INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

QUIMICA ORGANICA
CUESTIONARIO “PRACTICA 5: Cromatografía”
ALUMNO: REYMUNDO EMMANUEL SEGURA GARCIA .
. & RUIZ GARCIA BRENDA
GRUPO: 2QM1 ; Equipo:10 FECHA: 04/11/2020

1. ¿Qué precauciones se deben tener al empacar una columna de cromatografía?

Se debe de tener precaución al empaquetar la columna adicionando adecuadamente la fase estacionaria,
en nuestro caso la silica gel, con el hexano asegurándose de mantener un goteo constante y revisando que
el hexano fluya por la columna cromatográfica y por el embudo de separación. También se debe estar
revisando que la columna no se “seque” es decir que siempre haya, por lo menos 0.5 cm por el nivel de la
fase estacionaria, del disolvente usado el hexano, ya que se puede agrietar. Mantener un goteo uniforme
en la llave de salida del disolvente. La columna se llena hasta tres cuartas partes de su capacidad. Es
importante conocer la polaridad del adsorbente para así elegir la polaridad del disolvente.

2. ¿Qué fracciones se separaron por cromatografía en columna, de los extractos de espinaca, jitomate
y cómo se identificaron?
De los jitomates obtuvimos licopenos, y de las espinacas: pigmentos, caroteno, clorofila a y clorofila b; y
mediante cromatografía en capa fina, obtuvimos la separación de sus componentes al pasar el disolvente
por el punto aplicado, y por cromatografía en columna obtuvimos fracciones coloridas, las cuales indican
el grado de separación.

3. Escriba ¿qué conclusiones se obtienen de la cromatografíaen capa fina y de la cromatografía en

columna?
En la cromatografía fina la separación se realiza por distancias mientras que en columna se hace
por volúmenes (de las fracciones separadas)En la cromatografía en columna la separación de varias
muestras, se realiza de forma secuencial, por lo que si tenemos dos muestras cada una de ellas
deberá someterse individualmente al mismo proceso de introducción en la columna; en la
cromatografíade placa fina por el contrario, la separación de varias muestras se puede realizar deforma
simultánea, y todas ellas sometidas al mismo tiempo al proceso separativo esto supone un ahorro de
tiempo considerable.

4. Definir los siguientes términos: Adsorción, partición, eluyente, eluato, disolvente, fase movil, fase
estacionaria, Rf.
• Adsorción: Fenómeno de acumulación de partículas sobre una superficie. La sustancia que se
adsorbe es el adsorbato y el material sobre el cual lo hace es el adsorbente. La adsorción se utiliza
para eliminar de forma individual los componentes de una mezcla gaseosa o liquida. El
componente a separar se liga de forma física o química a una superficie solida. Ejemplo: Carbon
activo.
• Partición: Fenómeno de reparto entre las 2 fases debido a su solubilidad. La solubilidad es un
medida de la polaridad y de otro tipo de interacciones moleculares.
• Eluyente: Se trata de un disolvente que se usa para llevar los componentes de una mezcla a través
de una fase estacionaria.
• Eluato: Cada una de las sustancias que migran a través del lecho de la fase estacionaria
(impulsadas por la fase móvil) dentro de un sistema de separación cromatográfico.
 • Disolvente: Sustancia que permite la dispersión de otra en su seno. Es el medio dispersante de la
disolución, normalmente establece el estado físico de la disolución, también es el componente de
la mezcla que se encuentra en mayor proporción. Las moléculas de disolvente ejercen su acción
al interaccionar con las del soluto y rodearlas (se conoce como Solvatacion).Solutos polares serán
disueltos por disolventes polares al establecerse interacciones electrostáticas entre los dipolos, los
solutos no polares disuelven las sustancias no polares por interacciones entre dipolos inducidos.
• Fase movil: Puede ser un liquido o un gas y su función es transportar a los componentes de la
mezcla a través del sistema cronomatografico.
• Fase estacionaria: Permanece fija y consiste en partículas, generalmente solidas, pequeñas y con
una superficie microporosa de forma que presenta un amplio desarrollo superficial. Puede estar
empaquetada en forma de columna o extendida.
• Rf: Relación de frentes. Es el cociente de la división fs/fd (distancia recorrida por el soluto entre
distancia recorrida por el disolvente). Se utiliza con fines de identificación de compuestos cuando
se tienen patrones de referencia.

5. Especifica en que parte de la practica tienen aplicación los términos anteriores.

o Adsorción: Experiencia 1 cromatografia en placa fina, la mezcla hexano-acertona se encuentra
adsorbido por la cromato placa de silica gel.
o Partición: Durante la experiencia 2 separación de carotenos por cromatografia, ya que cada
componente se separaron en fases.
o Eluyente: Experiencia 1 cromatografia en placa fina, el eluyente era la mezcla hexano-acetona.
o Eluato: Experiencia 1 cromatografia en placa fina, el eluato es el concentrado de carotenos que
se utilizaron.
o Disolvente: Durante la cromatografia en columna, el disolvente fue la mezcla hexano-acetona 1:1
o Fase movil: Experiencia 1 cromatografia en placa fina
o Fase estacionaria: Experiencia 1 cromatografia en placa fina, la silicia gel era nuestra fase
estacionaria.
o Rf: Experiencia 1 cromatografia en placa fina, al momento de hacer los cálculos respectivos.

6. Hacer una comparación entre la cristalización, extracción, destilaciones y cromatografia, en cuanto la

eficiencia como métodos de separación y purificación.

La cristalización es un método de purificación de sólidos y con un buen rendimiento. El método de

extracción se utilizo para la separación liquido-liquido en base a la elección de un buen disolvente, la
extracción resulta muy eficiente para este tipo de separación.
Las destilaciones requieren de mucho cuidado y tiempo ya que como notamos en practicas anteriores
una destilación lenta y con un numero mayor de platos teóricos en comparación a una destilación simple
y muy rápida, muestra la destilación fraccionada mayor eficacia.
Cada método tiene buena eficiencia según se utilice en el proceso correcto, es decir, depende del estado
de agregación de la sustancia a separar y purificar, así como del estado en el que se encuentran los
contaminantes y los disolventes empleados.

7. Establecer una distinción clara entre cromatografia en columna y capa fina e indicar en que casos es
preferible alguno de los 2 métodos.
Un proceso cromatografico en columna tiene ventaja de ser separación a capa preparativa y no es de
aplicación analítica como la cromatografia en capa fina, es decir, la cromatografia en capa fina sirve solo
para verificar la pureza de un compuesto, de hecho si es una sustancia que se separo por columna
cromatografica se puede llevar a cromatografia de capa fina verificar la pureza de cada fracción obtenida
de la columna.

Bibliografias:
▪ William H. Brown. Química Orgánica 2da. Edición CECSA
▪ Francis A. Carey. Química Orgánica. McGraw-Hill. México. 6a edición. 2006
▪ Fessenden R.J. and Fessenden J.S.. (1993). Organic Laboratory Techniques. USA: Brooks/Cole.