UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA

AISLAMIENTO DE BACTERIAS
PRODUCTORAS DE
POLIHIDROXIALCANOATOS
MEDIANTE UNA COMBINACIOÓN DE
ENFOQUES FENETÍPICOS Y
GENOTÍPICOS

AUTORES: S.‐S. Si, Y.‐C. Chuang, C.‐H. Chen,

DOCENTE: HEBERT SOTO GONZALES

ALUMNO: AYRTON SOTO PAREDES

2021-PERÚ
 AISLAMIENTO DE BACTERIAS PRODUCTORAS DE
POLIHIDROXIALCANOATOS MEDIANTE UNA COMBINACIOÓN DE
ENFOQUES FENETÍPICOS Y GENOTÍPICOS

OBJETIVOS
Los polihidroxialcanoatos (PHA) son un grupo de poliésteres sintetizados por
bacterias, arqueas y algunos hongos. Estos poliésteres son biodegradables y
INTRODUCCIÓN biocompatibles. Cuando el sustrato de carbono es superior a otros nutrientes como Desarrollar un enfoque eciente
utilizando una combinación de
nitrógeno, azufre, fósforo u oxígeno , muchos microorganismos pueden acumular métodos fenotípicos y
PHA como energía intracelular y almacenamiento de carbono. inclusiones. genotípicos para el aislamiento
de bacterias ambientales que
producen polihidroxialcanoatos
MATERIALES Y de longitud media de cadena
MÉTODOS
Se utilizaron Pseudomonas oleovorans BCRC10951 (ATCC8062), (mcl-PHA).

Bacterias y cultivo
Pseudomonas nitroreducens BCRC11041 (ATCC33634) y Pseudomonas
de putida KT2442 como control positivo para las cepas productoras de PHA.
microorganismos

Se recolectaron suelos de diferentes sitios, incluidos un campo agrícola,

sitios de drenaje de desechos industriales, campo contaminado con
Aislamiento del petróleo, áreas de aguas termales, etc. Las bacterias aisladas de estos
medio ambiente de ambientes se examinaron para la producción de PHA.
microorganismos
productores de
PHA
 Las células bacterianas se recolectaron y lavaron dos veces con
Extracción de ADN para determinación
de secuencia, amplicación de cistrón de 1 ml de solución salina tamponada con fosfato estéril.
ARNr 16S por PCR y secuenciación de
ARNr 16S

El ADN bacteriano se extrajo de los sedimentos celulares como

se describió anteriormente.
Amplicación del gen
pha C por PCR

Se purificaron amplicones de PCR del tamaño esperado (800 pb)

Clonación y determinación
a partir de gel de agarosa de bajo punto de fusión ( 0,7 %)
de la secuencia del gen pha
C
Se estudiaron las producciones de polímeros de cepas seleccionadas utilizando
condiciones de crecimiento de cultivo por lotes en dos etapas.
Aislamiento y
caracterización de PHAs
La incorporación de la identificación fenotípica en la estrategia de aislamiento
RESULTADOS demostró ser un enfoque útil en nuestro aislamiento de cepas potenciales que se
utilizarán para la producción industrial de PHA

Una de las principales preocupaciones en la comercialización de PHA son los

DISCUSIÓN altos costos de producción de PHA producido biológicamente en comparación con
los de la producción de materiales plásticos de base petroquímica.
MUCHAS
GRACIAS