Guía 10 Q.

Org

UNMSM-FQIQ

EP.07.3 INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

IAO036 Laboratorio de Química orgánica

Practica N° 10 (MODALIDAD NO PRESENCIAL)

REACCIONES QUÍMICAS DE COMPUESTOS ORGÁNICOS NITROGENADOS :

PROPIEDADES DE LA UREA ,REACTIVIDAD DE Alfa-AMINOÁCIDOS Y

PROTEINAS

PRIMERA PARTE: PROPIEDADES DE LA UREA

I. COMPETENCIAS

1. Conoce propiedades físicas y químicas de la Urea

2. Reconoce la importancia de esta sustancia tanto a nivel orgánico, como

medicinal e industrial.

II. INTRODUCCION

La urea es un compuesto químico cristalino e incoloro; de fórmula CO(NH2)2. Se

encuentra en mayor proporción en la orina, en el sudor y en la materia fecal. Es el

principal producto terminal del metabolismo de las proteínas en el humano y en los demás

mamíferos. También es conocida como carbonildiamida o ácido carbamídico. El nombre

IUPAC es diaminocetona.

Usos

Es el fertilizante nitrogenado más valioso sin lastre, contiene hasta un 46% de

nitrógeno. También se utiliza como aditivo en la alimentación del ganado y sirve de

materia prima para la industria de materiales plásticos, colas sintéticas, industria textil, y

farmacéutica; de aquí que su producción industrial alcance varias decenas de millones de

toneladas anuales. La carbamida se obtiene sintéticamente a partir del Amoníaco (NH3)

y el Dióxido de carbono (CO2) cuya interacción comprende dos etapas.Estas reacciones

se verifican en los procesos industriales a temperaturas de 180 a 200 oC y presión de

18*106 - 2*107 N/m2 ( 200 atmósferas).

Aplicaciones

Más del 90% de la producción mundial de carbamida se destina a su uso como fertilizante,

el cual se aplica tanto al terreno como a la superficie foliar de las plantas através del riego.

La fácil solubilidad en el agua permite que sea absorbida por las raícesde las plantas.

Su utilización en la alimentación del ganado se fundamenta en que las bacterias de los

estómagos de los mamíferos rumiantes son capaces de metabolizar la urea y aportar

nitrógeno al organismo lo que redunda en un mayor rendimiento de proteínas.

A partir de la carbamida se obtienen resinas para producir materias plásticas valiosas como

los llamados plásticos amínicos, losas de viruta de madera, colas sintéticas y compuestos

para impregnar tejidos. También se emplea en la fabricación de fibras sintéticas conocidas

como Urilón. La carbamida tiene una amplia aplicación en la industria farmacéutica estando

presente en la composición química de medicamentos como la Carbamazepina y otros.

III. PARTE EXPERIMENTAL:

1. Propiedades físicas de la Urea

(completar la información)

2.Datos de solubilidad de la Urea

*en agua:_________

*en alcohol:_______

3.Reacción de Biuret

✓ En un tubo de prueba colocar 2 ml. de sol. acuosa de Urea al 5%.

✓ Agregar luego 1mL de NaOH al 10% y finalmente 0.5mL de solución de

CuSO4 al 5%.
✓ Anotar los cambios producidos y proponer la respectiva reacción química.

4. Reacción de hidrolisis de Urea

a)En medio Acido.

b)En medio Básico.

Cuestionario:

1. ¿Cuándo y en donde aplicar urea?

2. ¿Conceptualizar la urea como fertilizante?

3. ¿Cómo se obtiene la urea industrialmente?

SEGUNDA PARTE: REACTIVIDAD DE AMINOACIDOS

IV. COMPETENCIAS

1. Conoce los alfa-aminoácidos proteicos

2. Distingue a los alfa- aminoácidos , por sus reacciones más importantes de color:

Biuret, Ninhidrina y por los grupos presentes en su Molecula : Diazotacion

V. INTRODUCCION

Los aminoácidos son sustancias consideradas como iones dipolares , pues en un

mismo carbono contiene ionizados un grupo carboxilo y un grupo amino primario.

Se trata del monómero de una proteína y a estas sustancias se les llama : alfa-

aminoacido, pues se considera que se numeran desde el carbono primero o alfa de

esta molecula, Existen contados aminoácidos procedentes de las proteínas. Por este

motivo algunos deben proceder de la alimentación para poder disponerlos , de ahí que
se les designe Aminoácidos esenciales.

VI. PARTE EXPERIMENTAL:

Materiales y Reactivos

✓ Tubos de prueba

✓ Goteros

✓ Frascos de reactivos y de muestras

✓ Cubos de hielo

✓ Termómetro de -10°C hasta 100°C

✓ Sol. CuSO4 al 1%

✓ Sol, NaOH al 10%

✓ Sol.NaNO2 al 5%

✓ Sol. HCl. al 5%

✓ Sol. de Ninhidrina al 0.1%

✓ Las muestras serán ; solución acuosa de alfa-aminoácidos al 1% de

Alanina ,Valina , Acido Glutámico, y Lisina.

Reacciones:

1)Reacción de Biuret para alfa. Aminoácidos:

En tres tubos de prueba previamente rotulados Colocar 1mL. de muestras

de los siguientes Alfa-aminoacidos: Alanina, Acido Glutámico , Lisina

Se añade luego a cada tubo 2mL de NaOH al 10%.se agita vigorosamente.

Finalmente se agrega gota a gota un mL de Sol. de CuSO4 al 1%.

Y agitando la mezcla cuidadosamente , anote el resultado y proponga las

respectivas reacciones químicas producidas.

2. Reacción con el acido Nitroso:

Esta reacción permite visualizar la presencia

del grupo Amino primario presente en un alfa.-aminoácido. En un tubo de prueba ,

rotulado con el nombre del Aminoácido Valina , y enfriado previamente hasta 4°C

agregamos ; 2mL de solución al 1% del aminoácido Valina, 2ml. de NaNO2 al 5%

y en seguida 3mL. de HCl al 5% , se controla que la temperatura descienda hasta

4°C y luego se deja que el Baño de enfriamiento ascienda lentamente en

Temperatura hasta 10°C. (CONTROLE LA TEMPERATURA CON TERMOMETRO ).

Anote sus observaciones experimentales y explique los cambios producidos en el

Tubo de reacción acompañando con la reacción química respectiva.

3. Reacción con la Ninhidrina:

El compuesto Ninhidrina forma un complejo de color con los Alfa - aminoácidos.

Coloque en tres tubos de prueba previamente rotulados las muestras de 5mL

de solución de alfa- aminoácidos :Valina, Acido Glutámico y Lisina , luego

agregue a cada tubo 0.5mL de solución de Ninhidrina al 0.1 %.

Coloque luego los tres tubos en Baño de calentamiento hasta 95°C.

Anote sus observaciones y proponga las reacciones químicas producidas.

TERCERA PARTE : REACTIVIDAD DE PROTEINAS.-

PRIMERA SECCION : REACCIONES DE PROTEÍNAS

I. COMPETENCIAS

1. Identifica los compuestos proteínicos mediante reacciones de coloración.

2. Comprende el fenómeno de coagulación ( desnaturalización) de las proteínas.

II. INTRODUCCION

Las proteínas son polímeros formados por un gran número de L-aminoácidos unidos

entre sí mediante enlace peptídico

Enlace Peptídico (Enlace Amida): Se forma por la eliminación de una molécula de

agua entre el grupo amino de un aminoácido y el grupo carboxilo de otro aminoácido, tal
como se ilustra en el esquema anterior.

Cuando este proceso se realiza repetidamente se forma una gran molécula llamada

polipéptido.

Las proteínas contienen C, H, N, O, a menudo S, P y pequeñas cantidades de metales

como Mn, Fe, Mg, y realizan funciones muy importantes en los seres vivos, por ejemplo:

ENZIMAS:

✓ Glucosidasas : Hidrolizan los enlaces glucosídicos

✓ Lipasas : Catalizan los enlaces esteres glicéridos

✓ Deshidrogenasas : Transfieren protones desde un sustrato

PROTEINAS ESTRUCTURALES:

✓ Queratina : Pelo, uñas, cuernos, pezuñas.

✓ Colágeno : Tendones y cartílagos.

PROTEINAS DE ALMACENAMIENTO:

✓ Caseína : Una proteína nutriente de la leche.

✓ Ferritina : Almacena hierro.

PROTEÍNAS DE TRANSPORTE:

✓ Hemoglobina : Transporta oxígeno en la sangre

✓ Mioglobina : Transporta oxígeno en el músculo

✓ Seroalbúmina: Transporta ácidos grasos y actúa como tampón

Cada proteína tiene una función bioquímica específica. Cada una es un polipéptido

con una secuencia de aminoácidos propia y única que determina exactamente como se

pliega en una conformación tridimensional y como realiza su tarea bioquímica específica.

Actualmente hay más de 26 aminoácidos reconocidos, de éstos unos 10 se designan como

aminoácidos esenciales porque no pueden ser sintetizados por el organismo, sino que
deben ser proporcionados como tales por la dieta diaria y son: arginina, histidina, leucina,

isoleucina, lisina, metionina, fenilalanina, triptófano, treonina, valina, que varían algo,

según la especie animal.

Las proteínas se pueden clasificar desde diferentes puntos de vista. Por ejemplo,

considerando su composición puede ser: Proteína Simple, si por hidrólisis completa da

solo a- aminoácidos, ejemplo: insulina. Desde este mismo punto de vista puede ser:

Proteína conjugada si está compuesta de una proteína simple combinada con una

sustancia no aminoácido característica llamada grupo prostético, e0jemplo: hemoglobina.

Otra clase de proteínas derivadas que abarca un grupo bastante heterogéneo de sustancias

que se forman cuando se alteran las proteínas por tratamiento físico o químico, por

ejemplo, la albúmina de huevo coagulada, es una sustancia de este tipo.

Las propiedades físicas de las proteínas reflejan su gran tamaño. Existen en solución

como partículas coloidales y muestran propiedades asociadas al estado coloidal. La

exposición al calor o a pH extremos produce de ordinario cambios no hidrolíticos bastante

drásticos en la estructura de la proteína, la presión, irradiación, ácidos fuertes u otros

agentes químicos logran la desnaturalización de la proteína, es decir causan un cambio

tan profundo en la proteína que no es posible restaurar su estructura a su forma anterior.

La desnaturalización de proteínas está relacionada con cualquier modificación de su

estructura, sin rompimiento del enlace peptídico.

Las proteínas son anfóteras, propiedad que deriva de la presencia de los grupos

ácidos (carboxilo -COOH) y básicos (amino -NH2), simultáneamente en la molécula,

cuya interacción intramolecular (ácido-base) origina una forma dipolar llamada

Zwitterión, cuyo valor de pH se llama punto isoeléctrico, y cualquier variación del pH

del medio dará lugar a predomine una de las cargas, de aquí que se puede comportar como

ácido o base, según el pH del medio. Así:

Las proteínas pueden ser desdobladas para crear formas intermedias de diferentes
propiedades y tamaños. Los productos de la degradación proteica en orden decreciente de

tamaño son: proteínas, proteosas, peptonas, polipéptidos, péptidos, aminoácidos,

amoniaco y nitrógeno elemental.

III. PARTE EXPERIMENTAL:

Materiales:

✓ Tubos de ensayo.

✓ Gradilla.

✓ Vasos.

✓ Pipetas.

✓ Pizetas.

✓ Cocinilla Eléctrica.

✓ Papel de filtro

Reactivos:

✓ Etanol.

✓ HCI

✓ H2SO4

✓ HNO3

✓ CCl3COOH

✓ NaCl

✓ NH4OH

✓ Albúmina de huevo.

✓ NH4CI

✓ Pb(CH3COO)2

✓ HgCl2
✓ CUSO4

✓ CH3COOH

✓ NaOH

✓ Ninhidrina.

Procedimiento Experimental N°1: Reacciones de Desnaturalización por

Acción de los Ácidos y Solventes Orgánicos

➢ Fundamento: Los ácidos reaccionan con las proteínas causando su

desnaturalización, debido a que los protones se unen a los grupos

carboxilatos negativo cambiando el valor natural de la carga neta de

la proteína, provocando su precipitación.

Los disolventes orgánicos favorecen las fuerzas de atracción mutuas

de moléculas de proteína adyacentes, lo cual ayuda a su precipitación.

➢ Procedimiento:

1. Coloque en 5 tubos de ensayo 1mL de albúmina y adicione a cada uno 1mL de los
siguientes ácidos. Observe la proteína y anote en la tabla las características del precipitado.

Etanol 96% HClcc H2 SO 4 CH3 CH3COCl 10%

cc COOH cc

2. Al coagular las proteínas, estas se desnaturalizan, ¿Qué entiende por desnaturalización?

3. Mencione dos cambios que observa entre la proteína nativa y desnaturalizada.

Procedimiento Experimental N°2:

Reacciones de Precipitación: Sales Neutras y Metales Pesados.

➢ Fundamento: Las sales de metales pesados, plomo, plata, mercurio, y cobre son de ordinario
insolubles. Las soluciones de estos iones suelen precipitar a las proteínas debido a que los iones
metálicos positivos

reaccionan con las cargas negativas de las proteínas para formar sales.

Por otro lado, las proteínas son coloides hidrofílicos y al dispersarse en medio acuoso absorben gran
cantidad de agua, pero las sales neutras concentradas desplazan el agua del coloide (efecto salino) no
precipita.

➢ Procedimiento:

1. Coloque en 5 tubos de ensayo 1mL de albúmina y adicione a cada uno 1mL de las
siguientes soluciones de sales al 1% . Observe el comportamiento de la proteína y anote
en la tabla las características del precipitado.

NaCl IK AgNO3 Acetato

de Plomo HgCl2

2. ¿Por qué los metales pesados se enlazan a las proteínas?

Procedimiento Experimental N°3:

Reacción Xantoproteica.

➢ Fundamento: Cuando se calientan proteínas que contienen grupos aromáticos con ácido nítrico
concentrado se vuelven amarillas. La reacción química que produce el color es la nitración de
compuestos aromáticos. Cuando se trata de la presencia de tirosina, los nitrocompuestos formados se
convierten en sales de color anaranjado con la adición de un álcali, más cuando el aminoácido
presente es fenilalanina no se produce cambio de coloración, es decir no hay formación de sal.

➢ Procedimiento:

1. En un tubo de ensayo mida 2mL de proteína y añada 1mL de HNO3 cc

2. Caliente ligeramente y observar una coloración amarilla, sin absorber los vapores nitrosos.

3. Luego agregue 2 lentejas de NaOH, y observar que el precipitadose tornará anaranjado.

Procedimiento Experimental N°4:

Identificación de Proteínas por Reacciones de Color

A. Reacción de Ninhidrina:

➢ Fundamento: La Ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) es un agente oxidante poderoso

reacciona con todos los a- aminoácidos a un pH entre 4 y 8 causándoles descarboxilación (formación
de anhídrido

carbónico) e hidrólisis teniendo como producto un aldehído y una aminodicetona que se condensa con
otra molécula de ninhidrina formando un compuesto color azul violeta para casi todos los
aminoácidos, excepto prolina, hidróxiprolina y L-asparagina en los cuales se produce un color
amarillo.

Esta reacción se efectúa también con aminas primarias y amoníaco,

pero sin desprendimiento de CO2.

➢ Procedimientos:

1. Coloque en un tubo de ensayo 1mL de proteína.

2. Luego añada 5 gotas de ninhidrina al 1%

3. Lleve a baño maría la muestra y observe la coloración que

presenta.

4. ¿Qué tipos de reacciones se produce entre el aminoácido y la

ninhidrina?

B. Reacción de Biuret:

➢ Fundamento: Las sustancias que contienen dos o más enlaces

peptídicos producen color violeta con sulfato de cobre en medio

alcalino. El color es resultado de la formación de un complejo entre el

ion cúprico y varios de los enlaces de peptídicos de la proteína.

➢ Procedimientos:

1. En un tubo de ensayo coloque 1mL de proteína.

2. Agregue 1mL de CuSO4 al 5% y NaOH en exceso.

3. Deje en reposo 2 minutos.

4. Observe una coloración que varía de rosado a púrpura, dependiendo del número de enlaces
peptídicos

que tenga la muestra.

5. ¿Qué parte de la estructura de proteína reacciona con el Reactivo Biuret?

6. Esquematice un enlace peptídico.

C. Reacción de Identificación de Proteínas con Aminoácidos Azufrados:

➢ Fundamento: Reacción Cualitativa que permite el reconocimiento de proteínas que presentan

azufre en su constitución (cistina, metionina, cisteína). La proteína es previamente tratada con un
álcali fuerte a través del cual pierde el átomo de azufre formado un sulfuro de sodio él mismo que
reacciona con acetato de plomo para formar un precipitado color negro de sulfuro de plomo.

➢ Procedimientos:

1. Añadir al tubo con muestra problema 1mL de NaOH y 2mL de

Pb (CH3COO)2 al 10%, mezclar y llevar a baño maría.

2. Si la proteína contiene aminoácidos azufrados se formará un

precipitado de color negro.

IV. DISPOSICION FINAL DE LOS RESIDUOS GENERADOS 0EN LA PRÁCTICA

. Residuos de HCl Recipiente de vidrio

Residuos de Reactivo Biuret.

Residuos de Reactivo CCl3COOH.

Residuos de Reactivo NH4OH

Residuos Ninhidrina
Cuestionario:

1. ¿Que se conoce como aminoácidos esenciales para el ser humano?.Escriba

la fórmula de todos ellos.

2. Indique la clasificación general de los grupos de alfa-aminoacidos

3. Explique a que se denomina punto isoeléctrico de un alfa- aminoácido.

mencione ejemplos de :

a) Aminoácidos simples

b) Aminoacidos básicos

c) Aminoacidos ácidos

4. ¿Por qué se consideran a los alfa- aminoácidos como iones dipolares?

5. Indique el contenido en alfa-aminoácidos de:

- Carne de Anchoveta , - Carne de Pollo, - Carne de Res

6. Mencione 4 proteínas con alto contenido de aminoácidos azufrados

7. Cuál es el punto isoeléctrico del péptido - Glu-His-Pro.Asp-Lis-Asp-Gli.

OOOO------------------------------------------------------------------------------------------------------------OOOO

Lima , Mayo 2021

Introducción -----Mateo

Conclusión ----Diana

Recomendaciones----Diana

PRIMERA PARTE

Parte experimental:

Propiedades físicas de la urea y datos de la solubilidad de la urea ----Mateo

Reacción de Biuret ----Diana

Reacción de Hidrólisis de la urea a, b ---Daniel

Cuestionario 1(Daniel), 2 (Marielena), 3(Enzo)

SEGUNDA PARTE

Materiales y reactivos (Enzo)

Reacción de Biuret para alfa. Aminoácidos: ---Enzo

Reacción con el acido Nitroso: ----Daniel

Reacción con la Ninhidrina: (Marielena)

TERCERA PARTE

Materiales y reactivos (Marielena)

Procedimiento Experimental N°1: Reacciones de Desnaturalización por Acción de los Ácidos y

Solventes Orgánicos 1a, 1b(Marielena), 1c, 1d, 1e (Mateo), 2 , 3

Procedimiento Experimental N°2:Reacciones de Precipitación: Sales Neutras y Metales

Pesados. 1a, 1b, 1c(Diana), 1d, 1e , 2---Enzo

Procedimiento Experimental N°3: Reacción Xantoproteica. ---Daniel

Procedimiento Experimental N°4:

A. Identificación de Proteínas por Reacciones de Color ---Daniel

B. Reacción de Biuret: ----Diana
C. Reacción de Identificación de Proteínas con Aminoácidos Azufrados:
-Mateo---Mencionar los residuos generados en la práctica

Cuestionario 1, 2 (Mateo), 3, 4, 5(Marielena), 6, 7(Enzo)