lOMoARcPSD|6486599

DETERMINACION DE GLUCOSA POR POLARIMETRIA

Laboratorio de Análisis Instrumental (Universidad Autónoma Metropolitana)

StuDocu no está patrocinado ni avalado por ningún colegio o universidad.

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)
 lOMoARcPSD|6486599

DETERMINACION DE GLUCOSA POR POLARIMETRIA

Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Iztapalapa
Laboratorio de Análisis Instrumental
Práctica 2
Roberto Edrey Blanco Carapia
15I

RESUMEN
Se determinó la concentración presente en un suero rehidratante (50 g/l) por medio de la
técnica de polarimetría, con el método de adiciones patrón, la concentración obtenida fue
de (43.53±0.81)g/l , valor que está muy próximo a lo reportado en la etiqueta del suero ,y
que además cumple con las normas mexicanas NOM-218-SSA1-2011 y NOM-031-SSA2-
1999 las cuales establecen que los sueros rehidratantes deben tener una concentración
de glucosa entre 20 y 80 g/l.

FUNDAMENTOS TEORICOS

Moléculas que son imágenes especulares, son un tipo de isómeros denominados

enantiómeros, dichos compuestos se caracterizan por tener las mismas propiedades
físicas, llamase punto de fusión, punto de ebullición, índice de refracción, densidad, etc.
Sin embargo, debido a que estas moléculas presentan actividad óptica, la cual se define
como la capacidad de una sustancia de desviar el plano de luz linealmente polarizada en
sentidos opuestos, es posible distinguir entre estos dos tipos de enantiómeros, este
proceso se logra usando una técnica denominada polarimetría.

Un polarímetro mide la rotación de la luz polarizada. este aparato consta de una celda
tubular o cubeta de muestra donde se dispone la sustancia quíral ( o una disolución de la
misma) cuya actividad óptica se va a medir de un dispositivo para hacer pasar la luz
polarizada a través de la solución y de un sistema para medir la rotación del plano de
polarización de la luz emergente(figura 1).Se filtra la luz de una lámpara de sodio para
que esté formada por una sola longitud de onda (monocromática), ya que la mayoría de
los compuestos giran el plano de polarización a diferentes longitudes de onda con
intensidad diferente .La longitud de onda que se utiliza con más frecuencia en polarimetría
es la que corresponde a la línea amarilla del espectro de emisión del sodio , denominada
línea D del sodio(ʎ=589 nm) (1).

La luz monocromática después de pasar por un polarizador pasa por medio de una celda
la cual contiene la muestra con la sustancia ópticamente activa, cuando la luz sale de la
muestra pasa a otro polarizador móvil el cual registra en ángulo producido por la actividad
óptica de la muestra.

En ocasiones la determinación cuantitativa de un análito presente en una muestra , da

como lugar a resultaos erróneos esto se debe a que parte de la solución en la que se
encuentra embebido el análito interfiere en la señal detectada por el equipo , a este efecto
se le denomina efecto matriz , para resolver esta dificultad se procede a usar un método
llamado de adiciones patrón , el cual consisten en añadir a cada solución patrón una
determinada cantidad conocida de la muestra que contiene el análito el cual se quiere

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

cuantificar (solución problema) , esto con el fin de que cada sistema tenga un ambiente
químico similar al análito en la muestra .

OBJETIVOS

1. Cuantificar la cantidad de glucosa presente en un suero, por medio de su actividad

óptica usando el equipo de polarimetría.

2. Estimar la concentración de glucosa de una muestra de suero por medio del método de
adiciones patrón.

3. Realizar el tratamiento de datos adecuado para expresar los resultados con sus
respectivas incertidumbres.

MATERIALES Y EQUIPO

Reactivos

Hidróxido de amonio (NH4OH)

Glucosa anhidra
Agua destilada
Suero

Material

Matraz volumétrico de 25 mL
Matraz volumétrico de 10 mL
Pipeta volumétrica de 1 mL
Celda para el polarímetro

Equipo

Balanza
Polarímetro

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Se procedió a preparar una solución de hidróxido de amonio 6N en 10 ml, posteriormente

se prepararon soluciones patrón de acuerdo a la tabla 1.

Tabla 1. Curva de calibración para Glucosa

Sistemas 0 1 2 3 4 5 6 7
Glucosa (g) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
V NH4OH 6 M (mL) 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
VH2O (mL) 25 25 25 25 25 25 25 25

Una vez preparadas las soluciones patrón, se disolvieron, y se dejaron reposar 30

minutos antes de realizar las mediciones de rotación. Posteriormente midió la señal de
cada sistema y se construyó la curva de calibración. Las muestras problemas, se
prepararon tomando x ml de un suero y de un refresco respectivamente, de tal manera
que las concentraciones se pudieran estimar por interpolación de la curva de calibración,
estas cantidades se aforaron con 25 ml de agua destilada y se le adiciono la misma
cantidad de hidróxido de amonio reportada en la tabla 1.

Por otra parte, se prepararon siete sistemas de adición patrón de acuerdo a la tabla 2.

Tabla 2. Curva de calibración para Glucosa Adiciones patrón

Sistemas blanc 0 1 2 3 4 5 6 7
o
Glucosa (g) 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
V NH4OH 6 M 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
(mL)
V 0 5 5 5 5 5 5 5 5
problema/mL
VH2O (mL) 25 25 25 25 25 25 25 25 25

RESULTADOS Y DISCUCIONES

Nuestro equipo trabajó esta práctica pero usando como muestra de glucosa, un refresco
de 600ml , pero cuando se realizaron las mediciones nos percatamos que la muestra de
refresco dio lugar a una rotación óptica negativa , lo que implicaba la existencia de otros
azucares , por lo tanto no fue posible llevar a cabo la cuantificación de la glucosa presente
en el refresco . Sin embargo, para este reporte retomamos los valores de la curva de
calibración de adiciones patrón del equipo de Rosalba .he aquí los resultados:

1. Curva de adiciones patrón

Las soluciones patrón se muestran en la siguiente tabla, con sus respectivas

concentraciones y rotaciones ópticas.

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

Tabla3.Soluciones patrón
sistema Concentración(c´)(g/ml) Rotación Óptica
0 0 1.311± 0.0005
1 0.02±0.00002 2.024± 0.0005
2 0.04±0.00004 2.76± 0.0005
3 0.06±0.00006 3.416± 0.0005
4 0.08±0.00008 3.942± 0.0005
5 0.1±0.0001 4.69± 0.0005
6 0.12±0.0001 5.231± 0.0005
7 0.14±0.0001 5.837± 0.0005

La curva de calibración es:

curva de calibracion adiciones patrón

7
6
f(x) = 32.16 x + 1.4
5 R² = 1
Rotación óptca

4 sistemas
Linear (sistemas)
3 extrapolacion
2
1
0
-0.1 -0.05 0 0.05 0.1 0.15 0.2
concentración(g/ml)

Figura1. Curva de calibración (adiciones estándar)

De la curva de calibración tenemos que de manera general los valores de las señal
debido a cada sistema, en conjunto presentar una tendencia lineal, tendencia que está
confirmada por el valor del coeficiente de correlación R2=0.9981.

Por otro lado el valor de la pendiente y la ordenada al origen de la regresión lineal son:

m=( 32.163 ± 0.570 ) URml / g ...(1)

b=( 1.4 ± 0.05 ) UR …(2)

2. Determinación de concentración en la muestra de jarabe

Mediante la extrapolación se obtuvo la concentración de la muestra de acuerdo a la

siguiente expresión:

−b
c´= =cx … (3)
m

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

Teniendo entonces que la concentración del jarabe es:

cjarabe=( 43.53 ± 0.81 ) g /l … ( 4 )

La etiqueta del suero establece que la concentración de glucosa corresponde a 50 g/l , el

valor obtenido no difiere mucho con el reportado en dicha etiqueta , de manera que el
método de adiciones patrón junto con la técnica de polarimetría son útiles para la
cuantificación de glucosa .

3. Determinación de los parámetros de desempeño analítico

Para la curva de calibración estándar, se obtuvieron los parámetros de desempeño

analítico, como la sensibilidad, el límite de detección y el límite de cuantificación los
cuales se muestran a continuación:

URml
sensibilidad =pendiente de la curva de calibracion=32.163 …(5)
g

La sensibilidad nos permite inquirir la magnitud de variación de la señal, debido a un

cambio finito de la concentración del análito, en nuestro caso la magnitud de la
sensibilidad es muy alta, lo que implica una fuerte correlación entre la rotación óptica con
la concentración de glucosa.

El limiten de detección es un parámetro que nos permite diferenciar a partir de qué valor
de señal o concentración este corresponde al análito y no al ruido u otros componentes
de la solución , los valores obtenidos para este trabajo se muestran a continuación:

LODy=b+3 Sy=1.4015 UR … (6)

3 Sy
LODx= =0.000046 URml /g …(7)
m

Por otro lado, los límites de cuantificación, nos permiten saber a partir de qué valor, es
posible determinar cuantitativamente el análito. Para nuestra curva de calibración
tenemos que:

LOQy=b+10 Sy=1.405 UR … (8)

10 Sy
LOQx= =0.000155URml / g …( 9)
m

De los valores de estos límites de detección y de cuantificación, tenemos que la curva de

calibración obtenida permite cuantificar concentraciones pequeñas de glucosa.

CONCLUSIONES Y PERPECTIVAS

De acuerdo con lo establecido por parte de las normas mexicanas (NOM-218-SSA1-2011

y NOM-031-SSA2-1999), las bebidas llamadas sueros rehidratantes deben contener
glucosa dentro de un intervalo de concentración de 20 a 80g/l de glucosa .En nuestro
caso la cantidad obtenida de (43.53±0.81)g/l está muy próxima a lo que indica la etiqueta

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

del suero que establece que contiene 50g/l , por lo tanto la concentración determinada
está dentro de lo establecido por las normas mexicanas.

De la técnica de polarimetría tenemos que es una técnica muy útil para la cuantificación
de glucosa, siempre y cuando no estén presentes otros azucares los cuales interfieran
con los valores de la señal. Para estos casos cuando está presente más de un tipo de
azúcar, como en el caso de algunos refrescos, una alternativa seria usar una técnica de
cromatografía.

En esta práctica solo se cuantifico la concentración de glucosa en el suero por medio del
método de adiciones patrón, también hubiera sido útil realizar la determinación de glucosa
pero por medio del método de adiciones estándar, y comparar los resultados obtenidos
por ambos métodos , y así conocer cómo afecta los componentes en los que esta
embebida la glucosa en el suero a las medidas de rotación óptica y comparar la
concentración obtenida entre ambos métodos para saber cual da la concentración más
proxima a lo reportado por parte del fabricante.

REFERENCIAS

1. L. G. Wade , Química Orgánica ,pág. 178-182,Pearson Prentice Hall, quinta edición

2004,España.

2. Norma Oficial Mexicana NOM-218-SSA1-2011: Productos y Servicios. Bebidas

Saborizadas No Alcohólicas, sus Congelados, Productos Concentrados para prepararlas y
Bebidas Adicionadas con Cafeína. Especificaciones y Disposiciones Sanitarias. Métodos
de Prueba.

3. Bruce.G.R .; Gill .P.S.J Chem.Educ.1999,76,805-806.

MEMORIA DE CÁLCULO

Las incertidumbres de tipo B se pasaron a tipo A , si y solo si la incertidumbre porcentual

fuera menor al 5% ,en la siguiente tabla se recogen las incertidumbres más importantes
utilizadas durante el tratamiento de datos.

Tabla4.Incertidumbres
masa glucosa adicionada(g) incertidumbr incertidumbre
eB A
0 0.0001 5.10204E-05
0.1 0.0001 5.10204E-05
0.2 0.0001 5.10204E-05
0.3 0.0001 5.10204E-05
0.4 0.0001 5.10204E-05
0.5 0.0001 5.10204E-05
0.6 0.0001 5.10204E-05
0.7 0.0001 5.10204E-05

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

volumen de suero(ml) incertidumbr incertidumbre

eB A
5 0.01 0.005102041
volumen aforo(ml) incertidumbr incertidumbre
eB A
25 0.06 0.030612245
volumen de hidróxido de amonio incertidumbr incertidumbre
agregado a la solución(ml) eB A
0.05 0.0006 0.0003
incertidumbre de rotación óptica(°)
0.0005

De la tabla anterior tenemos que la incertidumbre asociada a las medidas de rotación

óptica corresponde a 0.0005° . En el caso de las incertidumbres de las concentraciones (c
´) de cada sistema se procedió de la siguiente manera:

Del método de adiciones patrón tenemos que la ecuación de la recta obtenida por el
método de mínimos cuadrados tiene la siguiente forma:

R=mc´ +b … ( 10 )
Donde
CsVs
c´= … (11)
Vx

Por extrapolación se obtuvo c´, y su incertidumbre se calculó por la siguiente expresión:

(( ) ) (( ) ) (( ) )
2 2 2 1/ 2
Scs SVs SVx
Sc ´=c ´ ( + + ) …(12)
Cs Vs Vx

La concentración de la muestra se determinó con la siguiente expresión:

b
cmuestra= …(13)
m
Y su incertidumbre mediante la ecuacion14.

√ ( )
2 2
Sy 1 yprom
S cmuestra = + 2
…(14 )
m N m S xx

Y finalmente para poder evaluar Scmuestra se tuvieron que calcular los parámetros
estadísticos los cueles se reportan en la siguiente tabla;

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)

 lOMoARcPSD|6486599

Tabla5. Parámetros estadísticos

0.0168

17.411

0.54033

R2 0.9981

32.1625
m

0.0732

0.565

b 1.4

0.0472

Descargado por Valeria Marin (Valeria.marin00@usc.edu.co)