OBTENCION DE BIOETANOL A PARTIR DE

DESECHO DE CASCARA DE BANANO MADURO

UTILIZANDO LA ENZIMA CELLULASE
TRICODERMA REESEI.
________________________________________
Sexto Semestre “A” Ingeniería de Alimentos
Universidad Técnica de Machala. Carrera de Ing. en alimentos
Biotecnología Alimentaria, Ing. Humberto Ayala

Villalta J., Montesdeoca V., Alava J.

Resumen.
Actualmente es mínimo el aprovechamiento de los residuos orgánicos en la industria,
estos residuos han sido objeto de una manipulación descontrolada, debido a que su
degradación natural genera gases tóxicos y de efecto invernadero, además de la
contaminación del suelo, problemas tales como: plagas, malos olores y contaminación
de las fuentes de agua subterránea
El residuo de las cascaras de banano es una materia prima que puede ser utilizada para
la obtención de bioetanol, debido a que estas tiene un alto contenido de carbohidratos,
es decir, azucares fermentables lo que lo hace apto para procesos de fermentación y con
ello la conversión de azucares en alcohol. En la actualidad la tercera parte de este
desecho o rechazo de banano son desechados o destinados para el consumo interno,
también para el proceso de compostaje y, solo dos tercios son utilizados para el estudio
de la producción de alcohol.
ABSTRAC
The residue of banana shells is a raw material that can be used for obtaining bioethanol,
because these have a high content of carbohydrates, that is, fermentable sugars which
makes it suitable for fermentation processes and with it the conversion of sugars into
alcohol. Currently one third of this waste or rejection of bananas are discarded or
intended for domestic consumption, also for the composting process and only two-thirds
are used
Introducción. su economía y en el bien de las
La energía marca un rol importante en sociedades.
el desarrollo de los seres humanos. En nuestra principal fuente de energía es el
sol, el cual nos suministra de luz y
calor. Otras enerias las encontramos en orgánicos como materia prima,
la atmosfera, en la superficie o en el teniendo como resultado un combustible
interior del planeta y estas puede ser que disminuye en gran medida la
renovables y no renovables, en las contaminación, por lo cual se lo
cuales son de origen fosis como: el denomina “Biocombustible” . De esta
petróleo,en carbón mineral y el gas forma se pretende preservar y
natural, los cuales como sabemos son conservar los recursos naturales
recursos que mas temprano que tarde, se renovables y no renovables de nuestro
acabaran. Es por eso que racias a país, para generar energía libre de
invertiaciones realizadas se pudo dar contaminación y con una mayor
con combustibles alternatvos los cuales rentabilidad.
su uso reducen en gran parte la El bioetanol puede fabricarse a partir de
contaminación del paneta, entre ellos cualquier materia prima oranica que
tenemos al Bioetanol contena cantidades sinificativas de
Bioetanol. azucares o compuestos que puedan
El bioetanol o conocido como alcohol trasformarse en azucares como almidon
etílico a sido utilizado como o celulosa. [ CITATION DPa10 \l 12298 ]
potenciador dela gasolina. Este es OBJETIVOS
completamente renovable ya que las General
plantas absorben el bióxido de carbono
que se libera al quemarlo, este es usado
Obtener bioetanol a partir de
durante la fotosíntesis de las plantas. desechos de cascara de banano
Además, usar bioetanol como maduro utilizando la enzima
potenciador de combustibles fósiles, celullusa de Trichoderma reesei
presenta alunas ventajas, como una
mejor oxidación de los hidrocarbonos
de la gasolina y por consiguiente la
reducción del efecto invernadero en la
Específicos.
atmosfera.  Construir un bioreactor para la

En la época actual el Ecuador tiende conversión de los azucares

más a preocuparse por el medio fermentables presentes en el

ambiente, es por ello que se han desecho de las cascaras de

estudiado nuevas fuentes de energía banano maduro.

alternativa donde se utilizan residuos

  Destilar el jarabe de banano
producto de la fermentación
alcohólica.
 Cuantificar el porcentaje de
bioetanol obtenido en el proceso
de destilación simple.
Marco teórico.
Cascaras de banano
Además de todas las propiedades
nutricionales y medicinales que posee el
banano; Se ha descubierto que puede ser
útil para diversas actividades, como
alimentación animal, fabricación de
plásticos, purificación de agua, entre
otras, esto se debe a la composición de
la cáscara[ CITATION BAD19 \l 12298 ].
El nombre de banano, cambur o guineo
agrupa una gran cantidad de plantas
herbáceas del género Musa, por lo que
muchos híbridos se obtienen
hortícolamente de las especies silvestres
del género Musa acuminata, Musa
balbisiana, Musa sapientum.
Originalmente clasificado por Carlos
Linneo como Musa paradisíaca en 1753,
la especie tipo del género Musa. Esta
familia incluye plátanos comestibles
crudos Musa cavendishii y plátanos
para cocinar Musa paradisíaca[ CITATION
BAD19 \l 12298 ].
La cáscara de plátano transforma
aproximadamente el 90% de su almidón
en azúcares aproximadamente 12 días
después de la cosecha; Se ha encontrado
un contenido de hasta 14,6 de azúcares
secos. El contenido de fibra en la
cubierta es de 13% en base seca: los
componentes principales de la cubierta
son: celulosa (25%), hemicelulosa
(15%) y lignina (60%),[ CITATION
Alv13 \l 12298 ]
Biomasa.
Sustancia orgánica renovable de origen
tanto animal como vegetal, la energía
de la biomasa proviene de la energía
que almacenan los seres vivos. En
primer lugar, los vegetales realizan la
fotosíntesis en donde utilizan la energía
del sol para formar sustancias orgánicas.
Después los animales incorporan y
transforman esa energía al alimentarse
de las plantas. Los productos de dicha
transformación que se consideran
residuos que, pueden ser utilizados
como recurso energético[ CITATION Fló14
\l 12298 ]
Composición de biomasa
En general las paredes celulares de
plantas consisten en polisacáridos,
compuestos fenólicos y compuestos
minoritarios (minerales, lípidos,
proteínas, etc.). Los polisacáridos se
clasifican en celulosa, hemicelulosas,
lignina y pectinas. Gran parte de los
compuestos fenólicos están presentes en
la estructura de lignina. La composición
química de las fibras naturales varía en
función del tipo y origen de la fibra. La
cascara de banano se transforma
alrededor del 90 % de su almidón a
azucares aproximadamente 12 días
después de su cosecha; un contenido de
hasta 14,6 % de azucares en base seca
ha sido encontrado. El contenido de
fibras en la cáscara de es del 13 % en la
base seca. Los principales componentes
de la cascara son: celulosa (25 %),
hemicelulosa (15 %) y lignina (60 %)
[ CITATION JOS15 \l 12298 ].
Polisacáridos
Están formados por grandes cantidades
de monosacáridos conectados por
enlaces glucosidicos. Los más
pequeños, llamados oligosacáridos,
contienen hasta unos 10 o 15
monosacáridos. Los polisacáridos
pueden tener estructura lineal o
ramificada. Pueden dividirse en dos
clases: homoglucanos, formados por un
solo tipo de monosacáridos, y
heteroglucanos, que contienen dos o
más tipos de monosacáridos[ CITATION
HER17 \l 12298 ].
Componentes lignocelulosos
Los materiales lignocelulósicos son la
materia prima más prometedora como
recurso natural y renovable esencial
para el funcionamiento de las
sociedades industriales modernas. Las
enormes cantidades de biomasa
lignocelulósica pueden convertirse en
diferentes productos de alto valor como
biocombustibles, productos químicos de
valor agregado y fuentes de energía
baratas para la fermentación microbiana
y producción de enzimas. Todos los
materiales vegetales están compuestos
principalmente por tres unidades
principales, es decir, celulosa,
hemicelulosa y lignina. Los materiales
lignocelulósicos, incluidos los residuos
agrícolas
Celulosa.
La celulosa es el biopolímero natural
renovable más abundante en la tierra y
está presente en una amplia variedad de
especies vivas, incluidas plantas,
animales y algunas bacterias. Es el
componente estructural principal de las
plantas y recupera la importancia como
recurso químico renovable para
reemplazar los materiales derivados del
petróleo Independientemente de las
fuentes, la celulosa consiste en un
homopolisacárido lineal compuesto por
unidades de -d-glucopiranosa unidas por
enlaces de -1-4. La unidad repetitiva es
un dímero de glucosa, conocido como mayoría por la cáscara. Esto ha
celobios[ CITATION VEI19 \l 12298 ]. motivado el desarrollo de estudios a
nivel de campo con la finalidad de
Lignina
aumentar el valor comercial y
La lignina es generalmente la fracción
diversificar el uso de las cáscaras de
más compleja y pequeña, que representa
banano, cuyo aprovechamiento
aproximadamente el 10-25% de la
tradicional es como insumo para la
biomasa en peso. Además, es un
alimentación animal y la recuperación
polímero natural que actúa como
de suelos[ CITATION ANG15 \l 12298 ].
pegamento entre las fibras de celulosa
de las plantas vivas. La lignina es un Hidrolisis
complejo polímero amorfo La hidrolisis es una reacción química
tridimensional compuesto por tres donde ocurre la ruptura de la molécula
unidades de fenilpropano: p- de agua. Los reactantes, así como los
hidroxifenilo (H), guaicilo (G) y productos de esta reacción pueden ser
siringilo (S). Estas unidades, que especies neutras ( como en el caso de
contienen un grupo hidroxilo en la las moléculas orgánicas) y/o iónicas
posición para de la cadena de alquilo, (como en el caso de las sales). La
están conectadas por diferentes enlaces biomasa proporciona una fuente
de éter y carbono a carbono. Además de potencial de productos químicos de
las funciones de éter creadas durante la valor añadido, como azucares
biosíntesis de lignina, las cadenas de reductores, furfural, etanol y otros
alquilo también contienen otros grupos productos, mediante canalización con
oxigenados tales como las funciones de ácido o mediante hidrolisis catalizada
alcohol, carbonilo y ácido por enzimas.[CITATION Zap15 \l 12298 ].
carboxílico[ CITATION VEI19 \l 12298 ].
Hidrolisis enzimática
Contenido de pectinas La hidrolisis enzimática es la operación
Se encuentra entre el 7-20% de pectinas unitaria en el proceso de conversión de
en banano, utilizando como método de lignocelulosa que utiliza enzimas para
extracción hidrólisis . Las cáscaras de despolimerizar la biomasa
banano se han propuesto como fuente lignocelulósica. Los componentes
de pectinas a nivel comercial, por su sacáridos liberados son la materia prima
relativo bajo costo. Los residuos para la fermentación. El contenido de
generados están constituidos en su sólidos en la hidrolisis enzimática
ofrece potencialmente muchas ventajas
sobre las conversiones que se realizan
con cargas de bajo o moderado de
sólidos, incluyendo el aumento de las
concentraciones de azúcar y etanol.
[ CITATION Car12 \l 12298 ]
Dentro de los sistemas biológicos las
enzimas forman las bases dificultosas y
variadas reacciones que caracterizan los
fenómenos vitales y catalizan la
hidrolisis de los materiales, que se
produce cuando un polímero tiene
enlaces inestables y algún grado de
hidrofilia. Una reacción catalizada
enzimáticamente ocurre en un lugar
específico de la enzima, es decir, el sitio
activo. Sustrato es el nombre que se le
designa a la molécula fijada en el sitio
activo y en el cual actúa el enzima. La
interrelación de la enzima con el
sustrato (reactivo), para formar un
complejo intermediario, luego, la
descomposición del complejo
intermediario para formar productos y
regenerar la enzima. [ CITATION Ran08 \l
12298 ]
Celulasas.
Las celulasas son enzimas hidroliticas
que participan en el rompimiento de los
enlaces glicosidicos B-1,4 presentes en
los polisarados presentes en la celulosa
y hemicelulosa.
El interés por las celulasas empezó
alrededor de los años 50 debido a su
enorme potencial para convertir la
lignocelulosa en glucosa y azucares
solubles. E importante señalar que la
lignocelulosa es una fuente de energía
renovable más abundante en toda la
tierra. La cual está formada por
celulosa, hemicelulosa y lignina.
Hongos y bacterias pueden producir
enzimas celulasas como en este caso,
está Trichoderma reesei. [ CITATION
DPa10 \l 12298 ]
Fermentación alcohólica.
La fermentación es un proceso
biológico el cual se lleva a cabo por una
gran diversidadde microorganismos, ya
sean en cultivos puros o mixtos que se
encargan de convertirlos azúcares
simples en alcohol y dióxido de carbono
en ausencia de oxígeno. La conversión
química de la fermentación alcohólica
se puede resumir en:
𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 → 2𝐸𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 + 2𝐷𝑖ó𝑥𝑖𝑑𝑜𝑑𝑒𝑐𝑎𝑟𝑏𝑜𝑛𝑜
𝐶6𝐻12𝑂6 → 2𝐶2𝐻5𝑂𝐻 + 2𝐶𝑂2
La fermentación en la producción de
alcohol como el etanol es un proceso
crítico dondelos principales parámetros
que afectan las vías de fermentación
incluyen, la composición del medio, el
pH, la temperatura, la velocidad de
agitación, laconcentración de azúcar y
el tipo de inoculo microbiano..
[ CITATION Ran08 \l 12298 ]
Se han utilizado varios tipos de cepas de
levadura en la fermentación para la
producción de etanol, incluidas las
levaduras híbridas, recombinantes y de
tipo salvaje. Levaduras pueden
fermentar directamente los azúcares
simples en etanol, mientras que otros
tipos de materias primas deben
convertirse en azúcares fermentables
antes de quepuedan fermentarse a
etanol. Los procesos comunes
implicados en la producción deetanol
son el tratamiento previo, la hidrólisis y
la fermentación.[ CITATION Gar16 \l
12298 ]
Es bastante difícil esperar que el
hidrolizado sea completamente
uniforme en términosdel monómero de
azúcar, sería fracciones de diferentes
monómeros y varios otrosoligosacáridos
con inhibidores probables o sustancias
no digeribles. [ CITATION Gar16 \l 12298 ]
Temperatura más baja. Enseguida se da
una breve descripción de cada modo. En
los capítulos posteriores de este texto se
da un estudio más detallado de estos
modos.[ CITATION Yun07 \l 2058 ]
Se han utilizado varios tipos de cepas de
levadura en la fermentación para la
producciónde etanol, incluidas las
levaduras híbridas, recombinantes y de
tipo salvaje. Laslevaduras pueden
fermentar directamente los azúcares
simples en etanol, mientras queotros
tipos de materias primas deben
convertirse en azúcares fermentables
antes de quepuedan fermentarse a
etanol. Los procesos comunes
implicados en la producción deetanol
son el tratamiento previo, la hidrólisis y
la fermentación.[ CITATION Gar16 \l
12298 ]
Destilación
La destilación es el proceso de calentar
una solución líquida, o una mezcla
líquido-vapor, para obtener un vapor y
luego recolectar y condensar este vapor.
En el caso más simple, los productos de
un proceso de destilación se limitan a
un destilado superior y un fondo, cuyas
composiciones difieren de las del
alimento. La destilación es uno de los
métodos más antiguos y comunes para
la separación química. Históricamente,
una de las aplicaciones más conocidas
es la producción de espíritus a partir de
vino. Hoy en día, muchas industrias
utilizan la destilación para la separación
dentro de muchas categorías de
productos
Destilación Simple
Este cambio de composición que cultivados específicamente con el fin de
acompaña al proceso de vaporización es crear etanol.[ CITATION Mag10 \l 12298 ]
la base para la separación de las mezclas
El bioetanol se puede producir a partir
por destilación. A medida que los
de una variedad de materias primas.
vapores producidos por la destilación se
Estos se dividen en tres categorías
mueven hacia el condensador enfriado
principales. Materiales que contienen
por agua, estos vapores se condensan en
grandes cantidades de sacarosa que se
un líquido, el destilado, que tiene la
pueden fermentar, como la caña de
misma composición que el vapor del
azúcar; Materiales con almidón tales
que se forma. El destilado recogido en
como polisacáridos que contienen maíz
el receptor contendrá más del
que pueden hidrolizarse para obtener
compuesto más volátil que el presente
azúcares adecuados para la
en la mezcla original. Si un compuesto
fermentación; y biomasa
es mucho más volátil que el otro, los
lignocelulósica, que contiene un
compuestos se pueden separar en una
complejo de varios polisacáridos que se
etapa de vaporización. Tal paso se llama
pueden descomponer de manera similar
destilación simple y usa un aparato que
en azúcares fermentables (las fuentes
consiste solo en una olla, un cabezal de
varían desde papel hasta madera). El
destilación, un condensador, un
uso de biomasa lignocelulósica a
adaptador y un receptor, como se
menudo se denomina "segunda
muestra en la figura.[ CITATION Abb18 \l
generación". Esta tecnología está en la
12298 ]
etapa de desarrollo y aún no se usa
ampliamente.[ CITATION Mag10 \l 12298 ]

Bioetanol

MATERIALES Y METODOS.
El etanol es un combustible que puede Materiales:
usarse como alternativa a la gasolina, o Los residuos de cultivo e banano
en una mezcla con gasolina para reducir pertenecen a la familia musaceae y de
la cantidad de petróleo consumida. El género musa provenientes de la
bioetanol es etanol producido a través provincia de El Oro y fueron en su
del procesamiento de materia biológica, 100% cascara de la fruta madura.
ya sea productos de desecho o cultivos
Para la obtención del extracto Dicha mezcla fue llevada a
enzimático se utilizó Celulasa esterilización por autoclave en un
proveniente de Tricoderma reesei. matras Erlenmeyer aforado de 500ml de
También se hizo uso de una estufa en la capacidad, durante 15 minutos a 121°C.
cual encubamos el jarabe enzimático Una vez que nuestra mezcla sale del
obtenido por la hidrólisis de la cascara autoclave procedemos a atemperar a
de banano maduro por acción de la 60°C para añadir la enzima Celulasa de
enzima. Trichoderma reesei, ya que a esta
De igual importancia recalcamos la temperatura actua dicha enzima.
elaboración y uso de un bioreactor en el Este es homogenizado por 20 minutos
cual llevaremos la trasformación de aproximadamente y llevado a
azucares fermentables a etanol mediante incubación por 96 horas a temperatura
una fermentación anaerobia con ayuda de 60°C. una vez terminado el periodo
de la levadura Saccharoyces cerevisie de incubación procedemos a filtrar o
Finalmente y de mucha importancia tamizar para deshacernos del bagazo e
tenemos el uso de un equipo de impurezas que posiblemente se
destilación simple en el cual vamos a encuentren en la cascara de banano, y se
obtener finalmente, un bioetanol. optiene un jarabe enzimático el cual se
Métodos: debe nuevamente a realizar un
el presente proyecto fue ejecutado en la tratamiento térmico con el fin de
Facultad de Ciencias Químicas y de la inactivar la enzima celulasa, la cual
Salud de la Universidad Técnica de inhibe una efectiva producción de
Machala, etanol. Puede ser un autoclavado o
se relizó un acondicionamiento de las pasteurización.
muestras el cual se basó en la selección Una vez lista la muestra, la enfriamos y
de las cascaras con mejor maduración, atemperamos a 30 o 35 °C de
de apariencia firma y olor característico. tempertatura en la cual hacemos la
Las cuales fueron lavadas con agua adicion de la Sacchaomyces Cereviciae
purificada y posteriormente trituradas o hasta 4g por litro, en este caso se
molidas con agua destilada en una adicionó 1g en 300 ml de jarabe
relación (1;1) que represento 250g de enzimático que se obtuvo de la
de cascara de banano triturada y 250ml separación del bagazo. La trasvasamos
de agua destilada la cual fue medida con al bioreactor para fermentación
un baso de precipitación para 250ml. anaerobia fabricado artesanalmente por
los estudiantes de la carrera de
Ingeniería en Alimentos. Asegurándose
que todos los sellos estén bien seguros y
que no permitan el escape de CO2 a
menos que sea hacia la trampa de agua,
ni el ingreso de oxigeno.
Luego de 4 dias de fermentación
procedemos con la destilación para
determinar qué cantidad de etanol fue
producido. Utilizando un equipo de
destilación simple subministrado por el
laboratorio de química analítica 2…..
Resultados.

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