Práctica # 11

Células LE

Introducción

El Lupus Eritematoso Sistémico es una enfermedad autoinmune, que afecta a

muchos tejidos y órganos como articulaciones, piel, sistema nervioso, riñón,
corazón, pulmón, sangre, hígado, bazo y ojos. Las células LE son
polimorfonucleares que fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la
destrucción del núcleo de otros leucocitos, por el llamado Factor LE (factor
nuclear). Este es IgG-anti ADN que se fija a la superficie del núcleo y determina
alteraciones en la cromatina; y entonces al ser recubierto por anticuerpos, es
fagocitado por los neutrófilo. El objetivo es hallar neutrófilo que tengan adherido
en su superficie restos nucleares, o bien que los restos estén en su interior.

El lupus eritematoso diseminado es una enfermedad inflamatoria crónica del tejido

conectivo que ocasiona cambios bioquímicos y estructurales en la piel,
articulaciones y músculo, por lo general con ataque de múltiples órganos. A la
postre puede causar la muerte por insuficiencia de órganos vitales especialmente
los riñones.

En el lupus eritematoso se produce un anticuerpo de carácter antinuclear. Este

anticuerpo puede atacar a los neutrófilos. La célula se rompe y queda en libertad el
núcleo, convertido en una masa eosinofílica amorfa y de gran tamaño. Esta masa es
fagocitada por otro neutrófilo el cual ocupa casi todo el espacio celular. La imagen
que se presenta una vez hecha la tinción, es inconfundible y recibe el nombre de
células LE.

La técnica que se presenta a continuación intenta provocar el fenómeno celular LE

in vitro, lo que favorece su producción machacando el coágulo a través de una fina
malla. Sin embargo, ocasionalmente pueden presentarse las células LE en otra
enfermedad en la que también se producen anticuerpos antinucleares,
particularmente en las llamadas colagenopatías. El examen se utiliza para:

✔ Facilitar el diagnóstico de LE.

✔ Evaluar el tratamiento de la enfermedad (en promedio 60% de individuos
tratados satisfactoriamente no muestran células propias de lupus, esto
después de 4 a 6 semanas de tratamiento).

Objetivo:

Realizar el procedimiento in vitro para la determinación de células LE para su

respectiva Identificación.

Materiales:

✔ Jeringa de 10 ml
✔ Liga
✔ Gabacha
✔ Guantes, lentes, gorro
✔ Sangre venosa tomada sin anticoagulante.
✔ Colador de malla fina de plástico
✔ Vaso de precipitado de 250 ml.
✔ Mortero con mazo.
✔ Aguja Wintrobe
✔ Gasa
✔ Tubos de Wintrobe
✔ Macro Centrífuga.
✔ Coloración de Wright
 ✔ Coloración Panóptica.
✔ Laminas
✔ Laminillas
✔ Micropipetas
✔ Puntas azules
✔ Puntas amarillas.

Desarrollo de la práctica:

1. Tomar 10 ml de muestra de sangre y depositarlo en un tubo sin

anticoagulante.
2. Una vez coagulada la sangre incúbela a 37°C por 2 horas o el tiempo
necesario para que el coágulo se retraiga.
3. Colocar la malla de gasa sobre el mortero, verter el contenido del tubo
previamente incubado sobre la malla y con el mazo machacar el coágulo,
recogiendo el colado en el mortero.
4. Con la pipeta Pasteur recoger el colado y llenar los tubos de Wintrobe
tratando que ambos queden bien calibrados. Centrifugar por 15 minutos,
centrifugar a 3500 rpm
5. Tomar del tubo de Wintrobe la capa de leucocitos y hacer una extensión
sobre un portaobjetos, ayudándose con otro.
6. Teñir con la coloración de Wright.
7. Revisar la preparación con el objetivo de inmersión.

Interpretación de los resultados

✔ Reporta como positivo s e se observan dos o más células LE.

✔ Reporta como negativo si no se observan dichas células.
El "Fenómeno de Roseta" se debe a la adhesión de 2 o más neutrófilo a un resto
nuclear. Es raro de observar, y se debe diferenciar de las células "pegoteadas"
propias de extendido. La presencia de leucocitos vacuolados no indica
necesariamente la presencia de células LE, ya que fagocitaron cualquier resto
celular. La prueba no es totalmente específica, debido a que en enfermedades
autoinmunes también generan células LE, y no tiene gran sensibilidad, ya que es
negativa en 30% de pacientes con lupus.

Esto se explica por el tratamiento con corticoides en estos enfermos, que inhibe la
formación de este fenómeno, por lo actualmente no tiene valor diagnóstico y es
necesario realizar otras pruebas, tal como: la presencia de anticuerpos
antinucleares o anticuerpos contra ADN.

Factores que interfieren en los resultados

✔ Hemólisis.
✔ Fármacos como la Isoniacida pueden dar falsos positivos.
✔ Algunos pacientes con artritis reumatoidea, con esclerodermia y con
sensibilidad a los medicamentos también muestran un examen de células de
lupus eritematoso positivo.

Ejemplo:
Completar:
1. Registre lo observado:

2. Investigar qué pruebas de laboratorio se realizan para el diagnóstico de

Lupus Eritematoso sistémico y compartir su nombre y principio: