EXAMEN FINAL DE MICROBIOLOGIA

PATRICIA GONZALEZ MONTERO

Grupo: 211

1. Establezca la diferencia entre los Hongos, Bacterias y Virus, en cada caso exponga
medios de cultivo y parámetros para la siembra y aislamiento.
Los hongos: son micro organismos eucarióticos, aerobios, no fotosintéticos
heterótrofos formadores de esporas, son inmóviles en todas las fases de su ciclo de
vida y absorben sus alimentos por digestión enzimática externa. Son los encargados
de producir micosis procesos alérgicos y mico toxinas patógenas al hombre y a los
animales. Los hongos se dividen en mohos y levaduras, en su forma de presentación
pueden ser monomorficos, que quiere decir que al sembrarlo en cualquier medio de
cultivo y a cualquier temperatura crece de igual forma y dimorficos quiere decir que en
desiguales formas de cultivo y temperaturas crecen de dos formas diferentes ejemplo:
moho de agar sabouraud a 25grados centígrados y en forma de levaduras en en agar
sangre a 37 grados centígrados. Los hongos necesitan determinadas condiciones
externas para su desarrollo tales como un PH acido temperatura y humedad
especifica.
Medios de cultivos más empleados en el diagnóstico de los hongos

- Agar sabouraud
- Agar papa dextrosa
- Agar extracto de malta
- Agar czapek-dox

Además el agar sabouraud se agrega antibióticos antibacterianos para inhibir el

crecimiento de las bacterias los moho crecen como promedio de 6 a 15 dias.
Por lo general los hongos patógenos proliferan en aerobiosis y el tiempo de
crecimiento puede ser de un día hasta un mes. La temperatura se debe
controlar en incubadora de laboratorio que estas varían en dependencia de que
los hongos sean saprofitos o patógenos.
Las Bacterias: Las bacterias son microorganismos procariotas unicelulares
que se encuentran en casi todas las partes de la tierra son vitales para los
ecosistemas del planeta poseen ribosomas, citoplasma y una membrana
plasmática. Presenta un tamaño de unos pocos micrómetros y diversas formas
como: barras, esferas, filamentos curvados y helicoidales. Según la
composición de su pared celular, se clasifican en Gram positivas y Gram
negativa. La técnica de coloración más usada para diferenciar en gram positivo
y gram negativo es se conoce como tinción de gram es un método fácil de
aplicar y se distingue por una absoluta fiabilidad de la gram negativa, no ocurre
así en el contexto del grupo gram positiva por lo que es necesario examinar en
este caso células en crecimiento, ya que en ciertos bacilos gram positivos
pierden rápidamente la capacidad de retener el complejo cristal violeta
negativo, una vez que cesa el crecimiento activo.
Medio de cultivo para las bacterias:
Agar Mac ConKey
Agar sangra
Agar Chocolate
Agar sabouraud
Agar EMB
Agar SS
Agar Vogel- Jhonson
Agar manito sal
Caldo tetrionato
Caldo selenito

El aislamiento de las bacterias consiste en la separación de un determinado

microorganismo a partir de una población microbiana natural mixta, el método
más sencillo de aislamiento en medios líquidos es por diluciones consecutivas
en un caldo latoso u otro.
Los Virus: Son agentes infecciosos submicroscópicos. No pertenecen a ninguno
de los grupos eucarióticos ni procarióticos, constituyen microorganismos
aparte. Los caracteriza un ácido nucleico envuelto en proteínas. También han
sido definidos como la brecha entre lo inerte y lo vivo, capaces de reproducirse
solamente en el interior de una célula viva específica, en la cual se introducen.
Las partículas virales dependen completamente de la célula huésped,
procarióticos o eucarióticos, en dependencia del reino que parasiten.
Los virus pueden clasificarse, atendiendo al tipo de organismo que parasitan,
en: Bacteriófagos o fagos: virus que parasitan a bacterias.
. Virus animales.
. Virus vegetales.
Los virus no pueden reproducir ni amplificar la información de sus genomas,
por lo que pueden denominarse como"parásitos genéticos", ya que poseen las
enzimas y la información requeridas para reprogramar a las células infectadas
y hacer que estas sinteticen los componentes necesarios para su propia
replicación.

Se diferencian de otros agentes biológicos en que contienen un solo tipo de

ácido nucleico: ácido desoxirribonucleico, ADN o ácido ribonucleico, ARN; no
tienen ribosomas ni organelas y no se multiplican por fisión binaria.
Son microorganismos intracelulares obligados y dependen del hospedero para
la síntesis de proteína y replicación. Son capaces de pasar de una célula a
otra, afectando a todas las formas de vida, y son responsables de muchas
enfermedades infecciosas fatales.

2- En una vaquería de la Provincia de Matanzas, en donde las condiciones

higiénico –sanitarias y de manejo no eran las mejores (con salas y cuartones
sucios, y animales muy hacinados), se presentó un brote de enfermedad
respiratoria bacteriana (en vacas y terneros), caracterizado por: disnea,
secreción nasal muco-purulenta, tos y conjuntivitis catarral. Dos terneros
fallecieron a pesar del tratamiento impuesto por el Médico Veterinario.
A: Realice la toma de muestra, envío y conservación de muestras en los
animales que presentaron problemas respiratorios y en los fallecidos. (A los
laboratorios de diagnóstico que usted considere necesario)
B: ¿Como usted detectaría la contaminación dentro de la instalación? Realice
la toma de muestras del aire, explique el método y la interpretación de los
resultados.

Envió de muestras. Las muestras deben trasladarse adecuadamente,

evitando que disminuyan o mueran los microorganismos así como su
contaminación.
El traslado debe ser a temperaturas entre 2-8 0C, en hielo o nevera y en un
tiempo no mayor de seis horas.
En caso de demorarse el traslado o envío de las muestras, debe usarse hielo
seco, si se empacan adecuadamente pueden conservarse por 2-3 días.
La refrigeración es un método de conservación muy efectivo y útil para
pequeños fragmentos de animales sacrificados o recién muertos.
De animales muertos o sacrificados: Las muestras de órganos deben ser
tomadas antes de abrir el tracto gastrointestinal. Además de los órganos diana,
se deben tomar muestra del bazo, hígado, riñón y ganglios correspondientes; el
resto estará en dependencia de las lesiones que se observen.
Las muestras de intestino y estómago se deben amarrar por los extremos
antes de cortar y no mezclar con otros órganos. Encéfalo. En caso de animales
pequeños, enviar la cabeza completa. Fetos. Completos y con las membranas
fetales. O en su lugar enviar el estómago doblemente anudado.
Todas las muestras se deben enviar separadas, en forma aséptica y en
frascos, placas de Petri, bandejas o en nailon, siempre cubiertas y a la menor
brevedad posible. Se pueden conservar en refrigeración a 4 0c, con hielo
corriente o con hielo seco.
La muestra que se destine a cultivos anaerobios debe tomarse por succión y
mantenerse dentro de la jeringa taponeándola para evitar la entrada de
oxígeno.

Aire: Las muestras pueden tomarse dejando sedimentar las partículas

suspendidas en el aire sobre la superficie de un medio de cultivo sólido en una
placa de Petri, durante un tiempo que puede ser entre 1-2 minutos.
Con este método se consigue que los microorganismos se depositen en el
medio de cultivo y luego se coloca la placa en la incubadora.
Otro método para tomar muestras de aire, mucho más exacto que el método de
asentamiento, consiste en aspirar volúmenes conocidos de aire y filtrarlo de
modo que la corriente de aire choque con una placa de Petri que contiene un
medio de cultivo específico.
Para desarrollar este método, se utiliza el aparato de Krotov que permite
conocer la cantidad de litros de aire que llegan a la placa en un tiempo
determinado. Es importante anotar y enviar con la muestra, el tiempo y la
velocidad de la corriente de aire que se utilizaron.
3 Exponga sus conocimientos sobre los efectos beneficiosos y perjudiciales de los virus,
bacterias y hongos .Explique las principales vías de transmisión y modo de infección de
cada uno de ellos.

Efectos beneficiosos y perjudiciales de los virus, bacterias y hongos

Los agentes biológicos se encuentran estrechamente unidos en un proceso
productivo. Las grandes poblaciones de microorganismos saprófitos, parásitos
y patógenos están en contacto directo con el huésped en sus alimentos y con
sus productos. La elevada capacidad enzimática microbiana de los géneros
saprófitos, en condiciones ambientales favorables, como elevadas humedad y
temperatura, facilita la proliferación microbiana. en las instalaciones, incluyendo
la microflora propia del cuerpo de los animales y la presente en los sustratos y
alimentos que estos consumen.

Las medidas preventivas de higiene y conservación deben ser constantes para

evitar la aparición de enfermedades y, en consecuencias
Su beneficio radica por ejemplo en la interrelación suelo-animal-alimentación,
la microflora del suelo constituye una población de gran importancia en la
transformación de la materia orgánica por la acción de microorganismos de los
géneros saprófitos y autótrofos; los que resultan sumamente importantes en la
homeostasis ecológica, al ser responsables del reciclaje y de la desintegración
de la materia orgánica, liberando gran cantidad de nutrientes que influyen en la
fertilidad y conservación de los suelos.
Por otra parte las bacterias patógenas hay que prestarle más atención porque
su importancia en la naturaleza es menor. Teniendo en cuenta el papel
fundamental que desempeñan las bacterias no patógenas, ya que intervienen
en el ciclo del nitrógeno y del carbono, así como en los metabolismos del
azufre, del fósforo y del hierro. Las bacterias de los suelos y de las aguas
resultan indispensables para el equilibrio biológico.
Las principales vías de transmisión corrientes de aire o aguas que llegan a las
instalaciones, donde se transforman de parásitos adaptados a desarrollar de
procesos infecciosos y enfermedades.
El agua, tan utilizada en múltiples funciones en la instalación, en su arrastre
sobre la superficie puede incorporar géneros patógenos provenientes de la
expulsión de excrementos y desechos, y en el consumo, al ser utilizada en la
limpieza, puede provocar trastornos de la salud animal.

Los microorganismos son beneficiosos en su acción degradativa y depurativa

de las aguas residuales de las instalaciones pecuarias, donde su actividad
biológica resulta muy importante en la mineralización de la materia orgánica.
Los alimentos, como es los piensos, durante su cosecha, procesamiento y
almacenamiento son portadores de agentes patógenos tales como hongos,
causantes de intoxicaciones alimentarias. Sin embargo, el uso correcto de
otros microorganismos presentes en la superficie de las hojas y tallos de los
forrajes permite, en condiciones controladas de estricta anaerobiosis, la
producción de ensilaje, en cuya conservación predominan las bacterias
ácidolácticas.
 Los hongos se encargan de descomponer la materia orgánica y permiten el
reciclaje de los nutrientes en los ecosistemas, establecen relaciones
simbióticas con organismos hospedantes de tal manera que ambos salen
beneficiados.
Por otra parte se les considera una herramienta de significativa importancia
para el estudio de la naturaleza química y física del protoplasma. También son
utilizados en el estudio de la mitosis y la meiosis.
Para la alimentación animal y humana se emplean géneros con fines
beneficiosos Morquelas, Morchella esculenta y trufas Tuber melanosporum.
Actualmente, mediante la biotecnología son utilizados en procesos
fermentativos para obtener enzimas, vitaminas y ácidos .son productores de la
penicilina y otros productos beneficiosos para la salud animal y humana, así
como para el consumo animal (levaduras).
Los rebaños y las crías, debido a la explotación intensiva, pueden ser
afectados por el contagio entre animales a través de las diversas vías y la
presencia de vectores portadores de agentes patógenos como por ejemplo, la
garrapata en el caso de la anaplasmosis.
Los hongos: al igual que las bacterias causan daños considerables como: las
dermatofitosis originadas por mohos y las candidiasis por levaduras.
También son importantes en fitopatología, ya que algunos producen
enfermedades devastadoras, que pueden causar graves pérdidas a la
agricultura; por ejemplo: el Phytophtora infestans, la Monilia fructicola, entre
otros. Al igual que las bacterias se desarrollan en condiciones favorable como
elevada humedad y temperatura

Los virus: es una partícula que sólo puede ser vista a través de un microscopio
electrónico, compuesta por material genético, que necesita de una célula viva
para poder multiplicarse; es mucho más pequeña que una bacteria y se considera un
agente causante de enfermedades (patógeno). son reconocidos como agentes
patógenos de gran consideración, debido a su rápida propagación por
contagio, por vía respiratoria, debido a su difusión en diminutas gotas de
secreción aquellas infectadas emiten al toser y estornudar o, como los que
causan, por vía oral o fecal. En otros, la propagación se realiza a través de
vectores como los insectos, y a través de la sangre o secreciones corporales.
Los virus infectan a todo tipo de organismo, desde los animales, hongos,
plantas, hasta bacterias. Tambien infestan a otros virus, estas especies reciben
el nombre de pirófagos.
Se encuentran en casi todos los ecosistemas de la tierra, son la identidad
biológica más abundante

No todos los virus provocan enfermedades, muchos se reproducen sin causar

ningún perjuicio al organismo, en los animales es frecuente que las infecciones
víricas del lugar a una respuesta inmunitaria que confiere una inmunidad
permanente a la infección. Este hecho es el que se pretende lograr con las
vacunas.

4 De la Replicación viral:

A: Explique los tres tipos de interacciones más comúnmente observadas.

 B: Diga las fases del ciclo de multiplicación viral y sus características.
C: Diga las diferencias entre los ciclos de replicación de los ADN virus y los ARN virus.

Interacción virus-célula
Cuando una partícula viral libre se pone en contacto con una célula sensible,
tiene lugar una serie de fenómenos durante los cuales el virus y la célula
constituyen una unidad con características propias.
La interacción del virus con la célula genera una entidad nueva: el complejo
virus-célula. Las distintas manifestaciones que puede presentar esta unión de-
penden de la naturaleza de la célula y del virus. Los tres tipos de interacciones
virus-célula más comúnmente observadas son las siguientes:
La interacción lítica: que da como resultado la multiplicación viral y la lisis de la
célula huésped.
La interacción transformadora: que da como resultado la integración del ge-
noma viral en el genoma del huésped y la transformación o alteración per-
manente de la célula huésped en relación con la morfología, los hábitos de
crecimiento y la forma en que interactúan con células que se ponen en
contacto con ella.
La interacción abortiva: que consiste en aquella interacción virus-célula en la
que el virus penetra, pero no se multiplica.
Ciclo de multiplicación viral. Cuando se habla de interacción virus-célula puede
pensarse en un ciclo: el ciclo de infección o multiplicación durante el cual el
virus ingresa en una célula, se multiplica y es liberado.
Para su mejor comprensión, el ciclo de replicación viral se puede dividir en
diver- sas fases o partes importantes.
Etapas o fases de la replicación viral:
- Adsorción.
- Penetración.
- Desnudamiento.
- Replicación del ARN y proteínas.
- Trascripción del ARNm temprano.
- Traducción de proteínas tempranas.
- Replicación del ácido nucleico viral.
- Transcripción del ARNm tardío.
- Traducción de proteínas tardías.
- Ensamblaje y liberación de proteínas.

Diferencias en los ciclos de replicación de los ADN virus y los ARN virus
- ADN virus
Para todos estos virus, el ARNm debe ser transcripto por una ARN polimerasa
ADN dependiente. La transcripción del ADN viral se hace de forma
programada, en secuencia, primero las proteínas primarias y luego las tardías.

Los ADN virus se diferencian en que la enzima puede ser celular o viral relacio-
nada con el sitio de replicación viral, si es en el núcleo o en el citoplasma.

- ADN de doble cadena.

Transcriptasa celular: Comprende Papovaviridae, Adenoviridae y
Herpesviridae. El genoma viral se transcribe en el núcleo por una ARN
polimerasa ADN dependiente celular.
Transcriptasa viral: Comprende a los Poxviridae y los Iridoviridae. Se replican
en el citoplasma y llevan su propia transcriptasa. El ARNm es transcripto
directamente del ADN viral.
- ADN sencillo.
Transcriptasa celular. Comprende a los Parvoviridae virus que tienen ADN o de
cadena (-). Necesita la síntesis de una cadena complementaria para formar un
ADN sencillo. El ADN de doble cadena, se transcribe en el núcleo y se procesa
para producir el ARNm sencillo antes de ir hacia el citoplasma para la
traslación.

- ARN virus
La transcripción es más complicada para estos virus que para los ADN virus, lo
que no es sorprendente, ya que son la única forma de vida que utiliza el ARN
como fuente de información genética.

5 En el sector privado se presentó un brote de enfermedad viral en perros

cachorros de más de 7meses de edad , caracterizado por :fiebre alta por más de
una semana (de tipo bifásica ), rinitis , descarga nasal de serosa a mucopurulenta ,
conjuntivitis serocatarral , disnea , respiración abdominal ,escudo del moro seco y
áspero, en algunos se presentó diarrea , endurecimientos de los pulpejos y
convulsiones , y fallecieron dos animales .
A: ¿Cuál es su diagnóstico presuntivo?
B: Características taxonómicas del agente etiológico, toma, conservación y
envío de muestras para los diferentes laboratorios de la Red Diagnostica que
UD considere .Qué requisitos debe tener las muestras que se envían para la
serología?,¿Qué requisitos debe tener las muestras que se envían para
Anatomía Patológica para realizar el diagnostico macroscópico?¿Qué
requisitos debe tener las muestras que se envían para Histopatologías para
realizar el diagnostico Microscópico?
C: Diagnostico Microbiológico Directo.
D: Diagnostico Microbiológico Indirecto. De una de las técnicas utilizadas diga:
Tipo, Principio en que se basa y Aplicaciones.
E: Interpretación Diagnostica.
F: Diagnóstico Diferencial Microbiológico con dos Agentes Biológicos productor
de síntomas semejantes
G: Diga si se aplica la inmunoprofilaxis e inmunoterapia.
Diagnostico presuntivo:
Moquillo canino (MC); Distemper canino.
Agente Etiológico: VIRUS RNA DE SENTIDO (-)
Familia: Paramyxoviridae (Morfología Helicoidal, Envuelto)
Género: Morbillivirus

Características de la Enfermedad:
Tiene varias formas de presentación: Respiratoria, digestiva, cutánea y
nerviosa.
El Curso Clínico puede ser: Sobre agudo, agudo, sub-agudo o crónico y en
ocasiones sub-clínico.

Toma, envío y conservación de muestras:

De animales vivos
 Muestras sanguíneas.
 Impronta o raspado Conjuntival.
 Raspados de la superficie de la córnea.
 Raspado de Tonsilas.
 Líquido Céfalo-Raquídeo (LCR).
 Exudados nasales.
 Exudados faríngeos.
 Exudados oculares.
 Orina.
 Sueros pareados.
De animales muertos
- Se debe enviar el animal completo o improntas (raspados) conjuntivales,
Improntas o raspados de córnea, cerebro, cerebelo, tonsilas, pulmones,
riñones, aparato digestivo (Estómago e intestinos), ganglios linfáticos,
vejiga urinaria, extremidades, entre otras.

Muestras para serología:

- Para el estudio serológico se toman muestras de animales sospechosos
de haber pasado la enfermedad o que hayan estado en contacto con
 animales enfermos, muertos o sacrificados. Se tomarán muestras
pareadas con intervalo de tiempo entre 14 y 21 días (en los primeros y
últimos estadios de la enfermedad). Usar agujas y tubos estériles sin
anticoagulantes y desinfectar la piel. O congelar el suero una vez
extraído.
- Se pueden enviar con un preservativo como fenol en concentración final
al 0,5 % o mertiolate al 1:10 000.
- Muestras para anatomía patológica
- Se pueden enviar animales vivos, con el objetivo de realizar biopsias o
seguir la clínica hasta su muerte o sacrificio.
- se pueden enviar cadáveres de animales recién muertos o conservados
en o refrigeración para practicarles la necropsia.
- Se pueden enviar animales completos al laboratorio si este se encuentra
cerca las condiciones lo permitan.
- si no es posible enviar el animal completo se enviarán vísceras
completas o fragmentos de órganos de 10 cm, representativos de las
lesiones observadas en el animal y que contengan áreas sanas y áreas
con lesiones.
- Se recomienda enviar órganos parenquimatosos, acompañados de
mues- o tras que sean representativas del diagnóstico presuntivo
realizado por el médico veterinario de la unidad pecuaria; basándose en
las normas de diagnóstico para las diferentes enfermedades y procesos
patológicos en los animales.
- Las muestras deben colocarse, para su traslado, en bolsas de nailon o
polietileno, separando individualmente los órganos y por aparatos para
evitar contaminaciones.
- La muestra de órganos tubulares del sistema digestivo deben amarrarse
en o sus dos extremos de acuerdo a la sección que se tome y adicionar
los ganglios linfáticos de la región.
- Aunque es la forma menos idónea del envío de muestras a patología
pueden enviarse fragmentos conservados en formol al 10 %, cuando
sola- mente serán diagnosticadas por el patólogo (pero estas muestras
nunca se podrán enviar a otros laboratorios que tengan como objetivo el
aislamiento del agente etiológico como: bacteriología, micología y
virología).
- Si hay sospecha de enfermedades nerviosas se debe enviar el animal
completo o y si esto no es posible, se debe enviar obligatoriamente la
cabeza con el resto de los órganos con lesiones.
- Todas las muestras deben ser identificadas y acompañadas de una
anamnesis.
- En la morgue, una de las secciones más importantes del laboratorio de
patología, el patólogo realizará la disección y descripción del cadáver,
vísceras o fragmentos de órganos; tomará y remitirá muestras, para los
exámenes com- plementarios, hacia otros laboratorios (bacteriología,
micología, virología, parasitología, toxicología), así como muestras para
la evaluación microscópica (laboratorio de histopatología).
 - La muestra de histopatología se debe tomar lo más rápido posible. Esa
muestra debe abarcar todas las estructuras del órgano y debe contener
un área afectada y un área sana, medir 1 cm3, conservarse en formol
neutro al 10 % y encontrarse en una proporción de 1:10 (es decir, una
porción de la muestra en 10 mL de formol). En los frascos debe
colocarse un pedazo de algodón para sumergir los fragmentos que floten
en el formol.

DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO DIRECTO

 CULTIVO:
Cultivos celulares: Riñón, pulmón, linfocitos y cerebro de perro (Se pueden cultivar
en embriones de pollo).

COMPROBACIÓN:

- Efecto Citopatogénico (ECP): Formación de “sincitios” multinucleados

(Células gigante multinucleares).

- Cuerpos de Inclusión (CI): Intracitoplasmáticos e Intranucleares.

- PRUEBA BIOLÓGICA: Por lo general no se aplica.

- DETECCIÓN DE GENES: RT- PCR: Reverso transcriptasa de la Reacción en

Cadena de la Polimerasa.

DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO INDIRECTO

 DETECCIÓN DE ANTIGENOS (Ag):

- Inmunofluorescencia Directa (IFD).

- Virus neutralización (VN).

- ELISA.

- Reacción de Fijación del Complemento (RFC).

- Inmunoperoxidasa (IP).
 DETECCIÓN DE ANTICUERPOS (Ac):

- Inmunofluorescencia Indirecta (IFI).

- ELISA.

- Reacción de Fijación del Complemento (RFC).

- Suero Neutralización (SN).

- AGD.

Análisis serológico del líquido cefalorraquídeo (LCR) (Encefalitis)

INMUNOPROFILAXIS E INMUNOTERÁPIA:

 INMUNOPROFILAXIS
Se pueden encontrar vacunas monovalente, bivalentes, trivalentes,
pentavalentes y muchas otras, que contienen: Parvovirus, Moquillo, Leptospira,
Hepatitis, Parainfluenza, Coronavirus, entre otros agentes.
 INMUNOTERÁPIA
Si tenemos los sueros hiperinmunes los utilizamos como Inmunoterapia y en el
caso de no disponer de vacunas, nos pueden posibilitar una protección
aceptable en los casos de riesgos inminentes hasta tanto los podamos vacunar.