcleo
anterior Cromosomas en una célula de la
glándula salivar de salamandra
• 1887: investigando el proceso de fecundación del parasito Ascaris
observó que en la primera división celular cada par de cromosomas
se separaba para formar dos células, cada una de las cuales
presentaba sólo la mitad del número usual de cromosomas
• Posteriormente, ambas células se dividían de nuevo según el

proceso asexual ordinario
• Denominó a este proceso “meiosis” (=reducción en griego)
• También demostró que el número de cromosomas es constante Edouard Van Beneden

(1846-1910)
para cada especie
• Además descubrió el centríolo

1899
Richad Altmann
Separa en sus experimentos

a las proteínas de las
nucleínas y reemplaza el
termino a ácido nucleico.
• 1902: sugirió que “La asociación de cromosomas
paternos y maternos en pares y su separación
subsecuente durante la división de reducción...
Puede constituir la base física de las leyes
mendelianas de la herencia”.
• “Las unidades de la herencia están localizadas en
los cromosomas” Walter Sutton
(1877-1916)
• Fue el primer científico que probó

válidas las “Leyes Mendelianas” de
segregación y clasificación
independiente con el uso de
cromosomas de saltamontes
Wilhem Johannsen
Acuña el termino gen (1909) griego significa que origina
1911: Acuña los términos fenotipo y genotipo

1908: Ley de Hardy-Weinberg
 En el lenguaje de la genética de poblaciones, la ley de

Hardy-Weinberg afirma que tras una generación de
apareamiento al azar, la composición genética de
una población permanece en equilibrio. Es decir, G.H. Hardy
la herencia mendeliana, por sí misma, no (1877-1947)
engendra cambio evolutivo.
 Las frecuencias génicas permanecen

constantes de generación a generación si no
hay
• Mutación
• Migración
Wilhelm Weinberg
• Selección natural (1862-1937)
1910: demuestra que los genes
residen en los cromosomas
Thomas Hunt Morgan

(1866-1945)
"El Premio Nobel de Fisiología o Medicina
de 1933 fue otorgado a Thomas H. Morgan
"por sus descubrimientos sobre el papel
Drosophila melanogaster desempeñado por el cromosoma en la
(mosca de la fruta) primer mutante de ojos balncos herencia".
cromosomas (4 pares), breve ciclo de vida (15-21 días)
1913: realiza el primer
mapa genético de un
Los mapas genéticos
cromosoma trabajando
muestran cromosomas
con el organismo
conteniendo genes
modelo Drosophila
organizados linealmente
melanogaster con Thomas
Hunt Morgan
Alfred Sturtevant
(1891-1970)
Historia de la Biología Molecular
1944: Oswald Theodore Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty identifican
el DNA como material genético (el portador universal de la información
genética)
Oswald Theodore Avery Colin McLeod Maclyn McCarty

(1877-1955) (1909-1972) (1911-2005)
Frederick Griffith
investigaba una vacuna

para prevenir la
Usó dos cepas de la
Médico y genetista neumonía durante la
bacteria Streptococcus
británico. pandemia de gripe que
pneumoniae
tuvo lugar tras la
Primera Guerra Mundial.
• Contenía una cápsula de polisacáridos y era virulenta al ser inyectada, causando

neumonía y matando a los ratones en un día o dos. Esta cápsula permitía a la
Cepa S bacteria resistir los ataques del sistema inmune.
• no era virulenta, y no causaba neumonía, porque carecía de cápsula

Cepa R
Experimento Frederick Griffith (1928)
“Principio transformante”
Transformación bacterias intercambian su materia

genético y modifican su fenotipo
Phoebus levene : bioquímico ruso (1929)
Demostró que el ADN esta

formado por : desoxirribosa, grupo
fosfato y 4 bases nitrogenadas
Ribosa y desoxirribosa son los

azúcares de los ácidos nucleicos.
Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos,
unidades moleculares que consisten en:
(1) un azúcar de cinco átomos de

carbono, ya sea desoxirribosa (en
el ADN) o ribosa (en el ARN);
(2) uno o mas grupos fosfato, que

hacen acida a la molécula
(3) una base nitrogenada,

compuesto que contiene nitrógeno
(Base nitrogenada purina de doble
anillo o una pirimidina de un solo
anillo)
Reglas de Chargaff
Erwin Chargaff
(1905-2002)
Separó las bases nitrogenadas de los ácidos nucleicos,

analizo el contenido de purinas y pirimidinas
Estudiando bases nitrogenadas en diferentes formas de vida

concluyó que:
“La cantidad de purinas siempre se encontraba en proporciones
iguales a pirimidinas, la proporción era igual en todas las células
de los individuos de una especie dada, pero variaba de una
especie a otra”
"El Premio Nobel de Fisiología o
1927: estudió los cambios que suceden en los Medicina de 1983 fue otorgado
a Barbara McClintock "por su
cromosomas durante la reproducción del maíz,
descubrimiento de elementos
poniendo de manifiesto procesos tan genéticos móviles".
fundamentales como la recombinación
genética que se produce durante la meiosis.
• Describió el primer mapa de ligamiento del Barbara McClintock
genoma de maíz (1902-1992)
• Resaltó el papel de
los telómeros y centrómeros
1940-1950: McClintock descubrió el proceso

de transposición de elementos del genoma y lo
empleó para explicar cómo los genes determinan
ciertas características físicas.
Transposonessecuencia de ADN que puede
moverse de manera autosuficiente a diferentes
partes del genoma de una célula causa
mutaciones y cambio en la cantidad de ADN del
genoma.
1952: El experimento de Hershey-Chase

prueba que la información genética de
los fagos (y de todos los organismos) es
el DNA, se utilizó virus bacterianos para Alfred D. Hershey Martha C. Chase
demostrar que el ADN es el materia (1908-1997) (1927-2003)
genpetico.
"El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de
1969 fue otorgado conjuntamente a Max
Delbrück, Alfred D. Hershey y Salvador E. Luria
"por sus descubrimientos sobre el mecanismo de
replicación y la estructura genética de los virus"
Experimento de Hershey y Chase
FAGOS T4
Experimento de Hershey y Chase
El ADN Y NO LA PROTEINA
Fago ADN, rodeado de EL QUE POSEE LA
una cubierta protéica. INFORMACIÓN GENETICA
La cubierta permanece PARA UNA NUEVA
en el exterior de las PRODUCCIÓN DE FAGOS
bacterias.
Rosalind Franklin y Maurice Wilkins
 Usando rayos X
demostraron que el ADN
tiene forma helicoidal
repetitiva
 Los fosfatos están al exterior
de la estructura.
FOTO 51
1953: James D. Watson y Francis Crick demuestran la estructura de doble
hélice del DNA de moldelo tridimensional.
James D. Watson
• ARNm transfiere el código genético del ADN a los
ribosomas que traducen esa información a proteínas.
• Dirigió el proyecto Genoma Humano
Francis Crick
• Dogma central de la biología molecular
• Describe los mecanismos de transmisión y expresión de
la herencia.
1958: El experimento de Meselson-Stahl demuestra que el DNA se replica
de modo semiconservador.
Matthew Meselson
(1930- ) Franklin Stahl (1929-)
1 Experimento de Meselson y Stahl
Bacterias E Coli. cultivaron
en un medio posee isotopo
pesado de Nitrógeno 15 2 Luego las pasan a un
medio con isotopo
toman las bacterias el ligero de Nitrógeno
nitrógeno para sintetizar 14 el ADN ahora
nuevas moléculas de ADN todas debe poseer N14
tendrán en el ADN con
nitrógeno 15.
Posibles mecanismos de replicación de DNA
El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 1968
1961: El código genético se ordena en tripletes fue otorgado conjuntamente a Robert W. Holley,
Har Gobind Khorana y Marshall W. Nirenberg "por
su interpretación del código genético y su función
en la síntesis de proteínas"
1964: Howard Temin muestra, utilizando virus de RNA,
que la dirección de transcripción DNA-RNA puede El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 1975
revertirse  TRANSCRIPCIÓN INVERSA fue otorgado conjuntamente a David Baltimore,
Renato Dulbecco y Howard Martin Temin "por sus
descubrimientos sobre la interacción entre los virus
tumorales y el material genético de la célula"
1970: Restrictasas - cortar y pegar fragmentos de DNA
El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 1978

fue otorgado conjuntamente a Werner Arber,
1972: Walter Fiers secuencia de un gen: el gen para la Daniel Nathans y Hamilton O. Smith "por el
proteína del bacteriófago MS26 . descubrimiento de enzimas de restricción y su
aplicación a problemas de genética molecular"
1976: Walter Fiers secuencia RNA del bacteriófago MS2

1977: Primera secuenciación del DNA
Frederick Sanger Walter Gilbert

"El Premio Nobel de Química de 1980 se dividió, la mitad (1918-2013) (1932- )
fue otorgada a Paul Berg "por sus estudios fundamentales
de la bioquímica de los ácidos nucleicos, con especial
atención al DNA recombinante", la otra mitad
conjuntamente a Walter Gilbert y Frederick Sanger "por
sus contribuciones relativa a la determinación de
secuencias de bases en ácidos nucleicos".
1983: Kary Banks Mullis descubre la reacción en cadena

de la polimerasaPCR
1989: Francis Collins y Lap-Chee Tsui secuencian el gen

humano codificador de la proteína CFTR (Cystic Fibrosis
Transmembrane Conductance)
1995: Se secuencia por primera vez el genoma de un

organismo vivo: Haemophilus influenzae
1996: Primera secuenciación de un genoma eucariota:

Saccharomyces cerevisiae
Clonación del primer mamífero (1997)
Instituto Roslin de
Escocia crearon a Dolly,
nacido después de 277
1998: Primera secuenciación del

genoma de un eucariota multicelular:
Caenorhabditis elegans
2001: Primeras secuencias del

genoma humano por el Proyecto
Genoma Humano y Celera Genomics
2003: El Proyecto Genoma Humano

publica la primera secuenciación
completa del genoma humano con un
99.99% de fidelidad (25 000 genes)
Los ácidos nucleicos transmiten la El ácido desoxirribonucleico
El ácido ribonucleico (ARN)
(ADN)
información hereditaria y
determinan que proteínas produce • Es el componente de los genes, • Participa en el proceso de unión
una célula. el material hereditario de la de aminoácidos para formar
En las células se encuentran dos célula, y contiene instrucciones polipéptidos.
tipos de ácidos nucleicos: el acido para la síntesis de todas las
desoxirribonucleico (ARN) y el proteínas y de todo el ARN que
acido ribonucleico (ARN) necesita el organismo.
NUCLEÓTIDOS Unidades o monómeros estructurales de los ácidos
nucleicos
(1) un azúcar de cinco átomos de

carbono, ya sea desoxirribosa (en
el ADN) o ribosa (en el ARN);
(2) uno o mas grupos fosfato, que

hacen ácida a la molécula y causa
la carga negativa de los ácidos
nucleicos.
(3) una base nitrogenada,

compuesto que contiene nitrógeno
(Base nitrogenada purina de doble
anillo o una pirimidina de un solo
anillo)
BASES NITROGENADAS
ADN contiene: ARN contiene:
• Las purinas adenina (A) y • Las pirimidinas citosina y

guanina (G) uracilo (U)
• Las pirimidinas citosina (C) y • Las purinas adenina y guanina
timina (T) • El azúcar ribosa
• El azúcar desoxirribosa • El fosfato
• El fosfato
LA PENTOSA
Ribosa ARN ribonucleótidos
Desoxirribosa ADN desoxirribonucleótidos

NUCLEÓSIDO
Entre el C-1´ de la
Mediante un
Unión de la base pentosa y el N-1 Ribonucleósidos y
enlace covalente
nitrogenada y la de las pirimidinas desoxirribonucleós
denominado
pentosa o bien el N-9 de idos
N-glucosídico
las purinas
NUCLEÓTIDOS
Enlace ester , C5
NUCLEÓSIDO + UN FOSFATO =
NUCLEÓTIDO O NUCLEÓSIDO MONOFOSFATO
ÁCIDOS
AMP (adenosina
NUCLEICOS
monofosfato)
ADP (adenosina difosfato)
CUANDO ESTAN
ATP (adenosina trifosfato) LIBRES FORMA
TRIFOSFATADA
Cadenas de ácidos nucleicos y
polinucleótidos
Los nucleótidos se unen

mediante enlaces
fosfodiéster  dar lugar a
cadenas de ácidos Enlace
nucleicos o fosfodiéster
polinucleótidos
Enlace entre el C-5´-

fosfato de un nucleótido y
el C-3´-hidroxilo del
siguiente nucleótido.
Unión sucesiva por

enclace 3,5-fosfodiester
policucleótido polarizado
Dos extremos 3´-

hidroxilo ; 5´-fosfato.
• polirribonucleótido o cadena
Cadena es de de ARN
ribonucleótidos • A, G, C, y U
• polidesoxirribonucleótido o
Cadena es de cadena de ADN
desoxiribonucleótidos • A, G, C y T
Por consenso universal, la secuencia de nucleótidos

en una cadena de polinucleótidos se escribe en
dirección
5’ → 3
ESTRUCTURA DEL ADN
Estructura
primaria del ADN
Corresponde a la secuencia de
nucleótidos del polinucleótido
linearizado.
La información genética esta

contenida en orden exacto de las
bases nitrogenádas que componen
los nucleótidos.
Si se modifica alguna de estas o su

orden se altera la información
Estructura
secundaria del ADN
Exterior:
Células eucariotas el ADN Desoxirribosa-fosfato
cadena doble de Hidrofílica
polidesoxirribonucleótidos.
Las dos cadenas giran

alrededor de un eje de
simetría imaginario
Interior:
Formando una estructura Bases nitrogenadas
helicoidal hidrófobas
“doble hélice del ADN”

Watson y Crick 1953
Relación espacial
Generada por el giro

entre las dos cadenas
de la hélice crea:
• Surco mayor (ancho)
• Surco menor (estrecho)
TRES CARACTERISTICAS PRINCIPALES DEL ADN:
1
Es antiparalela
• Asociación antiparalela el
extremo 5´ de una se asocial con
el extremo 3´ de otra
2 Es complementaria
 Las bases nitrogenadas de

una cadena se unen
mediante puentes de
hidrógeno a las bases
nitrogenadas de la otra
cadena de manera que:
 A siempre se une a T par
de bases unidos por 2
enlaces de hidrógeno
 G siempre se une a C par
de bases unidos por 3
enlaces de hidrógeno
 Una cadena siempre es el
complemento de la otra
dos enlaces de hidrógeno entre A y T
tres enlaces de hidrógeno entre G y C
¿Cuál sería la cadena complementaria?
ATTAGAATAGCATGAC
El apareamiento específico de bases entre las cadenas

de AND sustenta las llamadas reglas de Chargaff : en
cualquier muestra de ADN de cadena doble, la
cantidad de A es igual a la cantidad de T, la cantidad
de G es igual a la de C, y la cantidad de purinas es
igual a la de pirimidinas.
3 Forma un giro helicoidal dextrógiro o levógiro
forma predominante; condiciones fisiológicas

ADN circular
Forma circular, sin

El ADN mitocondrial y
extremos, donde no
el de células ADN circular como:
hay interrupción de los
procariotas
enlaces fosfodiéster.
una estructura relajada
Estructura superenrollada y
más compacta, donde la hélice
del ADN (ya enrollada) gira
sobre sí misma (superenrollada)
ADN circular superenrollado

permite la compactación del
ADN para que ocupe menor
espacio en la células;
Desnaturalización del ADN
Es la pérdida de
la estructura Rotura de los Separación de las No altera los
helicoidal puentes de dos cadenas enlaces
(estructura hidrógeno antiparalelas fosfodiéster.
secundaria)
agentes
químicos
agente
enzimas
físicos
cambios de pH
Agentes químicos
La urea, la formamida y el
formaldehído
son altamente polares
con grupos amino y carbonilo
y compiten con los grupos amino y

carbonilo de las bases nitrogenadas en
la formación de puentes de hidrógeno
pH
 También un pH
extremadamente alcalino
o ácido puede
desnaturalizar el ADN
 sin embargo, este
tratamiento puede dar
lugar a la rotura de
enlaces fosfodiéster
 y por lo tanto, a la
pérdida de la estructura
primaria.
Temperatura
Tmtemperatura
de fusión a la cual
Hasta llegar se ha
100°C pierde desnaturalizado el
Muestra de ADN
las fuerzas 50% de las Muestra con alto A
alto contenido de
estabilizadoras de moléculas de ADN y T <<<Tm
G y C >>>Tm
la doble hélice de la muestra,
separandolas rompe el 50% de
los puentes de
hidrógeno.
Enzimas
Las topoisomerasas
• cortan una o ambas hebras del ADN, lo que provoca la
relajación del superenrollamiento.
Las girasas
• actúan desenrollando el ADN circular presente en las
bacterias
Las helicasas
• se unen al ADN cerca de la horquilla de replicación, rompen
los puentes de hidrógeno y catalizan la separación de las
hebras mediante la energía liberada por hidrólisis de ATP.
El ARN
10 VECES MÁS
ABUNDANTE QUE EL
ADN
Es monocatenario
Diferencias con el
Posee uracilo en lugar de
ADN. timina
La pentosa que constituye

sus nucleótidos es la ribosa
Es químicamente más
inestable
ESTRUCTURA PRIMARIA
 Secuencia lineal de ribonucleótidos
 Se escriben en dirección 5´- 3´
ESTRUCTURA SECUNDARIA
 Apareamiento del las secuencias
complementarias de la misma cadena
(intracatenaria) o en el caso ARN de doble
cadena de virus( asociación intercatenaria)
 Unidos por puentes de hidrógeno
Tipos de ARN ARN heterogéneo
Producto inicial de la
nuclear (ARNhn)
Tambien conocido como
síntesis de la ARN
transcrito primario de
polimerasa en el
alto peso molecular
proceso de transcripción
Actua en células
Su fragmentación para
eucariotas como
formar otros tipos de
precursos de los demás
ARN supone la
tipos de ARN que se
maduración o
encuentran en el
procesamiento del ARN
citoplasma
En procariotas es
directamente el molde
para la síntesis de
proteínas sin necesidad
de maduración o
modificaciones.
Tipos de ARN ARN mensajero
(ARNm)
 Su función es la de transportar la información genética almacenada

en el núcleo de la célula, en el ADN, hacia el citoplasma que es el
sitio en donde se realiza la síntesis de proteínas.
 ARNm sirve de molde para la síntesis de proteínas
 En eucariotas ARNm en el extremo 5´muestra una capucha (CAP) y
en el extremo 3´(coli poliA) aumenta la vida media en el
citoplasma.
ARN ribosomal (ARNr)
Forma parte de la
estructura de los
ribosomas orgánulos
encargados de la síntesis de
proteínas
Plegamiento complejo
ARN de transferencia (ARNt)
Poseen entre 75 a 90 nucleótidos
32 de ARNt distintos
Intervienen en la síntesis de proteínas

Van unidos a un aminoácido que
liberarán en el ribosoma en el proceso
de traducción.
Posee bases nitrogenadas inusuales como
Inosina y dihidrouridina y timina
Estructura secundaria con plegamiento
complejo
Anticodón reconoce los codones del
ARNm
ARN pequeño nuclear (ARNsn)
Presente en el núcleo de
eucariotas
Procesos de maduración del

ARNhn
Se asocia a proteínas para

eliminar intrones (Fragmentos
de ARNhn que no aparecen en
el ARNm)
Enzimas de ARN (ribozimas)
Ácidos nucleicos que funcionan como

catalizadores
Poseen un sitio activo, uno de unión a

sustrato y uno de unión a un cofactor
Los ARNsn son ejemplo de ribozimas

siARN miARN
Moléculas de ARN de
doble cadena de 20 a 35 Moléculas de ARN de
nucleótidos cadena sencilla de 21-23
nucleótidos
Suprimen la expresión de
genes específicos
Encargadas de regular la
expresión génica
Se una a una secuencia
complementaria de ARNm
Se unen a la secuencia
complementaria de
Produciendo una ARNm y bloquean la
degradación enzimática traducción.
Los genes son la unidad
Todos los genes forman
mínima de información
el genoma
genética que contiene
información genética de
el ADN de un ser
la especie.
viviente
Los genes se Cromosomas se
encuentran dentro almacenan en el
de los cromosomas núcleo
Cada gen ocupa una Cada gen tiene su par
posición específica en (dos cromosomas un
Dos posibles versiones
el cromosoma (lugar materno y un
del gen alelo
denominado locus) paterno) pares
(loci en los dos genes) homólogos
LOCUS
LOCI
Alelos pueden ser iguales o
diferentes
Determina la expresión de algunos

rasgos físicos o fisiológicos
Alelos dominantes (se manifiestan)
• Se manifiesta siempre que están

presentes (A)
Algunos son recesivos (no tienden a

manifestarse
• No se expresan en presencia de
una alelo dominante (a)
Función de los genes
Forman parte de los

mecanismos de
Operan como un fabricación de la
molde o patrón vida.
Para la síntesis de
proteínas
Tipos de genes
• Contienen la
Genes información codificante
estructurales para generar una
proteína especifica
• Carecen de información codificante pero

cumplen funciones reguladoras, de
Genes ordenamientos
reguladores • Determinan el inicio y final de procesos
como la transcripción
• Cumplen roles durante la división celular
Estructura del gen
 Son una secuencia de nucleótidos

 Su orden específico codifica la secuencia
de aminoácidos que darán lugar a las
proteínas
Se componen de dos partes
• Exones: Región del gen que contiene el

ADN codificane (posee la secuencia
puntual de bases nitrogenadas que
permiten sintetizar una proteína
• Intrones: región del gen qque contiene

el ADN no codificante (no contiene
instrucciones para ls síntesis de proteínas)
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir los fenómenos que ocurren en el proceso de

división celular, ciclo celular y empaquetamiento del
genoma.
CONTENIDO
 Empaquetamiento del genoma
 Replicación del ADN
 Ciclo celular
 Meiosis
 Mitosis.
Debido a la longitud del
ADN genómico en las
células eucariotas
por ello, en el
empaquetamiento del
(alrededor de 2
ADN se distinguen
metros/célula)
diferentes niveles de
organización
El ADN se asocia con es necesaria su

nucleoproteínas compactación, de
(histonas y no-histonas) manera que permita
para formar la ocupar menos espacio y
cromatina y dar origen quepa dentro del
a los cromosomas núcleo de la célula.
El ADN esta empaquetado
en cromosomas
Cromosomas se encuentran
en el núcleo celular
Seres humanos poseemos en

cada célula 46 cromosomas
Desenreda la fibra del cromosoma se

observan pequeñas estructuras
circulares denominados nucleosomas
Cada nucleosoma posee 8

histonas
El ADN enrolla en los

nucleosomas y los junta
NIVELES DE EMPAQUETAMIENTO DEL ADN
Solenoide
Asas
(fibras de Cromosoma Cromosoma
Nucleosomas cromatínicas
30nm de condensado mitótico
(300nm)
cromatina)
Nucleosoma
Histonas carga positiva
a pH fisiológico alto
contenido de aminoácidos
lisina y arginina.
Una doble hélice de ADN

Propiedad que le permite espaciador (55pb) permite
unirse al ADN con carga unir los nucleosomas.
negativa.
Existen cinco tipos de

histonas: H1, H2A, H2B,
H3 y H4 octamero.
ADN de doble hélice (

146pb) 1,6 vueltas al Cromatosoma el
octamero octamero de histonas
más las dos vueltas que
da el ADN.
Formando el
nucleosoma
 La estructura se extiende y va formando un “collar de perlas”
Solenoide
Los nucleosomas
se compactan
para formar un Eucromatina
polinucleosoma, cromatina Heterocromatina
El ADN linker se El ADN esta
estructura más activa, más 
asocia con la compactado
compacta descompactada inativaforma
Histona H1 unas 100 veces.
solenoide  para compacta
forma una hebra transcripción.
de 30nm
cromatina
Asas cromatínicas
Las estructuras de fibra

de 30nm se pliega y se
condensa
forma unas estructuras de

asas amplias
supernrolladas
Las cuales se anclan sobre

proteínas de andamiaje y
dan lugar a una hebra de
300nm de grosor.
Cromosoma condensado
Las asas
cromatínicas se
compactan y
Progresión del Cromosomas
mayor nivel de forman
empaquetamie visibles en
empaquetamiento cromosomas
nto del ADN interfase
condensados
de 700nm de
espesor
Cromosomas mitóticos
Las cromátidas hermanas visibles

en la mitosis representan la
Llegan a medir 1400 nm de grosor.
última etapa de organización del
ADN.
 Cromosomas solo se
visualizan en los procesos
de división celular
 Cromosoma metafásico
Cariotipo
 Representación grafica de los cromosomas de un determinado
individuo .
Cromosomas homólogos codifican

para los mismos genes
22 pares de cromosomas autosómicos

1 par cromosomas sexuales
Síndrome de Down Síndrome de Turner
Ciclo celular
Conjunto ordenado de sucesos que
conducen al crecimiento de la misma y
su división
Conjunto de
pasos ordenados
Reproducción
asexual células
somáticas mitosis
Reproducción
sexual células
sexualesGametos
 meiosis
Principio de la teoría celular
“Toda célula procede de otra

célula preexistente”
División celular
Unicelulares
 como las bacterias cada división
produce un organismo nuevo completo
Pluricelulares
 ser humano a partir de un cigoto
(originado por la unión de dos gametos
sexuales) se necesitará una gran
cantidad de divisiones celulares formar
un organismo completo divisiones
durante toda la vida reponer células
muertas o regeneración.
1
Interfase (ciclo de
desarrollo o periodo
preparatorio) (días,
semanas o más)
• G1
•S
• G2
2
División celular (Fase M)
(aprox. 1h)
• Cariocinesis divide su núcleo

• Citocinesis divide la célula
• Células animales Centrípeta
• Células vegetales Centrifuga
De acuerdo con su potencial proliferativo, las células pueden categorizarse en:
Células lábiles Células estables Células

• Alta actividad • En condiciones permanentes
mitótica, tejidos que normales no se • Carecen de
se renuevan dividen, células que capacidad de
constantemente, se renuevan de división, células
revestimiento manera lenta, totamente
epitelial de las perdida tisular, ej: diferenciadas,
cavidades y hígado, tubulos especializadas. Ej:
suferficie corporal, renales, células eritrocitos al perder
espermatogonias. endoteliales de los su núcleo
vasos sanguíneos
1 Interfase
La célula crece, duplica sus

cromosomas y se prepara para una
división celular.
Duplica su material genético, es decir

el ADN, y todo su contenido
(proteínas, ARN, organelos,
membranas), de manera que duplica
su tamaño antes de dividirse en dos
células hijas.
La molécula de ADN no está en doble

hélice ni en forma de cromosomas,
sino en un estado parcialmente
condensado conocido como
cromatina.
Fase de descompactación (G1)
La célula dividida Incremento del

Síntesis de ARNm
entra a la fase G1 volumen celular
descondensación
Las células
mantienen su Atraviesa el punto
número de de inicio (start) de Síntesis de proteínas
cromosomas forma irreversible
constantes (2n)
Se descondensa la
La célula determina
cromatina de forma
condiciones
gradual a una forma Síntesis de orgánulos
adecuadas para la
extendida doble
división
hélice
Fase de duplicación o síntesis (S)
Las dos copias de cada
Duplicación del ADN
cromosoma
(replicación del ADN) 1 min (células
permanecen unidos
cada célula hija tenga embrionarias) a pocas
íntimamente entre las
una copía identica de horas
cromátidas hermanas
comosomas.
por las cohesimas.
Duplicación de
2n4n
centriolos
Duplica los Síntesis de proteínas

centrosomas histonas.
Fase de preparación para la división de la cromatina (G2)
Se realizan
Se sintetizan el Aumenta el tamaño
reparaciones si es
ARNm, ARNr y ARNt del núcleo
necesario
50 divisiones
se inicia la condensación
celulares Entra en
gradual de la cromatina Posee el doble de
G0 senescencia
(proceso inverso a la fase ADN comparado con
llega la muerte celular
G1 o de la fase G1.
y programada o
descondensación)
apoptosis.
Traduce el ADN
Aparecen los
necesario para
cromosomas
proteínas
generalmente se ve
tubulina huso
bajo el microscopio
mitótico
Condensación
Fase G0
Provienen de la fase M
No todas las células se replican constantemente
Estas células pueden ser:

• quiescentes (inactive) células parequima del hígado y riñon
• senescentes (envejecimiento o deterioro) no ingresan al ciclo
nuevamente
Etapa transitoria, durar largo tiempo o no dividirse

definitivamente.
SI el cuerpo lo requiere o las condiciones son idóneas,

pueden seguir la fase G1.
Células cancerígenas inducir a G0 para que no se dividan

Células del pulmón, riñón e hígado
PUNTOS DE CONTROL
 Control para que una célula pase o no a la siguiente fase
Ciclinas M se unen a la
CDC2
Estimulan el factor MPF
Ciclinas G1
Unen a una CDK2
(quinasas) fosforilan
Forman complejo
Proteínas P53 revisa si el
SPF factor promotor de la
ADN está apto para
fase S
replicarse
Replique de forma Tamaño apropiado

correcta el ADN Existencia de ADN dañado
Control del ciclo celular
Control de cada etapa
Participan proteínas permiten

o no, el avance del ciclo.
Ciclinas y cinasas dependientes de

ciclinas (CdK)
Se unen una transfiere grupos

fosfatos del ATP a residuos de serina y
treonina de las proteínas diana
implicadas en la progresión del ciclo
celular
Otra es subunidad
reguladora
> conc. Ciclina se

activa la cinasa 
proceso avanza
2 Fase M
Mitosis o
meiosis
MITOSIS
De un núcleo se
forman dos núcleos.
Reparto completo
del material genético
FASES MITOSIS
Profase
Se condensa el
ADN
Desaparece el
nucléolo
Centrosomas
hacen crecer
sus microtubos
Empieza
aparecer el uso
mitótico
Prometafase
Se rompe la
envoltura nuclear
Los microtúbulos
de los usos
mitóticos se unen
a los cinetocoros
Metafase
Cromosomas se
colocan en el
medio de la célula
(placa ecuatorial)
Condesados al
máximo los
cromosomas
Anafase
Los cromosomas se
separaran en sus dos
cromátidas
Cada cromátida va a los

polos apuestos (los
microtúbulos se acortan).
Se rompe el centrómero
La célula empieza a
estrecharse por el medio
Telofase
Las cromáticas llegan a los polos
Se descondensan los cromosomas
Aparecen los nucléolos
Aparece la envoltura nuclear
Microtúbulos se disgregan
De un núcleo se forman dos
Los centrosomas en cada célula

Citocinesis o citodiéresis
Se forma un anillo de actina que se contrae,
dividiendo el citoplasma
Se divide la célula en dos
En células animales: estrangulación en el

ecuador del huso (proteínas de la membrana
actina y miosina) y forman el anillo
contractil.
Células vegetales acumulación de

vesículas, poseen elementos de la pared
celular fusionan con las paredes laterales
tabique o fragmoplasto la célula se divide.
MEIOSIS
Dos objetivos
• División celular
• Variabilidad genética
Se dan en Dos
células de ciclos
línea 4
germinal células
Meiosis
Células
2nn sexuale
s
Resultad
o
células
haploides
MEIOSIS I
Profase I
Leptoteno Cigoteno Paquiteno Diploteno Diacinesis
Leptoteno
• condensa los cromosomas
duplicados, empiezan
hacerse visibles, forman
largas turas en el núcleo.
Cigoteno
• pares de cromosomas homólogos
(paterno y materno) se aproximan
entre sí, y tiene lugar la sinapsis o
apareamiento, comienza por los
extremos y se extiende a lo largo.
• Se forma una tétrada o bivalente
Paquiteno
• Se completa la sinapsis en todos los
cromosomas.
• Entrecruzamiento mediante quiasmas
• Tiene lugar un intercambio genético
produciendo recombinación genética
(variabilidad).
• se entrecruzan los cromosomas
(quimasmas), intercambio de material
genético.
Diploteno
• separan los cromosomas
homólogos
• Se mantienen unidos por los
quiasmas.
Diacinesis
• Cromosomas se condensan al
máximo
• Desaparece el núcleo
• Desaparece la membrana nuclear,
quedan libres en el citoplasma.
• Cada bivalente esta unido por cuatro
cromátidas (tétradas)
Metafase I
Los cromosomas homólogos

se alinean en el plano
ecuatorial completamente al
azar, lo que garantiza la
reunión de los cromosomas
maternos y paternos.
Anafase I
Es la separación de
cada bivalente, que se
desplazan hacia los
polos opuestos de la
célula.
Cada cromosoma sigue

constituido aún por dos
cromátidas.
Telofase I
Los cromosomas llegan hasta
los polos opuestos
Se vuelven a formar los núcleos

y comienza la citocinesis.
Cada célula hija recibe 23 cromosomas

(n), pero como cada cromosoma está
compuesto por dos cromátidas
El contenido de ADN todavía es

diploide.
Cada una de las células hijas

recién formadas entra en la
meiosis II.
Meiosis II (o división ecuatorial)
Tan sólo tiene lugar la separación por el

centrómero de cada cromosoma para
liberar las cromátidas que emigran a cada
polo opuesto del huso.
En el hombre, cada uno de los cuatro

gametos resultantes sufre una
transformación hasta espermatozoide
maduro.
En la mujer, el citoplasma se distribuye de

manera desigual entre los cuatro gametos
resultantes: uno de ellos lo gana casi todo
(óvulo), mientras que los otros tres
(cuerpos residuales) degeneran.
Esta división no va precedida por una fase S; por lo demás, resulta bastante similar a la mitosis:
Profase II
• Es muy corta; se rompe la membrana nuclear
y se forma el nuevo huso.
Metafase II
• Los cromosomas, cada uno de ellos formado
por dos cromátidas, se alinean en el plano
ecuatorial.
Anafase II
• Se separan las cromátidas de cada
cromosoma.
Telofase II
• Se forma la membrana nuclear alrededor de
los cuatro núcleos haploides y comienza la
citocinesis.
• El resultado final son cuatro células hijas que,
a diferencia de lo que ocurre en la mitosis,
contienen el número haploide de cromosomas
y son distintas desde el punto de vista de su
dotación genética.
• Cada gameto contiene su propio
complemento genético único.
REPLICACIÓN
DEL ADN
Capacidad de formar Se lleva acabo en la Objetivo conservar la
ADN
copias de si mismo fase S del ciclo celular información genética
Se va adicionando
Los dNTPs se añaden a Proceso denominado Sintesis de las cadenas
desoxirribonucleótidos
la hebra molde polimerización de ADN 5´3´
(dNTP) al extremo 3´
Aprovechando
la
Se generan dos División
complementarie Sin replicación
Molécula de moléculas de celular las
dad se terminaría la
ADN se separa ADN idénticas nuevas células
construye la vida
entre ellas tienen ADN
cadena
complementaria
 La replicación del ADN cuenta con tres
características que la definen y permiten
entender el proceso:
Semiconservadora
Antiparalela Bidireccional
Semiconservadora
Significa que en la replicación una molécula de ADN recién sintetizada conserva una de las
cadenas originales y la otra es sintetizada de novo.
Anteriormente:
Semiconservadora (modelo
correcto)
•En cada una de las moléculas hijas se
conserva una de las cadenas originales.
Conservadora
•Se sintetiza una molécula totalmente
nueva, copia de la original, por lo que
tras la duplicación quedan, por un lado,
las dos hebras antiguas juntas y, por otro,
las dos hebras nuevas.
Dispersora o dispersante
•Las cadenas hijas constan de fragmentos
de la cadena antigua y fragmentos de la
nueva.
Bidireccional
A partir del sitio de origen ORI o ARS, se
sintetizan las cadenas en ambos sentidos .
Con dos puntos de crecimiento que

forman lo que se conoce como
horquillas de replicación.
Eucariota varios ORIS debido al tamaño

replicación se considera multifocal
Bacterias y virus un solo ORI ADN

circular replicación monofocal
ORI secuencias específicas ricas en A y T
Y controlan la replicación de una

unidad de ADN llamada replicón
A:T facilita la separación de las hebras y

formación de la burbuja de replicación.
Discontinua
Una cadena se
Una cadena
sintetiza en “Fragmentos de
continua y la otra
fragmentos Okazaki”
en fragmentos
cortos
Cuestión la Longitud 1000

Replicación y 2000
sesolvió los
siempre en nucleótidos en
janoneses
sentido 5´3´ bacterias y 100 y
Okazaki en 1960
400 nucleótidos
en eucariotes.
El extremo 3´-OH
Una de las
libre punto a
cadenas debería
partir del cual
sinterizarse en
produce la
3´5´
enlongación
Las cadenas
5´ de una cadena
deben crecer de
se enfrenta con
forma simultanea
el extremo 3´ de
a pesar de ser
la otra.
antipáralelas
Las cadenas que se sintetizan:
En sentido que avanza la horquilla de replicación En sentido contrario al avance de la horquilla se

se denomina denomina
• hebra adelantada, líder o conductora, continua • hebra rezagada o retrasada, atrasada se
 se sintetiza de forma continua por la ADN sintetiza de forma discontinua o en fragmentos,
polimerasa. y para disponer de una cierta longitud de ADN
molde para continuar hay que esperar a que la
horquilla de replicación avance.
Proteínas que participan en la replicación
Helicasa
• separa las dos hebras del ADN rompiendo puentes de hidrógeno
Proteínas de unión a cadena sencilla (SSB procariotas; RPA eucariotas)

• Evita la formación de los puentes de hidrógeno entre las cadenas separadas y permiten que se copien
Topoisomerasas
• Cortan y forman enlaces fosfodiéster ya sea una de las hebras (topoisomerasa I) o las dos (topoisomerasa
II). Escisión selectiva y libera la tensión del superenrollamiento (elimina tensiones)
Primasa
• Sintetiza pequeños fragmentos de ARN de 8-10 nucleótidos, conocidos como primers o cebadores, complementarios a un fragmento
de ADN. La unión de los cebadores proporciona un extremo 3´ necesario para que la ADN polimerasa lleve a cabo su acción. (ADN
polimerasa enzima que sintetiza ADN y que no puede añadir nucleótidos si no existe un extremo 3´libre)
Rnasa H1
• Nucleasa (enzimas catalizan ruptura de enlaces fosfodiester) encargada de retirar los cebadores de ARN durante la síntesis de los
fragmentos de Okazaki y en los procesos de reparación del ADN.
FEN1/RTH1
• Endonucleasa flap 1 , se encarga de remover el ribonucleotido 5´ del fragmento de Okazaki.
Ligasa
• enzima que cataliza la formación del enlace fosfodiéster entre nucleótidos contiguos.
Telomerasa
• Ribonucleoproteína con actividad de ADN polimerasa, sintetiza secuencias de ADN en los telómeros
Antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA)

• Homotrímero, forma una estructura toroide, se abre por acción del RFC (factor de replicación C), y permite su circulación alrededor
de la doble hélice del ADN. A la altura del extremo de primer en la cadena líder. PCNA interactúa con la ADN polimerasa, sirviendo
como una pinza que sostiene a la polimerasa en el extremo del primer y le permite sintetizar la cadena de ADN.
ADN POLIMERASA
Sintetizan nuevas cadenas de ADN a partir de la

hebra patrón o molde y los dNTPs
(desoxiribonucleótidos).
Añade los nucleótidos en dirección 5´3´

siempre y cuando haya un extremo 3´ disponible.
Leerá la cadena molde en dirección 3´5´
En eucariotascinco AND polimerasas

involucradas en la replicación del ADN, cada una
con una actividad específica: α, β, γ, δ y ε.
ADNpol Eucariotas
ADNpol α ADNpol δ y ADNpol ε ADNpol β
• también llamada primasa, • son responsables de la • Involucrada en la
inicia la síntesis del ADN mayor parte de la reparación de errores o
mediante la formación de elongación de ambas daños en el ADN. Une
un cebador ARN. hebras del ADN. fragmentos de okasaki
función ligasa
ADNpol Involucradas en la
α, β, δ replicación del ADN Rompen enlaces fosfodiester:
yε nuclear Exonucleasa extremos 3´o 5´
Endonucleasa medio de la cadena
Lleva a cabo la replicación del Existen otras polimerasas, como las

ADNpol γ ADN mitrocondrial polimerasas ζ (theta), η (eta) y ι (iota),
cuya función no es muy conocida, pero
se cree que están involucradas sobre
Actividad exonucleasa-3´ (elimina todo en mecanismos de reparación y
ADNpol nucleótidos), capaces de corregir errores, recombinación.
δ, γ y ε elimina nucleotiodos erróneos por
correctos.
ADNpol PROCARIOTAS
ADNpol I ADNpol II ADNpol III

• Función polimerasa 5´3´ • Función polimerasa • La que más nucleótidos
• Doble exonucleasa elimina 5´3´ pone
nucleótidos 5´3 y 3´5´ • Exonucleasa 3´5´ • Mas adecuada para
• Elimina los ARN primers y • Corrige errores de la construir la cadena
los sustituye por ADN cadena complementaria
• ADNpol III pone mal un • Función polimerasa 5´3´
nucleótido la ADNpol I lo • Doble exonucleasa
retira elimina nucleótidos
5´3 y 3´5´
FASES DE LA
REPLICACIÓN
INICIO ELONGACIÓN TERMINACIÓN

INICIO
Existen lugares
específicos en el ADN
Sitios ricos en A y T
donde se iniciará la
replicación (300pb)
Son reconocidos por

Se crea la burbuja de proteínas de
replicación reconocimiento del
sitio de origen
Posee dos horquillas

( y )
Se separan las dos cadenas
de ADN Helicasa rompe
los puentes de H
Se provoca inestabilidad en
las cadenas simples se
unen las proteínas
estabilizadoras SSB
Primasa sintetiza un
cebador o primer
primasa
ADN polimerasa iniciará la

síntesis incorporando dNTPs
complementarios a las
bases de la cadena patrón.
Dirección de la
horquilla de
replicación
3´ 5´
5´ 3´
3´ 5´
5´ 3´
SSB Burbujas de replicación
Helicasa
Primasa
Elongación
ADN polimerasa añade
Horquilla avanza
los nucleótidos a
aumenta la tensión por
medida que avanza la
delante de la cadena
horquilla
Las topoisomerasas I y II
La cadena líder
cortan los enlaces
síntesis de forma
fosfodiéster para evitar
continua un solo
que la tensión impida el
cebador
avance de la horquilla.
Cadena retrasada
forma discontinua
fragmentos de Okazai
cebadores intercalados
5´
3´
(ADNpol)Nucleasa
Lee 3´5´ pero sintetiza 5´3´

Primasa
Primasa
Terminación
Produce un Completar la síntesis de la

ADNpol llega al extremo
descoplamiento de todo el cadena retardada y unir
del fragmento del ADN.
replisoma los fragmentos de Okazaki
Este proceso se
Eliminación de los cebadores
denomina maduración
Espacio que quedó por la ADN ligasa une el espacio

eliminación del cebador resultante.
Nucleasa
Siempre se lee la cadena molde en dirección 3´5´
3´ 5´
5´ 3´
3´ 5´
5´ 3´
3´ 5´
5´ 3´
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir el proceso de transcripción al ARN mensajero,

traducción a proteínas, los tipos de mutación y
mecanismos de reparación.
CONTENIDO
 Transcripción al ARN mensajero
 Traducción a proteínas
 Código genético.
 Mutación y mecanismos de reparación.
Transcripción es el paso previo para la
generación de proteínas
Las secuencias de AND que se copian en cada

proceso de transcripción se denominan genes
gen es una secuencia lineal de nucleótidos en

la molécula de ADN
Humanos aproximadamente 23 000 genes

Estructura del gen
Procariotas operones Eucariotas se transcribe
conjunto de genes solo un producto génico
Proceso de transcripción
situados en el mismo (unidades
en eucariotas más
fragmento de ADN, se transcripcionales
complejo que en
transcriben como una sola monocistrónicas) con
procariotas
unidad genera varios mayor complejidad en su
productos funcionales. regulación
Policistrónico codifican a más de una proteina con un ARNm MonocistrónicaUna sola cadena de
Cadena codificadora
El primer paso de la expresión

génica es la transcripción
Consiste en la síntesis de una cadena

de ARN complementaria y
antiparalela a la secuencia de
nucleótidos de una de las cadenas
de ADN denominada cadena molde
Por tanto tiene la secuencia idéntica

a la cadena opuesta del ADN llamada
cadena codificadora (timina se
sustituye por Uracilo en el ARN)
Transcripción es el paso previo para

la generación de proteínas. cadena molde
ARN complementario
Los genes eucariotes están constituidos por
secuencias regulatorias y codificantes.
• El inicio del sitio de transcripción se

Dirección denomina +1, y la numeración
corriente aumenta conforme se dirige al
extremo 3´, donde se encuentran
abajo las secuencias codificantes del gen.
Dirección • la numeración se indica como —1,

dirección hacia el extremo 5´,
corriente donde se encuentra la mayoría de
arriba regiones regulatorias del gen
La región codificadora del gen posee
• Intrones regiones que no serán traducidas y

que son retirados por medio del proceso corte y
empalme del ARNm primario o heterogéneo
nuclear (ARNhn).
• Exones regiones que codifican para el
producto génico
El tránscrito primario o ARNhn es el

producto inmediato de la transcripción y
consiste en un ARN que contiene las
secuencias intrónicas y exónicas, cuyos
extremos 5’ y 3’ no han sufrido ninguna
modificación.
El producto final, ARN mensajero

maduro, ARN ribosomal (ARNr) y ARN
transferencia (ARNt) (obtenidos por
modificaciones postranscripcionales)
Procariotas ARN recién sintetizado no sufre modificaciones

postranscripcionales
A los promotores se
Promotor basal El
les unen proteínas
promotor basal es
reguladoras
Promotores la secuencia
conocidas como
secuencias de ADN Promotor mínimo mínima requerida
factores
regulatorias que no region regulatoria para la unión de la
transcripcionales
codifican para el indispensable para maquinaria basal
(transcriptional
producto génico, la transcripción del de transcripción y
factors, TF)cuya
pero regulan su gen. para la ARN pol II
función es regular
expresión incluye el Inr
(aumentar o
(iniciador) y la caja
disminuir) la tasa
TATA o el DPE.
de transcripción.
Secuencias consensos  comunes entre sí reconocidas por la ARNpol II región conocida como iniciador
(Inr) localizada entre las posiciones –3 y +5.
CAJA TATA El DPR (downstream promoter

• 8 pares de bases A-T se localiza a –31 a –25 element)
bp hacia el extremo 5’ del punto de inicio, • es un elemento común en los promotores TATA
promotores sin caja TATA (TATA menos). menos, se localiza de +28 a +32.
Promotores distales ayudan a los
promotores débiles a iniciar la
transcripción se encuentran a más de
200pb corriente arriba del sitio de inicio de
la transcripción
Las regiones que controlan la transcripción

de un gen no necesariamente tienen que
estar cerca de la región codificadora.
Los potenciadores o secuencias

amplificadoras (enhancers) son secuencias
cortas que potencian o aumentan la
transcripción del gen de manera
cooperativa con otras secuencias
reguladoras y alteran la estructura del
ADN.
Silenciadores
Silenciadores secuencias cortas de nucleótidos de dos tipos: los elementos silenciadores
o los elementos de regulación negativa (negative regulation elements, NRE), actuan:
1. Modificando la 3. Alterando el proceso

estructura de la de corte y empalme del
cromatina y evitando ARN heterogéneo
que los genes sean nuclear y evitando su
activados. maduración.
2. Reclutando factores 4. Creando señales que

transcripcionales bloquean la traducción,
represores y evitando e inactivando así la
que factores expresión génica.
transcripcionales
inductores se unan al
ADN.
Tipos de ARN polimerasa (ARNpol)
Sintetiza una cadena de ARN en dirección 5’3’ encima de

una cadena de ADN.
Esta enzima actúa de manera continua durante toda la

unidad de transcripción:
• Primero sobre el sitio de inicio indicado en el promotor basal (caja TATA)
• Continúa en la secuencia codificadora
• Finaliza en una secuencia de terminación (rica en GC independiente de
rho) (rho se une a la secuencia RUT el factor rho se une y termina la
síntesis)
En las células eucariotas los genes nucleares son transcritos

por tres tipos de ARN pol: I, lI y III, que transcriben
diferentes tipos de genes en lugares específicos del núcleo.
La ARN pol I reside en una zona definida del núcleo, el

nucleolo, donde transcribe los genes que codifican para lo
ARNr.
 Eucariotas
 Procariotas  No factor sigma
 Factor sigma
 ARNpol I (ARNr)
 Una sola ARNpol (fabrica
 ARNpol II (ARNm)
(ARNm, ARNr, ARNt)
 ARNpol III (ARNt)
 Ocurre la transcripción en el núcleo
 La traducción en el citoplasma
ETAPAS DE LA
TRANSCRIPCIÓN
INICIACIÓN
ELONGACIÓN
TERMINACIÓN
INICIACIÓN
ARNpol II se une al promotor
(inicio del gen)
ARNpol II separa las cadenas

de ADN σ
La ARNpol llega con el factor

sigma y se une (procariotas)
Avanza la ARNpol (sibtetiza

5´´3´) (lee 3´5´)
ELONGACIÓN
La ARNpol II añade en
dirección 5´3´ los
ribonucleótidos.
Si se lee una A en la cadena

molde se colocará un U.
La ARNpol II avanza por todo la

cadena de ADN hasta
encontrarse con un terminador.
TERMINACIÓN
 Implica dos procesos:

 Independiente de RhoFinaliza
leyendo una secuencia de
terminación (rica en GC), cuando
la ARNpol la sintetiza y se genera
un lazo o bucle y se deja de
transcribir, desacoplándose la
enzima.
 Dependiente de Rho
factor que se une a
una secuencia
especifica RUT
sintetizada del ARN,
rho se une tira de ella
y libera el ARN
fabricado.
 Hidroliza ATP para
tirar de la cadena de
ARN.
 Desestabiliza la
ARNpol II y deja libre
el ARN
 Factor Rho se queda
libre.
Procesamiento del ARN
El ARNm es sintetizado en Adición de alrededor de
el núcleo y requiere de ser 200 residuos de adenina en
transportado al citoplasma el extremo 3’ por la enzima
para su traducción. poli-A polimerasa
construyendo la cola de
poli(A).
El extremo 5’ se modifica
cuando el ARN es apenas un La ARN pol II continúa
polímero de 20 a 40 añadiendo nucleótidos
ribonucleótidos. antes de colapsar la
burbuja de transcripción
Añade 7-metil-guanosina, en
tres pasos enzimáticos: la
eliminación de un grupo fosfato
(enzima ARN trifosfatasa); la Formando una región
adición del nucleótido guanina terminal 5' una caperuza
(enzima guanilil transferasa), y (cap) metilada.
por último, su metilación
(enzima metil transferasa).
La región codificadora del gen también contiene
regiones que no serán traducidas, denominadas
intrones, y que son retirados por medio del
Procesamiento del ARN
proceso corte y empalme del ARNm primario o
heterogéneo nuclear (ARNhn).
Las regiones que codifican para el producto

génico se conocen como exones.
Antes de que se produzcan proteínas los

intrones deben ser eliminados
Proceso denominado corte y empalme

(splicing) .
Maduración del ARNhn
Se realiza en la unidad catalítica

denominada espliceosoma Espliceosoma
Compuestos por ribonucleoproteínas
pequeñas nucleares (snRNP)
snRNP se unen al extremo 5´ del intrón y

otra al extremo 3´ del intrón
Otras snRNP interactúan con el complejo.
Ponen en contacto los dos extremos del

entrón formando un lazo.
TRADUCCIÓN
Cambio del lenguaje de ácidos
nucleicos (sucesión de
nucleótidos)
al lenguaje de proteínas
(sucesión de aminoácidos)
CITOPLASMA(RIBOSOMAS)
Aminoácidos están libres

en el citoplasma y llegan
hacia el ribosoma
mediante el ARNt
Sitio (E)
Salida del ARNt
después de dejar
el aminoácido
aminoacil-ARNt
Sitio peptidil (P)

Sitio aminoacil (A)
Peptidil ARNt,
lleva la cadena Entrada a nuevos
polipeptidica aminoacil-ARNt
creciente
Enzima Aminoacil-ARNt-sintetasa cataliza la esterificación de un
aminoácido específico con un ARNt
 Une específicamente cada aminoácido leyendo el codón correspondiente

 Tiene tres sitios activos
 Se une un ARNt
Aminoacil-ARNt Específico para cada aa
 Se une un aminoácido
 Se une ATP da la energía para formar el enlace
 Codón se une un anticodon une un aminoácido específico
 Sucesión de codones sucesión de aminoácidos proteína específica
 Met codón AUG primero que tiene todas las proteínas.
 codones para parar (UAA, UAG, UGA)
Etapas de la traducción
Iniciación
Elongación
Terminación
Iniciación
Tenemos los aminoacil-ARNt
sintetizados
A la subunidad menor del

ribosoma se une el aminoacil-
ARNt de la metionina
Se une el ARNm al ribosoma y encaja

el codón (AUG) con el anticodon
aminoacil-ARNt de la metionina
Se une la subinidad mayor
El aminoacil-ARNt de la
metionina se une con el sitio
peptidil
En eucariotas
Se repiten estos pasos continuamente ELONGACIÓN
1
• Unión al sitio aminoacil de un aminoacil-
ARNt para que encaje codón con
anticodon.
2
• Peptidil transferasa rompe el enlace ester
que une (aminoácido con el ARNt) y
transfiere esa energía a un enlace
peptídico entre el aminoácido nuevo y el
péptido.
• El ribosoma avanza un triplete 5´3, lo
del sitio peptidil se va y lo del aminoacil
pasa al sitio peptidil y el aminoacil queda
libre para que se una otro aminoacil
nuevamente.
Terminación
 Llega al codón de parada (UAG,

UGA,UAA)
 No determina un aminoácido
sino la terminación de la
traducción.
 Peptidil transferasa rompe el
enlace ester (energía no se
utiliza para formar un enlace
peptídico)
 La energía se lleva una
molécula de agua, y la
proteína se desune.
Ejercicio traducción
 AGU UGA GGA AAG UGC CCA CGU CAA CGA GAC
MUTACIÓN
Cambio de la secuencia de DNA de un individuo provocado
por:
• errores de replicación
• la alteración espontánea de nucleótidos
• agentes físicos o químicos (mutágenos)
• exógenos o endógenos
Puede afectar tanto a partes codificantes como a no

codificantes
Puede o no ser hereditaria (células germinales o somáticas,

respectivamente)
Junto con la recombinación meiótica son las principales

fuentes de variabilidad genética en todo tipo de organismos
Secuencia normal  salvaje, silvestre o wild type

Secuencia alterada  mutante
En el caso de Efectividad
la replicación de la lesión
Los procesos Algunas
del ADN dependerá:
de lesiones del
existen • Tasa de división
replicación Provocando ADN se
sistemas de celular
son precisos errores escapan
reparación • Eficiencia de los
pero no causando mecanismos de
específicos y
perfectos mutaciones reparación
bien
coordinados
CLASIFICACIÓN DE LAS MUTACIONES
Las mutaciones pueden clasificarse desde diferentes enfoques.
Pueden ocurrir tanto en los genes como en los cromosomas, en un tejido somático o en un tejido
germinal, lo que define una mutación somática y germinal, respectivamente.
 Mutación germinal
 Ocurre en óvulos y espermatozoides, se transmiten a la siguiente generación
 Mutación somática
 Ocurre en cualquier célula del cuerpo excepto germinales por lo que no se
transmiten a su descendencia (solo a las células que se originen a partir de ésta si
esta en división).
 Cancer mutaciones en genes que controlan la división celular
Clasificación según origen
 Tipo de célula
 Germinal
 Somática
 Magnitud
 “Grandes” anomalías cromosómicas
 “Medianas” regiones génicas*
 “Pequeñas” puntuales (1 solo nucleótido)*
* Génicas
Según Mecanismo
 Endógenas (espontáneas)
 Errores de replicación
 Desaminación oxidativa
 Inestabilidad química
n-glicosídico
 Mutágenos endógenos (p.ej.

radicales libres)
Según Mecanismo
 Exógenas (inducidas por mutágenos)
 Agentes químicos
• Acción directa
• Alquilantes
• Intercalantes bifuncionales
 Agentes físicos
• Radiación UV
• Radiaciones ionizantes
 Agentes biológicos
• virus
De acuerdo con la magnitud del material genético afectado, las mutaciones suelen clasificarse
en tres tipos: puntuales o génicas, cromosómicas y genómicas.
 Mutación puntual o génica

 Ocurre en un par de bases o en un número reducido de bases adyacentes y puede
deberse a modificaciones químicas del ADN que cambian una base nitrogenada por
otra diferente.
 De acuerdo con las bases sustituidas, las mutaciones puntuales pueden
clasificarse en dos grupos:
 Transición
 cambio de un nucleótido por otro de la misma clase; es decir, purina por purina o
pirimidina por pirimidina
 Transversión
 cambio de un nucleótido por otro de diferente clase; es decir, purina por pirimidina o
pirimidina por purina
Mutaciones génicas por
cambio de nucleótido
 Sustituciones de bases: cambio o sustitución de una base por
otra en el DNA
 Transiciones: cambio de una purina por otra purina, o de una
pirimidina por otra (A por G) ó (T por C)
 Transversiones: cambio de una purina por una pirimidina o viceversa
Mutaciones génicas por cambio de
tamaño (desfase)
 Producen cambios en el cuadro de lectura

 Inserciones o adiciones: ganancias de uno o más nucleótidos
 Deleciones: pérdidas de uno o más nucleótidos

Mutaciones génicas por cambio de
tamaño (desfase)
 Duplicaciones: repetición de un segmento de DNA del interior de un gen
 Inversiones: un segmento de DNA del interior de un gen se invierte
 Transposiciones: un segmento de un gen cambia de posición o ubicación
dentro del gen o genoma
Mutaciones génicas por formación de dímeros de
nucleótidos
La asociación covalente de dos T:

• impide el emparejamiento con sus A complementarias
• origina una estructura tridimensional localmente incompatible con el
giro de la doble hélice, que fuerza una flexión en la molécula de DNA
• se paraliza la replicación, pues la DNA polimerasa no puede reconocer
los dímeros y se detiene
Mutaciones génicas por la actividad de
radiaciones ionizantes
 Las radiaciones ionizantes (rayos X y rayos γ) pueden provocar:

 apertura de los anillos
 fragmentación de las bases
 rotura del esqueleto covalente del DNA
 (por fotólisis del agua) la generación de radicales de hidróxilo, que producen 8-hidroxiguanina,
entre otros
 Debido a su mayor poder de penetración, estas radiaciones afectan a todo tipo de tejidos, a
diferencia de la luz UV, que provoca lesiones solamente en la piel
Mutaciones, repercusión en la proteína
sintetizada
 Silenciosas o sinónimas  No causan cambio significativo (mismo aa),
polimorfismos
 No silenciosas  causan cambios notables

 De sentido alterado
 Conservadoras
 No conservadoras
 Desplazamiento de marco
 Sin sentido/de terminación prematura
 De terminación tardía
Mecanismos de
reparación del DNA
Reparación del DNA
Tipo de reacción Ejemplo Error reparado
Eliminación de mutágenos Superóxido dismutasa Evita lesión oxidativa
Reversión directa Alquiltransferasa Derivados de alquilo de las

bases
Escisión de nucleótidos Sistema escilnucleasa Evita distorsión de la doble
general hélice
Escisión de nucleótidos N-glicosidasas y Eliminan bases
específica endonucleasas desaminadas, oxidadas, etc
Reparación de Proteínas correctoras de Detecta y corrige errores

apareamientos incorrectos errores MMR (hMLH1) de apareamiento
Eliminación de mutágenos
 Previenen daños mediante neutralización de mutágenos
Reparación por alquiltransferasa
Agentes químicos alquilantes

Mecanismo general de reparación por
escisión
 Mecanismo mediante el cual, proteínas específicas detectan y reemplazan los errores
 NER, nucleotide excision repair: intervienen proteínas que reconocen distintos tipos de alteraciones que causan
distorsión en la doble hélice, como los dímeros de timina o una base con un sustituyente voluminoso (psoraleno,
cisplatino, acetamidofluoreno, etc.)
Reparación de apareamientos
incorrectos
MutS recorre el DNA y encuentra apareamientos

incorrectos introduciendo una torcedura en el DNA. En
pasos sucesivos, MutS recluta MutL y MutH, y la
actividad de ATPasa de MutS cataliza la hidrólisis de ATP.
MutH es una endonucleasa que crea una mella en el
DNA cerca al sitio de la mutación. Después, una
exonucleasa digiere la hebra mellada moviéndose hacia
adelante y atrás el apareamiento incorrecto.
Finalmente, el espacio resultante de la hebra sencilla se
llena debido a la actividad de la DNA polimerasa,
eliminando la mutación.
Mecanismo específico de reparación por
escisión
 BER, base excision repair se encarga de reparar bases
específicas
 reconoce y actúa en sitios concretos, reparando lesiones
que son demasiado sutiles para distorsionar gravemente
el DNA, es decir, que no reconoce por el sistema general
de escisión de nucleótidos.
 Reparación post replicación
 Cuando el resto de los mecanismos han fallado
 En humanos se han identificado 5 proteínas MMR
(¨Mismatch repair¨)
 hMLH1, hMSH2, hPMS1, hPMS2, hMSH6
Reparación de dímeros de
nucleótidos
 Fotorreactivación: Irradiación con luz UV causa la formación de

dímeros de timina. Al exponerse a la luz, la enzima DNA fotoliasa
rompe el anillo que se ha formado entre los dímeros para restaurar
los dos residuos de timina.
Enfermedades causadas por defectos
en genes de reparación de mutaciones
 Xerodermia pigmentosa
• Cáncer de piel (también denominado xerodermia de Kaposi o melanosis lenticular
progresiva)
• Deficiencia en alguno de los genes responsables de la reparación por escisión de
nucleótidos, conduciendo principalmente a la acumulación de dímeros de timina
• La piel de estos enfermos es extremadamente sensible a la exposición a los rayos
ultravioleta de la luz solar, ocasionándoles cánceres de piel con una frecuencia 1.000 o
2.000 veces superior a la de personas normales
• También sufren una incidencia entre 10 y 20 veces mayor de cánceres en órganos
internos, y síntomas neurológicos como retraso mental, ataxia progresiva y sordera
• Se han identificado defectos causantes de XP en 7 genes del sistema de reparación,
que codifican componentes de la escinucleasa: XPA , XPB , XPC , XPD , XPF , ERCC1 y
XPG
 Síndrome de Cockayne
• Caracterizado por enanismo, retraso mental y síntomas neurológicos
progresivos causados por desmielinización
• Sensibilidad moderada a la radiación ultravioleta
• Se origina por mutaciones en los genes CSA o CSB , relacionados con
la reparación acoplada a la transcripción
• Algunas mutaciones de XPB , XPD y XPG dan lugar a síndromes
solapantes XP/CS
Síndrome de Lynch
• Cáncer colorrectal hereditario - no asociado a poliposis
• Uno de los cánceres hereditarios más comunes
• Defectos en los genes hMSH2 o hMLH1 , ambos responsables
de la reparación de emparejamientos incorrectos
• El sistema de reparación defectuoso no elimina pequeños
bucles monocatenarios de DNA, lo que conduce a una mayor
longitud de algunos microsatélites de DNA
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir las características básicas de la herencia, leyes

de Mendel.
CONTENIDO
 Bases de la herencia
 Conceptos básicos de herencia biológica.
 Leyes de Mendel
 Primera Ley de Mendel
 Segunda Ley de Mendel
 Cruzamiento y retrocruzamiento
 Tercera Ley de Mendel
 Herencia mendeliana en plantas y animales
CONCEPTOS BÁSICOS
Gen: Unidad básica de la herencia que consiste en un segmento de ADN que codifica una proteína
específica o un segmento de una proteína (o una molécula de ARN) con una característica o función
determinada.
Fenotipo: rasgos observables en un organismo, incluyendo su morfología, fisiología y conducta a todos los
niveles de descripción. Determinado por el genotipo y el medio.
Genotipo: Es el conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores.
Alelo: variante o versiones de como se expresa un gen. Cada gen tiene dos alelos que se sitúan en el mismo
locus o lugar del cromosoma. Un individuo hereda dos alelos para cada gen, uno del padre y el otro de la
madre.
Herencia: Transmisión de información genética de los progenitores a su descendencia
Genética: Ciencia de la herencia, estudia similitudes genéticas y variaciones genéticas , las diferencias
entre progenitores y s u descendencia o entre individuos.
Cada gen ocupa una Cada gen tiene su par
posición específica en (dos cromosomas un
Dos posibles versiones
el cromosoma (lugar materno y un
del gen alelo
denominado locus) paterno) pares
(loci en los dos genes) homólogos
LOCUS
LOCI
Alelos pueden ser iguales o
diferentes
Determina la expresión de algunos

rasgos físicos o fisiológicos
Alelos dominantes (se manifiestan)
• Se manifiesta siempre que están

presentes (A)
Algunos son recesivos (no tienden a

manifestarse
• No se expresan en presencia de
una alelo dominante (a)
Las Leyes de Mendel
Las Leyes de Mendel son un Él no sólo describió sus
conjunto de reglas básicas observaciones sino que planeó
sobre la transmisión por de manera cuidadosa sus
herencia de las características experimentos, registró los
de los organismos padres a sus datos, y analizó resultados.
hijos.
Las leyes se derivan del Mendel fue el primer científico

trabajo realizado por Gregor en aplicar de manera efectiva
Mendel publicado en el año métodos cuantitativos para
1865 y 1866. estudiar la herencia.
Si bien muchas de las

Ciertas interacciones entre los
características se heredan de
alelos, interacciones entre los
acuerdo con las leyes
genes, e interacciones con el
establecidas por Mendel, otras,
medio ambiente explican gran
tal vez la mayoría, siguen
parte de estas desviaciones de
patrones de herencia más
los principios mendelianos.
complejos.
Principios de Mendel sobre la herencia
Gregor Mendel no fue el primero en

dedicarse al mejoramiento de plantas.
En la época en que el inicio su
trabajo, hacia bastante tiempo que
los criadores habían reconocido la
existencia de plantas y animales
híbridos, la descendencia de dos
progenitores geneticamente distintos.
Cuando Mendel empezo en 1866 sus experimentos de
fitomejoramiento, habia dos importantes conceptos
acerca de la herencia ampliamente aceptados:
1) Todas las plantas hibridas que son descendientes de

progenitores geneticamente puros, o de una variedad
pura, son similares en apariencia.
2) Cuando los hibridos se aparean entre si, no resulta una

raza o variedad pura; sus descendientes muestran una
mezcla de rasgos. Algunos se parecen a sus progenitores,
y otros tienen algunas caracteristicas de sus abuelos.
Mendel eligio
Las flores de
cuidadosamente
guisante tienen
el organismo Relativa
Las plantas de Habia muchas partes
para sus facilidad para
guisante se variedades femeninas y
experimentos. implementar
cultivan con disponibles masculinas y se
El guisante de polinizaciones
facilidad comercialmente autopolinizan
jardin, Pisum controladas.
en forma
sativum, tenia
natural.
varias ventajas.
Sin embargo, las anteras (partes
masculinas de la flor que producen el
polen) se pueden eliminar para evitar la
autofertilización.
Se puede aplicar el polen de una fuente

distinta al estigma (la superficie
receptiva del carpelo, o parte femenina)
Las flores de guisante son fáciles de

proteger de otras fuentes de polen
porque los pétalos cubren completamente
las estructuras reproductivas
 Mendel selecciono cepas que representaban siete caracteres,
 los atributos (como el color de la semilla) para los cuales las diferencias
heredables, o rasgos, son conocidos.
ALELOS
1ra Ley: Uniformidad de los híbridos A dominante (amarillo) siempre

manifiesta sus características
a recesivo (verde) manifiesta
sus características solo en la
presencia de otro alelo recesivo
 Color de los guisantes
 “Raza pura” homocigoto “Híbrido”heterocigoto
x
Homocigoto
AA aa Homocigoto
dominante
recesivo
Genotipo
Heterocigoto 100%
F1 filial 1 generación 1
Aa Fenotipo
Heterocigoto
Semillas amarillas100%
RUGOSIDAD DE LA SEMILLA
ALELOS
B dominante (lisas)
b recesivo (rugosas)
Genotipo
Heterocigoto 100%
Fenotipo
Semillas lisas100%
2da Ley: Segregación de caracteres en la
segunda generación filial Durante la formación de los
gametos, cada alelo de un par se
separa de un miembro, para
Heterocigoto Heterocigoto determinar la formación genética
del gameto hijo.
Genotipo
Heterocigoto 50% (1/2)
Homocigotos dominante25% (1/4)
Homocigotos recesivo25% (1/4)
Fenotipo
Semillas amarillas75% (3/4)
Semillas verdes25% (1/4)
Genotipo
Heterocigoto 50% (1/2)
Homocigotos dominante25% (1/4)
Homocigotos recesivo25% (1/4)
Fenotipo
Semillas amarillas75% (3/4)
Semillas verdes25% (1/4)
3ra Ley independencia de los caracteres
hereditarios ALELOS COLOR SEMILLA
A dominante (amarillo)
a recesivo (verde)
Usa dos caracteres
ALELOS RUGOSIDAD
B dominante (lisas)
b recesivo (rugosas)
Se combinan
ambos rasgos
Diferentes rasgos son

heredados
independientemente unos de
Utilizo dos
individuos F1 otros y no existe relación
heterocigotos para entre ellos, el patrón de
los dos alelos AaBb herencia de un rasgo no
afecta al patrón de herencia
del otro.
Los caracteres
deben
Para que se encontrarse en O distancias
cumpla la cromosomas grandes entre
tercera ley separados gen y gen.
Retrocruzamiento
Permite determinar si un
individuo que exhibe el
fenotipo de un gen
dominante es homocigótico
(AA) o heterocigótico (Aa).
Se cruza este individuo con

un parental homocifoto
recesivo (aa) para conocer
su F2 si son homocigóticos
o heterocigóticos
Todos amarillos
Herencia intermedia
Dos características
que se manifiestan a
la vez dando un
fenotipo intermedio
R=B igual de fuertes
RR= rojo; BB=

blanco; RB= rosa
Codominancia
Dos alelos se expresan a la vez

Ejercicio
 Si una planta homocigótica de tallo alto (AA) se cruza con una homocigótica
de tallo enano (aa), sabiendo que el tallo alto es dominante sobre el tallo
enano, ¿Cómo serán los genotipos y fenotipos de la F1 y de la F2?
 Un ratón A de pelo blanco se cruza con uno de pelo negro y toda la
descendencia obtenida es de pelo blanco. Otro ratón B también de pelo
blanco se cruza también con uno de pelo negro y se obtiene una descendencia
formada por 5 ratones de pelo blanco y 5 de pelo negro. ¿Cuál de los ratones A
o B será homocigótico y cuál heterocigótico? Razona la respuesta.
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir los procedimientos y fundamentos de cada una

de las técnicas empleadas para la extracción de ácidos
nucleicos.
CONTENIDO
 Elección del método de extracción
 Métodos de lisis celular
 Tratamientos químicos
 Digestión enzimática
 Métodos manuales
 Uso de kits comerciales.
Introducción
Funciones Pasos básicos (3 o 4)

•Forense •Lisis de las células
•Paternidad •Extracción lípidos de la
•Desbloquear caracteres membrana
hereditarios •Extracción de proteínas
•Precipitación del ADN
Factores pureza y calidad

•Cantidad del material biológico
y moléculas de ácidos nucleicos
•Condiciones ambientales
•Posibles contaminantes
Extracción de ácidos nucleicos
Estudio del ADN y

ARN
• ADN se extrae par

Se deben extraer búsqueda de mutaciones
de todos los o alteraciones
componentes • ARN se extrae para
estudios de expresión
celulares génica
Consideraciones para la extracción de
ácidos nucleicos
En solución
ADN rígido
enrollado
Los fragmentos Utiles para
ADN frágil en aleatoriamente
obtenidos PCR,
cuanto a su (repulsiones
oscilan 100 y electroforesis,
estructura entre los
150kb southern blot
grupos fosfato
y las bases
nitrogenadas)
ADN genómico para su uso en procesos
como una PCR cualitativa o
suele Southern blot, para
diagnóstico, determinación
de variantes alélicas o
extraerse clonación en vectores.
para realizar una reacción

de retrotranscripción y
posteriormente, una PCR
ARN se extrae que determine los niveles
de expresión génica en
condiciones y momentos
determinados.
Para el diagnóstico de
enfermedades
El ADN mitocondriales o bien
análisis evolutivo; pero el
mitocondrial aislamiento de este ADN
conlleva un proceso
específico.
Normas de bioseguridad
 Descontaminar el laboratorio antes y después de realizar la practica

 Las soluciones y el material deben ser estériles
 Limpiar los materiales y el área de trabajo periódicamente con una solución
de lejía al 10% o 70% de etanol
 Manejar con cuidado los materiales
 Usar guantes y cambiarlos frecuentemente
 Pipetas y tubos con filtro
 Mantener las soluciones siempre tapadas
Fuente del ácido nucleico
 Obtiene de cualquier célula excepto eritrocitos

 Las fuentes posibles de material para la extracción de
 los ácidos nucleicos son: leucocitos (sangre), suero, plasma,
 biopsia, orina, heces, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial,
 líquido anmiótico, esputo, semen, raspado bucal, folículo
 capilar, etc.
 Etica se prefieren muestras no invasivas
Técnicas minuciosas
Lísis de la
célula
Disolución Separación
Lavado Purificación
Precipitación
 Durante la extracción de ácidos nucleicos, y en particular en la extracción del ARN, que es
una molécula más lábil ya que es de cadena sencilla, debe considerarse el uso de:
Materia nuevo
Esteril
Libre de ADNasas
Libre de ARNasas
Uso de guantes (evitar contacto con nucleasas
pelo, sudor, saliva o ácidos nucleicos enxógenos)
Relizar el proceso en frío 4°C
Métodos generales
Homogenización • Nitrógeno líquido, pistilos u

homogeneizadores,
del tejido homogenización química
• Métodos químicos, métodos

Lisis celular físicos y métodos biológicos.
Eliminación de • Mediante centrifugación

restos celulares
Homogenización del tejido
La homogeneización, mecánica o
química, consiste en romper las
uniones entre las células para
facilitar la interacción con las
soluciones de lisis que ayudan a
liberar el material genético
Nitrógeno líquido
 Macerar la muestra con

nitrógeno líquido en un
mortero hasta obtener un
polvo muy fino
 Congela la muestra muy
rápidamente
 Evita formación de cristales
que rompen la estructura
celular
Pistilos u homogenizadores
 Disgregan la muestra por fricción

 Se puede utilizar resinas o vidrio
pulverizado como abrasivo
 Adiciona previamente buffer lisis
 Realizarlo en una cama de hielo
 Muestras pequeñas y tejidos blandos
 No con tejidos congelados
Homogenización química
 Uso de detergentes y proteasas es recomendable para bacterias, muestras
pequeñas de tejidos frescos o sangre.
 Determinar la cantidad de muestra (ensayos) para conocer el rendimiento
Lisis celular
 Destruir la pared celular, membrana

celular y nuclear para liberar los ácidos
nucleicos sin dañarlos
 Regulación de la presión osmótica
 Se utilizan soluciones básicas,
detergentes (Triton o docedil sulfato
sódico, SDS) o agentes caotrópicos que
permiten disolver la membrana celular,
así como inhibidores para inactivar las
enzimas que degradan el ADN.
 material fibroso y proteínas que
permanecen en solución se separan del
ADN por centrifugación.
Buffer de lisis
 Agente tamponante mantener el pH
 Sales (NaCl) modificar la osmolaridad
 Detergentes (Tritón x-100) solubilizar lípidos y proteínas
 EDTA quelante de Mg para inhibir inactiva las nucleasas
intracelulares
 Proteinasas proteólisis/ libera el ADN de histonas
 Todas las soluciones previmente enfriadas a 4°C
 Incubación por 2 horas a 65°C
 Células con pared celular sonicadores
Extracción de proteínas y lípidos con
solventes orgánicos
 Se retiran los restos celulares (purificación)
 Los métodos de purificación de ácidos nucleicos combinan estrategias tan
diversas:
Extracción/
precipitación
Separación
Cromatografía
por afinidad.
Electroforesis Centrifugación
Fenol cloroformo
 Solución que tiene una relación 25:24:1 v/v para
el fenol: cloroformo: alcohol isoamílico;
generalmente se añade hidroxiquinolina al 0.1%,
que funciona como antioxidante del fenol, un
inhibidor parcial de ARNsas, quelante débil de
iones metálicos, y que ayuda a identificar la fase
orgánica por el color amarillo que le confiere
La eliminación de las proteínas y componentes

homogenado celular se efectúa con la formación
de dos fases después de la centrifugación
a) una fase en la parte inferior del tubo de precipitado

orgánica que contiene lípidos, proteínas y debris
(fenólica) celulares
b) una fase en la parte superior (menos densa), que

contiene los ácidos nucleicos y otras
acuosa pequeñas moléculas hidrosolubles.
En la interfase se ubican la mayor parte de

las proteínas debido a su contenido en
aminoácidos hidrofóbicos e hidrofílicos
Precipitación
 El ADN disuelto en la solución acuosa

se precipita (condensación de las
fibras de ADN)
 Añadiendo alcohol absoluto
(isopropanol o etílico) no se mezcla
con el ADN
 Etanol añade el doble de volumen de
le fase acuosa; con isopropanol (IprOH)
se demanda solamente 0.7 veces el
volumen de fase acuosa.
 Añaden cationes para que formen sales
con los ácidos nucleicos cargados
negativamente. Sales son insolubles en
alcohol y precipita más fácil el ADN.
 Centrifuga nuevamente y se forma un
botón en el fondo del tubo.
 Elimina el sobrenadante.
Lava el precipitado
 El botón de ADN obtenido en la

precipitación se lava con etanol al 70%
por, al menos, dos ocasiones.
 Se centrifuga
 El contenido de alcohol de esta solución
(70%) mantiene al ADN precipitado, y el
H2O (30%) permite la disolución de las
sales presentes.
 Después de los lavados, se seca el botón,
lo que permite la evaporación del alcohol
(espontánea o acelerada en un
desecador).
Resuspender o Diluir
Inmediatamente después de la evaporación del

alcohol, el botón de ADN se disuelve en
soluciones que aseguren su preservación, como
agua estéril y libre de ADNsas, o bien soluciones
amortiguadoras, como el buff er Tris EDTA (TE).
El AND se disuelve por pipeteo constante del

botón hasta lograr una solución homogénea.
Añadir ARNasas eliminar interferencias de ARN

Salting out wizard
Empleo de una solución concentrada de sales en lugar de solventes orgánico.
La adición de una solución saturada de sales provoca la agregación de
proteínas y debris celular, lo que permite su separación de los ácidos nucleicos.
 ETAPAS:
 Lisis de la membrana celular y nuclear
 Degradación de ARN
 Degradación de proteínas
 Concentración de ADN genómico
 PROCEDIMIENTO 300ΜL DE SANGRE:

 Coloca 300μl de sangre en tubos de microcentrifuga
de 1,5 ml estéril. Añadir 900μl de cell lysis solution
 Agitar suavemente  Añadir Nuclei Lysis Solution 300 μl
 Incubar por 10 minutos a temperatura ambiente  Añadir RNasa solution 1,5 μl
 Centrifugar de 13,000 a 16,000 por 20 segundos  Añadir Protein Precipitation Solution 100 μl
 Retirar el sobrenadante  Centrifugar 13,000 a 16,000 durante 3 minutos
 Colocar en el Vortex para que se resuspendan las  Mezclar suavemente la solución y repetir los pasos 1 al 4 hasta que
células blancas el pellet este de color blanco.
CHELEX
CHELEX
 Resina que captura iones metálicos polivalentes en
soluciones. (Quelante)
 Previene la degradación de ADN por su efecto quelante
Mg 2+
(Mg)
 Tiene copolimeros de estireno dibenzeno- inones
iminodiacetato
Mg 2+
 Reactivos utilizados no son tóxicos y son 3:

 PBS
 La saponina
 Chelex-100 simple
 Desventaja: El ADN extraído es de cadena sencilla,

solo se puede utilizar en PCR
Procedimiento
1. 20 µl de Agua pura (tipo I) en un microvial de 1.5ml de capacidad
2. 100 µl de PBS (1%saponina)
3. Dejar incubando a TA x 20 min
4. Centrifugar a 20.000g x 2min
5. Descartar el sobrenadante
6. 75 µl de Agua desionizada (tipo I) + 25 µl de Chelex-100 (preparado en Agua pura
(tipo I) al 20%) Agitación suave
7. Hacer hueco en la tapa del microvial
8. Hervir la muestra x 10min
9. Centrifugar a 20.000 g x 1min
10. Pasar a tuvo de almacenaje para futuros análisis
PURIFICACIÓN EN LAS MATRICES DE SÍLICA
El sodio juega un rol como un catión enlazante o puente

que atrae el oxígeno cargado negativamente en los
fosfatos de las cadenas de ácidos nucleicos.
DNA eluye de
la sílica en
agua
El principio de está basada

en la elevada afinidad de
las cadenas de ADN DNA se une
cargadas negativamente a la sílica
con respecto a las en NaI
partículas de sílica
cargadas positivamente.
Pure LINK
Los Kits de ARN / ADN PureLink , proporcionan una

rápida y eficiente método para purificar ADN O ARN a
partir de fluidos biológicos frescos o congelados libres
de células, como son :
• Plasma,
• Suero,
• Líquido cefalorraquídeo sobrenadantes de cultivo
de células.
Kit FTA
● Recogida, transporte, almacenamiento y extracciòn de ADN a temperatura ambiente

● FTA es una tarjeta impregnada de un producto quìmico patentado, cuando una muestra biològica
es depositada en FTA este producto realiza una lisis celular y desnaturaliza las proteìnas, mientras
que lo àcidos nuclèicos son extraídos y protegidos en las fibras del papel. La tarjeta FTA puede
entonces ser transportada a temperatura ambiente hasta el laboratorio o bien ser almacenada en
vista de un anàlisis ulterior
FTA cards
ELECTROFORESIS
ADN
 Solución buffer (mantener el pH)
 Gel agarosa (extraído de las algas marinas)
Moléculas con carga se
desplazan al polo de carga Ácidos nucleicos poseen carga Migran hacia el lado positivo
opuesta cuando son sometidas negativa (ánodo)
a un campo eléctrico.
ADN
ElectroforesisMigración de moléculas a través de un

gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso
molecular o tamaño y movimiento por su carga
Elementos para electroforesis
Cámara de electroforesis
• Genera un campo eléctrico alrededor de un gel donde se depositan las muestras.
• El gel esta introducido en una solución tampón
• La cámara posee dos polos conectados a una fuente de energía
• Polo positivo (rojo) y negativo (negro)
Gel
Medio de soporte para la muestra
Gel semisólido o gelatinoso
Forman una malla o microporos a través

de los cuales avanzan las moléculas
Gel de agarosa separar ácidos

nucleicos
Gel de poliacrilamida algunos ácidos

nucleicos y proteínas
Geles de agarosa
 Polisacárido extraído de algas marinas
 Se mantiene sólido a temperatura ambiente
 Se disuelve a 50°C-60°C
 Se pesa la cantidad requerida
 Se disuelve en un buffer
 Se vacía en un molde rectangular
 Y se colocan peines para generar pocillos donde
se colocarán las muestras
 No es tóxico
 El tamaño del poro depende de la concentración
del gel
 > concentración (0,5-2%) < tamaño de poro
 Moleculas con > peso atraviesan más lento los
poros
 Solidifica en 20 min
Geles acrilamida
 Polímero sintético, termoestable,

incoloro y químicamente inerte
 Polimerización química de acrilamida
y bisacrilamida (19:1)
 Acrilamida coencentración define
el tamaño de poro
 Porosidades menores a los geles de
agarosa
 Acrilmida es neurotoxina
 Se realiza en cámaras verticales
 Solidifica en 30 min
Buffer de corrida
Misma composición y
Medio para transmitir
pH del buffer con el
la corriente eléctrica
que se prepara el gel
Ácidos nucleicos TBE

(Tris base, ácido
Mantiene el pH sin
bórido y EDTA) o TAE
variaciones durante la
(Tris base, ácido
corrida
acético y EDTA). pH
8,5
Proteínas Tris,
25mM, SDS al 1% y
glicina, 192mM a un
pH 8,3.
Marcador de peso molecular
 Son moléculas de ADN o proteínas que
por comparación de tamaño permite
determinar el tamaño del los
fragmentos contenidos en las
muestras.
 Disponibles comercialmente
 Moléculas de ADN sintéticas (poseen un
incremento gradual de tamaño como
escaleras).
 Proteínas son proteínas de peso
molecular conocido (10 a 300kDa)
Buffer de carga  Brinda peso, densidad y color a la
muestra
 Se mezcla con la muestra antes de
colocarla en el gel
 Facilita el depósito en el pocillo y
evita su salida del gel
 Permite monitorear la corrida en el
gel
 Se emplea en relación 1:3 para ácidos
nucleicos o 1:6 para proteínas
 Contiene para ácidos nucleicos: Tris,
azul de bromofenol, azul de xileno y
glicerol
 Contiene para proteinas: Tris-HCl, pH
6.8, ditiotritiol (DTT), SDS, glicerol y
azul de bromofenol.
Transiluminador
 Transmite luz
ultravioleta
 Exita a la molécula
cromogénica emitiendo
fluorescencia.
Procedimiento general
 1. Preparar un gel de agarosa (<1000pb) o acrilamida a la concentración requerida

(0.5 a 2%) . (Si los fragmentos de ADN son pequeños (menos de 50 pb) o bien se
requiere discernir entre fragmentos de ácidos nucleicos con una diferencia de
longitud de 1 a 20 pb, se recomienda utilizar un gel de poliacrilamida que permita
esta resolución)
 2. Mezclar las muestras a analizar con un buffer de carga adecuado.
 3. Cargar las muestras en el gel.
 4. Realizar la corrida electroforética al voltaje pertinente (entre 75 y 100V, >
voltaje mayor velocidad de corrida, para el caso de productos de PCR (entre 100
pb y 1.5 kb).
 Para muestras de ADN genómico y plasmídico (> 2 kb) se recomienda aplicar
valores de entre 25 y 75V
 5. Visualizar los ácidos nucleicos
Visualización de las muestras
 Bromuro de etidio intercalante entre bases
nitrogenadas del ADN y ARN, es mutagénico,
teratogénico y cancerígeno.
 Coloca antes que solidifique el gel y se
homogeniza
 Incorpora en la agarosa (0.5mg/ml)
 Fluorece de color naranja cuando se expone
a la luz UV
 BE se ha sustituido por SYBR® Safe que se
une de manera no covalente a los ácidos
nucleicos. Este colorante tiene una
fluorescencia a 280nm.
 SYBR®-Greenes un fl uoróforo que se une
con gran afinidad al surco menor del ADN
bicatenario, y es unas 25 veces más
fluorescente que el bromuro de etidio.
Electroforesis de proteínas
 Sistema discontinuo
 Gel formado por dos geles de poliacrilamida
compactamieto y resolución), que difieren en su
concentración, composición y pH
 Para electroforesis de proteínas, la acrilamida se prepara
a partir de una solución al 30% de acrilamida-
bisacrilamida 19:1.
 Ésta se mezcla con el buffer correspondiente y una
solución de SDS; además, se añade persulfato de amonio
(APS) y N,N,N’,N’-tetrametiletilenodiamina (TEMED)como
polimerizadores en concentraciones del orden de 1 a 10
mM.
 sumergir los geles en el tanque, se debe de asegurar que
los pocillos del gel estén totalmente cubiertos por el
buffer.
 La muestra mezclada con el buffer de carga se deposita
con cuidado en los pocillos
 La electroforesis se realiza hasta que el colorante,
visualizado como una línea azul, haya llegado a los límites
de la parte inferior del gel.
 Si se requiere, el gel se
sumerge en un recipiente
conteniendo el colorante azul
brillante de Coomasie y se
incuba por unos minutos, lo
que permitirá la visualización
de las bandas de proteínas.
Electroforesis Proteínas
 https://www.youtube.com/watch?v=RNbvJR9JQKQ
ELECTROFORESIS ÁCIDOS NUCLEICOS
https://www.youtube.com/watch?v=U1g2qt3juZw
https://www.youtube.com/watch?v=U1g2qt3juZw&t=71s
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir los procedimientos y fundamentos de cada una

de las técnicas de hibridación.
CONTENIDO
 Hibridación
 Dot /Slot blot
 Southern Blot
 Northern
 Western
 Hibridación insitu
HIBRIDACIÓN MOLECULAR
Gran complejidad ADN todo el genoma
Estudiar un solo gen se debe aislar de todo el

genoma
Material se debe fragmentar→ aislar un fragmento

específico
Se han desarrollado tecnologías para localizar y

aislar fragmentos específicos de ácidos nucleicos.
 Hibridación→ unión de dos moléculas de una

hebra mediante complementariedad→
produciendo un hibrido.
Electroforesis
 Separación de macromoléculas (carga/masa)

 Sometidas a un campo eléctrico
 0,5 a 2% agarosa
HIBRIDACIÓN
Sondas
Las sondas son segmentos de ADN o ARN de cadena sencilla
marcados con moléculas reporteras, como enzimas o
radioisótopos, que permiten su fácil detección.
Unirán de forma complementaria para identificar “un solo gen”

o “el fragmento de un gen”.
Depende de la especificidad de la sonda.
La longitud de las sondas puede ir de 15 a 30 bases, hasta miles

Marcaje de sondas:
• 32P
Radiactivamente • Vida media más corto (para 32P, de 15
días).
• Sensibilidad→ detectan hasta 0.1 pg
• biotina, digoxigenina
Enzimáticamente • su vida media es muy larga (meses)
• Sensibilidad→ entre 1 y 10 pg.
SOUTHERN BLOT
Determinar la
presencia de un gen o
Dos pasos:
Analizar ADN
fragmentos del ADN • desnaturalización ADN
Se desarrolló, en 1975, previamente digerido
específicos en una
Edwin Southern con enzimas de • hibridación con sondas
mezcla de ácidos
restricción.
nucleicos previamente
extraídos.
Enzimas de restricción
Enzima bacterianas aisladas que
cortan la molécula de ADN en
secuencias específicas.
El aislamiento de estas enzimas es

fundamental para el desarrollo de
la tecnología de ADN recombinante
(ADNr) y la ingeniería genética.
Cortan moléculas de ADN por

secuencias específicas
Corte romo→ no genera extremos

libres y Corte cohesivo→ deja
extremos libres
SOUTHERN BLOT
Desnaturaliza el
ADN
Revelado
Transferencia;
Capilaridad
Vacio
Electrotransferenc
ia
Sonda encuentra su Soporte sólido

secuencia Nitrocelulosa o Nylon
complementaria
Aplicaciones
La sustitución de
especies animales o
vegetales por otras Identificar genes
similares con menor asociados con
valor económico es uno enfermedades de
de los fraudes transmisión genética
alimentarios más
frecuentes.
Identificar genes
asociados con
enfermedades de Identificar mutaciones,
transmisión genética, e como rearreglos,
identificar mutaciones, deleciones y dosis
como rearreglos, génica en caso de
deleciones y dosis portadores
génica en caso de
portadores
Southern blot para el diagnostico de
anemia faciforme
NORTHERN BLOT
Como ácido nucléico se utiliza ARN en lugar de

ADN.
No se utilizan enzimas de restricción. ARN

moléculas son más pequeñas y para su análisis no
requieren su fraccionamiento.
Desnaturalización
(aunque el ARN es
de cadena Hibridación con
Electroforesis Transferencia
sencilla, puede una sonda.
formar estructuras
secundarias),
12 a 24 horas
Hibridación:
APLICACIONES
Estudio de los productos de la transcripción génica

(ARNm)
Regulación transcripción
Se pueden estudiar las potenciales variaciones en la

abundancia de especies del ARN en diferentes
condiciones experimentales o comparar condiciones
clínicas normales o patológicas.
Dot blot y Slot blot
Tras el aislamiento y separación de los ácidos nucleicos,
éstos se aplican directamente a la membrana sin separarlos
No se realiza electroforesis (NO REQUIERE GEL)
La fijación se hace generalmente con vacío y en un molde cuyo pocillo

puede tener forma de punto (dot blot) o ser lineal (slot blot).
Es posible realizar detecciones no sólo cualitativas (positivo o negativo)

sino también cuantitativas, utilizando como patrón diluciones seriadas de
concentraciones conocidas del genoma que se está determinando.
Membrana PVDF o
nitrocelulosa
WESTERN BLOT
Paso 5: Visualización
Anticuerpo secundario→unión a biotina, a una enzima reporter como

la fosfatasa alcalina o la peroxidasa del rábano (HRP),
 Modulo de transferencia
 Serie de almohadillas y papeles filtro
Video
 https://www.youtube.com/watch?v=HocmMZUieFg
Hibridación in Situ
La especificidad de la hibridación in situ se basa en la unión de
una sonda con una secuencia complementaria de ADN o ARN
dentro de un tejido.
No requiere extracción de ácidos nucleicos
En el tejido se lleva a cabo el procedimiento de detección

hibridación; de ahí el nombre de in situ (en el mismo lugar).
Las sondas que se utilizan para la hibridación in situ pueden ser

radiactivas y no radiactivas.
Mas relevantes marcadas con fluorescencia
Fluorocromos (FISH), o con biotina

Aspectos técnicos
 El primer paso para la hibridación es la preparación y fijación del tejido, en el

cual deben conservarse los ácidos nucleicos lo más íntegramente posibles,
mantener la morfología del tejido y permitir una accesibilidad suficiente para que
la sonda penetre.
 La fijación con formalina, seguida de una inclusión con parafina es el
procedimiento más usado. Después de la fijación las secciones de tejido deben
adherirse al portaobjetos y no deben desprenderse durante el procedimiento de
hibridación.
 Normalmente se utiliza gelatina crómica, polilisina o Vectabond® (producto
comercial).
 Antes de la hibridación, los tejidos se pretratan con HCl (que extrae proteínas e
hidroliza parcialmente las secuencias diana) y proteinasa K (que incrementa la
penetración y la accesibilidad de la sonda) y se someten a una posfijación con
paraformaldehído (incrementa la especificidad de la señal).
Microarrays
 Microarreglos→ chips de ADN
 En una superficie sólida estan ancladas sondas
 Superfice de 4cm2, 10 000 poros donde se deposita
el ANDc (transcriptase inversa) , permitiendo el
estudio de nivel expresion de multiples genes.
 En cada poro zonas específicas hibridan a un solo
gen
 Escanea con un laser observando la fluorescencia
Aplicaciones
 La hibridación in situ tiene un alto grado de resolución, que permite la

localización de secuencias génicas a nivel cromosómico, con lo que se pueden
detectar translocaciones y otras alteraciones cromosómicas, así como el
estudio de expresión de genes (ARNm) a nivel celular y subcelular.
 Las principales aplicaciones son la identificación de infecciones virales en
tejidos, así como el mapeo cromosómico.
 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3308598/
MACHALA
BIOLOGÍA MOLECULAR

OBJETIVO
 Describir la técnica de reacción de la polimerasa PCR y

describir su utilización en la industria alimentaria.
 Reacción en cadena de la polimerasa
(polymerase chain reaction, PCR). En
 permite la amplificación de una secuencia
específica de ADN mediante nucleótidos
trifosfatados y un ADN polimerasa
 La idea de multiplicar una hebra de ADN
millones de veces.
 se le ocurrió emplear ADN polimerasas
termoestables, extraídas de
microorganismos termofílicos, como la Taq
polimerasa procedente de Thermus
aquaticus
• Clon: conjunto de ‘‘elementos’’ genéticamente idénticos entre sí y a su precursor
 Moléculas
 Células
 Tejidos
 Órganos
 Organismos pluricelulares completos. Cada componente individual de un clon contiene la misma
información genética, el mismo genotipo, que el elemento de partida; por ello, se puede
considerar que la clonación supone una amplificación genética.
Clonación molecular, o clonación de moléculas de ácido nucleico  PCR es

la técnica que permite amplificar el DNA (o RNA) sin emplear células. Por ello,
se trata de una clonación acelular .
INTRODUCCION
 Kary Mullis,
 Publica en 1985 (Cetus Co.)
 USD$10.000 (recompensa de Cetus)
 Cetus vende patente a Hoffman La Roche en 300millones USD
 Nobel de Química de 1993
 Réplica de sistema “in vivo”
 Claves:
1. Primers (=cebadores) sintéticos
2. Ciclos Térmicos
3. DNA polimerasa Termoestable “Taq”
Pasos
Desnaturalización
Replicación Hibridación
Cebadores o iniciadores monocatenarios
Unen a la región de interés
 Desoxinucleótidos concentración óptima de

entre 50 y 200 μM, cantidad suficiente para
sintetizar de 6.5 a 25 μg de ADN.
Elementos que se requieren para la
síntesis de ADN mediante PCR
• Molde de ADN
• Iniciador (cebador, primer): secuencia corta de nucleótidos (18-20nt) complementaria a
la hebra de molde.
Son los sustantivos que determinan la secuencia diana/amplificada  especificidad

Primers
 Par de primers flanqueando la secuencia diana

 Longitud (17-28pb)
 Contentido de GC: 50-60%
 GC Clamp:
 La presencia de bases G o C dentro de las últimas cinco bases desde el extremo 3 'de los
cebadores (GC clamp) ayuda a promover la unión específica en el extremo 3' debido a la
unión más fuerte de las bases G y C. Se deben evitar más de 3 G o C en las últimas 5 bases
en el extremo 3 '
 Tm entre 55-80oC
 Evitar secuencias sencillas – p.ej. tramos de G’s
 Evitar autocomplementariedad de los primers
 p.ej. horquillas, homodimeros, heterodimeros
 dNTPs: desoxirribonucleótidos tri-fosfatos
 ADN polimerasa termoestable: Las enzimas ADN polimerasas sólo pueden iniciar
la síntesis de una cadena de DNA a partir de un 3’-OH libre.
Thermus aquaticus
• La Taq polimerasa carece de la actividad correctora de pruebas (exonucleasa 3’)
 La frecuencia de errores es superior a la propia de la replicación (alrededor de un error por
cada 5.000 nucleótidos incorporados)
• Buffer o Tampón (Mantener el pH)
– 20mM Tris-HCL pH 8.4
– 50mM KCl
• MgCl2 (co-factor de la polimerasa)

• Termociclador: con flujo de aire caliente o frio para subir y bajar la
temperatura rápidamente entre las etapas sucesivas
Ciclos de la PCR en Termociclador
1) Denaturación inicial 94°C, 5min
2) Desnaturalización 94°C, 50seg

3) Annealing, anillamiento 55°C, 50seg x35 ciclos
4) Elongación 72°C, 60seg
Luego de los 35 ciclos:

5) Elongación final 72°C, 3min
6) Mantén temperatura de 4°C

Termociclador
 Normalmente los rangos de temperatura que abarca el equipo van de 4 a 96°C.

Inicio Desnaturalización
 Del ADN para dar hebras sencillas (95°C por 5 min)

Desnaturalización
 Calentamiento de forma brusca
para la separación de las hebras
de ADN entre 68oC y 97oC por 30-
120seg
La temperatura central del intervalo de transición (donde 50% de la

moléculas se desnaturalizan) se llama temperatura de fusión (Tf o Tm,
del inglés melting).
Alineamiento o hibridación
 Enfriamiento rápido por debajo de Tm que permite la re-asociación de las

hebras con los cebadores tras la desnaturalización (entre 37 y 65oC por 10 a
120seg)
 Balance entre hibridación con eficacia y especificidad

 Los iniciadores buscan las cadenas de ADN su secuencia complementaria y formen los puentes de
hidrógeno con la cadena molde, dejando el extremo 3’OH disponible y listo para la adición de los
nucleótidos consecutivos por la ADN polimerasa.
Hibridación
 Enfriamiento rápido
Sólo si el enfriamiento es lento tiene lugar una renaturalización,

mientras que un enfriamiento rápido impide la reasociación
correcta de las hebras.
Replicación o Extensión
 También, se
denomina elongación
del cebador o
polimerización.
 72-75 oC, 1-3min
 La DNA polimerasa
termoestable elonga
los cebadores,
empleando como
molde ambas hebras
originales
 hasta terminar la
lectura del molde o
 hasta que se eleve la
temperatura en una
nueva etapa de
desnaturalización
(siguiente ciclo)
Revisión general de PCR
Etapas en cada ciclo:

D = desnaturalización del
DNA bicatenario
H = hibridación con los
cebadores (alineamiento)
E = elongación, extensión
de los cebadores,
replicación o
polimerización
Amplificación
exponencial
https://www.medicapanamericana.com/materialesComplementarios/LodishEst/reproduct
or.aspx?URLVideo=cap%2F2%2F5%2F05-06-
Reacci%C3%B3n%20en%20cadena%20de%20la%20polimerasa.swf
Aplicaciones de PCR
 Amplificación de DNA (cantidades de μg) a partir de pequeñas cantidades (cantidades de fg) [amplificación
de mil millones veces]
 Clonación acelular de fragmentos de DNA
 Rastreo de mutaciones
 Tipificación de DNA para trasplantes
 Diagnóstico de enfermedades genéticas (incluido el diagnóstico prenatal)
 Determinación de secuencias específicas de DNA relacionadas con situaciones patológicas definidas
 Resolución de problemas forenses o arqueológicos
 Estudios evolutivos
 Detección de microorganismos infecciosos
 Detección de células tumorales
 Amplificación de DNA para su posterior clonación celular
PCR
https://www.youtube.com/watch?v=mslMRgxbdOA&t=17s
PCR CORONAVIRUS
https://www.youtube.com/watch?v=ThG_02miq-4
PCR con comienzo en
caliente
Variantes del método

PCR larga
PCR anidada
PCR inversa
PCR con adaptadores
PCR asimétrica
RT-PCR (amplificación
de RNA)
Variantes de PCR
• Consiste en privar a la mezcla de reacción de alguno
PCR con de sus componentes (frecuentemente la polimerasa)
hasta que se haya alcanzado una temperatura superior
“comienzo en a la de hibridación
caliente” • Se evita la elongación de cebadores que hayan

podido asociarse al comienzo con poco rigor (a
secuencias parcialmente homólogas con la diana)
(“hot start” PCR) • Se aumenta la especificidad de la amplificación
• Objetivo: superar los límites de la PCR convencional

para amplificar con fidelidad regiones diana de
PCR “larga” gran tamaño (entre 5 y 40 kb)
• El principal factor limitante es la ausencia de
actividad correctora de pruebas en la polimerasa
L-PCR (Long PCR ) o LA- Taq
PCR (Longer and • Se añade una cantidad menor de otra enzima con
capacidad de corrección de pruebas (por ejemplo,
Accurate PCR, "PCR más la Pfu) para:
larga y exacta" • Contrarrestar la carencia de esta actividad
• Seguir aprovechando la eficacia de elongación de
la polimerasa principal (Taq o similar)
La polimerasa de ADN Pfu (PfuPol) es una enzima encontrada en la
arqueobacteria hipertermófila Pyrococcus furiosus
Variantes de PCR
• Objetivo: aumentarse la especificidad
• Realizando una segunda reacción de PCR, con dos
cebadores nuevos que hibridan dentro del fragmento
PCR “anidada” diana amplificado por el primer par
• Productos más cortos, pero más específicos
• Las copias correctas de la primera diana contendrán
(“nested” PCR) ambas secuencias complementarias a los nuevos
cebadores, a diferencia de los productos no específicos
generados en la primera PCR que no resultarán
amplificados en la segunda
• Objetivo: amplificarse una región de DNA de

secuencia desconocida ligando a sus fragmentos de
restricción unos adaptadores, oligonucleótidos
PCR “con sintéticos con extremos cohesivos compatibles con los
generados en la muestra
adaptadores” • Una vez desnaturalizados, se añaden cebadores
específicos para las secuencias 3’ de los adaptadores
• Se amplifica así el conjunto de adaptadores y
(“Adapter” PCR) secuencia diana
• Se amplifican por igual todos los fragmentos de
restricción presentes, no sólo uno
Variantes de PCR
• Objetivo: Generar copias monocatenarias de un DNA
PCR • Se añaden suficientes copias del DNA diana y cantidades muy
“asimétrica” diferentes de ambos cebadores
tras los primeros ciclos de PCR uno de ellos se agota
solo una de las hebras del DNA sigue amplificándose gracias al
(“Asymetric” PCR) cebador más abundante
• Objetivo: clonar regiones desconocidas de un DNA, situadas

en posición vecinal a secuencias diana conocidas
• En lugar de amplificar la región interna, flanqueada por los
dos cebadores (PCR convencional), se amplifica la región
PCR externa, que flanquea a los cebadores
• Cortar el DNA a ambos lados de la región diana con una
“inversa” enzima de restricción
• Se necesita que los extremos cohesivos resultantes puedan
hibridar entre sí, formando una molécula circular
(“Inverted” PCR) • Ésta se cierra mediante una ligasa y se realiza la PCR con
cebadores que hibridan con los extremos 5’ de la
secuencia conocida, por lo que la elongación se extenderá
alrededor del círculo
• https://www.youtube.com/watch?v=n0Zn89AHE04
APLICACIONES
 Caracterización molecular de Varroa sp. en abejas
 El gen mitocondrial COI citocromo C oxidasa, ha
resultado uno de los marcadores moleculares más
importantes para realizar estudios taxonómicos.
 Un fragmento de 458 pares de bases de ADN del
gen cox1 de Varroa ha demostrado ser útil en la
identificación de una especie en particular de
ácaros
 Se compara los resultados de las secuencias con
otras secuencias de la misma región depositada en
la base de datos GenBank.
 Número de acceso GeneBank: AJ493124.2
AMPLIFICACIÓN DEL GEN HTT
EN INDIVIDUOS
DIAGNOSTICADOS CON
COREA DE HUNTINGTON
Corea de Huntington
Características
 Enfermedad hereditaria  autosómica dominante
 Incidencia: 4-15 en 100,000 individuos de ascendencia europea
 Neurodegenerativa  síntomas motores, psíquicos y cognitivos
 Edad media de aparición  40 años
 Estos síntomas evolucionan hacia un empeoramiento progresivo y conducen, en un

período de 10 a 20 años, a un síndrome demencial con un estado de postración en
cama y caquexia
 Vida promedio desde el diagnóstico  17 años
Área afectada
Ganglios basales
Cuerpo
estriado
El responsable
Gen HTT Cromosoma 4
Huntintina, 340KD. Actúa a nivel

intraneuronal.
Mutaciones provocan pobre comunicación

intraneuronal, neurodegeneración
progresiva y promueven la apoptosis.
Htt (exón 1)
gctgccgggacgggtccaagatggacggccgctcaggttctgcttt
tacctgcggcccagagccccattcattgccccggtgctgagcggcg
ccgcgagtcggcccgaggcctccggggactgccgtgccgggcggg
agaccgccatggcgaccctggaaaagctgatgaaggccttcgagt
ccctcaagtccttccag/cag/cag/cag/cag/cag/cag/cag/
cag/cag/cag/cag/cag/cag/cagcaacagccgccaccgccg
ccgccgccgccgccgcctcctcagcttcctcagccgccgccgcag
gcacagccgctgctgcctcagccgcagccgcccccgccgccgccc
ccgccgccacccggcccggctgtggctgaggagccgctgcaccga
ccgtgagtttgggcccgctgcagctccctgtcccggcgggtcccag
gctacggcggggatggcggtaaccctgcagcctgcgggccggcga
cac
Prueba diagnóstica
•CAG repeticiones ≥40: full penetrance allele (FPA). Este es el caso de “prueba
positiva" o "resultado positivo". Un resultado positive no constituye un
diagnóstico, porque se puede obtener años o decadas antes que los síntomas
aparezcan.
•36-39 repeticiones: incomplete or reduced penetrance allele (RPA). Puede

causar síntomas, generalmente más adelante en la vida adulta. Existe un riesgo
máximo del 60% de que una persona con un RPA sea sintomática a la edad de 65
años, y un 70% de riesgo de ser sintomático a la edad de 75 años.
•27-35 repeticiones: intermediate allele (IA), or large normal allele. No no se

asocia con la enfermedad sintomática en la prueba individual, pero puede
expandirse en una herencia adicional para dar síntomas en la descendencia.
•Repeticiones ≤26: Prueba negativa

de Die-Smulders CE et al, "Reproductive options for prospective parents in families
with Huntington's disease: Clinical, psychological and ethical reflections". Human
Reproduction Update, 2013.
Gen  Proteína
*
Glutamina
Poliglutamina
ubiquininada
340KD Aglomerados a nivel nuclear y

perinuclear
PCR
 https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/pcr/
APLICACIONES
 Detección de alérgenos soya, avellana, maní, gluten, almendra apio,

mostaza, crustáceos y pescado.
 Detección de patógenos, pruebas de PCR que se han descrito para patógenos
relacionados a alimentos
(Salmonella, E. coli O157, L. monocytogenes, Campylobacter y varios otros).
 Identificación molecular de algunas muestras de atún, tanto fresco como
enlatado.
PCR TIEMPO REAL
 Termociclador que detecta fluorescencia

 Conforme aumenta la fluorescencia mayor
número de moléculas amplificadas.
 Syber Green (498 nm) se une al DNA
 Uso de sondas Taq-man

 Fluróforo y quencher
PCR EN TIEMPO REAL - qPCR
PCR EN TIEMPO REAL - qPCR
5´ 3´ (no OH)
 Señal del fluoroforo es detectada por el termociclador
Cabe mencionar que para la
La detección de las copias
técnica de PCR en tiempo
del producto de PCR se
real la temperatura de
realiza al mismo tiempo
alineación y extensión es la
que sucede la
misma, por lo que ambos
amplificación.
pasos se unifican.
Monitoreo de patógenos
 En aguas residuales pueden detectarse bacterias como :

 Escherichia coli O157
 Aeromonas hydrophila, Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Enterococcus
faecalis, Straphylococcus aureus, etc.
 También pueden detectarse patógenos en plantas y alimentos.
Monitoreo de OGM
 Los organismos genéticamente modificados se encuentran regulados a nivel

internacional y es importante conocer los niveles de presencia en alimentos y
en la cadena de consumo.
 Para esto, es necesario contar con métodos de detección y cuantificación
adecuados y eficaces, así como garantizar que durante su comercio no se
sobrepasen los umbrales permitidos por algunos países, de modo tal que la
herramienta idónea para su control ha sido la cuantificación mediante PCR en
tiempo real
RT PCR
Área personal / Mis cursos /
18855.05.A.D.21-2 /
UNIDAD I /
LECCIÓN UNIDAD 1
Comenzado el miércoles, 1 de diciembre de 2021, 11:40

Estado Finalizado
Finalizado en miércoles, 1 de diciembre de 2021, 12:24
Tiempo 44 minutos 26 segundos
empleado
Puntos 16,75/20,00
Calificación 12,56 de 15,00 (84%)
Pregunta 1
Correcta
Puntúa 1,00 sobre 1,00
La unidad estructural de un ácido nucleico es un nucleósido.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 2
Correcta
En los ribosomas el sitio A es donde se unen los aminoacil-ARNt.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 3
Correcta
Relacione los términos según correspondan:
1,6 vueltas del ADN en el octamero de histonas

Cromatosoma 
1,6 vueltas del ADN en el octamero de histonas y el ADN linker. Nucleosoma 
Cromatina activa, se presenta con una forma más descompactada. Eucromatina 
Forma una hebra de 30nm, los nucleosomas se compactan mediante su ADN linker a la histona H1 Solenoide 

Pregunta 4
Correcta
El ordenamiento de nucleótidos determina la secuencia de aminoácidos de una proteína.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 5
Correcta
En el proceso de replicación se sintetiza una cadena de forma continua y otra cadena de forma discontinua.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 6
Correcta
La regla de Chargaff detalla:
Seleccione una:
a. La cantidad de purinas es siempre mayor a las de pirimidinas
b. La cantidad de purinas es siempre igual a las de pirimidinas 
c. La cantidad de purinas es siempre diferente a las de pirimidinas
Pregunta 7
Correcta
Las dos hebras de ADN son idénticas en su composición.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 

Pregunta 8
Incorrecta
La unión entre en grupo fosfato y la pentosa de un nucleósido para formar un nucleótido se da mediante un enlace éster.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 9
Correcta
La cadena líder se sintetiza en fragmentos y la cadena rezagada de forma continua en sentido que avanza la horquilla de replicación.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 10
Correcta
La longitud de una molécula de ADN y el número de genes es constante en todos los organismos.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 11
Correcta
La cadena de ADN tiene la misma funcionalidad que la cadena de ARN
Seleccione una:
Verdadero
Falso 

Pregunta 12
Correcta
Empareje las respuestas correctas:
Alelo Versión de un gen 
Cromosoma Producto del ADN enrollado más histonas 
Genes Segmentos de ADN que codifican a una proteína específica. 
Locus Posición específica de un gen en un cromosoma 
Pregunta 13
Correcta
La desnaturalización del ADN implica en rompimiento de los puentes de hidrógeno entre las bases complementarias, nunca implica la
alteración de los enlaces fosfodiéster,
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 14
Incorrecta
En el experimento de Griffith:
Seleccione una:
a. Cuando la sepa S se somete a una fuente de calor, no se destruye el ADN el cual se libera y se implanta en las cepas R, provocando
la muerte del ratón al inocularlo con dicha cepa.
b. Cuando la sepa R se somete a una fuente de calor, no se destruye el ADN el cual se libera y se implanta en las cepas S, provocando
c. Cuando la sepa S se somete a una fuente de calor, se destruye el ADN y al inocularla en el ratón este no muere.

d. Cuando la sepa R se somete a una fuente de calor, se destruye el ADN y al inocularla en el ratón este no muere.
Pregunta 15
Correcta
Un gen es un cromosoma
Seleccione una:
Verdadero
Falso 

Pregunta 16
Correcta
Seleccione la respuesta incorrecta:
Seleccione una:
a. Los intrones son las regiones no codificables de un gen
b. Los exones son las regiones codificables de un gen
c. Durante el proceso de maduración del ARNm se eliman los intrones
d. Los genes estructurales cumplen funciones reguladoras. 
Pregunta 17
Correcta
Las células permanentes tienen la capacidad de dividirse constantemente.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 18
Incorrecta
La forma B del ARN es la predominante en condiciones fisiológicas y se enrolla de izquierda a derecha es decir es dextrógira.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 19
Correcta
Se considera el ADN como una molécula antiparalela debido a que:
Seleccione una:
a. El extremo 5´ de la una cadena se asocia al extremo 5´ de la otra cadena.
b. La dirección de la síntesis de ADN es 5´→ 3´
c. El extremo 3´ de la una cadena se asocia al extremo 5´ de la otra cadena. 

Pregunta 20
Parcialmente correcta
Empareje según corresponda:
La A y la T se unen mediante Dos puentes de hidrógeno 
La C y la G se unen mediante Tres puentes de hidrógeno 
En el extremo 3´ Presente un grupo fosfato 
Los nucleótidos se umen mediante Enlaces fosfodiéster 
◄ RESUMEN TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN
Ir a...

Área personal / Mis cursos /
18855.05.A.D.21-2 /
UNIDAD I /
LECCIÓN UNIDAD 1
Comenzado el miércoles, 1 de diciembre de 2021, 11:40

Estado Finalizado
Finalizado en miércoles, 1 de diciembre de 2021, 12:14
Tiempo 34 minutos 11 segundos
empleado
Puntos 18,75/20,00
Calificación 14,06 de 15,00 (94%)
Pregunta 1
Correcta
La unión entre una base nitrogenada y una pentosa se da mediante:
Seleccione una:
a. Puentes de azufre
b. Enlace iónico
c. Enlace N-glucosídico 
d. Puente de hidrógeno
Pregunta 2
Correcta
El nivel de empaquetamiento del ADN más complejo es:
Seleccione una:
a. Nucleosomas
b. Cromosoma condensado
c. Cromosoma mitótico 
d. Asas cromatínicas
Pregunta 3
Parcialmente correcta
Empareje las respuestas correctas:
Cromosoma Producto del ADN enrollado más histonas 
Alelo Versión de un gen 
Locus Posición específica de un gen en los cromosomas homólogos 
Genes Segmentos de ADN que codifican a una proteína específica. 

Pregunta 4
Correcta
Empareje según corresponda:
La A y la T se unen mediante Dos puentes de hidrógeno 
En el extremo 3´ Presente un grupo OH 
La C y la G se unen mediante Tres puentes de hidrógeno 
Los nucleótidos se umen mediante Enlaces fosfodiéster 
Pregunta 5
Correcta
Las células permanentes tienen la capacidad de dividirse constantemente.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
Pregunta 6
Correcta
Friedrich Miescher introdujo el termino de nucleinas a lo que actualmente conocemos como ácidos nucleicos.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 7
Correcta
Las bases se unen y mantienen enfrentadas por :
Seleccione una:
a. Puentes de hidrógeno 
b. Puentes de nitrógeno
c. Todas las respuestas son correctas
d. Enlaces covalentes
Pregunta 8
Correcta
El dogma central se define como:
Seleccione una:
a. Mecanismos de como se replica, se transcribe el ARN a ADN y posteriormente el mecanismo de traducción a proteínas.
b. Mecanismos de como se replica el ARN, se transcribe el ARNr a ADN y posteriormente el mecanismo de traducción a proteínas.
c. Mecanismos de como se replica, se transcribe el ADN a ARNm y posteriormente el mecanismo de traducción a proteínas. 
Pregunta 9
Correcta
El ADN se define como:
Seleccione una:
a. ácido desoxirribonucleico, conformado por una secuencia de nucleósidos, que presentan en su estructura el azúcar desoxirribosa y
las bases nitrogenadas A, G, T, C
b. ácido desoxirribonucleico, conformado por una secuencia de nucleótidos, que presentan en su estructura el azúcar desoxirribosa 
y las bases nitrogenadas A, G, T, C
c. ácido ribonucleico, conformado por una secuencia de nucleótidos, que presentan en su estructura el azúcar ribosa y las bases
nitrogenadas A, G, U, C
d. ácido desoxirribonucleico, conformado por una secuencia de nucleótidos, que presentan en su estructura el azúcar ribosa y las bases
nitrogenadas A, G, U, C
Pregunta 10
Correcta
En la meiosis:
Seleccione una:
a. Posee únicamente Meiosis I
b. Se producen células haploides 
c. Se lleva a cabo en células somáticas

Pregunta 11
Correcta
Relacione los términos según correspondan:
1,6 vueltas del ADN en el octamero de histonas y el ADN linker. Nucleosoma 
Cromatina activa, se presenta con una forma más descompactada. Eucromatina 
1,6 vueltas del ADN en el octamero de histonas

Cromatosoma 
Forma una hebra de 30nm, los nucleosomas se compactan mediante su ADN linker a la histona H1 Solenoide 
Pregunta 12
Correcta
En el experimento de Griffith:
Seleccione una:
a. Cuando la sepa R se somete a una fuente de calor, no se destruye el ADN el cual se libera y se implanta en las cepas S, provocando
b. Cuando la sepa S se somete a una fuente de calor, no se destruye el ADN el cual se libera y se implanta en las cepas R, 
provocando la muerte del ratón al inocularlo con dicha cepa.
c. Cuando la sepa S se somete a una fuente de calor, se destruye el ADN y al inocularla en el ratón este no muere.
d. Cuando la sepa R se somete a una fuente de calor, se destruye el ADN y al inocularla en el ratón este no muere.
Pregunta 13
Correcta
La unión entre en grupo fosfato y la pentosa de un nucleósido para formar un nucleótido se da mediante un enlace éster.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 14
Correcta
La regla de Chargaff detalla:
Seleccione una:
a. La cantidad de purinas es siempre diferente a las de pirimidinas
b. La cantidad de purinas es siempre igual a las de pirimidinas 
c. La cantidad de purinas es siempre mayor a las de pirimidinas
Pregunta 15
Correcta
Relacione las enzimas y sus funciones:
Topoisomerasa Elimina la tensión del superenrollamiento 
Primasa Sintetiza los primers de ARN 
Helicasa Separa las dos hebras de ADN, rompiendo puentes de hidrógeno. 
ADN polimerasa Sintetiza la nueva hebra de ADN, añadiendo los dNTPs 
Pregunta 16
Correcta
Encargada de proceso de síntesis del ARNm a partir del ADN
Seleccione una:
a. ADN polimerasa
b. Ligasa
c. ARN polimerasa 
d. Primasa
Pregunta 17
Incorrecta
La unión entre nucleótidos se da mendiante:
Seleccione una:
a. Enlace N-glucosídico
b. Enlace fosfodiéster
c. Puentes de hidrógeno
d. Enlace ester 
Pregunta 18
Correcta
En la doble hélice del ADN se ubica la desoxirribosa-fosfato al exterior de la hélice integrando una región hidrofílica y en el interior se ubican
las bases nitrogenadas dando a esta región una característica hidrofóbica.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 19
Correcta
En el proceso de replicación se sintetiza una cadena de forma continua y otra cadena de forma discontinua.
Seleccione una:
Verdadero 
Falso
Pregunta 20
Correcta
La cadena líder se sintetiza en fragmentos y la cadena rezagada de forma continua en sentido que avanza la horquilla de replicación.
Seleccione una:
Verdadero
Falso 
◄ RESUMEN TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE

Ing. Estefanía Chérrez Neacato. Mgs.

 Describir las características generales sobre ácidos

Genes Caracteres Virus

 MECANISMOS DE COMO SE REPLICA, TRANSCRIBE Y TRADUCE A PROTEÍNAS

para crear proteínas

Las proteínas actúan

ADN: ácido desoxirribonucleico. Es la molécula portadora la información genética, que posibilita su

Genotipo: Es el conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores.

Cruzó plantas que

1865: Publicación del artículo de Gregor

1869: Friedrich Miescher:

Realizó grandes aportaciones a la terminología genética actual

• el término genética fue acuñado en una carta dirigida a Adam

1902: publicó "Los principios mendelianos de la herencia: una

Walther Flemming Eduard Strasburger Edouard Van Beneden

1880-1890: Walther Flemming, Eduard Strasburger y

• Trabajando con tintes de basófilo encontró

• Investigó también el proceso de la división Walther Flemming

en el núcleo hermano, proceso que

• Hipotetizó por primera vez que todos los

• Posteriormente, ambas células se dividían de nuevo según el

• Denominó a este proceso “meiosis” (=reducción en griego)

• También demostró que el número de cromosomas es constante Edouard Van Beneden

• Además descubrió el centríolo

Separa en sus experimentos

• Fue el primer científico que probó

Acuña el termino gen (1909) griego significa que origina

1911: Acuña los términos fenotipo y genotipo

 En el lenguaje de la genética de poblaciones, la ley de

engendra cambio evolutivo.

 Las frecuencias génicas permanecen

Thomas Hunt Morgan

Oswald Theodore Avery Colin McLeod Maclyn McCarty

investigaba una vacuna

• Contenía una cápsula de polisacáridos y era virulenta al ser inyectada, causando

• no era virulenta, y no causaba neumonía, porque carecía de cápsula

Transformación bacterias intercambian su materia

Demostró que el ADN esta

Ribosa y desoxirribosa son los

(1) un azúcar de cinco átomos de

(2) uno o mas grupos fosfato, que

(3) una base nitrogenada,

Separó las bases nitrogenadas de los ácidos nucleicos,

Estudiando bases nitrogenadas en diferentes formas de vida

1940-1950: McClintock descubrió el proceso

1952: El experimento de Hershey-Chase

El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 1978

1976: Walter Fiers secuencia RNA del bacteriófago MS2

Frederick Sanger Walter Gilbert

1983: Kary Banks Mullis descubre la reacción en cadena

1989: Francis Collins y Lap-Chee Tsui secuencian el gen

1995: Se secuencia por primera vez el genoma de un

1996: Primera secuenciación de un genoma eucariota:

1998: Primera secuenciación del

2001: Primeras secuencias del

2003: El Proyecto Genoma Humano

(1) un azúcar de cinco átomos de

(2) uno o mas grupos fosfato, que

(3) una base nitrogenada,

ADN contiene: ARN contiene:

• Las purinas adenina (A) y • Las pirimidinas citosina y

Ribosa ARN ribonucleótidos

Desoxirribosa ADN desoxirribonucleótidos