Alumna: Torres Silva Ruth Miriam

BIOSÍNTESIS DEL PÉPTIDOGLICANO DE MUREÍNA

Se realiza en 4 etapas o fases que son:

1. Síntesis de precursores solubles en el citoplasma.

2. Estos precursores son transferidos a un transportador lipídico situado en
la membrana citoplasmática (un poliisoprenol fosfatado llamado
undecaprenil-fosfato), donde se forman las unidades disacarídicas con el
pentapéptido.
3. Las unidades disacarídicas se polimerizan en cadenas lineales fuera de
la membrana, pero aún unidas al undecaprenil-fosfato de la membrana.
4. Unión del polímero lineal así formado al péptidoglicano preexistente en
la pared celular, por entrecruzamiento de (al menos) parte de sus
péptidos respectivos.

A estas etapas hay que añadir una fase adicional de regeneración del
transportador lipídico, una vez que ha cumplido su misión, para que pueda
ser operativo en un nuevo ciclo de síntesis.
Fase 1: Los monosacáridos que luego van a constituir la unidad disacarídica
repetitiva del esqueleto del péptidoglicano N- acetil muramico y N-acetil
glucosamina (NAM y NAG) se activan al unirse a uridín di fosfato (UDP). (En
general, los monosacáridos que han de incorporarse a polímeros de pared
celular bacteriana se activan mediante su unión con nucleósidos-fosfato.) se
unen por enlaces glucosidicos.

Entonces en esta primera fase se sintetiza por separado:

 NAG-UDP
 NAM-UDP

Después se va produciendo la adición secuencial y ordenada de los distintos

aminoácidos al NAM (en reacciones que requieren energía e iones Mn++):

 L-ala
 D-glu
 m-DAP (u otro di aminoácido; p. ej. L-lys en Staphylococcus aureus)
 D-ala-D-ala

Podemos observar que no se produce un tetrapéptido, sino un pentapétido.

El último paso de adición de aminoácidos es la unión del dipéptido D-alanil-D-

alanina, que se ha sintetizado en dos fases.

 una racemasa convierte la L-ala a D-ala

 creación de enlace peptídico entre dos D-ala

Fase 2: El UDP-NAM-pentapéptido se transfiere ahora a un transportador de

membrana, llamado undecaprenil-fosfato (Lip-P), en una reacción catalizada
por una translocasa específica.

El undecaprenil-fosfato es un poliisoprenoide de 55 átomos de C (C55,

derivado de la repetición 11 veces de la unidad isoprenoide, con un fosfato
terminal). Se le conoce también con el nombre de bactoprenol. El bactoprenol
permite el transporte y ensamblaje de sustancias que, como los azúcares, son
hidrofílicas, y no podrían pasar por sí mismas la barrera hidrofóbica de la
membrana.
Una vez que el NAM-pentapéptido está unido al undecaprenil (por medio de
pirofosfato), una transferasa transfiere a éste la NAG desde el UDP-NAG. Se
genera pues el enlace ß(1à4) entre NAG y NAM. Por lo tanto, se obtiene: Lip-P-
P-NAM(pentapéptido)-NAG.

En esta situación es cuando se producen las modificaciones en la estructura

básica del PG. Por ejemplo: en Staphylococcus aureus el grupo -COOH del D-
glutámico en posición (2) es amidado (pasa a --CO-NH2. Por otro lado, se
introducen los puentes peptídicos, que en el caso de esta bacteria consisten en
una pentaglicina, que se une al grupo amino terminal de la L-Lys en posición
(3).

Tanto la translocasa como la transferasa está localizadas en el citoplásma de

la membrana, de modo que el precursor Lip-P-P-NAM(pentapéptido)-NAG, en
este momento está “colgando” hacia el citoplasma, anclado a la lámina interna
de la membrana a través de bactoprenol.

Fase 3: Polimerización de varias unidades disacarídicas: Ahora el

bactoprenol “se da la vuelta” en la membrana (una especie de flip-flop desde la
capa interna hasta la externa), de modo que logra que el precursor resultante
de la fase 2 quede expuesto hacia el medio acuoso exterior a la membrana.
Entonces tiene lugar la polimerización de varias unidades disacarídicas: ello se
logra en una reacción de transglucosiación. Consiste en la unión de cada
unidad disacarídica (con su pentapéptido) unida a su respectivo Lip-P-P, con el
extremo libre (reductor) de una cadena preexistente que a su vez está unida a
otra molécula de Lip-P-P.

En el proceso se libera uno de los Lip-P-P (o sea, el undecaprenil, pero en

forma pirofosforilada). Sobre este Lip-P-P actúa una fosfatasa específica, que
elimina el fosfato terminal, regenerándose el undecaprenil-fosfato, que queda
dispuesto para otro ciclo como el descrito.

Fase 4: El polímero surgido de la fase anterior es una cadena lineal de PG sin

entrecruzar, y unido aún al transportador lipídico de membrana. Ahora este
polímero naciente (con sus pentapéptidos) reacciona, por transpeptidación, con
un PG aceptor preexistente. En esta reacción se ven implicados el grupo C=O
de la D-ala (4) del PG naciente y el grupo -NH2 libre del diaminoácido (3) del
PG aceptor (o del último aminoácido del puente peptídico).

Esto es lo mismo que decir que el enlace peptídico entre D-ala (4) y D-ala (5)
del PG naciente se ve sustituido por otro enlace peptídico, entre dicha D-ala (4)
y el diaminoácido del PG naciente.

La energía para esta reacción la suministra la hidrólisis concomitante del

enlace peptídico entre las dos D-ala terminales. Es decir, en cada reacción de
transpeptidación se libera una D-ala, correspondiente a la que ocupaba la
posición (5).

ANTIBIÓTICOS QUE ACTÚAN A NIVEL DE LA BIOSÍNTESIS DE

PÉPTIDOGLICANO (PG):

Estos antibióticos tienen un efecto bactericida sobre bacterias en crecimiento.

Ello se debe a que, al inhibir determinados pasos del ciclo de síntesis y
ensamblaje del PG, provocan la acumulación de precursores de dicho PG, lo
que a su vez desencadena la activación de las autolisinas de la bacteria, que
degradan el PG y que finalmente provoca la lisis celular (en medios
hipotónicos), por entrada masiva de agua a la célula.

1. Fosfomicina: actúa inhibiendo la formación del 3-O-D-lactil-éter de la

NAG (o sea, del NAM). Parece ser que la base molecular estriba en la
semejanza estructural entre el este antibiótico y el PEP (es decir, la
fosfomicina es análogo estructural del PEP, lo que lleva a la inactivación
de la enzima correspondiente a esta reacción).
2. Cicloserina: Se comporta como análogo estructural de la D-alanina, por
lo que inhibe la actuación de la racemasa que convierte la L-ala a D-ala,
así como de la reacción de unión de dos D-ala.
3. Tunicamicina: inhibe la traslocasa que cede el NAM unido hasta
entonces al UDP y lo pasa al bactoprenol (fase 2ª).
4. Vancomicina y ristocetina: inhiben la segunda transglucosidación (fase
3ª), es decir, la unión de diversas unidades disacarídicas.
5. Bacitracina: se une al undecaprenol-pirofosfato, bloqueando su
desfosforilación, e impidiendo, por lo tanto, la regeneración del
transportador de membrana.
6. Antibióticos ß-lactámicos (p. ej.: penicilinas, cefalosporinas): inhiben la
reacción de entrecruzamiento por transpeptidación.

CRECIMIENTO DE PARED CELULAR

aunque la pared celular es una estructura cerrada y sin disposición de

continuidad, debe permitir su crecimiento, y esto supone que se han de romper
ciertos enlaces si se quiere que el nuevo material se ensamble con el
preexistente mediante nuevas uniones, es decir, debe existir una acción
concertada de mureín-hidrolasas y de mureín-sintasas.

Se producen dos tipos de procesos:

 la expansión (aumento de tamaño) de esa pared

 formación del tabique transversal en el centro de la célula.
El crecimiento y septación del péptidoglicano están basados en la actividad
controlada y localizada en puntos determinados, de una gama de autolisinas,
especialmente las dotadas de actividad transglucosidasa y/o transpeptidasa.
Debido a que estas enzimas son los sitios de acción de las penicilinas (y otros
antibióticos ß-lactámicos), se les conoce también con el nombre de PBP.

Propiedades de las PBPs de escherichia Coli.

CRECIMIENTO DE LA PARED EN UNA BACTERIA GRAM-NEGATIVA:

Escherichia coli

El crecimiento de la pared en E. coli se puede considerar dividido en dos fases:

1. Crecimiento en longitud (elongación), mientras la célula crece en

tamaño.
2. Producción del tabique transversal (septación), que conduce a la
formación de dos células hijas.

Elongación. - Las PBPs 1 son las encargadas de la elongación de las cadenas

de PG naciente (por transglucosidación de las unidades disacarídicas) y
simultáneamente, por transpeptidación, logran el entrecruzamiento.

Las cadenas nacientes del PG se intercalan en la parte cilíndrica del sáculo de

PG gracias a que las PBP4 y PBP5 cortan enlaces del PG preexistente. La
PBP2 interviene aquí también para transpeptidación. La cadena de PG se va
elongando unidireccionalmente alrededor de la circunferencia de la célula. Se
calcula que existen unos 200 sitios de inserción de nuevo material en cada
célula, dispersos de forma más o menos uniforme por toda la superficie de la
célula. La maquinaria biosintética tarda 8 minutos en completar cada
circunferencia de elongación.

Formación del tabique transversal

La división de la bacteria por fisión binaria simétrica se logra por medio de una
invaginación circular de las envueltas (membrana citoplásmica y
peptidoglucano) en mitad de la célula madre. En el inicio de este proceso tiene
un papel esencial la proteína FtsZ, y más tarde intervienen otras proteínas Fts.

FtsZ es una proteína imprescindible, presente tanto en eubacterias como en

arqueas, que muestra parecido con las tubulinas eucarióticas. Al parecer, al
igual que las tubulinas, la FtsZ se une a GTP, con lo que se promueve su
polimerización. Bajo control del ciclo celular, la FtsZ se ensambla poco antes
de la división en el centro de la célula, formando un “anillo citocinético” en el
lado citoplásmico de la membrana celular. Existen indicios fuertes de que la
formación de este anillo de FtsZ señaliza el sitio por donde se producirá la
división y se activará el crecimiento del peptidoglucano del tabique transversal.
Una vez que FtsZ ocupa el lugar del futuro septo, entran en acción otras
proteínas Fts, formando un complejo llamado “divisoma”.

En las fotografías a microscopio electrónico se ve cómo bajo la invaginación de

membrana que constituye la “avanzadilla” del septo, se localizan las moléculas
de FtsZ.

A microscopio electrónico se observa que este tabique está formado por dos
láminas de PG (densas a los electrones) separadas entre sí por otra
transparente. El final de la división ocurre como consecuencia de la
invaginación de la membrana externa entre las dos láminas de PG.

CRECIMIENTO Y SEPTACIÓN EN UNA BACTERIA GRAM-POSITIVA:

Enterococcus faecalis

A diferencia de la E. coli, en el enterococo (Enterococcus faecalis) el

crecimiento del PG no es difuso, sino zonal, comenzando en el centro (zona
ecuatorial) y avanzando hacia afuera.
  Tras unos 15 minutos después del marcado se observa que existe una
banda ecuatorial oscura (no marcada, por lo tanto, está constituida por
material nuevo recién insertado), mientras que los polos de las células
siguen enteramente marcados.
 Tras 30 o 60 minutos observamos células enteramente sin marcar,
intercaladas entre células con uno de sus polos marcados.

El proceso se puede describir así:

1. En la célula adulta antes de la división aparece una banda ecuatorial

donde la pared celular se hace más gruesa.
2. Debajo de esta zona engrosada (hacia el interior del citoplasma) se va
depositando nuevo material, lo que marca el inicio de la formación del
tabique transversal. Enseguida aparece una muesca en la banda
ecuatorial.
3. El tabique, con un grosor doble al de la pared celular de la superficie
celular, sigue avanzando, hasta que...
4. Se completa. Simultáneamente a los pasos 3º y 4º la zona de nueva
síntesis de P.C. superficial alcanza el ecuador de las celúlas hijas
nacientes
5. El tabique completo de doble grosor va siendo escindido en dos mitades
desde el exterior hacia el centro, por acción de autolisinas. De esta
forma se le adjudica a cada célula hija la nueva pared correspondiente a
uno de sus polos (el otro procede, intacto, de la célula madre).

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. VAZQUEZ, D. Biosíntesis del peptidoglucano: mecanismos de acción y

selectividad de los antibióticos inhibidores. En: Bioquímica y Biología
Molecular Salvat, Barcelona, 1986.
2. FLORES J. farmacología humana 6ta edición Elsevier España -
Barcelona 2014.