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RESUMEN

Informe N°3 En esta práctica N°3 se analizará desde un


punto de vista teórico y analítico; las células
procariotas, su estructura y la posibilidad de
su observación a través de los distintos
métodos de tinción en un laboratorio, con
diferentes técnicas e instrumentos.

1. OBJETIVOS
1.1 Objetivo general
Reconocer las diferentes formas
morfológicas bacterianas y las diferentes
técnicas de tinción empleadas en la
observación de microorganismos
procariotas.

1.2 Objetivos específicos


● Conocer la estructura de la cual está
formada las células procariotas.
Materia: Biología
● Conocer e identificar las funciones
Semestre: 1ero que cumplen cada parte en las
Paralelo: “D” células procariotas.
Unidad: 1 ● Comprender las técnicas que se
deben utilizar para la observación en
NRC: 4808 el laboratorio de las células
Informe Nro: 2 procariotas.
Fecha:23/06/2021 ● Comprender el uso, función y
manipulación de los instrumentos
Tema: Observación de células procariotas
que se deben utilizar para la
Integrantes: observación y tinción en el
● Diego Guancha laboratorio de las células procariotas
● Erick Rivera mediante el uso del microscopio.

● Anthony Ayala
● Benjamin Almeida 2. INTRODUCCIÓN
● Bryan Nacimba La Célula Procariota
● Andres Bonilla Forman organismos vivientes unicelulares,
pertenecientes al imperio Prokaryota o a los
dominios Archaea y Bacteria, dependiendo
de la clasificación biológica que se prefiera.

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La principal característica de las células ● Nutrición saprófita: Se basa en la
procariotas es que no tienen núcleo celular, descomposición de la materia
y en cambio presentan su material genético orgánica dejada por otros seres
disperso en el citoplasma, apenas reunido vivos, ya sea al morir o como restos
en una zona llamada nucleoide. de su propia alimentación.
● Nutrición simbiótica: Algunos
procariontes se asocian con otros
seres vivos, obtienen su materia
orgánica para existir a partir de ellos
y se genera un beneficio mutuo.
● Nutrición parasitaria: Existen
organismos procariotas (parásitos)
que se nutren a partir de la materia
Mecanismos de nutrición: orgánica de otro mayor (huésped u
Las células procariotas pueden ser hospedador), al que perjudican en el
autótrofas (elaboran su propio alimento) o proceso (aunque no lleguen a
heterótrofas (se alimentan de materia matarlo directamente). (Anexo).
orgánica fabricada por otro ser vivo), tanto
aerobias (requieren de oxígeno para vivir) Morfología:
como anaerobias (no requieren de oxígeno Las células procariotas pueden tener formas
para vivir), lo cual se traduce en varios muy variadas, y a menudo incluso una
mecanismos de nutrición: misma especie puede adoptar formas
cambiantes, lo que se denomina
● Fotosíntesis: Al igual que las plantas, pleomorfismo. Sin embargo, se pueden
algunos procariontes pueden utilizar distinguir tres tipos principales de
la energía de la luz solar para morfología:
sintetizar materia orgánica a partir de
materia inorgánica, tanto en ● Coco: Es un tipo morfológico típico
presencia como en ausencia de de las bacterias que presenta forma
oxígeno. Existen dos tipos de más o menos esférica y uniforme.
fotosíntesis: la fotosíntesis oxigénica Las bacterias también pueden
(que produce oxígeno) y la presentarse en cocos en grupos de a
fotosíntesis anoxigénica (no produce dos (diplococo), cocos en grupos de
oxígeno). a cuatro (tetracoco), cocos en
● Quimiosíntesis: Semejante a la cadenas (estreptococo) y cocos en
fotosíntesis, las células emprenden la agrupaciones irregulares o en racimo
oxidación de materia inorgánica (estafilococo).
como mecanismo para obtener su ● Bacilo: Con forma de bastón, incluye
energía y obtener su propia materia una vasta gama de bacterias y otros
orgánica para crecer. La organismos saprófitos de vida libre.
quimiosíntesis se diferencia de la También se pueden encontrar
fotosíntesis en que esta última utiliza bacilos en grupos de a dos o
como fuente de energía la luz solar. formando filamentos.

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● Formas helicoidales: Este grupo dentro de la célula procariota. Este
incluye a las del tipo vibrio, un material genético es, obviamente,
género de proteobacterias indispensable para la reproducción.
responsables de la mayoría de las ● Ribosomas: Son complejos de
enfermedades infecciosas en el proteínas y piezas de ARN que
hombre y los animales superiores, permiten la expresión y traducción
sobre todo aquellas típicas del tracto de la información genética, es decir,
digestivo (como el cólera); y a los sintetizan las proteínas requeridas
espirilos, organismos con forma por la célula en sus diversos
helicoidal o de espiral, que suelen procesos biológicos, conforme a lo
ser muy pequeñas y abarcan desde estipulado en el ADN.
bacterias patógenas hasta autótrofas ● Compartimientos procariotas: Son
(Anexo). exclusivos de las células procariotas.
Varían según el tipo de organismo y
Partes y funciones de una célula tienen funciones muy específicas
procariota dentro de su metabolismo. Algunos
La célula procariota posee las siguientes ejemplos son: cromosomas
estructuras: (necesarios para la fotosíntesis),
● Membrana plasmática: Es la frontera carboxisomas (para fijar el dióxido de
que divide el interior y el exterior de carbono (CO2), ficobilisomas
la célula y que sirve de filtro para (pigmentos moleculares para recoger
permitir el ingreso y/o la salida de la luz solar), magnetosomas
sustancias (como la incorporación de (permiten orientación conforme al
nutrientes o la salida de residuos). campo magnético terrestre), etc.
● Pared celular: Consiste en una capa
resistente y rígida que se encuentra Adicionalmente, estas células pueden
por fuera de la membrana celular, lo presentar otras estructuras, como:
que le confiere forma definida a la ● Flagelo: Es un orgánulo en forma de
célula y una capa adicional de látigo empleado para movilizar la
protección. La presencia de pared célula, a modo de cola propulsora.
celular es un rasgo compartido entre ● Membrana externa: Es una barrera
vegetales y hongos, aunque la celular adicional que caracteriza a las
composición de esta estructura bacterias gram-negativas.
celular es distinta en cada uno de ● Cápsula: Es una capa formada por
estos grupos de organismos. polímeros orgánicos que se deposita
● Citoplasma: Es una sustancia por fuera de la pared celular. Tiene
coloidal muy fina que compone el una función protectora y también se
“cuerpo” celular y se encuentra en el utiliza como depósito de alimento y
interior de la célula. lugar de eliminación de desechos.
● Nucleoide: Sin llegar a ser un núcleo, ● Periplasma: Es un espacio que rodea
sino una región muy dispersa, es la al citoplasma y lo separa de las
parte del citoplasma donde suele membranas externas, lo que permite
hallarse el material genético (o ADN)

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una mayor efectividad en distintos ADN de la bacteria parasitada se
tipos de intercambio energético. integra al ADN de la nueva bacteria.
● Plásmidos: Son formas de ADN no ● Transformación: Una bacteria puede
cromosómico, de forma circular, que introducir en su interior fragmentos
en ciertas bacterias acompañan al de ADN que están libres en el medio
ADN bacteriano y se replican de (plásmidos). Estos pueden provenir
modo independiente, confiriéndole del rompimiento o degradación de
características esenciales para una otras bacterias a su alrededor.
mayor adaptabilidad al medio (Anexo).
ambiente. (Anexo).

Reproducción
Se da de dos maneras: 3. MÉTODO, MATERIALES,
EQUIPOS, INSUMOS Y
Reproducción asexual por bipartición o
fisión binaria es la forma más sencilla y REACTIVOS
rápida en organismos unicelulares, cada 3.1. Método
célula se parte en dos, previa división del
Cabe destacar que para este informe se
material genético y posterior división de
hará mención sobre los dos diferentes tipos
citoplasma (citocinesis).​
de tinción presentados en el video:
Reproducción parasexual, para obtener
variabilidad y adaptarse a diferentes ● El método de tinción simple y
ambientes, entre las bacterias puede ocurrir ● El método de tinción compuesta,
intercambio de ADN como la: también conocido como tinción de
Gram (Anexo)
● Conjugación: Proceso que ocurre
cuando una bacteria hace contacto 3.1.1. Procedimiento
con otra usando un hilo llamado PILI.
En el momento en el que los Se procedió primero a realizar el frotis
citoplasmas están conectados, el directo para así luego proceder a la tinción:
individuo donante (considerado
1. Toma de una solución salina y se
como masculino) transfiere parte de
coloca sobre una placa portaobjetos
su ADN a otro receptor (considerado
limpia
como femenino) que lo incorpora (a
2. Esterilizar el asa bacteriológica al
través del PILI) a su dotación
rojo vivo con ayuda del mechero,
genética mediante recombinación y
haciendo un ángulo de 90° para
lo transmite a su vez al reproducirse.
esterilizar también el mango
● Transducción: En este proceso, un
3. Permite al asa enfriarse a
agente transmisor, que generalmente
temperatura ambiente y toma una
es un virus, lleva fragmentos de ADN
muestra de bacterias de la placa de
de una bacteria parasitada a otra
Petri deslizando el asa entre las
nueva receptora, de tal forma que el
colonias.

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4. Mezcla y homogeniza la muestra (lugol). El lugol y el cristal violeta
tomada con el asa con la gota de forman un complejo insoluble en
solución salina de la lámina agua capaz de penetrar en la pared
portaobjeto. de las células bacterianas.
5. Importante: después de usar el asa, 3. Enjuagar la muestra con agua.
asegúrate de esterilizarla 4. Lavar de nuevo el portaobjetos con
nuevamente. una mezcla de alcohol acetona y
6. Fije la preparación con calor, dejar reposar durante 30 segundos.
pasándola varias veces sobre la 5. Enjuagar la muestra con agua.
flama del mechero en forma rápida 6. Ahora cubrimos la muestra durante 1
7. Ahora secar el frotis bacteriano a minuto con safranina para la
temperatura ambiente. contratación.
7. Enjuagar la muestra con agua.
Procedimiento para la Tinción simple: 8. Dejamos que se seque
1. Realizar la extensión sobre un completamente a temperatura
portaobjetos a partir de la muestra. ambiente.
2. Dejar secar al aire con temperatura 9. Una vez seco observamos la muestra
ambiente. al microscopio usando 100X.
3. Fijar la extensión con calor. 10. Ya se puede observar la muestra al
4. Teñir el portaobjetos por microscopio donde se visualizarán
decantación, y esperar el tiempo de color violeta las gram positivas y
necesario según el colorante de color rosa-rojizo las gram
utilizado: negativas (Anexo).
● Azul de metileno: 2 minutos.
● Violeta de genciana: 30-45 3.2. Materiales y equipos
segundos. Es importante mencionar que el uso de los
● Cristal Violeta: 15 segundos. siguientes materiales de laboratorio debe
● Fuchsinas y safraninas: 1 ser con extrema precaución y con la guía de
minuto. un profesional a cargo ya que su uso
5. Lavar la preparación con agua inadecuado podría producir accidentes. Los
destilada para eliminar el exceso de materiales usados fueron:
colorante. ● Mechero bunsen (Anexo).
6. Dejar secar la preparación al aire con ● Portaobjetos (Anexo).
temperatura ambiente. ● Asa bacteriológica (Anexo).
7. Observar la preparación al ● Caja de petri (Anexo).
microscopio óptico (Anexo). ● Pipeta pasteur (Anexo).
● Frasco lavador (Anexo).
Procedimiento para la Tinción compuesta: ● Microscopio (Anexo).
1. Aplicar el tinte de cristal violeta ● Puente de coloración (Anexo).
sobre el portaobjetos y esperar un
minuto. 3.3. Insumos, reactivos y muestras
2. Enjuagar la muestra con agua y Es importante mencionar que el uso de los
aplicar un fijador de cristal violeta siguientes reactivos de laboratorio debe ser
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con extrema precaución y con la guía de un distinta composición molecular a las
profesional a cargo ya que su uso bacterias.
inadecuado podría producir accidentes. Los ● Tenericutes. No presentan pared
reactivos usados fueron: celular, al ser endoparasitas.
● Solución salina (Anexo).
● Muestra de bacterias (Anexo). Se a obtenido que existen dos tipos de
● Azul de metileno (Anexo). bacterias según la tinción de GRAM:
● Agua (Anexo). ● Las bacterias Gram positivas tienen
● Cristal violeta (Anexo). una pared gruesa compuesta de
● Lugol de Gram (Anexo). peptidoglucanos y polímeros, e
● Alcohol acetona (Anexo). impermeable, que hace que resiste
● Safranina (Anexo). la decoloración. En el caso de las
bacterias GRAM positivas los
complejos insolubles se quedan
atrapados entre las capas de
4. DATOS, CÁLCULOS Y peptidoglicano de la pared
RESULTADOS bacteriana, sin disolver y dando la
coloración morada característica al
4.1 Discusión de resultados y conclusiones
observarlas al microscopio.
Al concluir el laboratorio se ha podido ● Las bacterias GRAM negativas
comprender a las diferentes células tienen una capa delgada de
procariotas dependiendo su composición, peptidoglucanos más una bicapa de
clasificación, estructura que su material lipoproteínas que se puede deshacer
genético se encuentra libre en el citoplasma con la decoloración. Estos
celular. Se sabe que se clasifican de acuerdo compuestos sí que se disuelven y
a su morfología(forma): pierden su color. Al microscopio se
● Cocos. De forma esférica, irregular. verán incoloras o de color rosa-rojo,
● Bacilos. En forma de bastoncillos. en función de si se ha añadido la
● Vibrios. Con formas de coma, es fucsina al final de la técnica de
decir, curvadas. tinción de GRAM (Anexo).
● Espirilos. De forma helicoidal o
espiral, como un tornillo.
● Irregulares. Aquellas que no
presentan forma definida, como las 5. CONCLUSIONES
arqueas.
● El cultivo es el proceso de
Según su envoltura celular: reproducción de microorganismos al
● Gracilicutes. Que presentan una proporcionarles un entorno con
delgada piel de peptidoglicano. condiciones apropiadas. Los
● Firmicutes. Que presentan una microorganismos en incremento
gruesa pared de peptidoglicano. producen réplicas de sí mismos y
● Mendosicutes. Como las arqueas, necesitan los elementos presentes
cuyas membranas celulares son de en su composición química. Los

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nutrientes deben proporcionar estos ● https://www.youtube.com/watch?v=64
elementos en una forma que sea M6aQ6xExM&t=811s
accesible desde el punto de vista
metabólico.
● El estudio de los microorganismos
ANEXOS
desde el área clínica es muy
Preguntas realizadas en el video sobre la
importante pues gracias a esto se
tinción simple:
pueden detectar cuales son los
causantes de ciertas afecciones en 1. ¿Qué forma de bacterias observas?
el organismo y así mismo crear La forma de espiral de las bacterias.
métodos de prevención de las
mismas ya sea mediante vacunas y/o 2. ¿Cuál es el aumento de la
antibióticos. Es por eso que los preparación?
medios de cultivo para microbiología X100
aportan gran fuerza en la búsqueda
de soluciones efectivas 3. ¿Cuál es la importancia clínica del
● Los microorganismos requieren género Klebsiella?
energía metabólica para sintetizar Es la especie de mayor relevancia
macromoléculas y mantener clínica dentro del género bacteriano
gradientes químicos esenciales a Klebsiella, compuesto por bacterias
través de sus membranas. Los Gram negativas de la familia
factores que deben controlarse Enterobacteriaceae, que
durante la proliferación incluyen desempeñan un importante papel
nutrientes, pH, temperatura, como causa de las enfermedades
aireación, concentración de sales y infecciosas oportunistas.
fuerza iónica del medio.
4. Menciona 2 ejemplos de cocos con
importancia clínica

6. BIBLIOGRAFÍAS Staphylococcus Epidermis:


1. Flora normal de piel y mucosas.
● https://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%
2. Sensible a la novobiocina.
A9lula_procariota
3. No produce hemólisis.
● https://www.kapitalinteligente.es/culti
4. Coagulasa negativa Staphylococcus
vo-de-microorganismos/#Objetivos-c
saprophyticus.
ultivo-microorganismos
5. Infecciones del tracto urinario.
● https://concepto.de/celula-procariota
6. Posee la enzima ureasa.
/
● https://www.medigraphic.com/pdfs/c Staphylococcus Aureus:
osmetica/dcm-2018/dcm182n.pdf 1. Agrupación en racimos.
● https://www.caracteristicas.co/celula- 2. Capsulados ´ Crecen en agar sangre.
procariota/ 3. Pigmentación dorada.
4. Producen beta hemólisis.

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5. Anaeróbicos facultativos. 4. ¿Qué formas morfológicas
6. Toleran altas concentraciones de sal. bacteriana observas?
7. Catalasa y coagulasa positivas. Se puede observar una forma de
bacilos.
Preguntas realizadas en el video sobre la
tinción compuesta: 5. ¿El género Salmonella sp es GRAM+
O GRAM-?
1. ¿Qué forma bacteriana observas? Es un género de bacterias GRAM-.
Se puede observar forma cilíndrica
por lo que se puede determinar que 6. ¿El género Lactobacillus sp es
son bacilos. GRAM+ O GRAM-?
Es un género de bacterias GRAM+.
2. ¿La bacteria del enfoque es GRAM+
o GRAM-? 7. ¿Cuáles son las principales
La bacteria del enfoque que se características de Salmonella sp?
observa en el microscopio 100X se El género Salmonella pertenece a la
determinó que es GRAM- ya que el familia enterobacteriaceae, son
color rosa-rojizo fue asignado para la bacilos GRAM-, generalmente
GRAM-. móviles por flagelos perítricos,
anaerobios facultativos y no
3. ¿Para qué es útil saber si este esporulados.
organismo es GRAM+ O GRAM-?
● GRAM - 8. ¿Qué formas morfológicas
Son muchas las especies de bacterianas observas?
bacterias Gram- que causan Se puede observar formas de bacilos
enfermedades, teniendo la y cocos.
membrana externa una gran
parte de esa responsabilidad 9. Clasifica las bacterias observadas
patogénica del según forma morfología y
microorganismo. clasificación GRAM:
● Bacilos GRAM+
● GRAM + ● Bacilos GRAM-
La pared bacteriana de los ● Cocos GRAM+
Gram+ se encuentra ● Cocos GRAM-
inmediatamente accesible y
constituye un blanco ideal
para los antibióticos. Esto no
ocurre en bacterias Gram-,
donde la pared es mucho
menor y se encuentra entre
dos membranas que
dificultan su acceso a los
antibióticos.

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Imagenes relacionadas: Asa bacteriológica:

Tipos de tinción:

Caja de petri:

Mechero bunsen:

Pipeta pasteur:

Porta-objetos:

Frasco lavador:

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Microscopio: Muestra de bacterias:

Azul de metileno:

Puente de coloración:

Agua:

Solución salina:

Cristal violeta:

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Lugol de Gram: Nutrición:

Morfología:
Alcohol acetona:

Partes:
Safranina:

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Reproducción: Tinción compuesta:

Bacterias Gram:

Tinción simple:

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