Tecnica para bsqueda de celulas LE

materiales: tubos de macro-hematocrito portas frasquito con 4-8 perlas de vidrio y 1 gota de hepaerina jeringa con aguja gruesa, de 15 cm de largo embudo Introduccion: El Lupus Eritematoso istemico es una enfermedad autoinmune, que afecta a muchos tejidos y organos como articulaciones, piel, sistema nervioso, ri!on, cora"on, pulmon, sangre, higado, ba"o y ojos# Las celulas LE son polimorfonucleares que fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la destruccion del nucleo de otros leucocitos, por el llamado Factor LE $factor nuclear%# Este es Ig Ganti ADN que se fija a la superficie del nucleo y determina alteraciones en la cromatina& y entonces al ser recubierto por anticuerpos, es fagocitado por los neutrofilos# El objetivo es hallar neutrofilos que tengan adherido an su superficie restos nucleares, o bien que los restos esten en su interior# E'isten ( metodos $entre otros% A) Metodo sin cogulo: 1- acar sangre al paciente, y colocar en frasquito con las perlas que posean 1 gota de heparina# (- )ejarlo rotar en el agitador por *+ minutos, o bien agitar vigorosamente por 5 a 1+ minutos para generar la lisis de leucocitos# *- Llevar la muestra a estufa de *, -. entre 1 a 4 horas, para darle tiempo a los leucocitos enteros a fagocitar los restos de los lisados y que decanten los globulos del plasma# 4- .on la jeringa de aguja larga aspirar la capa de leucocitos, en la interface plasma-globulos rojos y descargar dentro de ( a 4 tubos de macrohematocrito# 5- .entrifugar a muy baja velocidad $5++-1+++ rpm%, por 5 minutos# /- 0spirar nuevamente con la jeringa la capa de leucocitosde los tubos, y descargar en los portas, y reali"ar los e'tendido con e'tensor# ,- .olorear por el metodo de 1ay 2run3ald - 2iemsa y ver con

objetivo de inmersion# B) Mtodo con cogulo: 1- e sacan unos 5 a 1+ ml de sangre y se la deja coagular durante ( horas a *, -.# (- .entrifufar a *5++ rpm por 1+ minutos# *- Eliminar el suero y depositar el coagulo sobre varias capas de gasa, y 4stas sobre un embudo# 4- 0plastar el coagulo con una varilla y recojer el producto en un tubo de ensayo# 5- 5asar el liquido obtenido a un tubo de macrohematocrito con la jeringa con aguja larga, y centrifugar 15 minutos a (+++ rpm# /- 6sando la misma jeringa, eliminar primero el suero, y luego tomar la capa de leucocitos y depositar en portas para hacer e'tendidos# ,- .olorear por el metodo de 1ay 2run3ald - 2iemsa y ver con objetivo de inmersion# Observacion e interpretacion: 7uscar los campos bien coloreados y con las celulas bien separadas, evitando lo observacion de celulas 8pegoteadas8 por efecto de la lisis y la e'tension# La prueba es positiva cuando se hallan leucocitos que fagocitaron restos nucleares de los lisados, o bien los tenga adheridos en su superficie, que se notara por la diferencia de color entre el resto nuclear y el nucleo de leucocito entero, y se informara 8 e observan celulas LE8 El 89enomeno de :oseta8 se debe a la adhesion de ( o mas neutrofilos a un resto nuclear# Es raro de observar, y se debe diferenciar de las celulas 8pegoteadas8 propias de e'tendido# La presencia de leucocitos vacuolados no indica necesariamente la presencia de celulas LE, ya que fagocitaron cualquier resto celular# La prueba no es totalmente especifica, debido a que enfermedades autoinmunes tambien generan celulas LE, y no tiene gran sensibilidad, ya que es negativa en *+; de pacientes con lupus# Esto se e'plica por el tratamiento con corticoides en estos enfermos, que inhibe la formacion de este fenomeno, por lo actualmente no tiene valor diagostico y es necesario reali"ar otras pruebas, tal como a

busqueda de anticuerpos, que son mas sensibles y especificas# 0lgunos laboratorios sugieren que se confirme la presencia de anticuerpos antinucleares $90<=0<0% antes de buscar e informar las celulas LE, ya que es una tecnica con alto error# 0demas no es especifica para Lupus, y esta cayendo en desuso# in embargo, para diagnosticar LE , es uno de los 1+-15 parametros a considerar para confirmar la enfermedad# Imagenes de Celulas LE:

7ibliografia> 2uia de trabajos practicos de la .atedra de ?ematologia de la 6<L5 - 0sociaci@n Lupus 0rgentina A 0L60 - http>==333#alua#org#ar 1anual de t4cnicas de laboratorio en hematologBa - Coan LluBs Dives i .orrons,Cosep LluBs 0guilar 7ascompte- *ra edicion,a!o (++/# editorial 1asson origen de las imagenes> http>==333#freeed#net=s3eethaven=1edEech=?ematology=lesson1ain#aspF i<umG+411 9acultad de medicina de Londres http>==3331#imperial#ac#uH=medicine=divisions=olddivisions=is=hae matology=morphology=bain=images=slide5+=