Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

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Biosensores y bioelectrónica

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Biosensores fáciles para la detección rápida de COVID-19

Lizhou Xu a , * , 1 , Danyang Li B , 1 , Sami Ramadán a , Yanbin Li C , Norbert Klein a

a Departamento de Materiales, Imperial College London, Londres, SW7 2AZ, Reino Unido
B Facultad de Cáncer y Ciencias Farmacéuticas, King ' s College London, 150 Stamford Street, Londres, SE1 9NH, Reino Unido
C Departamento de Ingeniería Biológica y Agrícola, Universidad de Arkansas, Fayetteville, AR, 72701, EE. UU.

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO RESUMEN

Palabras clave: Actualmente, el mundo enfrenta el desafío de una emergencia de salud pública provocada por la pandemia de coronavirus (COVID-19). Los amplios esfuerzos en las
SARS-CoV-2 pruebas de detección de la infección por coronavirus, combinados con el aislamiento de los casos infectados y la cuarentena de las personas en contacto, han
COVID-19
demostrado ser exitosos para controlar la epidemia. La detección rápida y sencilla de esta enfermedad tiene una gran demanda. Esta revisión resume los avances
Deteccion rapida
recientes en las estrategias informadas por investigadores e ingenieros internacionales sobre cómo abordar el COVID-19 a través de pruebas rápidas, principalmente a
Pruebas en el lugar de atención
través de pruebas de ácidos nucleicos y anticuerpos. Se enfatiza el papel de los biosensores como poderosas herramientas analíticas para la detección de ARN virales,
Coronavirus
antígenos de superficie, partículas virales completas, anticuerpos y otros biomarcadores potenciales en muestras humanas. Revisamos críticamente en profundidad los
Biosensor
métodos de biosensores desarrollados recientemente, especialmente para la detección en el campo y en el lugar de atención del SARS-CoV-2. Además, esta revisión

describe posibles estrategias futuras para la detección rápida de virus. Ayuda a los investigadores que trabajan en tecnologías de sensores novedosas a adaptar sus

tecnologías de manera que aborden el desafío de la detección efectiva de COVID-19.

1. Introducción
Desde el brote del síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2), con la
enfermedad conocida como enfermedad del nuevo coronavirus (COVID-19), reportada por primera
vez a principios de enero de 2020 en Wuhan, China ( Zhu y col., 2020a ; Wang et al., 2020 ), la
tendencia creciente de casos infectados aún no está bajo control ( Chan et al., 2020 ; Huang y col.,
2020a ). El COVID-19 fue anunciado oficialmente como una pandemia por la Organización Mundial de
la Salud (OMS) el 11 de marzo de 2020. Hasta el momento, se han confirmado más de 7.823.289
casos en todo el mundo, con 431.541 muertes en más de 210 países y territorios hasta el 15 de junio
de 2020. ( Organización Mundial de la Salud, 2020a ). El SARS-CoV-2 es la cepa del virus que causa
la enfermedad respiratoria COVID-19. Se cree que el SARS-CoV-2 tiene orígenes zooticos y tiene
una similitud genética cercana con los coronavirus de murciélago ( Chen y col., 2020a, b ). Es un virus
de ARN monocatenario de sentido positivo con aproximadamente 50 - 200 nm de diámetro ( Figura 1 A)
( Xu et al., 2020 ). Al igual que otros coronavirus, el SARS-CoV-2 tiene principalmente cuatro proteínas
estructurales, a saber, las proteínas de pico (S), membrana (M), envoltura (E) y nucleocápside (N),
respectivamente ( Wrapp et al., 2020 ). El virus hace un uso completo de la proteína S para unirse a la
enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) en la superficie de la célula humana, para ingresar a
la célula huésped. Entonces
La proteína contiene el genoma viral pero también participa en la respuesta celular del huésped a la
infección viral. Las proteínas S, E y M juntas crean la membrana protectora externa viral ( Figura 1 B) ( Wrapp
et al., 2020 ). Tanto las proteínas (p. Ej., La proteína S) como el ARN viral pueden usarse como dianas para
la detección de COVID-19. Alternativamente, también se podrían detectar anticuerpos como IgM e IgG de
muestras de pacientes para comprender el historial de infecciones. El ARN del SARS-CoV-2 es detectable
2 - 3 días antes del inicio de los síntomas y pueden permanecer hasta 25 - 50 días después, dependiendo de
la gravedad de la enfermedad ( He et al., 2020 ). Muchos estudios muestran que los anticuerpos IgM
comienzan a detectarse alrededor de las 5 - 10 días después del inicio de los síntomas y aumentan
rápidamente, seguido de cerca por una respuesta de anticuerpos IgG ( Peeling et al., 2020 ). Estas
seroconversiones ocurren típicamente dentro de las primeras 3 semanas con un tiempo medio de 9 - 11 días
después del inicio de los síntomas de anticuerpos totales (10 - 12 días para IgM y 12 - 14 días para IgG). El
nivel de ARN puede permanecer alto a pesar de las altas concentraciones de anticuerpos IgM e IgG en la
sangre del paciente ( Zhao et al., 2020 ). Estos estudios de respuesta inmune e infección viral destacan la
ventana de detección para el diagnóstico de SARS-CoV-2 y, lo que es más importante, guían la
implementación estratégica de tipos apropiados de pruebas en las diferentes etapas de la infección. Por
ejemplo, las pruebas inmunológicas pueden desempeñar un papel importante en el seguimiento de los
casos sintomáticos en la etapa media / tardía de la infección (p. Ej., 5 - 10 días después del inicio de los
síntomas). Resultado positivo de IgM en

* Autor correspondiente.
Dirección de correo electrónico: l.xu@imperial.ac.uk (L. Xu).
1 El Dr. Lizhou Xu y el Dr. Danyang Li contribuyen igualmente a este trabajo.

https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112673
Recibido el 17 de junio de 2020; Recibido en forma revisada el 26 de agosto de 2020; Aceptado el 30 de septiembre de 2020

On-line el 1 de octubre de 2020

0956-5663 / © 2020 Elsevier BV Todos los derechos reservados.
L. Xu y col. Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

pacientes sintomáticos que cumplen con la definición de caso de COVID-19 sugiere fuertemente una y pruebas de anticuerpos.

infección por SARS-CoV-2. Sin embargo, todavía se recomienda la prueba de ARN para confirmar el
caso.
2.1. Prueba de ácido nucleico (ARN)
Un mensaje clave de la OMS a principios de marzo es: 'prueba, prueba, prueba '
( Organización Mundial de la Salud, 2020b ). Las pruebas de detección especialmente rápidas son
Muchos kits de diagnóstico molecular de laboratorio han sido desarrollados por organizaciones de
extremadamente críticas y una forma poderosa de monitorear y manejar la pandemia antes de que estén
control de enfermedades, institutos de investigación y empresas privadas y se han utilizado para
disponibles vacunas o medicamentos efectivos. La detección eficaz ayuda a confirmar los casos infectados
realizar pruebas a los pacientes. ' especímenes desde el comienzo de la pandemia COVID-19 ( Centro
con síntomas mostrados o incluso cuando aún se encuentran dentro del período de incubación del virus
Chino para el Control y la Prevención de Enfermedades, 2020 ; CDC, 2020 ; Corman et al., 2020 ; Roche
(pruebas de diagnóstico), lo que permite el tratamiento a tiempo. Se han realizado millones de pruebas
Ltd, 2020a ). La prueba de ácido nucleico basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
basadas en ARN en todo el mundo buscando la presencia de genes virales en un frotis de nariz o garganta
busca ARN virales en muestras de las vías respiratorias superiores (frotis nasales y / o faríngeos) de
como un signo de infección activa. Además, los análisis de sangre para detectar anticuerpos contra el
un individuo. tabla 1 resume los métodos recientes de detección basados en ácidos nucleicos virales
SARS-CoV-2 pueden indicar indirectamente una infección activa o un historial de inmunidad / infección
para las pruebas de SARS-CoV-2. La PCR cuantitativa de transcripción inversa (qRT-PCR) se ha
posterior a la infección (prueba de vigilancia). Las pruebas rápidas también ayudan a la asignación eficiente
convertido gradualmente en el estándar de oro actual para el diagnóstico de la infección por
de los recursos médicos en los hospitales y ahorran tiempo a los trabajadores de la salud de primera línea.
SARS-CoV-2. Genes del SARS-CoV-2 como ORF1ab ( marco de lectura abierto), RdRp ( Gen de ARN
Particularmente para los países de bajos ingresos, rápido, Las pruebas asequibles, en el campo y en el
polimerasa dependiente de ARN), E ( gen de la proteína de la envoltura), y N ( gen de la proteína de la
lugar de atención pueden tener efectos sustanciales en el control de la propagación de la enfermedad donde
nucleocápside) puede ser el objetivo para el diagnóstico. El protocolo general de qRT-PCR se basa en
los sistemas de salud pueden ser débiles y el acceso al tratamiento médico limitado. Además, la información
la extracción de ARN de hisopos respiratorios disueltos en medios de transporte viral (VTM) y la
valiosa sobre la distribución local de infecciones mejora la precisión de la predicción epidemiológica y facilita
posterior transcripción inversa en un solo paso y qRT-PCR en tiempo real dirigida a una o varias
la formulación de políticas correspondiente. Por lo tanto, las detecciones rápidas, fáciles, rentables y
secuencias de genes del SARS-CoV. -2 ( Zou et al., 2020 ). Los investigadores han intentado simplificar
accesibles para la detección a gran escala, las pruebas de campo y el diagnóstico de la enfermedad en el
este protocolo actual evitando el paso de extracción de ARN basado en el calentamiento directo de
lugar de atención son de gran importancia y urgencia para controlar rápidamente la propagación rápida y
VTM con hisopo nasofaríngeo antes de la qRT-PCR, que puede proporcionar opciones viables para
altamente contagiosa de COVID. 19. En este trabajo, primero revisamos el reciente avance en las pruebas
superar cualquier problema de la cadena de suministro y ayudar a aumentar el rendimiento de las
rápidas para COVID-19. A continuación, destacamos las funciones de los biosensores para la detección
pruebas ( Alcoba-Florez et al., 2020 ). Otros nuevos métodos basados en ARN para la detección del
rápida y sencilla del SARS-CoV-2 que cubre los ARN virales, los antígenos de superficie / virus completos,
SARS-CoV-2 ( tabla 1 ) también se han desarrollado para abordar esta crisis, como la técnica de
detección de anticuerpos y biomarcadores potenciales. Finalmente, se discuten los desarrollos futuros de
amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa (RT-LAMP) ( Lamb et al., 2020 ).
nuevos biosensores de virus.
Yan y col. evaluó un ensayo RT-LAMP para el SARS-COV-2 en 30 minutos utilizando cebadores
dirigidos ORF1ab y S ( spike) genes, con un LOD de 2 × 10 1 copias y 2 × 10 2 copias de ARN por
reacción, respectivamente ( Yan et al., 2020 ). No se encontró reactividad cruzada con otros 60
patógenos respiratorios. La sensibilidad (tasa de verdaderos positivos) para el diagnóstico de muestras
clínicas (n = 130) fue cercana al 100% (IC del 95%

2. Tecnología de punta en enfoques de pruebas rápidas para el SARS-CoV-2

Actualmente, la tomografía computarizada, las pruebas hematológicas y los métodos moleculares

basados en mediciones genéticas virales son las principales herramientas utilizadas para el diagnóstico
clínico de COVID-19, junto con la identificación de síntomas clínicos para confirmar la infección ( Jin y
92,3% - 100%), al igual que su especificidad (95% CI 93,7% - 100%). En comparación con qRT-PCR,
col., 2020b ). Estas pruebas de laboratorio son esenciales para controlar el florecimiento de la
RT-LAMP es más rápido y no requiere aislamiento previo de ARN de las muestras. Los reactivos
enfermedad. Se utilizó un enfoque de secuenciación metagenómica de próxima generación (mNGS)
para RT-LAMP son relativamente baratos y estables a temperatura ambiente y, por lo tanto, esta
basado en ARN para identificar la secuencia de SARS-CoV-2 inmediatamente después del brote inicial ( Chen
técnica es prometedora para su uso fuera de un laboratorio central (detección en el campo) por parte
y col., 2020a, b ). mNGS es una técnica sensible, pero está restringida por el rendimiento, el tiempo de
del personal sin capacitación especial y sin necesidad de equipo avanzado ( Park et al., 2020 ). Se
respuesta, el alto costo y el requisito de una gran experiencia técnica. Los enfoques de detección rápida
informó un método colorimétrico-LAMP utilizando tintes sensibles al pH para visualizar la
podrían marcar el comienzo de una era de pruebas en el punto de atención (POCT) o detección de virus
amplificación de LAMP a través del cambio en el pH resultante de la acumulación de protones debido
en el campo. Figura 2 muestra los dos enfoques de prueba principales que se utilizan actualmente para
a la incorporación de desoxinucleósidos trifosfatos (dNTP) ( Zhang y col., 2020c ). Sensibilidad / LOD
COVID-19 a nivel mundial: pruebas de ácido nucleico
tan bajo como 4.8 copias / μ L se logró en la prueba de muestras de ARN

Figura 1. Diagrama esquemático de (A) modelo 3D del virión SARS-CoV-2. Reimpresión de la Biblioteca de imágenes de salud pública de los CDC (ID 23312: Alissa Eckert y Dan Higgins). (B) Sitios de orientación relacionados
(biomoléculas) para la detección de COVID-19. No a escala. Parcialmente reimpreso de ( Morales-Narv ´ áez y Dincer, 2020 ).

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Figura 2. Principales enfoques de prueba actuales para COVID-19: prueba de ácido nucleico y prueba de anticuerpos.
purificado a partir de hisopos respiratorios del paciente, y los resultados coincidieron en un 100% con
los del método qRT-PCR. Este esfuerzo amplía la caja de herramientas de las pruebas moleculares
más allá de los laboratorios de diagnóstico sofisticados con el objetivo de combatir y monitorear la
creciente amenaza para la salud pública. Además, se ha informado que la PCR digital (dPCR) mejora
el LOD a al menos 10 veces más bajo que el de RT-PCR, y se informó que la precisión general en la
detección clínica de 109 muestras es del 96,3%, lo que sugiere el potencial de dPCR para la
detección de pacientes asintomáticos y sospechosos ( Lu et al., 2020 ).
Aunque las pruebas de qRT-PCR son sensibles y se utilizan ampliamente como herramientas de
diagnóstico actuales para el SARS-CoV-2, solo se pueden realizar en laboratorios certificados con
equipos costosos y técnicos capacitados, pero no en lugares como aeropuertos, fronteras, grandes
centros comerciales, etc. ., donde las instalaciones de prueba no son fácilmente accesibles. Teniendo en
cuenta el tiempo de entrega de las muestras a los laboratorios centralizados, las pruebas de qRT-PCR
podrían tardar más de 24 ho más desde el muestreo hasta los resultados (tiempo de respuesta), a pesar
de que el ensayo en sí solo toma unas pocas horas. Además, las altas tasas de falsos negativos pueden
ser un problema para la prueba qRT-PCR de COVID-19 debido a errores en el muestreo y la prueba ( Corman
et al., 2020 ; Xie et al., 2020 ; Tang Xiao et al., 2020 ). A veces, la identificación de secuencias de genes
virales diana no puede confirmar la presencia de partículas virales activas, porque una detección positiva
puede deberse a residuos de ARN viral. Como se resume en
tabla 1 , se han hecho muchos intentos para realizar un diagnóstico molecular confiable y más rápido de
COVID-19, como LAMP, como se mencionó anteriormente. Muchos han estado disponibles en el
mercado, mientras que algunos todavía necesitan validación clínica utilizando muestras de pacientes.
Sus estados de comercialización se destacan en tabla 1 como FDA-EUA (Autorización de uso de
emergencia de la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE. UU.) o CE-IVD (marcado CE
europeo para diagnóstico in vitro). Hasta el 21 de agosto de 2020, la FDA había emitido más de 176
pruebas moleculares para diagnosticar infecciones con el virus SARS-CoV-2, incluidas 17 " Colección
Diagnostics-Molecular-Home " kits para recolectar muestras en casa y luego enviarlas al laboratorio
autorizado para su análisis ( FDA de EE. UU., 2020 ). Algunas pruebas de diagnóstico molecular requieren
un operador altamente capacitado para realizar la prueba manualmente (por ejemplo, un paso de
extracción de ARN utilizando plataformas y kits de extracción específicos). Por ejemplo, el ensayo
múltiple de influenza SARS-CoV-2 (Flu SC2) desarrollado por los Centros para el Control y la Prevención
de Enfermedades (CDC) basado en qRT-PCR solo se puede ejecutar en laboratorios de alta
complejidad, ya que puede detectar y
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Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
diferenciar el SARS-CoV-2, la influenza A y / o la influenza B en muestras de las vías respiratorias
superiores e inferiores y depender de instrumentos específicos ( CDC, 2020 ). Mientras que otros están
automatizados y solo requieren una capacitación limitada para realizarlos. Entre ellos, el enfoque de
amplificación de ácido nucleico isotérmico con un tiempo de muestreo más corto hasta el resultado y
un protocolo más simple se muestra prometedor para poder superar los inconvenientes asociados con
la qRT-PCR convencional. Como ejemplo de éxito, el sistema isotérmico rápido 'ID NOW ' fue lanzado
para la detección cualitativa de COVID-19 con tecnología de amplificación de ácido nucleico
isotérmico el 28 de marzo de 2020 por una de las empresas biomédicas líderes ( Abbott (2020) . Este
dispositivo es capaz de dar resultados positivos en 5 min y resultados negativos en 13 min. Aunque
solo está disponible para uso profesional en este momento, este kit de prueba de coronavirus portátil
lleva las pruebas moleculares al frente y ha mejorado sustancialmente la capacidad de prueba en los
EE. UU. Desde principios de abril de 2020 después de la aprobación de la FDA de EE. UU. Según la
EUA. Sin embargo, aún no se han informado los resultados de rendimiento de las pruebas clínicas
para este producto. También han surgido muchos otros productos para la detección de ácidos
nucleicos para las pruebas de COVID-19 en el punto de atención que fueron aprobados recientemente
por las autoridades para uso de emergencia, como la prueba Accula SARS-CoV-2 de Mesa Biotech ( Mesa
Biotech, 2020 ), Xpert ®
Xpress SARS-CoV-2 de Cepheid Xpert ( Cefeida, 2020 ) y máquinas SAMBA II ( Universidad de
Cambridge, 2020 ) entre otros.
2.2. Prueba de anticuerpos
Prueba de anticuerpos en el paciente ' La sangre es otra modalidad para la detección de
COVID-19. Los kits de prueba de anticuerpos se diseñan generalmente para la detección cualitativa
de anticuerpos IgM y / o IgG contra el SARS-CoV-2 en un suero, plasma (EDTA, citrato) o muestra de
sangre completa por venopunción de un paciente. La tira de prueba de flujo lateral (LFTS) o el
inmunoensayo de flujo lateral (LFIA) se utilizan ampliamente para este propósito. Este es un
dispositivo simple a base de celulosa que emplea flujo lateral cromatográfico que está destinado a
detectar la presencia de un analito diana (anticuerpo contra el SARS-CoV-2) en una muestra líquida
(sangre / suero / plasma, etc.) sin la necesidad de y equipo costoso - aunque se pueden utilizar
equipos de laboratorio para lograr una mayor sensibilidad ( Posthuma-Trumpie et al., 2009 ). Por lo
general, contiene una almohadilla de muestra, una almohadilla de conjugado, una membrana de
nitrocelulosa y una almohadilla absorbente. La almohadilla de muestra se expone al
L. Xu y col. Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

tabla 1
Kits de prueba comerciales representativos con potencial POCT y otras pruebas basadas en ácidos nucleicos para la detección de COVID-19.

Muestra Objetivo de detección Detección Sensibilidad B Especificidad C Ensayo Giro de vuelta Comercial Árbitro.

volumen a método (Cierto detección hora productos /

Limite de Cierto
tasa negativa) hora estado de registro
detección positivo
Velocidad

5μL ARN (RdRp, E, N QRT en tiempo real 3.9 copiar / 100% (n 100% (n = ~ 2 horas > 4h Desarrollado por Corman y col.
genes) PCR reacción (E = 297) 297) académico y público (2020)
gene); 3.6 copiar / laboratorios en
reacción (RdRp nacional y
gene) Investigación europea
redes
5μL ARN QRT en tiempo real 3.2 copiar / μ L / / ~ 2 horas > 4h El CDC Flu SC2 CDC (2020)
PCR Ensayo multiplex;
FDA-EUA
/ ARN (ORF-1a, E QRT en tiempo real / / / ~3-8h ~ 1 día Roche Cobas ® Roche Ltd
regiones genéticas) PCR Prueba de SARS-CoV-2 (2020a)
(cobas ® 6800/8800
Sistemas);
FDA-EUA + CE-IVD
Marcos

/ ARN LÁMPARA / / / 5 minutos < 30 minutos Abbott ID AHORA Abbott

(positivo); plataforma; (2020)
13 min FDA-EUA
(negativo)
/ ARN PCR con lateral / / / < 30 minutos < 1 hora Mesa Biotech Accula Mesa Biotech
ensayo de flujo Prueba de SARS-CoV-2; (2020)
FDA-EUA
/ ARN QRT en tiempo real / / / < 45 min < 1 hora Cefeida Xpert ® Cefeida
PCR Xpress SARS-CoV-2; (2020)
FDA-EUA
/ ARN (gen N) ADN isotermo / 95,0% 100% (n = < 30 minutos < 1 hora Cue Health, Cue Cue Health
amplificación (n = 20) 30) Prueba COVID-19; (2020)
FDA-EUA
/ ARN Molecular / 98,7% 100% (n = < 90 min < 90 min DRW SAMBA II Universidad de
método (norte 102) máquinas Cambridge
102 =) (2020)
20 μ L ARN LÁMPARA con 4.8 copiar / μ L / / ~ 30 min < 1 hora Hisopo probado Zhang y col.
colorimétrico muestras; en clinica (2020c)
leer etapas de validación

< 10 μ L ARN (genes E, N) Basado en CRISPR 10 copia / μ L 95% (n 100% (n = < 45 min < 1 hora Hisopo probado Provocada
LÁMPARA con = 40) 42) muestras; en clinica et al. (2020)
flujo lateral etapas de validación

ensayo

14 μ L ARN PCR digital > 1 copia / μ L / / < 45 min < 1 hora Hisopo probado Lu y col.
muestras; en clinica (2020)
etapas de validación

25 μ L ARN (ORF1ab, S Marcha atrás 20 copia / 100% (n 100% (n = < 30 minutos < 1 hora Hisopo probado Yan y col.
genes) transcripción- reacción = 58) 72) muestras; en clinica (2020)
LÁMPARA etapas de validación

25 μ L ARN Marcha atrás 1.02 fg / < 30 minutos < 1 hora Solo detecta Lamb y col.
transcripción- paciente simulado (2020)
LÁMPARA muestras
15 μ L ARN Marcha atrás 100 copias / / / < 30 minutos < 1 hora Sin muestras clínicas Park y col.
transcripción- reacción probado (2020)
LÁMPARA

/ Sintético RCA con subfemtomolar / / ~ 100 min <2h Sin muestras clínicas Tian y col.
complementario magnético probado (2020)
ADN (RdRp) nanopartículas

Nota: qRT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa cuantitativa); LAMP (amplificación isotérmica mediada por bucle); CRISPR (repeticiones palindrómicas cortas agrupadas regularmente espaciadas); FDA-EUA
(Autorización de uso de emergencia de la Administración de Alimentos y Medicamentos); CE-IVD (marcado CE-Diagnóstico in vitro); RCA (amplificación de círculo rodante).

a El volumen de la muestra es parte del medio de transporte viral (VTM) para el transporte de muestras recolectadas por hisopos respiratorios (por ejemplo, nasofaríngeas u orofaríngeas).
B La sensibilidad de un método analítico generalmente significa el cambio de la señal medida correspondiente al cambio de la concentración de analito y / o se refiere a un método. ' s límite de detección (límite de detección), que es

la cantidad más pequeña de analito que podemos determinar con confianza ( Harvey, 2010 ); la sensibilidad de una prueba clínica se refiere a la capacidad de identificar correctamente a los pacientes con la enfermedad (también

denominada tasa de verdaderos positivos) ( Lalkhen y McCluskey, 2008 ).

C La especificidad de una prueba clínica se refiere a la capacidad de identificar correctamente a los pacientes sin la enfermedad (también denominada tasa de verdaderos negativos) ( Lalkhen y McCluskey, 2008 ).

muestra (una mezcla de células sanguíneas, vesículas, restos celulares, anticuerpos, moléculas membrana de nitrocelulosa para alcanzar la línea de prueba y la línea de control. La almohadilla absorbente

pequeñas, etc.) y actúa como un filtro para promover el flujo lateral de ayuda. La muestra rehidrata el absorberá el exceso de líquido de muestra. Las nanopartículas de oro coloidal se utilizan a menudo para la

antígeno recombinante conjugado con oro preinmovilizado (es decir, proteína de pico o su dominio de visualización colorimétrica, pero también se pueden utilizar nanopartículas de látex de colores, fluoróforos,

unión al receptor (RBD)) en la almohadilla del conjugado y los anticuerpos se unen con sus antígenos etc. ( Sajid et al., 2015 ).
coincidentes. Debido a la fuerza capilar, la muestra continúa fluyendo a lo largo del Tabla 2 resume las tiras reactivas representativas basadas en anticuerpos del SARS-CoV-2 que son
rápidas y a un costo relativamente bajo. Por ejemplo, un rápido y

4
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L. Xu y col. Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

Se ha desarrollado un inmunoensayo de flujo lateral en el lugar de atención para la detección patrones de anticuerpos basados en el antígeno nucleocápsido recombinante y perlas magnéticas ( Lin
simultánea de anticuerpos IgM e IgG contra el virus del SARS-CoV-2 en sangre en 15 minutos ( Li y et al., 2020 ). Las pruebas clínicas de IgG identificaron 65 infecciones por SARS-CoV-2 de 79
col., 2020b ). También se ha informado de un inmunoensayo de quimioluminiscencia para la pacientes confirmados y solo dos casos falsos positivos del grupo de control (n = 80) con valores de
detección de infecciones por SARS-CoV-2 y la vigilancia de cambios sensibilidad y especificidad que alcanzaron el 82,3% y el 97,5% respectivamente. Además

Fig. 3. Biosensores reportados para la detección de ARN viral de SARS-CoV-2. (A) Esquema del flujo de trabajo de DETECTR de SARS-CoV-2. La extracción de ARN convencional se puede utilizar como entrada para DETECTR
(preamplificación LAMP y detección basada en Cas12 para el gen E, el gen N y la RNasa P), que se visualiza mediante un lector fluorescente o una tira de flujo lateral. Reimprimir desde ( Broughton et al., 2020 ). (B) Un biosensor
plasmónico de función dual que combina el efecto fototérmico plasmónico (PPT) y la transducción de detección de resonancia plasmónica de superficie localizada (LSPR) para el diagnóstico clínico de COVID-19. Reimprimir desde ( Qiu et
al., 2020 ). (C) Un biosensor basado en la reacción en cadena híbrida de nanoandamio de ADN (DNHCR) para la detección de ARN del SARS-CoV-2. Reimpreso de ( Jiao et al., 2020 ).

6
L. Xu y col.
La prueba de tiras inmunocromatográficas (ICG) a base de oro coloidal para detectar IgM o IgG
virales se llevó a cabo con 134 muestras de 105 pacientes, y se logró una sensibilidad del 11,1% en
la etapa inicial (1 - 7 días después del inicio), 92,9% en etapa intermedia (8 - 14 días después del inicio)
y 96,8% en etapa tardía (más de 15 días) ( Pan et al., 2020 ). Sin embargo, no se evaluó la
especificidad para este ensayo ICG. No obstante, según un estudio transversal multicéntrico, la tasa
positiva de IgG de las pruebas de anticuerpos podría alcanzar el 100% alrededor de 20 días después
del inicio de los síntomas ( Long et al., 2020 ), lo que confirma la gran capacidad de los kits de análisis
de anticuerpos para su uso en infecciones en etapa tardía. Se ha informado que la tasa positiva de la
prueba única de IgG en suero es más alta que la de IgM sola en la detección de COVID-19, pero se
demostró que la detección tanto de IgG como de IgM es más precisa ( Li y col., 2020b ; Jin y col.,
2020a ).
Los kits de prueba de anticuerpos aún no están disponibles para realizar pruebas en el hogar, pero
permiten realizar pruebas en laboratorios o por parte de los trabajadores de la salud en un punto de
atención. Las pruebas de anticuerpos no pueden confirmar la presencia del virus. Los resultados positivos
significan inmunidad adquirida contra la infección por COVID-19, que podría atribuirse a infecciones
pasadas o presentes con cepas distintas del SARS-CoV-2, como el coronavirus HKU1. Por el contrario, los
resultados negativos no descartan la infección por SARS-CoV-2, especialmente para aquellos que han
estado en contacto con portadores del virus. Se encontró que la IgM era detectable en pacientes ' s sangre
después de 3 - 6 días después de la infección, con IgG detectable después de 8 días ( Xie et al., 2020 ; Long
et al., 2020 ). Por lo tanto, la prueba de anticuerpos es útil en las etapas intermedia o tardía más que en la
etapa inicial de la infección ( Pan et al., 2020 ). En una palabra, esta herramienta de detección rápida es más
adecuada como método complementario a las pruebas de ácido nucleico (especialmente para resultados
negativos) al proporcionar evidencia inmunológica importante para que los médicos tomen decisiones
diagnósticas y previas al tratamiento, pero no como un método único. base para el diagnóstico o la
exclusión de la infección por COVID-19 ( Zhang y col., 2020a ). En particular, una vez que se dispone de una
vacuna para COVID-19 y las personas se inmunizan mediante la vacunación, es posible que las pruebas
de anticuerpos no puedan diferenciar a los que adquieren inmunidad de los infectados. Las industrias han
estado activas en el desarrollo de kits de prueba de anticuerpos (principalmente inmunoensayos) ( Tabla 2 ),
como los kits de prueba rápida de anticuerpos IgM / IgG para el nuevo coronavirus (2019-nCoV) de
National Bio Green Sciences LLC (aprobado por la FDA-EUA) ( National Bio Green Sciences LLC, 2020 ),
prueba rápida qSARS-CoV-2 IgG / IgM de Cellex (aprobada por la FDA-EUA) ( Cellex, 2020 ), Casete de
prueba rápida de coronavirus COVID-19 de Sure- Screen Diagnostics ( Diagnóstico SureScreen, 2020 ), etc.
A partir del 21 de agosto de
2020, la FDA había emitido más de 39 pruebas serológicas (de anticuerpos) para el SARS-CoV-2, así
como 3 pruebas de antígenos ( FDA de EE. UU., 2020 ). Un informe técnico del Centro Europeo para la
Prevención y el Control de Enfermedades publicó que hay más de 60 pruebas rápidas de anticuerpos
contra el SARS-CoV-2 con la marca CE a partir del 1 de abril de 2020 en el mercado ( Centro Europeo
para la Prevención y el Control de Enfermedades, 2020 ). Estas pruebas para la detección cualitativa de
anticuerpos contra el SARS-CoV-2 en sangre, suero y / o plasma están destinadas a ser utilizadas
como ayuda para identificar a las personas con una respuesta inmune adaptativa al SARS-CoV-2, que
indique una infección reciente o previa . La validación clínica de COVID-19 debe llevarse a cabo en
comparación con una prueba estándar de oro para un número suficientemente grande de muestras
diana antes de autorizarlas como pruebas de diagnóstico independientes (Centro Europeo para Prevención
y control de enfermedades, 2020 ). Por ejemplo, se evaluaron seis pruebas comerciales de flujo lateral
POCT para anticuerpos COVID-19 ( Lassauni`
ère et al., 2020 ) y su desempeño general fue
clasificado según la sensibilidad y especificidad de detección. Estos hallazgos facilitan la selección
de ensayos serológicos para la detección de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 con fines de
diagnóstico, así como estudios seroepidemiológicos y de desarrollo de vacunas. La pandemia se
está extendiendo por todo el mundo y muchos países se enfrentan a una segunda ola de COVID-19.
Por lo tanto, todavía hay una gran demanda de métodos analíticos de anticuerpos más sensibles, de
bajo costo, específicos y rápidos para detectar la inmunidad entre las poblaciones y ayudar a rastrear
el progreso de la epidemia.
7
Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
3. Biosensores para la detección rápida y sencilla del SARS-CoV-2
3.1. Detección de ácidos nucleicos
Los biosensores como dispositivos analíticos inteligentes que combinan el reconocimiento
específico del objetivo y la lectura sensible de señales pueden facilitar la detección rápida, fácil y
rentable de COVID-19 en el campo y en un punto de atención. La tecnología de flujo lateral puede
servir como una plataforma de biosensores fácil para acoplarse con enfoques de prueba de ácido
nucleico para la detección de ARN viral. Por ejemplo, se desarrolló un RT-LAMP multiplex
prometedor junto con un biosensor de flujo lateral basado en nanopartículas (mRT-LAMP-LFB) para
diagnosticar COVID-19 con LOD de 12 copias por reacción en 1 h ( Zhu y col., 2020b ). La sensibilidad
de la prueba de SARS-CoV-2 fue del 100% (33/33 muestras de pacientes con torunda de orofaringe)
y la especificidad también fue del 100% (96/96 muestras de pacientes con torunda de orofaringe).
Recientemente se desarrolló un biosensor basado en CRISPR (repeticiones palindrómicas cortas
agrupadas regularmente interespaciadas) / Cas12 combinado con un ensayo de flujo lateral para el
SARS-CoV-2 que permite obtener un resultado de prueba en aproximadamente 30 minutos ( Fig. 3 A)
( Broughton et al., 2020 ). Después de la extracción de ARN de muestras de pacientes, el llamado
DETECTR realiza transcripción inversa simultánea y amplificación isotérmica mediante amplificación
mediada por bucle (RT-LAMP) a 62 ◦ C durante 20 min, seguido de la detección Cas12 de secuencias
de coronavirus predefinidas a 37 ◦ C durante 10 min, después de lo cual la escisión de una molécula
indicadora confirma la detección del virus tal como se visualiza en una tira de flujo lateral. La
compatibilidad con la tira lateral también permite que esta tecnología basada en CRISPR se utilice
para pruebas en el punto de atención fuera del laboratorio de diagnóstico clínico. De manera similar,
Huang y sus colegas informaron un ensayo rápido de reportero fluorescente CRISPR-Cas12a junto
con métodos de amplificación de la polimerasa recombinasa isotérmica (RPA) de un solo paso para
amplificar regiones diana de ARN virales extraídos, con un tiempo de respuesta de muestra de ~ 50
min , y un LOD de 2 copias por muestra ( Huang y col., 2020b ). Este ensayo se puede realizar
fácilmente en placas de microtitulación de 96 pocillos y actualmente se está investigando el potencial
para integrarse en un chip de microfluidos y un sistema de lectura de teléfonos inteligentes para
entornos de punto de atención. Otros sistemas automáticos de detección de genes integrados se
encuentran en etapa de validación clínica para COVID-19, por ejemplo, CoVIDNudge ( Gibani et al.,
2020 ), AIGS ( Li y col., 2020a ). En otro ejemplo, se ha informado que un biosensor plasmónico de
doble función que combina el efecto fototérmico plasmónico (PPT) y la transducción de detección de
resonancia plasmónica de superficie localizada (LSPR) proporciona una alternativa para la detección
clínica de COVID-19 ( Fig. 3 B) ( Qiu et al., 2020 ). Este biosensor LSPR de doble función exhibe una
alta sensibilidad hacia las secuencias virales, incluidos los genes RdRp, ORF1ab y E de
SARS-CoV-2 con un LOD más bajo hasta la concentración de
0,22 pM y permite la detección precisa del objetivo específico en una mezcla multigénica. Este
biosensor ofrece una plataforma de diagnóstico confiable y fácil de implementar para mejorar la
precisión del diagnóstico en las pruebas clínicas y aliviar la presión en las pruebas basadas en PCR.
Además, Jiao et al. desarrolló un biosensor de fluorescencia basado en una reacción de cadena
híbrida de nanoandamio de ADN (DNHCR) para la detección rápida del ARN del SARS-CoV-2 ( Fig. 3 C)
( Jiao et al., 2020 ). En este biosensor, los nanoandamios de ADN construidos por el autoensamblaje
de hebras largas de ADN y sondas autoamplificadas (H1) actúan como elemento sensor. Los ARN
diana inician la hibridación de las sondas de ADN H1 y H2 libre a lo largo del nanoandamio para
iluminar la nanocadena de ADN, que refleja la concentración del virus. Este biosensor DNHCR puede
detectar SARS-CoV-2 en 10 minutos y en condiciones leves (15 - 35 ◦ C), mostrando un gran potencial
en el diagnóstico clínico rutinario. Además, los investigadores han concebido nuevos conceptos para
mejorar en gran medida la capacidad de detección de las pruebas de qRT-PCR, adoptando un
enfoque de agrupación para permitir la detección simultánea de docenas de muestras. Un estudio
muestra que las pruebas grupales pueden identificar una muestra positiva entre 64 muestras
diferentes con suficiente sensibilidad ( Yelin et al., 2020 ). Por lo tanto, si se amplían adecuadamente,
dichos métodos de agrupación podrían facilitar las pruebas masivas y a gran escala con un menor uso
de recursos y un tiempo más rápido.
L. Xu y col.
Figura 4. Biosensores informados para la detección directa de antígenos virales o partículas virales del SARS-CoV-2. (A) Un transistor de efecto de campo de grafeno para el sondeo eléctrico del antígeno de superficie del SARS-CoV-2 (subunidad Si de
la proteína de pico o su dominio de unión al receptor (RBD)). Reimprimir de (X. Zhang y col., 2020b ). (B) Un biosensor basado en transistor de efecto de campo para la detección rápida del virus SARS-CoV-2 en muestras de hisopos nasofaríngeos
humanos. Reimprimir desde ( Seo et al., 2020 ).
3.2. Detección directa de antígenos de superficie y / o virus completos
Además de la detección rápida de componentes genéticos virales en hisopos usando
biosensores, sería atractivo implementar la detección directa y fácil de la partícula de virus completa
o su correspondiente epítopo de antígeno de superficie. Esta estrategia podría emplearse para el
desarrollo de una herramienta de diagnóstico o detección de COVID-19. Hasta ahora se han
informado algunos estudios de investigación relevantes. Por ejemplo, recientemente se informó sobre
un inmunosensor de transistor de efecto de campo de grafeno ultrasensible (Gr-FET) como un
esfuerzo hacia la detección simple y rápida de COVID-19 ( Figura 4 A) ( Zhang y col., 2020b ). La
superficie del grafeno se funcionalizó con el anticuerpo proteico de la subunidad S1 de la espiga del
SARS-CoV-2 (CSAb) o el receptor ACE2. La hibridación de la proteína S1 ligeramente cargada
positivamente (que contiene un dominio de unión al receptor, RBD) con los receptores CSAb / ACE2
inmovilizados altera su conductancia / resistencia a través del efecto de campo, que puede leerse
eléctricamente de forma sensible. Este inmunosensor Gr-FET puede identificar rápidamente (en
aproximadamente 2 min) y capturar con precisión la proteína de pico COVID-19 S1 a un LOD de
hasta 0,2 pM, en tiempo real y sin marcaje. Aunque las partículas completas de coronavirus en lugar
de las proteínas antigénicas puras deben analizarse para la validación del ensayo, y luego se
requieren ensayos clínicos, este trabajo representa un estudio de prueba de concepto temprano y
demostró el potencial de la tecnología Gr-FET para la detección sensible y rápida de coronavirus.
Curiosamente, se ha informado de otro dispositivo biosensor de grafeno basado en transistor de
efecto de campo (FET) recubierto con un anticuerpo específico contra la proteína de pico del
SARS-CoV-2 para la detección directa del SARS-CoV-2 ( Figura 4 B) ( Seo et al., 2020 ). Las partículas
de virus introducidas en la superficie de grafeno recubierta de anticuerpo generaron cambios
eléctricos legibles. Este sensor COVID-19 FET no solo detecta el medio de transporte de proteínas
del antígeno SARS-CoV-2 para muestras de hisopos, sino que también detecta virus cultivados y
virus en muestras clínicas.
8
Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
El LD para la detección de muestras clínicas (n = 19 pacientes y sujetos normales) alcanzó 2,42 × 10 2
copias / mL. Se necesitaría un tamaño de muestra clínica más grande para validar aún más su
potencial clínico para la detección de virus. Sin embargo, dada la complejidad de las muestras
clínicas, sería necesario el desarrollo de materiales novedosos para sensores FET que pudieran
superar los problemas de interacciones no específicas y efectos de detección asociados con
muestras clínicas para proporcionar una detección más precisa. Uno de los aspectos clave aquí es la
alta sensibilidad del ensayo con un mínimo de falsas alarmas, lo que debe lograrse para facilitar las
aplicaciones prácticas. Nuestro equipo ha estado desarrollando sensores de grafeno y tecnología
FET para la detección de células, exosomas y biomoléculas en biofluidos durante los últimos años ( Kwong
Hong Tsang y otros, 2019 ; Delle et al., 2018 ; Hanham y col., 2015 ). Uno de nuestros trabajos
recientes sobre biosensores Gr-FET para la detección de exosomas puede lograr LOD hasta el nivel
de una sola partícula en 10 minutos, mejorado por la nano decoración de la superficie de puntos de
carbono específicos ( Ramadán et al., 2020 ). Nuestro enfoque de punto de carbono ha aumentado el
límite de detección de exosomas, y esperamos una mejora similar para la detección de COVID-19:
los exosomas exhiben muchas propiedades similares al SARS-CoV-2, incluido el tamaño de partícula
equivalente (50 - 200 nm), abundantes moléculas de antígeno de superficie, estructura esférica de
caparazón-núcleo, etc., por lo que es teóricamente razonable reutilizar esta tecnología ultrasensible
para la detección de COVID-19. El trabajo actual se centra en la fabricación escalable de obleas de
sensores Gr-FET hacia la detección sensible, rápida, en el campo y rentable de SARS-CoV-2,
trabajando junto con una fundición de grafeno líder en el mundo ( Graphenea, 2010 ).
Es importante comprender la dosis clínica infecciosa de SARS-CoV-2 a fin de desarrollar
biosensores adecuados para la detección o el diagnóstico. La mayoría de las concentraciones de
ARN viral en muestras del tracto respiratorio superior se encuentran entre 10 2 - 10 8 Copias de ARN (o
partículas de virus) por
L. Xu y col.
hisopo, siendo el más alto 7,11 × 10 8 copia / hisopo en el día 4, primera semana del inicio de los
síntomas y, en la mayoría de los casos, las dosis virales en las muestras de esputo y heces son
superiores a 10 2 copias por hisopo, como sugiere un análisis virológico reciente de 9 pacientes ( Wölfel
et al., 2020 ). Se extrajeron conclusiones similares sobre la carga viral de otro estudio clínico de 17
pacientes con COVID-19 ( Zou et al., 2020 ). Estos datos indican que un biosensor capaz de detectar
con precisión 100 partículas de virus o más (por ejemplo, LOD 10 2 ARN / hisopo) sería potencial
como herramienta de detección, e incluso como ≤
a exosomas ( Kwong Hong Tsang y otros, 2019 ; Ramadán et al., 2020 ). Muchas otras plataformas de
herramienta de diagnostico. También podría ser útil para la gestión del alta hospitalaria, ya que los
pacientes después del día 10 de síntomas con menos de 100 copias de ARN viral por μ L de esputo
podría considerarse para el alta temprana y el consiguiente aislamiento domiciliario ( Wölfel et al.,
2020 ). Obviamente, es más fácil detectar los casos graves de COVID-19 que los leves, ya que los
primeros tienden a expresar una carga viral más alta y períodos más prolongados de eliminación del
virus ( Liu et al., 2020 ). Por lo tanto, los métodos de prueba de antígenos deseados son aquellos lo
suficientemente sensibles como para detectar el extremo inferior de las cargas virales clínicamente
relevantes, generalmente alrededor de 10 3 ácidos nucleicos virales por ml (un virión por μ L), que es
tan bajo como una sola partícula dentro de una muestra, para competir con el método de diagnóstico
actual de qRT-PCR, cuyo LOD es tan bajo como 3 copias / μ L de muestra de entrada (igual a 3
partículas virales) ( CDC, 2020 ; Zou et al., 2020 ). Otro tema importante es la especificidad,
especialmente para la detección de virus completos / antígenos de superficie. Los resultados
positivos de las pruebas de antígenos pueden ser muy precisos, pero existe una mayor probabilidad
de falsos negativos, por lo que los resultados negativos no descartan una infección, que puede
causar un contagio severo. Es probable que otros coronavirus como el coronavirus del síndrome
respiratorio de Oriente Medio (MERS-CoV) y el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo
(SARS-CoV) causen interferencia en la detección del SARS-CoV-2 debido a su tamaño similar, virus
estructura y propiedades infecciosas. El virus de la influenza A o B también puede afectar la
selectividad de la detección. Por lo tanto, el elemento de biorreconocimiento, generalmente
anticuerpos o aptámeros,
Con el avance de los materiales funcionales, los mecanismos de detección novedosos y la
nanotecnología, el análisis de un solo virus sería posible, aunque sigue siendo un desafío en
entornos clínicos ( Schmidt y Hawkins, 2016 ). Mientras tanto, el progreso técnico emergente ayudaría
a superar otros problemas desafiantes como la estabilidad del ensayo y la reproducibilidad de los
biosensores en la detección de antígenos / virus completos, facilitando así la detección o el
diagnóstico precisos. El SARS-CoV-2 es una partícula esférica de alrededor de 100 nm de diámetro,
con muchos antígenos expresados en la superficie ( Bar-On et al., 2020 ). Tales propiedades del
virus SARS-CoV-2 son similares a
Figura 5. El sistema de diagnóstico COVID-19 ROS consta de tres electrodos de aguja recubiertos por nanotubos de carbono de paredes múltiples funcionalizados (A) y es capaz de medir la corriente para diferenciar las
muestras de los pacientes (B). G1: internado en UCI (n = 25); G2: hospitalizado sin necesidad de cuidados en UCI (n = 36); G3: PCR positivo no hospitalizado (n = 45); G4: controles sanos negativos por PCR (n = 36).
Reimpreso de ( Miripour et al., 2020 ).
9
Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
Hay otros virus, como los virus de la influenza, con los que los investigadores están más
familiarizados y hay más métodos de detección disponibles. Por lo tanto, las ideas para mejorar la
detección de COVID-19 hacia aplicaciones rápidas, fáciles y confiables pueden inspirarse en
investigaciones anteriores ( Schmidt y Hawkins, 2016 ; Wang y Li, 2016 ). Por ejemplo, al trabajar en
estrecha colaboración con socios de la industria y médicos, nuestro equipo está desarrollando
actualmente un sensor de grafeno portátil para la detección de antígenos virales y virus completos,
adaptándose a partir de una plataforma establecida en el punto de atención para el análisis de
biosensores desarrolladas para la detección rápida, en el campo y portátil de varios virus por nuestro
equipo durante las últimas décadas prometen ser reutilizadas para el SARS-CoV-2. Por ejemplo, un
aptasensor de hidrogel sensible al objetivo incrustado con indicadores fluorescentes de puntos
cuánticos podría usarse para la detección rápida, en un solo paso y en el campo, de virus en 30
minutos ( Xu et al., 2016 ). Un biosensor enzimático inteligente controlado por bio-nanogate podría
mejorar la sensibilidad de la detección de virus a casi un nivel de partículas ( Wang et al., 2015 ).
Otras tecnologías rápidas y de campo, incluido un inmunosensor de impedancia basado en
microelectrodos de bajo costo ( Lin et al., 2015 ; Wang et al., 2011 ), un biosensor de impedancia con
nanopartículas de oro para la amplificación de la señal ( Karash et al., 2016 ), un biosensor de
microbalanza de cristal de cuarzo fácil ( Wang y Li, 2013 ), etc.han demostrado una capacidad
sobresaliente para detectar virus de manera sensible y específica en muestras de hisopos y estos
enfoques son muy prometedores para ser desarrollados como detección portátil de COVID-19. Los
aptámeros son oligonucleótidos de ARN o ADN monocatenarios capaces de unirse selectivamente y
de forma sensible a los antígenos diana mediante enlaces de hidrógeno, interacciones electrostáticas
e hidrofóbicas ( Wang et al., 2013 ). Representan una alternativa a los anticuerpos como agentes de
reconocimiento de virus en el diseño de nuevos biosensores. Por lo tanto, las pruebas basadas en
antígenos / virus completos son prometedoras para una detección rápida y sencilla en el campo o en
el punto de atención.
3.3. Detección de anticuerpos
Además de los kits de prueba de flujo lateral disponibles comercialmente y reportados para
detectar anticuerpos generados en sangre, los investigadores de todo el mundo están intensificando la
investigación de tecnologías de biosensores nuevas y emergentes para la detección de anticuerpos.
Por ejemplo, es posible desarrollar la plataforma de detección Gr-FET para detectar posibles
anticuerpos candidatos al SARS-CoV-2, si los antígenos de superficie, como las proteínas de punta,
se recubren inicialmente sobre grafeno para el diseño del sensor. Zhang y sus colaboradores han
demostrado el principio del antígeno S1 de la proteína de pico
L. Xu y col. Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

Gr-FET funcionalizados para un análisis y detección rápidos de anticuerpos neutralizantes, que

pueden impedir que los coronavirus se adhieran e infecten la célula de salud ( Zhang y col., 2020b ).
No obstante, además de los inmunoensayos actuales basados en flujo lateral que se basan en
plataformas industriales maduras, creemos que se desarrollarán enfoques de detección más rápidos
con la ayuda de nanomateriales, microfluidos e impresión 3D, etc. detección de COVID-19.

3.4. Detección de otros biomarcadores

Aparte de la detección de ARN virales, antígenos de superficie, partículas virales completas y

los anticuerpos correspondientes, la detección de otros biomarcadores novedosos puede presentar
una estrategia de prueba interesante. En un estudio exploratorio reciente para investigar un
mecanismo de diagnóstico basado en rastros tempranos de sobreproducción de especies de oxígeno
reactivo mitocondrial (ROS) como células pulmonares ' disfunciones inducidas por SARS-CoV-2,
Miripour y colaboradores desarrollaron un sensor electroquímico rápido, portátil y simple para la
medición de ROS en la muestra de esputo (con un volumen de <500 μ L) ( Miripour et al., 2020 ). Este
sistema detector ROS consta de un sensor desechable como parte principal de diagnóstico del
sistema, una placa de lectura electroquímica automática portátil integrada y una unidad de retención
Figura 6. Diagrama esquemático de " ASEGURADO " biosensores para la detección de SARS-CoV-2, incluidos
de muestras ( Figura 5 A). El sensor fue fabricado por nanotubos de carbono de paredes múltiples
enfoques basados en la selección de ARN virales, antígenos de superficie, virus completos, anticuerpos y
(MWCNT) en la punta de agujas de acero en la conformación de tres electrodos (Trabajo (WE),
otros biomarcadores en muestras humanas.
Contador (CE) y Referencia (RE)) con una distancia triangular de 3 mm desde entre sí y pueden
medir con sensibilidad la señal actual de la muestra ( Figura 5 B) bajo potencial de barrido que va
El alto índice de refracción se asemeja al del ADN, y se podrían emplear sensores de imágenes
desde - 0,8 a 0,8 V con una velocidad de exploración de 100 mV / s. En comparación con los
CMOS comerciales para detectar partículas de virus individuales. En resumen, los criterios ahora
diagnósticos clínicos (n> 140 muestras de pacientes), se detectaron más del 97% de los pacientes
conocidos por el acrónimo ASEGURADO ( A asequible S ensitivo, S específico U ser amigable, R apid, mi
positivos verdaderos, mientras que el sensor ROS declara el diagnóstico en menos de 30 s. Debería
sin quipment,
verificarse la especificidad del análisis clínico. Sin embargo, este tipo de sistemas de detección
D Elivered), según lo acuñado por la OMS en 2004, deben representar las pautas a seguir en la
compactos y portátiles resulta atractivo como un poderoso asistente en la detección rápida de los
construcción de un sistema de atención de salud sólido ( Kettler y col., 2004 ). Con rápidos avances en
pacientes que necesitan un examen médico adicional durante la pandemia. El análisis de estudios
tecnología de salud digital y móvil, los llamados REASURED ( R conectividad en tiempo real, mi ase
publicados recientemente destaca el papel de la vasculitis sistémica y los trastornos de la
de recogida de especímenes, A asequible S ensitivo, S específico U ser amigable, R apid y
coagulación mediados por citocinas como los principales actores de la insuficiencia multiorgánica en
pacientes con COVID-19 grave y se han identificado muchos biomarcadores potenciales con
R obusto mi sin quipment o simple y mi respetuoso con el medio ambiente,
homocisteína y angiotensina II, en particular, podrían desempeñar Papel significativo ( Ponti et al.,
D alcanzable para los usuarios finales) se podrían establecer sistemas de diagnóstico para fortalecer los
2020 ). Además, estudios recientes muestran que las personas con COVID-19 grave pueden estar en
sistemas de atención de la salud y mejorar los resultados de los pacientes ( Figura 6 ) ( Land et al., 2019 ).
riesgo de sufrir el síndrome de tormenta de citocinas ( Mehta et al., 2020 ), por lo tanto, los métodos y
Particularmente en países de ingresos bajos y medianos (PIBM) y áreas con recursos limitados sin
biosensores en el punto de atención que sean capaces de monitorear los niveles de citocinas (p. ej.,
acceso suficiente a laboratorios clínicos, se debe recomendar el uso de ensayos moleculares en el lugar
IL-6) serían necesarios y beneficiosos para los pacientes que padecen la inflamación viral severa ( Russell
de atención y pruebas de inmunodiagnóstico rápido (pruebas serológicas) sin ningún tipo de problema.
et al., 2020 ).
vacilación para la detección del SARS-CoV-2 ( Peeling et al., 2020 ). Ambos ahora están disponibles
comercialmente, son escalables y asequibles para permitir pruebas rápidas basadas en la comunidad
para COVID-19 en estos LMIC y áreas. La cooperación global y la solidaridad internacional podrían
potenciar su capacidad y mejorar el suministro de bienes / reactivos para combatir esta pandemia. los " Tranquilizado
" Los biosensores para la detección de virus, como se analiza en esta revisión, pueden ayudar a
clasificar a los individuos sintomáticos en entornos comunitarios, probar contactos de casos confirmados
y ayudar en el análisis y la vigilancia de la situación, proporcionando métodos altamente específicos
para la enfermedad.
3.5. " Tranquilizado " biosensores para la detección de virus

Para mitigar la propagación mundial de la pandemia COVID-19, los métodos de detección de

bajo costo, rápidos, confiables y sensibles todavía tienen una gran demanda para detectar la
enfermedad en el campo y en el punto de atención y para la inmunidad entre grandes poblaciones.
4. Conclusiones y perspectivas futuras
Es de primordial importancia diagnosticar aquellos que ya muestran síntomas (sospechosos). Es muy
conveniente posibilitar el diagnóstico de quienes no presentan síntomas (portadores asintomáticos),
No dudamos que la pandemia de COVID-19 se combatirá eficazmente en un futuro próximo. Las
ya que en esos casos la dosis viral infectada suele ser baja y probablemente representan un
lecciones que se pueden aprender del impactante número de muertes y la enorme crisis económica
porcentaje considerable (más de un tercio) del total de infecciones ( Qiu, 2020 ; Nishiura et al., 2020 ).
involucrada deberían alertarnos sobre la necesidad de estar bien preparados para cualquier brote viral o
Más allá de las tecnologías de detección discutidas en esta revisión, un tipo de kit de detección
microbiano patógeno en el futuro. En este contexto, las estrategias de detección rápida son clave para
rápida prometedor y futurista (aunque no poco realista) para el SARS-CoV-2 y otras infecciones
la prevención y el manejo de posibles epidemias futuras. Por lo tanto, es aún más importante y esencial
virales se puede visualizar como, por ejemplo, un pequeño cartucho o chip con un Dispositivo de
desarrollar enfoques de diagnóstico independientes del laboratorio, descentralizados en el hospital,
mano o portátil que detectaría directamente partículas virales en un hisopo, o incluso una muestra de
personalizados y en el punto de atención con exámenes de detección portátiles, baratos, rápidos y de
aliento o saliva, en un período corto de tiempo sin tratamiento previo o enriquecimiento.
alto rendimiento. Los nuevos sensores basados en materiales funcionales, nanotecnologías y
Alternativamente, las moléculas diana como el ARN del virus podrían detectarse directamente,
mecanismos de detección creativos son prometedores en términos de sensibilidad sin precedentes,
seguido de la simple rotura de la membrana viral externa para liberar el ARN. Como una posibilidad
tamaño mínimo y bajo costo. Avances en biología molecular y sintética, el descubrimiento de nuevos
realista, las partículas virales inmovilizadas individuales podrían detectarse mediante la dispersión de
agentes aglutinantes, como nanocuerpos y aptámeros, y la bioingeniería pueden facilitar una mayor
la luz, dado que su relativamente
especificidad en la detección. Nuevo inteligente

10
L. Xu y col.
Los enfoques de detección que combinan la sensibilidad ultra alta de los biosensores con los avances
en inteligencia artificial e Internet de las cosas pueden ayudar a proporcionar un mejor control de
cualquier posible propagación de enfermedades ( Jeong et al., 2020 ). La pandemia actual contribuirá
claramente a la definición de metas para las agendas de la ciencia interdisciplinaria en un futuro
próximo.
Declaración de contribución de autoría de CRediT
Lizhou Xu: Conceptualización, redacción - revisión y edición, contribución a la concepción del
trabajo, búsqueda de datos para artículo, discusión de contenido, redacción, revisión / edición de
manuscrito. Danyang Li: Conceptualización, redacción - revisión y edición, contribuyó a la
concepción del trabajo, búsqueda de datos para artículo, discusión de contenido, redacción, revisión /
edición de manuscrito. Sami Ramadán:
Redacción: revisión y edición, contribución a la discusión de contenido, búsqueda de literatura,
edición de manuscritos / corrección de pruebas. Yanbin Li:
Redacción - revisión y edición, contribución a la concepción del trabajo, interpretación de datos,
revisión sustantiva. Norbert Klein: Redacción: revisión y edición, contribuyó a la concepción,
interpretación de los datos y revisó sustancialmente el manuscrito.
Declaración de intereses en competencia
Los autores declaran que no tienen intereses económicos en competencia o relaciones
personales que puedan haber influido en el trabajo informado en este documento.
Agradecimientos
L. Xu, S. Ramadan y N. Klein han recibido financiación del Reino Unido
Consejo de Investigación en Ingeniería y Ciencias Físicas (EPSRC) a través de las subvenciones activas
EP / P02985X / 1 y EP / M020398 / 1.
Referencias
Abbott, 2020. Detecte COVID-19 en tan solo 5 minutos | sala de redacción de abbott [WWW
Documento]. Abbott.Com. https://www.abbott.com/corpnewsroom/product-an d-innovation /
detect-covid-19-in-tan-little-as-5-minutes.html .
Alcoba-Florez, J., González-Montelongo, R., Iñigo-Campos, A., Artola, DG-M. de, Gil-
Campesino, H., Team, TMTS, Ciuffreda, L., Valenzuela-Fernandez, A., Flores, C.,
2020. Detección rápida de SARS-CoV-2 por RT-qPCR en muestras de hisopos nasofaríngeos precalentados. En
t. J. Infect. Dis. 2020 https://doi.org/10.1016/j.ijid.2020.05.099 ,
04.08.20058495.
Autobio, 2020. Autobio ' s dos kits de detección de anticuerpos para el SARS-CoV-2 [WWW
Documento]. http://www.autobio.com.cn/en/index.php?m=content&c=index&a
= mostrar & catid = 29 & id = 54 . consultado el 8.23.20.
Bar-O n, YM, Flamholz, A., Phillips, R., Milo, R., 2020. SARS-CoV-2 (COVID-19) por el
números. Elife 9. https://doi.org/10.7554/eLife.57309 .
Biotech, Mesa, 2020. Prueba de diagnóstico Accula SARS-CoV-2 para COVID-19 - Mesa Biotech
[Documento WWW]. https://www.mesabiotech.com/coronavirus . consultado el 4.13.20.
Broughton, JP, Deng, X., Yu, G., Fasching, CL, Servellita, V., Singh, J., Miao, X.,
Streithorst, JA, Granados, A., Sotomayor-Gonzalez, A., Zorn, K., Gopez, A., Hsu, E., Gu, W., Miller, S., Pan,
C.-Y., Guevara , H., Wadford, DA, Chen, JS, Chiu, CY,
2020. CRISPR - Detección de SARS-CoV-2 basada en Cas12. Nat. Biotechnol. 1 - 5 https: //
doi.org/10.1038/s41587-020-0513-4 .
CDC, 2020. CDC ' s ensayo múltiple de diagnóstico para la gripe y COVID-19 y suministros | Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades
[Documento WWW]. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/multiplex. html . consultado el 8.22.20.
Cellex, 2020. COVID-19, prueba rápida lgG / lgM, detección de anticuerpos, análisis de sangre, serológico
prueba, enfermedad por coronavirus. inmunoensayo de flujo lateral [Documento WWW]. https: //cellexcovid.com/ .
consultado 4.14.20.
Cefeida, 2020. Xpert ® xpress SARS-CoV-2 ha recibido un uso de emergencia de la FDA
autorización [Documento WWW]. https://www.cepheid.com/coronavirus . accedido
4.13.20.
Chan, JFW, Yuan, S., Kok, KH, To, KKW, Chu, H., Yang, J., Xing, F., Liu, J., Yip, CC
Y., Poon, RWS, Tsoi, HW, Lo, SKF, Chan, KH, Poon, VKM, Chan, WM, Ip, J.
D., Cai, JP, Cheng, VCC, Chen, H., Hui, CKM, Yuen, KY, 2020. Un grupo familiar de neumonía asociado con el
nuevo coronavirus de 2019 que indica transmisión de persona a persona: un estudio de una familia grupo.
Lancet 395, 514 - 523. https: // doi. org / 10.1016 / S0140-6736 (20) 30154-9 .
Chen, L., Liu, W., Zhang, Q., Xu, K., Ye, G., Wu, W., Sun, Z., Liu, F., Wu, K., Zhong, B.,
Mei, Y., Zhang, W., Chen, Y., Li, Y., Shi, M., Lan, K., Liu, Y., 2020a. El enfoque de mNGS basado en ARN
identifica un nuevo coronavirus humano de dos casos individuales de neumonía en el brote de Wuhan de 2019.
Emerg. Microb. Infectar. 9, 313 - 319. https://doi.org/
10.1080 / 22221751.2020.1725399 .
11
Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
Chen, N., Zhou, M., Dong, X., Qu, J., Gong, F., Han, Y., Qiu, Y., Wang, J., Liu, Y., Wei, Y.,
Xia, J., Yu, T., Zhang, X., Zhang, L., 2020b. Características epidemiológicas y clínicas de 99 casos de
neumonía por el nuevo coronavirus de 2019 en Wuhan, China: un estudio descriptivo. Lanceta 395, 507 - 513. https://doi.org/10.10
30211-7 .
Centro Chino para el Control y la Prevención de Enfermedades, 2020. Pruebas de laboratorio para COVID-
19 [Documento WWW]. http://www.chinacdc.cn/en/COVID19/202003/P02020032
3390321297894.pdf .
Corman, VM, Landt, O., Kaiser, M., Molenkamp, R., Meijer, A., Chu, DK, Bleicker, T.,
Brünink, S., Schneider, J., Schmidt, ML, Mulders, DG, Haagmans, BL, van der Veer, B., van den Brink, S.,
Wijsman, L., Goderski, G., Romette, JL, Ellis, J., Zambon, M., Peiris, M., Goossens, H., Reusken, C.,
Koopmans, MP, Drosten, C.,
2020. Detección del nuevo coronavirus de 2019 (2019-nCoV) mediante RT-PCR en tiempo real. Euro Surveill. 25 https://doi.org/10.28
, 2000045.
Cue Health, 2020. Cue - COVID-19 [Documento WWW]. https://www.cuehealth.com
/COVID-19 . consultado el 8.23.20.
Delle, LE, Pachauri, V., Sharma, S., Shaforost, O., Ma, H., Adabi, M., Lilischkis, R.,
Wagner, P., Thoelen, R., Klein, N., O ' Kennedy, R., Ingebrandt, S., 2018. Matrices IDE recubiertas de grafeno
modificadas con ScFv para ' cribado de biomarcadores de enfermedades cardiovasculares en solución salina
fisiológica. Biosens. Bioelectron. 102, 574 - 581.
https://doi.org/10.1016/j.bios.2017.12.005 .
Diagnostics, SureScreen, 2020. Casete de prueba rápida de coronavirus COVID-19 | SureScreen
Diagnóstico [Documento WWW]. https://www.surescreen.com/products/covid-19-co
ronavirus-rapid-test-cassette . consultado 4.14.20.
Centro Europeo para la Prevención y el Control de Enfermedades, 2020. Una visión general del rápido
Situación de prueba para el diagnóstico de COVID-19 en el. UE / EEE, Estocolmo .
Gibani, MM, Toumazou, C., Sohbati, M., Sahoo, R., Karvela, M., Hon, T.-K., De
Mateo, S., Burdett, A., Felice Leung, KY, Barnett, J., Orbeladze, A., Luan, S., Pournias, S., Sun, J., Flower, B.,
Bedzo-Nutakor, J ., Amran, M., Quinlan, R., Skolimowska, K., Klaber, R., Davies, G., Muir, D., Randell, P.,
Crook, D., Taylor, GP, Barclay, W. , Mughal, N., P Moore, LS, Jeffery, K., Cooke, GS, Graham Cooke, P.,
2020. CovidNudge: precisión diagnóstica de un novedoso diagnóstico en el punto de atención sin laboratorio para el
SARS-CoV-2 1. AUTORES. medRxiv. https://doi.org/10.1101/
2020.08.13.20174193 .
Graphenea, 2010. Productor de grafeno de alta calidad. - Graphenea [Documento WWW].
https://www.graphenea.com/ . consultado 4.16.20.
Hanham, SM, Watts, C., Otter, WJ, Lucyszyn, S., Klein, N., 2015. Dielectric
mediciones de líquidos en nanolitros con un resonador de cristal fotónico a frecuencias de terahercios. Apl.
Phys. Letón. 107, 032903 https://doi.org/10.1063/1.4927242 .
Harvey, D., 2010. Capítulo 3: el vocabulario de la química analítica. En: Analítico
Química, vol. 2. https://doi.org/10.1515/9783110289039.619 , 0.
Él, X., Lau, EHY, Wu, P., Deng, X., Wang, J., Hao, X., Lau, YC, Wong, JY, Guan, Y.,
Bronceado, X., Mo, X., Chen, Y., Liao, B., Chen, W., Hu, F., Zhang, Q., Zhong, M., Wu, Y., Zhao, L., Zhang, F.,
Cowling, BJ, Li, F., Leung, GM, 2020. Dinámica temporal en la diseminación viral y transmisibilidad de
COVID-19. Nat. Medicina. 26, 672 - 675. https: // doi.org/10.1038/s41591-020-0869-5 .
Huang, C., Wang, Y., Li, X., Ren, L., Zhao, J., Hu, Y., Zhang, L., Fan, G., Xu, J., Gu, X.,
Cheng, Z., Yu, T., Xia, J., Wei, Y., Wu, W., Xie, X., Yin, W., Li, H., Liu, M., Xiao, Y., Gao, H., Guo, L., Xie, J.,
Wang, G., Jiang, R., Gao, Z., Jin, Q., Wang, J., Cao, B., 2020a. Características clínicas de los pacientes
infectados con el nuevo coronavirus de 2019 en Wuhan, China. Lancet 395, 497 - 506. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)301
.
Huang, Z., Tian, D., Liu, Y., Lin, Z., Lyon, CJ, Lai, W., Fusco, D., Drouin, A., Yin, X.,
Hu, T., Ning, B., 2020b. Diagnóstico COVID-19 ultrasensible y de alto rendimiento potenciado por CRISPR.
Biosens. Bioelectron. 164, 112316. https://doi.org/10.1016/j. bios.2020.112316 .
Jeong, H., Adv, S., Jeong, Hyoyoung, Rogers, JA, Xu, S., 2020. Continuo en el cuerpo
Detección de la pandemia de COVID-19: brechas y oportunidades. Sci. Adv. 4794, eabd4794 https://doi.org/10.1126/sciadv.abd47
.
Jiao, J., Duan, C., Xue, L., Liu, Y., Sun, W., Xiang, Y., 2020. ADN nanoandamio basado
Detección de SARS-CoV-2 para diagnóstico de COVID-19. Biosens. Bioelectron. 167, 112479.
https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112479 .
Jin, Y., Wang, M., Zuo, Z., Fan, C., Ye, F., Cai, Z., Wang, Y., Cui, H., Pan, K., Xu, A.,
2020a. Valor diagnóstico y varianza dinámica del anticuerpo sérico en la enfermedad por coronavirus 2019.
Int. J. Infect. Dis. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2020.03.065 .
Jin, YH, Cai, L., Cheng, ZS, Cheng, H., Deng, T., Fan, YP, Fang, C., Huang, D.,
Huang, LQ, Huang, Q., Han, Y., Hu, B., Hu, F., Li, BH, Li, YR, Liang, K., Lin, LK, Luo, LS, Ma, J., Ma, LL, Peng,
ZY, Pan, YB, Pan, ZY, Ren, XQ, Sun, HM, Wang, Y., Wang, Yun Yun, Weng, H., Wei, CJ, Wu, DF, Xia, J .,
Xiong, Y., Xu, HB, Yao, XM, Yuan, YF, Ye, TS, Zhang, XC, Zhang, YW, Zhang, YG, Zhang, HM, Zhao, Y.,
Zhao, MJ, Zi, H., Zeng, XT, Wang, Yong Yan, Wang, XH, 2020b. Una guía de asesoramiento rápido para el
diagnóstico y tratamiento de la neumonía infectada por el nuevo coronavirus de 2019 (2019-nCoV) (versión
estándar). Mil. Medicina. Res. https://doi.org/
10.1186 / s40779-020-0233-6 .
Karash, S., Wang, R., Kelso, L., Lu, H., Huang, TJ, Li, Y., 2016. Detección rápida de aves
virus de la influenza H5N1 en muestras de tráquea de pollo utilizando un aptasensor de impedancia con nanopartículas
de oro para la amplificación de la señal. J. Virol. Métodos 236, 147 - 156.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2016.07.018 .
Kettler, H., White, K., Hawkes, S., 2004. Mapeo del panorama de diagnósticos para
Infecciones de transmisión sexual: hallazgos clave y recomendaciones. UNICEF / PNUD / Banco Mundial /
OMS .
Kwong Hong Tsang, D., Lieberthal, TJ, Watts, C., Dunlop, IE, Ramadan, S., del Rio
Hernandez, AE, Klein, N., 2019. Biosensor FET de grafeno funcionalizado químicamente para la detección sin
etiquetas de exosomas. Sci. Rep. 9 https://doi.org/10.1038/s41598- 019-50412-9 .
Lalkhen, AG, McCluskey, A., 2008. Pruebas clínicas: sensibilidad y especificidad. Cont. Educ.
Anaesth. Crit. Cuidado del dolor 8, 221 - 223. https://doi.org/10.1093/bjaceaccp/mkn041 .
L. Xu y col.
Lamb, LE, Bartolone, SN, Ward, E., Chancellor, MB, 2020. Detección rápida de novela
Coronavirus (COVID-19) por amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa.
medRxiv. https://doi.org/10.1101/2020.02.19.20025155 ,
2020.02.19.20025155.
Land, KJ, Boeras, DI, Chen, XS, Ramsay, AR, Peeling, RW, 2019. REASURED
diagnósticos para informar las estrategias de control de enfermedades, fortalecer los sistemas de salud y mejorar los
resultados de los pacientes. Nat. Microbiol. 4, 46 - 54. https://doi.org/10.1038/ s41564-018-0295-3 .
Lassauni`ère, R., Frische, A., Harboe, ZB, Nielsen, AC, Fomsgaard, A., Krogfelt, KA,
J ø rgensen, CS, 2020. Evaluación de nueve inmunoensayos comerciales de SARS-CoV-2. medRxiv. https://doi.org/10.1101/2020.04.09.20056325
roche.com/us/en/products/params/elecsys-anti-sars-cov-2.html . consultado el 8.23.20.
, 2020.04.09.20056325.
Li, Y., Li, J., Zhang, Y., Dai, L., Li, L., Liu, J., Zhang, S., Wu, X., Hu, Y., Qin, C., Jiang, T., Kang, X., 2020a. Desarrollo de un
sistema automático integrado de detección de genes para el nuevo coronavirus relacionado con el síndrome
Sajid, M., Kawde, AN, Daud, M., 2015. Diseños, formatos y aplicaciones de flujo lateral
respiratorio agudo severo (SARS-CoV2). Emerg. Microb. Infectar. 9 de octubre de 1489 - 1496. https://doi.org/10.1080/22221751.2020.1782774
. ensayo: una revisión de la literatura. J. Saudi Chem. Soc. 19, 689 - 705. https://doi.org/
Li, Z., Yi, Y., Luo, X., Xiong, N., Liu, Y., Li, S., Sun, R., Wang, Y., Hu, B., Chen, W., Zhang, Y., Wang, J., Huang, B.,
Lin, Y., Yang, J., Cai, W., Wang, X., Cheng, J., Chen, Z., Sun, K., Pan, W., Zhan, Z., Chen, L., Ye, F., 2020b.
Desarrollo y aplicación clínica de una prueba rápida de anticuerpos combinados IgM-IgG para el diagnóstico de
la infección por SARS-CoV-2. J. Med. Virol. jmv 25727. https://doi.org/10.1002/jmv.25727 .
Lin, J., Wang, R., Jiao, P., Li, Yuntao, Li, Yanbin, Liao, M., Yu, Y., Wang, M., 2015. An
Inmunosensor de impedancia basado en microelectrodos de bajo costo y anticuerpos monoclonales específicos para la
detección rápida del virus de la influenza aviar H5N1 en hisopos de pollo. Biosens. Bioelectron. 67, 546 - 552. https://doi.org/10.1016/j. https://doi.org/10.1021/acsnano.0c02823 .
biografías.2014.09.037 .
Lin, D., Liu, L., Zhang, M., Hu, Y., Yang, Q., Guo, J., Dai, Y., Xu, Y., Cai, Y., Chen, X.,
Huang, K., Zhang, Z., 2020. Evaluaciones de la prueba serológica en el diagnóstico de infecciones por el nuevo
coronavirus de 2019 (SARS-CoV-2) durante el brote de COVID-19. medRxiv
27, 20045153. https://doi.org/10.1101/2020.03.27.20045153 , 2020.03.2020
Liu, Y., Yan, LM, Wan, L., Xiang, TX, Le, A., Liu, JM, Peiris, M., Poon, LLM,
Zhang, W., 2020. Dinámica viral en casos leves y graves de COVID-19. Lancet Infect. Dis. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30232-2
amplificación para la detección optomagnética en tiempo real de la secuencia de codificación RdRp del
. SARS-CoV-2. Biosens. Bioelectron. 165, 112356. https://doi.org/10.1016/j. bios.2020.112356 .
Long, Q., Deng, H., Chen, J., Hu, J., Liu, B., Liao, P., Lin, Y., Yu, L., Mo, Z., Xu, Y.,
Gong, F., Wu, G., Zhang, Xian-xiang, Chen, Y., Li, Z., Wang, K., Zhang, Xiao-li, Tian, W., Niu, C., Yang, Q .,
Xiang, J., Du, H., Liu, H., Lang, C., Luo, X., Wu, S., Cui, X., Zhou, Z., Wang, J., Xue, C ., Li, X., Wang, L., Tang,
X., Zhang, Y., Qiu, J., Liu, X., Li, J., Zhang, D., Zhang, F., Cai, X ., Wang, D., Hu, Y., Ren, J., Tang, N., Liu, P.,
Li, Q., Huang, A., 2020. Respuestas de anticuerpos al SARS-CoV-2 en COVID- 19 pacientes: la aplicación en
perspectiva de las pruebas serológicas en la práctica clínica. medRxiv.
https://doi.org/10.1101/2020.03.18.20038018 , 2020.03.18.20038018.
Lu, R., Wang, J., Li, M., Wang, Y., Dong, J., Cai, W., 2020. Detección de SARS-CoV-2 usando
PCR digital para diagnóstico de COVID-19, seguimiento del tratamiento y criterios de alta. medRxiv. https://doi.org/10.1101/2020.03.24.20042689
, 2020.03.24.20042689.
Mehta, P., McAuley, DF, Brown, M., Sánchez, E., Tattersall, RS, Manson, JJ, 2020.
COVID-19: considere los síndromes de tormenta de citocinas y la inmunosupresión. Lanceta.
https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30628-0 .
Miripour, ZS, Sarrami-Forooshani, R., Sanati, H., Makarem, J., Taheri, MS,
Shojaeian, F., Eskafi, AH, Abbasvandi, F., Namdar, N., Ghafari, H., Aghaee, P., Zandi, A., Faramarzpour, M.,
Hoseinyazdi, M., Tayebi, M., Abdolahad , M., 2020. Diagnóstico en tiempo real de especies reactivas de
oxígeno (ROS) en esputo fresco mediante rastreo electroquímico; correlación entre COVID-19 y ROS
inducidos por virus en el epitelio pulmonar / respiratorio durante esta pandemia. Biosens. Bioelectron. 165,
112435. https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112435 .
Morales-Narváez, E., Dincer, C., 2020. El impacto de la biodetección en un brote pandémico:
COVID-19. Biosens. Bioelectron. 163, 112274. https://doi.org/10.1016/j. bios.2020.112274 .
National Bio Green Sciences LLC, 2020.Anunciado el kit de prueba rápida COVID-19 de 15 minutos -
jems [Documento WWW]. https://www.jems.com/2020/04/01/15-minute-covid-19- anuncio-kit-de-prueba-rápida / .
consultado 4.14.20.
Nishiura, H., Kobayashi, T., Suzuki, A., Jung, S.-M., Hayashi, K., Kinoshita, R., Yang, Y.,
Yuan, B., Akhmetzhanov, AR, Linton, NM, Miyama, T., 2020. Estimación de la proporción asintomática de
infecciones por nuevos coronavirus (COVID-19). En t. J. Infect. Dis.
https://doi.org/10.1016/j.ijid.2020.03.020 .
Pan, Y., Li, X., Yang, G., Fan, J., Tang, Y., Zhao, J., Long, X., Guo, S., Zhao, Z., Liu, Y.,
Hu, H., Xue, H., Li, Y., 2020. Abordaje inmunocromatográfico serológico en el diagnóstico de pacientes
COVID-19 infectados con SARS-CoV-2. J. Infect. 81, 28 - 32. https: // doi.org/10.1101/2020.03.13.20035428 .
Park, G.-S., Ku, K., Beak, S.-H., Kim, SJ, Kim, S. Il, Kim, B.-T., Maeng, J.-S., 2020.
Desarrollo de ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa (RT-LAMP)
dirigidos al SARS-CoV-2. J. Mol. Diagnósticos. https://doi.org/10.1101/
2020.03.09.983064 , 2020.03.09.983064.
Peeling, RW, Wedderburn, CJ, García, PJ, Boeras, D., Fongwen, N., Nkengasong, J.,
Sall, A., Tanuri, A., Heymann, DL, 2020. Pruebas serológicas en la respuesta a la pandemia de COVID-19.
Lancet Infect. Dis. https://doi.org/10.1016/s1473-3099(20) 30517-x , 0.
Ponti, G., Maccaferri, M., Ruini, C., Tomasi, A., Ozben, T., 2020. Biomarcadores asociados
con progresión de la enfermedad COVID-19. Crit. Rev. Clin. Lab Sci. https://doi.org/
10.1080 / 10408363.2020.1770685 .
Posthuma-Trumpie, GA, Korf, J., Van Amerongen, A., 2009. Flujo lateral (inmuno)
ensayo: sus fortalezas, debilidades, oportunidades y amenazas. Una encuesta de literatura. Anal. Bioanal.
Chem. 393, 569 - 582. https://doi.org/10.1007/s00216-008-2287-2 .
Qiu, J., 2020. Las infecciones encubiertas por coronavirus podrían estar sembrando nuevos brotes. Naturaleza.
https://doi.org/10.1038/d41586-020-00822-x .
Qiu, G., Gai, Z., Tao, Y., Schmitt, J., Kullak-Ublick, GA, Wang, J., 2020. Dual-funcional
biosensores fototermales plasmónicos para sistemas respiratorios agudos graves de alta precisión
12
Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673
detección del síndrome coronavirus 2. ACS Nano 14, 5268 - 5277. https://doi.org/
10.1021 / acsnano.0c02439 .
Ramadán, S., Lobo, R., Zhang, Y., Xu, L., Shaforost, O., Tsang, DKH, Yin, T., Qiao, M.,
Rajeshirke, A., Jiao, LR, Petrov, PK, Dunlop, IE, Titirici, M.-M., Klein, N., 2020. Transistores de efecto de campo de
grafeno mejorado de punto de carbono (CD) para la detección ultrasensible de exosomas. Resultados no publicados .
Roche Ltd, 2020a. cobas ® Prueba de SARS-CoV-2 [Documento WWW]. https: //diagnostics.roch
e.com/global/en/products/params/cobas-sars-cov-2-test.html . consultado 4.15.20.
Roche Ltd, 2020b. Elecsys ® anti-SARS-CoV-2 [Documento WWW]. https: // diagnóstico.
Russell, SM, Alba-Patiño, A., Baron, E., Borges, M., González-Freire, M., de la Rica, R.,
2020. Biosensores para el manejo de la tormenta de citocinas COVID-19: desafíos futuros. ACS Sens. https://doi.org/10.1021/acssen
, 2020.
10.1016 / j.jscs.2014.09.001 .
Schmidt, H., Hawkins, AR, 2016. Análisis de virus único mediante óptica basada en chip
detección. Bioanálisis. https://doi.org/10.4155/bio-2016-0004 .
Seo, G., Lee, G., Kim, MJ, Baek, S.-H., Choi, M., Ku, KB, Lee, C.-S., Jun, S., Park, D.,
Kim, HG, Kim, S.-J., Lee, J.-O., Kim, BT, Park, EC, Kim, S. Il, 2020. Detección rápida del virus causante de
COVID-19 (SARS-CoV-2 ) en muestras de frotis nasofaríngeos humanos utilizando un biosensor basado en
transistor de efecto de campo. ACS Nano 14, 5135 - 5142.
Siemens, 2020. Ensayo total de SARS-CoV-2 - siemens healthineers USA [Documento WWW].
https://www.siemens-healthineers.com/en-us/laboratory-diagnostics/ensayos-por-enfermedades-condiciones/análisis-en-fermedadesinfecciosas
/ ensayo-cov2t . consultado el 8.23.20.
Tang Xiao, A., Xin Tong, Y., Gao, C., Zhu, L., Jie Zhang, Y., Zhang, S., 2020. Dinámico
perfil de los hallazgos de RT-PCR de 301 pacientes con COVID-19 en Wuhan, China: un estudio descriptivo.
J. Clin. Virol. 104346. https://doi.org/10.2139/ssrn.3548769 .
Tian, B., Gao, F., Fock, J., Dufva, M., Hansen, MF, 2020. Círculo a círculo homogéneo
Universidad de Cambridge, 2020. Prueba de diagnóstico rápida de COVID-19 desarrollada por Cambridge
equipo que se desplegará en hospitales [Documento WWW]. En línea. https://www.cam.ac. uk / research / news /
rapid-covid-19-diagnosis-test-desarrollada-por-cambridge-team-to-be-deployed-in-hospital . consultado el 4.13.20.
EE. UU., FDA, 2020. FDA lucha contra COVID-19 con dispositivos médicos. https: //www.hsdl.or
g /? view & did = 838993 .
Wang, R., Li, Y., 2013. Aptasensor QCM basado en hidrogel para la detección de influenza aviar
virus. Biosens. Bioelectron. 42, 148 - 155. https://doi.org/10.1016/j. bios.2012.10.038 .
Wang, R., Li, Y., 2016. Biosensores para la detección rápida de influenza aviar. En: Pasos
Avances en el diagnóstico y control de la influenza. InTech. https://doi.org/10.5772/ 64353 .
Wang, R., Lin, J., Lassiter, K., Srinivasan, B., Lin, L., Lu, H., Tung, S., Hargis, B.,
Bottje, W., Berghman, L., Li, Y., 2011. Estudio de evaluación de un biosensor de impedancia portátil para la
detección del virus de la influenza aviar. J. Virol. Métodos 178, 52 - 58.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2011.08.011 .
Wang, R., Zhao, J., Jiang, T., Kwon, YM, Lu, H., Jiao, P., Liao, M., Li, Y., 2013. Selección
y caracterización de aptámeros de ADN para su uso en la detección del virus de la influenza aviar H5N1. J.
Virol. Métodos 189, 362 - 369. https://doi.org/10.1016/j. jviromet.2013.03.006 .
Wang, R., Xu, L., Li, Y., 2015. Reacción enzimática controlada por bio-nanogate para virus
sintiendo. Biosens. Bioelectron. 67, 400 - 407. https://doi.org/10.1016/j. biografías.2014.08.071 .
Wang, C., Horby, PW, Hayden, FG, Gao, GF, 2020. Un nuevo brote de coronavirus de
preocupación de salud mundial. Lancet 395, 470 - 473. https://doi.org/10.1016/S0140-6736 (20) 30185-9 .
Wo¨ lfel, R., Corman, VM, Guggemos, W., Seilmaier, M., Zange, S., Müller, MA, Niemeyer, D., Jones, TC, Vollmar, P.,
Rothe, C., Hoelscher, M ., Bleicker, T., Brünink, S., Schneider, J., Ehmann, R., Drosten, C., Wendtner, C., 2020.
Evaluación virológica de pacientes hospitalizados con COVID-2019. Naturaleza. https://doi.org/
10.1038 / s41586-020 .
Organización Mundial de la Salud, 2020a. Informes de situación de la enfermedad por coronavirus (COVID-2019)
- 147 .
Organización Mundial de la Salud, 2020b. Director General de la OMS ' s comentarios de apertura en el
rueda de prensa sobre COVID-19 - 16 de marzo de 2020 [Documento WWW]. https: //www.wh
o.int/dg/speeches/detail/who-director-general-s-opening-remarks-at-the-media-br
iefing-on-covid-19-16-marzo-2020 .
Wrapp, D., Wang, N., Corbett, KS, Goldsmith, JA, Hsieh, CL, Abiona, O., Graham, B.
S., McLellan, JS, 2020. Estructura Cryo-EM del pico 2019-nCoV en la conformación de prefusión. Ciencia
84367, 1260 - 1263. https://doi.org/10.1126/science. aax0902 .
Xie, X., Zhong, Z., Zhao, W., Zheng, C., Wang, F., Liu, J., 2020. CT de tórax para el típico 2019-
Neumonía por nCoV: relación con la prueba de RT-PCR negativa. Radiología. https: // doi. org / 10.1148 /
radiol.2020200343 , 200343.
Xu, GJ, Kula, T., Xu, Q., Li, MZ, Vernon, SD, Ndung ' u, T., Ruxrungtham, K., Sánchez, J., Brander, C., Chung, RT, O ' Connor,
KC, Walker, B., Larman, HB, Elledge, SJ, 2015. Perfiles serológicos completos de poblaciones humanas
utilizando un viroma humano sintético. Science 84 348, aaa0698. https://doi.org/10.1126/ science.aaa0698 aaa0698.
Xu, L., Wang, R., Kelso, LC, Ying, Y., Li, Y., 2016. A target-responsive and size-
aptasensor de hidrogel dependiente incrustado con indicadores fluorescentes QD para la detección rápida del virus
de la influenza aviar H5N1. Sensor. Solenoide. B Chem. 234, 98 - 108.
https://doi.org/10.1016/j.snb.2016.04.156 .
L. Xu y col. Biosensores y bioelectrónica 170 (2020) 112673

Xu, X., Chen, P., Wang, J., Feng, J., Zhou, H., Li, X., Zhong, W., Hao, P., 2020. Evolución Zhang, Y., Odiwuor, N., Xiong, J., Sun, L., Nyaruaba, RO, Wei, H., Tanner, NA, 2020c.
del nuevo coronavirus del brote en curso de Wuhan y modelado de su proteína de pico para el riesgo de Detección molecular rápida del ARN del virus SARS-CoV-2 (COVID-19) utilizando LAMP colorimétrico.
transmisión humana. Sci. China Life Sci. https://doi.org/10.1007/ s11427-020-1637-5 . medRxiv 2. https://doi.org/10.1101/2020.02.26.20028373 ,
2020.02.26.20028373.
Yan, C., Cui, J., Huang, L., Du, B., Chen, L., Xue, G., Li, S., Zhang, W., Zhao, L., Sun, Y., Zhao, J., Yuan, Q., Wang, H., Liu, W., Liao, X., Su, Y., Wang, X., Yuan, J., Li, T., Li, J.,
Yao, H., Li, N., Zhao, H., Feng, Y., Liu, S., Zhang, Q., Liu, D., Yuan, J., 2020. Detección rápida y visual del nuevo Qian, S., Hong, C., Wang, F., Liu, Y., Wang, Z., He, Q., Li, Z., He, B., Zhang, T., Fu, Y., Ge, S., Liu, L., Zhang, J.,
coronavirus de 2019 (SARS-CoV-2) mediante un ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle de Xia, N., Zhang, Z., 2020. Respuestas de anticuerpos al SARS-CoV-2 en pacientes con enfermedad del nuevo
transcripción inversa. Clin. Microbiol. Infectar. coronavirus 2019. Clin. Infectar. Dis. https://doi.org/
https://doi.org/10.1016/j.cmi.2020.04.001 . 10.1093 / cid / ciaa344 .
Yelin, I., Aharony, N., Tamar, ES, Argoetti, A., Messer, E., Berenbaum, D., Shafran, E., Zhu, N., Zhang, D., Wang, W., Li, X., Yang, B., Song, J., Zhao, X., Huang, B., Shi, W.,
Kuzli, A., Gandali, N., Shkedi, O., Hashimshony, T., Mandel-Gutfreund, Y., Halberthal, M., Geffen, Y., Lu, R., Niu, P., Zhan, F., Ma, X., Wang, D., Xu, W., Wu, G., Gao, GF, Tan, W., 2020a. Un nuevo coronavirus de
Szwarcwort-Cohen, M., Kishony, R., 2020 Evaluación de la prueba COVID-19 RT-qPCR en grupos de muestras pacientes con neumonía en China, 2019. N. Engl. J. Med.
múltiples. Clin. Infectar. Dis. https://doi.org/ 382, 727 - 733. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2001017 .
10.1093 / cid / ciaa531 . Zhu, X., Wang, X., Han, L., Chen, T., Wang, L., Li, H., Li, S., Él, L., Fu, X., Chen, S.,
Zhang, W., Du, RH, Li, B., Zheng, XS, Yang, X. Lou, Hu, B., Wang, YY, Xiao, GF, Xing, M., Chen, H., Wang, Y., 2020b. Amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa
Yan, B., Shi, ZL, Zhou, P., 2020a. Investigación molecular y serológica de pacientes infectados con 2019-nCoV: multiplex combinada con biosensor de flujo lateral basado en nanopartículas para el diagnóstico de COVID-19.
implicación de múltiples rutas de diseminación. Emerg. Microb. Infectar. 9, 386 - 389. https://doi.org/10.1080/22221751.2020.1729071
Biosens. Bioelectron. 166, 112437. https://doi.org/
. 10.1016 / j.bios.2020.112437 .
Zhang, X., Qi, Q., Jing, Q., Ao, S., Zhang, Z., Ding, M., 2020b. Sondeo eléctrico de Zou, L., Ruan, F., Huang, M., Liang, L., Huang, H., Hong, Z., Yu, J., Kang, M., Song, Y.,
Dominio de unión al receptor de proteína de pico de COVID-19 a través de un transistor de efecto de campo de grafeno arXiv 1 - 20 Xia, J., Guo, Q., Song, T., He, J., Yen, HL, Peiris, M., Wu, J., 2020. Carga viral del SARS-CoV-2 en muestras de las vías
. respiratorias superiores de pacientes infectados . N. Engl. J. Med. https: // doi. org / 10.1056 / NEJMc2001737 .

13