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Catedra de Inmunología - Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí.

TECNICAS DE DIAGNOSTICO EN INMUNOLOGIA


María Cedeño Velez1, José Delgado Muentes1, Andrea Medranda Cevallos1, Helen Morales Garcia1,
Marcela Rodríguez Palacios1, Jorge Cañarte Alcívar2-3
1Estudiantede la Escuela de Laboratorio Clínico. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí, Portoviejo
– Manabí – Ecuador
2Docente Investigador. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí. Portoviejo – Manabí – Ecuador
3Medico especialista en Inmunología Clínica, StemMedic, Manta – Manabí – Ecuador.

Resumen. - En los últimos años, los avances inmunológicas. La inmunocromatografía es una


tecnológicos han permitido el desarrollo de de las técnicas inmunológicas cuya principal
técnicas para el diagnóstico de múltiples ventaja es la rapidez para el diagnóstico de
enfermedades, estas técnicas se fundamentan en enfermedades. El objetivo de esta revisión fue
la afinidad antígeno-anticuerpo. El antígeno es una explorar y analizar información específica sobre
sustancia que, al introducirse en el organismo, técnicas de diagnóstico en inmunología,
induce una respuesta inmunitaria, provocando la destacando las principales pruebas y
formación de anticuerpos. Un anticuerpo es una procedimientos, para lo cual se ha realizado una
gammaglobulina elaborada por las células búsqueda sistemática de libros y artículos para
plasmáticas en respuesta a un antígeno. Estas fortalecer el carácter científico de la investigación.
técnicas inmunológicas han sido de gran ayuda
para las enfermedades autoinmune. La
sensibilidad y especificidad en la detección de los Palabras claves. – Técnicas,
anticuerpos específicos también ha aumentado, inmunocromatografía, inmunofluorescencia,
dado que las nuevas técnicas permiten un contrainmunoelectroforesis, antígeno.
diagnostico con mayor certeza. La técnica de la
inmunofluorescencia indirecta es la más utilizada
debido a su fácil manejo y estandarización. En el
método ELISA la modalidad más frecuente para la
Introducción.- Investigar enfermedades
determinación de antígenos es el ELISA
que modifican principalmente el sistema
"sándwich" directo. Para los antígenos puros o
inmunológico es un desafío importante para los
totales se utiliza la prueba de
médicos, ya que generalmente requiere pruebas
Contrainmunoelectroforesis, técnica que permite
complementarias específicas y costosas.
una rápida detección de anticuerpos o antígenos
microbianos solubles encontrados en fluidos En este sentido, es factible dividir las
corporales y tejidos. Las técnicas de aglutinación enfermedades inmunológicas en cuatro
se basan en la reacción antígeno-anticuerpo, son categorías: inmunodeficiencia, enfermedades
la base de la mayor parte de las técnicas autoinmunes, enfermedades alérgicas y
enfermedades tumorales, por lo que es factible

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orientar la investigación de laboratorio desde forma específica, gracias a la correspondencia


métodos clínicos adecuados (Carla Bastías O., entre sus estructuras. (1)
2015) (Carla Bastías O., 2015).
Durante los últimos años el avance tecnológico ha
Actualmente, el soporte de laboratorio para el permitido desarrollar técnicas que ayudan al
diagnóstico de enfermedades autoinmunes diagnóstico de múltiples enfermedades. En el caso
incluye un gran número de tecnologías que de las enfermedades autoinmunes, las técnicas
permiten la identificación y confirmación de inmunológicas son de gran ayuda ya que permiten
antígenos específicos que han sido identificados. la detección de varios auto anticuerpos
Además, en las últimas décadas, este tipo de simultáneamente a partir de volúmenes de
tecnologías han evolucionado significativamente muestra pequeños.
con el desarrollo de pruebas con mayor
Aunado al desarrollo de las nuevas técnicas, la
especificidad y sensibilidad. Las técnicas más
sensibilidad y especificidad en la detección de las
utilizadas son: inmunofluorescencia indirecta (IFI),
especificidades de los anticuerpos también han
ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
ido en aumento, de tal manera que el clínico
(ELISA), ensayo multiplex y
puede contar con pruebas que le permiten hacer
electroinmunotransferencia (EIT). Cada uno de
los diagnósticos tempranos con mayor certeza y
ellos es diferente, pero conservan la base general
hacer también el seguimiento del curso de la
para reconocer la unión antígeno-anticuerpo, por
enfermedad en función de la variación de los
lo que presentamos las características más
anticuerpos presentes en las muestras de los
importantes de estas pruebas. (Diego F.
pacientes.
Hernández Ramírez, 2010)
Cabe destacar que las nuevas técnicas de
laboratorio que se utilizan para el apoyo en el
Técnicas de diagnóstico en inmunología. diagnóstico de las enfermedades autoinmunes ya
no son exclusivas de laboratorios de investigación,
Las técnicas de detección de antígeno son técnicas sino que, por su control de calidad, facilidad de
inmunológicas que se fundamentan en la afinidad
estandarización y reproducibilidad pueden usarse
antígeno-anticuerpo. Definiríamos el antígeno en laboratorios clínicos medianos y pequeños.
como aquella molécula estructural o metabólica
de origen microbiano que es reconocida como Inmunofluorescencia indirecta
extraía por el organismo humano y que es capaz La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es una de
de desencadenar una respuesta inmunitaria. las técnicas más utilizadas en los estudios de
Por otro lado, un anticuerpo es una autoinmunidad debido a su fácil manejo y
gammaglobulina sintetizada por las células estandarización. Sin embargo, la lectura e
plasmáticas en respuesta a la estimulación interpretación requieren de amplia experiencia.
ejercida por un antígeno, con el que reacciona de

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La técnica se basa en el reconocimiento de los la enzima. Por último, se añade el sustrato


anticuerpos que reconocen estructuras incoloro que, por acción de la enzima, dará un
antigénicas celulares nativas. La interacción se producto coloreado que producirá un color
evidencia por medio de un anticuerpo observable a simple vista y cuantificable mediante
antiinmunoglobulina humana, producido en un espectrofotómetro. (4)
conejo, cabra o cobayo, dirigido contra las
Se han desarrollado varios paquetes diagnósticos
fracciones constantes (Fc) de las
basados en este tipo de método para la
inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM. (2)
identificación de patógenos y toxinas tales como
En la inmunofluorescencia indirecta el anticuerpo Salmonella spp., Escherichia coli, enterotoxinas
empleado no está marcado con ninguna sustancia, estafilocóccicas, entre otros.
revelándose la presencia del antígeno al emplear
El método para la determinación de la avidez del
un segundo anticuerpo marcado con un
enlace de IgG específica es un ensayo indirecto
fluorocromo frente al anticuerpo primario. (3)
que consiste en un enzimoinmunoanálisis. El
La interacción se evidencia por medio de un antígeno se emplea para recubrir los pocillos (fase
anticuerpo antiinmunoglobulina humana, sólida). La presencia de enlaces fuertes entre
producido en anticuerpos IgG y antígeno (es decir la avidez de la
conejo, cabra o IgG) en una determinada muestra positiva para
cobayo, IgG se detecta comparando la señal de una
dirigido contra muestra de referencia (es decir no tratada) con la
las fracciones señal de la misma muestra tratada con urea, que
constantes (Fc) disocia los enlaces débiles entre IgG y el antígeno.
de las (5)
inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM.

Determinación de antígenos por ELISA

La modalidad más frecuente del método ELISA


para la determinación de antígenos es el modelo
ELISA "sándwich" directo. En este modelo, el Ac
específico para la Ag de interés se encuentra
adsorbido en un soporte sólido sobre el cual se
añadirá la muestra biológica. En el caso de que en Contrainmunoelectroforesis
dicha muestra se encuentre la Ag, quedará
capturado en la placa y será puesto en evidencia La prueba de Contrainmunoelectroforesis (CIEF)
tras la adición de otro Ac específico conjugado con es una técnica de inmunoprecipitación que utiliza

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antígenos puros o totales, y permite la rápida a través del uso de partículas que están
detección de anticuerpos o antígenos microbianos recubiertas por antígeno o por anticuerpo. (7)
solubles en una variedad de fluidos corporales y
tejidos. (6)

En un par de pocillos practicados en un gel de


agarosa se enfrentan la muestra en la cual
deseamos estudiar la presencia de antígeno y el
antisuero homólogo. Al aplicar un campo eléctrico
a través del gel, el antígeno migra hacia el pocillo
del antisuero y las inmunoglobulinas hacia el del
antígeno, bien como consecuencia de la carga
eléctrica o bien arrastradas en sentido contrario
por el flujo osmótico que se establece en el
Inmunocromatografía
interior del agar.
Es una técnica inmunológica que permite
visualizar la reacción antígeno-anticuerpo por la
acumulación del oro coloidal del conjugado en
zonas específicas del papel de nitrocelulosa donde
se fijan previamente anticuerpos de captura. (8)

En la actualidad, esta técnica se viene utilizando


para el diagnóstico rápido de varias
enfermedades, a través de la detección de
Técnicas de aglutinación antígenos en diversos líquidos biológicos, tales
Las reacciones de aglutinación y de precipitación como en infecciones por Estreptococos b-
son la base de la mayor parte de las técnicas hemolítico, Chlamydia, virus de la hepatitis,
inmunológicas. Su principio se basa en la reacción malaria, etc.
antígeno-anticuerpo.

Las técnicas de aglutinación son sólo


semicuantitativas y algo más difíciles. La
aglutinación de los antígenos nativos insolubles o
de las partículas recubiertas por el antígeno puede
evaluarse a simple vista con o sin la ayuda del
microscopio. Entre las ventajas de las reacciones
de aglutinación están su alto grado de sensibilidad
y la enorme variedad de substancias identificables

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donde la usamos es en la inmunocromatografía


para la determinación de pruebas en las que
necesitamos un resultado rápido y una técnica
Conclusiones. - Se puede acotar que las poco invasiva, un claro ejemplo son las pruebas
técnicas de diagnóstico en el área de la rápidas para coronavirus.
inmunología son de suma importancia hoy por
hoy, dichas técnicas han evolucionado, son menos
invasivas y nos facilitan la determinación de las
enfermedades autoinmunes para que se pueda
emitir un tratamiento. Como se habló
anteriormente existen múltiples técnicas, sin
embargo todas tienen el mismo fundamento que
radica en el reconocimiento de la unión antígeno-
anticuerpo, además de que actualmente poseen
una mayor especificidad y sensibilidad o en otras
palabras nos brindan más precisión en sus
resultados.

Por su fácil manejo, una de las técnicas más


utilizadas es la inmunofluorescencia indirecta y
esta tiene muchos campos de aplicación como por
ejemplo su uso en el área de microbiología al
momento de diagnosticar algunos tipos de
bacterias con sus cultivos que en estado positivo
emiten fluorescencia color verde manzana. La
inmunofluorescencia directa se basa en el
reconocimiento de anticuerpos que reconocen
estructuras antigénicas nativas, esta interacción
se da por medio de un anticuerpo anti
inmunoglobulina humana que se dirige en contra
de las fracciones constantes de las
inmunoglobulinas IgA, IgG o IgM.

La inmunología tiene una aplicación bastante


amplia, es una ciencia que se basa en las
reacciones del organismo frente a agentes
externos que pueden ser causantes de patologías,
pienso que otra de las áreas más importantes

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Bibliografía. - Reumatología Clínica, 6(3), 173–177.


doi:10.1016/j.reuma.2009.10.003
1. Carla Bastías O., F. S. (2015).
LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA EN 6. Gosling J. Immunoassays: A Practical
LA PRÁCTICA Approach. Oxford: Oxford University.
[Online].; 2000. Acceso 21 de Agosto
2. Carles A, Bartalome R, Dominguez J,
de 2021. Disponible en:
Lurdes M, Rabella N. SEIMC. [Online].;
http://scielo.sld.cu/pdf/hie/v51n1/hie
2005. Acceso 23 de Agosto de 2021.
09113.pdf.
Disponible en:
https://seimc.org/contenidos/docume 7. Becerra L, Campos C. SCIELO. [Online].;
ntoscientificos/procedimientosmicrob 2017. Acceso 23 de Agosto de 2021.
iologia/seimc- Disponible en: Dialnet-
procedimientomicrobiologia19.pdf. TestDeAvidezEnElDiagnosticoDePrimo
infeccionDeEnfer-6236151.pdf.
3. Diego H, Caviedes J.
ReumatologiaClinica. [Online].; 2010. 8. Acuña D, Cornejo W. SCIELO. [Online].;
Acceso 21 de Agosto de 2021. 2020. Acceso 23 de Agosto de 2021.
Disponible en: Disponible en:
https://www.reumatologiaclinica.org/ http://www.scielo.org.pe/scielo.php?
es-tecnicas-inmunologicas-que- pid=S1025-
apoyan-el-articulo- 55832020000300294&script=sci_artt
S1699258X09002411. ext.

4. Cercenado E, Cantón R. Seimc.org. 9. Aguilar V. MEDIAGRAPHICS. [Online].;


[Online].; 2005. Acceso 21 de Agosto 2004. Acceso 23 de Agosto de 2021.
de 2021. Disponible en: Disponible en:
https://seimc.org/contenidos/docume https://www.medigraphic.com/pdfs/g
ntoscientificos/procedimientosmicrob aceta/gm-2004/gms043p.pdf.
iologia/seimc-
procedimientomicrobiologia19.pdf. 10. Escalante H, Huamanchay O, Davelois
K. SCIELO. [Online].; 2001. Acceso 23
de Agosto de 2021. Disponible en:
5. Hernández Ramírez, D. F., & Cabiedes, http://www.scielo.org.pe/scielo.php?s
J. (2010). Técnicas inmunológicas que cript=sci_arttext&pid=S1726-
apoyan el diagnóstico de las 46342001000200002.
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