FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE BACTERIOLOGÍA

CURSO: LABORATORIO CLÍNICO II

CODIGO: 504137
HORAS SEMANALES: 5
COMPONENTE: TEÓRICO-PRÁCTICO
UBICACIÓN: IVSEMESTRE
REQUISITOS: 504115-504129-504130
DOCENTES: OLIVA ENNIS
GLADYS GONZALEZ

GUÍA N° 4

UROCULTIVO RECUENTO DE COLONIASY ANTIBIOGRAMA

INTRODUCCIÓN
Una de las enfermedades más comunes es la infección urinaria. El sistema
urinario alto es estéril, sólo el tercio anterior de la uretra posee flora comensal
con predominio de cocos grampositivos, enterobacterias y anaerobios.
Una infección urinaria se localiza a cualquier nivel: Uretritis, cuando involucra
solamente la uretra, Cististis, si también está comprometida la vejiga, y
Pielonefritis, si la infección llega hasta el riñón. El nivel de infección depende de
factores como: tamaño del inóculo, resistencia del huésped y virulencia de la
cepa infectante; según hasta donde llegue la infección será la sintomatología
experimentada por el paciente. En Uretritis y Cistitis será polaquiuria, disuria,
tenesmo vesical y urgencia urinaria. En pielonefritis dolor lumbar y/o abdominal,
malestar, escalofrío, fiebre, disuria, polaquiuria.
La infección puede llegar por vía hematógena o linfática de infecciones
contiguas o lejanas, pero generalmente es producto de una contaminación
ascendente con origen en la flora fecal normal donde estos microorganismos
están en grandes cantidades y por los malos hábitos higiénicos, actividad
sexual o incontinencia fecal colonizan el perineo, meato periuretral, uretra
anterior e introito vaginal.

Las bacterias son los agentes etiológicos más frecuentes de las infecciones
urinarias y entre ellas los bacilos gramnegativos de la familia
Enterobacteriaceae: E. coli, Klebsiella, Proteus y Enterobacter, de las cuales E.
coli es la bacteria más aislada en las infecciones adquiridas
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extrahospitalariamente (hasta un 90%). Entre las bacterias grampositivas tiene

importancia el Streptococcus faecalis y en mujeres jóvenes sexualmente
activas el Staphylococcus saprophyticus. En infecciones intrahospitalarias se
aíslan principalmente Serratia, Klebsiella, Proteus y Pseudomona, asociados
con instrumentación urinaria y contaminación de desinfectantes y equipos del
hospital. Algunas especies de Candida pueden causar infección urinaria en los
diabéticos no controlados o en pacientes inmunosuprimidos.

Las infecciones urinarias se dan más frecuentemente en mujeres que en

hombres por poseer la uretra más corta y amplia, facilitando así la entrada de
microorganismos y la proximidad del orificio intestinal y urinario, además
carecen de las secreciones prostáticas que tienen efectos bactericidas. La
incidencia es mayor en embarazadas donde hay dilatación uretral por factores
hormonales o presión mecánica del útero grávido. También ocurre más
frecuentemente en diabéticos, varones de más de 50 años con prostatitis y en
pacientes inmunodeprimidos, debilitados o sometidos a cateterización.

El análisis de laboratorio orientador para solicitar un urocultivo es el parcial de

orina, cuando revela un aumento en el número de leucocitos y/o la presencia
de glóbulos rojos. También son importantes los datos de análisis químicos
como presencia de proteínas y pH.

El aislamiento a partir de la orina del agente causal es lo que determina con

certeza una infección urinaria, pero para llegar a aislarlo es necesario la
recolección de una buena muestra, su procesamiento rápido en el laboratorio
utilizando los métodos adecuados, la lectura correcta de los resultados y que el
médico al cual le lleguen sepa valorarlos en toda su dimensión teniendo en
cuenta la sintomatología y la situación de cada paciente.

La toma de muestra se debe hacer previo lavado de la vulva o del pene, de la

primera orina de la mañana, la segunda porción, en recipiente estéril, teniendo
el cuidado de trasladar rápidamente la muestra al laboratorio.
El diagnóstico definitivo de infección urinaria se hace por medio del urocultivo
siendo en general positivo cuando el recuento de colonias es de cien mil
(100.000) o más de un solo microorganismo por cc en orina obtenida por vías
naturales, sin embargo estas cifras no son concluyentes pudiendo existir
infección urinaria con cifras menores.

NECESIDAD
Que los estudiantes dominen los aspectos relacionados con el urocultivo
necesarios para establecer un buen diagnóstico.
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OBJETO DE ESTUDIO
Los agentes etiológicos más frecuentes de la infecciones del tracto urinario.

OBJETIVOS
 Diferenciar los gérmenes más frecuentemente involucrados en las
infecciones urinarias.
 Identificar el microorganismo presente en una muestra de orina dada.
 Valorar la importancia de una correcta identificación e interpretación de
los resultados que ayude a establecer un diagnóstico preciso y confiable
de infección urinaria.

COMPETENCIAS A ADQUIRIR POR PARTE DE LOS ESTUDIANTES

 Identificar correctamente los microorganismos responsables de las

infecciones del tracto urinario.
 Correlacionar signos y síntomas del paciente con el diagnóstico de
laboratorio.
 Valorar la importancia del urocultivo como método diagnóstico de
infección del aparato urinario en el laboratorio clínico.

METODOLOGÍA
En el desarrollo de la práctica de laboratorio se socializará la guía, se discutirán
casos clínicos y se llevaran a cabo los debidos procedimientos.

MÉTODOS
 Socialización de la guía.
 Desarrollo de los procedimientos.

MATERIALES
 Orina.
 Láminas y laminillas.
 Asa calibrada.
 Microscopio.
 Mechero.
 Urotubos.
 Centrífuga.
 Incubadora.
 Agar CLED, EMB o Mc Conkey, TSI, SIM, Citrato, Urea, LIA, MR/VP.
 Elementos de bioseguridad (bata, guantes).
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 Medios cromogenicos
 Agar muller Hilton
 Sensidiscos de antibióticos
 Dispensador de antibióticos
 Escobillnes esteriles
 Tubos con 5ml de agua destilada esteril

PROCEDIMIENTO

 Recoja la muestra de orina según las instrucciones dadas.

 Realice citoquímico (recuento celular y tirilla).
 Centrifugue la orina durante 5 – 10 minutos a 2000 RPM.
 Entre lámina y laminilla monte el sedimento. Cuando se observen más
de 8 células epiteliales por campo se debe repetir la muestra porque
indica contaminación con secreción vaginal.
 Homogenice la muestra y siembre en agar CLED para realizar recuento
y en agar Mc Conkey o EMB para el estudio cualitativo.
 Si observa resultados positivos realizar pruebas bioquímicas y
antibiograma.

Métodos de siembra
Siembre con asa calibrada en la superficie del agar hasta agotar el inóculo así:

 Con un asa de platino calibrada para inocular 0.001 o 0.01 ml tome

muestra y siémbrela en los medios adecuados según la morfología
observada en el gram.
 Incube a 37º C durante 24 – 48 horas.
 Observe las características del crecimiento obtenido. Si se obtuvo un
solo tipo de colonia, se realiza su recuento y se multiplica por el factor de
dilución, el cual es de acuerdo a la calibración del asa. Se multiplica por
1000, si se utilizó un asa de 0.001 y por 100 si se utilizó un asa de 0.01.
 Una vez terminado el recuento en las cajas, efectúe la identificación de
los microorganismos.

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 Si a las 24 horas no se obtiene crecimiento, vuelva a incubar hasta las

48 horas, si continúa negativo, se reporta “no se observa crecimiento
bacteriano después de 48 horas de incubación”.

Interpretación de resultados

 Un conteo significativo es de 50.000 a 100.000 ufc/ml.

 En mujeres sintomáticas con piuria es significativo conteos de 100
ufc/ml.
 En hombres recuentos de 1000 ufc/ml son significativos.
 En muestras tomadas por sonda vesical son significativos recuentos de
1000 ufc/ml.
 En muestras tomadas por punción suprapúbica es significativo cualquier
recuento de gérmenes.
 Cuando en una orina se obtiene dos o más especies de
microorganismos con recuentos de colonias inferiores a 100.000 ufc/ml,
en pacientes asintomáticos se sospecha de una inadecuada recolección
de la muestra. Se debe pedir nueva muestra, siempre y cuando se haya
relacionado con el sedimento urinario y no se haya encontrado
respuesta leucocitaria.

PRELABORATORIO

1. ¿Cuáles son los factores predisponentes para la presentación de una

infección del tracto urinario?
2. En una pielonefritis aguda ¿Qué esperaría encontrar en el examen
químico y microscópico de la orina?
3. En pacientes con sonda vesical permanente ¿Cuál es el microorganismo
que puede aislarse como causante de infección urinaria?
4. ¿Por qué cuando la muestra se toma por punción suprapúbica cualquier
aislamiento es importante?

POSTLABORATORIO

1. Si un paciente se encuentra en estado de coma ¿Cómo se le debe

realizar la toma de muestra para un urocultivo?
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2. ¿Por qué se deben suspender los diuréticos antes de realizar un

urocultivo?
3. Si en un urocultivo el microorganismo aislado es una Candida ¿La
reportaría? ¿Por qué?

CASO CLÍNICO

Mujer de 45 años consulta por fiebre, dolor lumbar, ardor al orinar. El médico
además observa edema en las extremidades inferiores. Ordena a la paciente
parcial de orina y urocultivo, estos análisis informan:

Parcial de orina:
pH : 8, Células epiteliales: +, Bacterias: ++++, Hematíes: 20 x C,
Albúmina: elevada.

Urocultivo – sedimento:
Leucocitos: 50 x C, Hematíes: 25 x C, Bacterias: bacilos
gramnegativos,
Recuento bacteriano: más de 10000 ufc/ml, Gérmenes aislados: E. coli y
Klebsiella.

1. Si se aislaron 2 microorganismos ¿por qué el gram del sedimento indica

una sola morfología y reacción?
2. ¿Qué dato de los presentes le ayuda a definir si esta es una infección
mixta o una mala toma de muestra?

BIBLIOGRAFÍA

Escobar, Myriam. Fundamentos de Microbiología. 1998.

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Manual de Laboratorio Clínico. Editorial Mc Graw Hill.

VIVES, S.A. Aguilar. Técnicas de laboratorio en hematología salvat. 1.990

JAMES, C. Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio, Barcelona

científicas y técnicas 1.993

BAICELLS, Alfonso. La clínica y el laboratorio. Científicas y técnicas. 1.993

FISCHBACH. Manual de pruebas diagnosticas. 5ª. Edición, McGraw- Hill

interamer4icana. 1.997.

ESCOBAR, Myriam: Fundamento de microbiología. CESA 1.998

MINISTERIO DE SALUD. Manual de normas técnicas y administrativas para el

laboratorio. Decreto 00711/ 94

MANDELL/ BENNET/ DOUGLAS, de medica panamericana 1.997

LAGUADO, Ivonne: Uroanálisis. Universidad de Antioquía. 2001

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ESQUEMA PARA LA REALIZACIÓN DE UN UROCULTIVO

Orina

Examen del Gram Cultivo

Sedimento en
Fresco Cualitativo
Cuantitativo
Siembra de
Observar leucocitos, Observar aislamiento
Hematíes, bacterias, morfología A. Mc Conkey Siembra con asa
Levaduras, etc. A. EMB calibrada
A. Sangre
35 – 37º C x 24h
Aerobiosis A. Sangre
A. CLED
35 – 37º C
Gram Aerobiosis
24 hrs.
Cocos gram positivos Levaduras Bacilos gram negativos
identificación
Catalasa Prueba de Lactosa Normal <103 UFC/ml

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identificación Levemente significativo 103-104

UFC
+ - Significativo 105 UFC/ml
+ - Enterobacterias Enterobacterias o Pseudomonas
Staphylococcus Streptococcus
Micrococcus Oxidasa
+ -
PseudomonasEnterobacterias

Prueba de identificación Prueba de identificació

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