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Anteproyeto Sr. de La Maza-2
Anteproyeto Sr. de La Maza-2
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
CARRERA DE ODONTOLOGÍA
Autor:
Jonathan Andrés De La Maza
Tutor:
Dr. Juan Benenaula
Cotutor:
Dr. Juan Viteri
Autor:
Jonathan Andrés De La Maza Zea
Tutor:
Dr. Juan Benenaula
Cotutor:
Dr. Juan Viteri
ii
AUTORIZACIÓN PARA
Yo, Dr. JUAN BENENAULA, Docente de la Facultad de Odontología, una vez que he
revisado el tema propuesto como proyecto de investigación de grado titulado:
ANÁLISIS DE LA PERMEABILIDAD Y ADHERENCIA BACTERIANA A
MEMBRANAS NO REABSORBIBLES DE POLIPROPILENO Y
POLITETRAFLUORETILENO DE ALTA DENSIDAD. PERTENECIENTE AL
ÁREA DE CONOCIMIENTO: Ciencias odontológicas LÍNEA DE
INVESTIGACIÓN: Biología estomatológica, sublínea microbiología oral, del/la
estudiante: JONATHAN DE LA MAZA ZEA CI 1803733060 me comprometo
legalmente y asumo la responsabilidad de tutorear este proyecto de tesis, en todos sus
aspectos: científico, ético, metodológico, semántico, estadístico y pertinente, el mismo
que tendrá aporte investigativo adecuado a la carrera, que ha sido revisado en el banco
de tesis y no tiene similitud a otros temas anteriormente presentados, al final del proceso
se entregará el certificado del programa antiplagio, y un certificado de culminación de la
investigación, de manera que el estudiante podrá continuar con su trámite administrativo
correspondiente.
………………………………………. ………………………………………
TUTOR ESTUDIANTE
DR(A): JUAN BENENAULA OD. JONATHAN DE LA MAZA
C.I: 0103642930 C.I: 1803733060
iii
ÍNDICE DE CONTENIDOS
AUTORIZACIÓN............................................................................................................iii
ÍNDICE DE CONTENIDOS............................................................................................iv
ÍNDICE DE ANEXOS.....................................................................................................vi
1. RESUMEN.........................................................................................................1
2. REVISIÓN DE LA LITERATURA...................................................................2
2.1. Enfermedades Infecciosas Bacterianas...............................................................2
2.1.1. Biofilm Bucal......................................................................................................3
2.2. Porphyromonas Gingivalis.................................................................................5
2.2.1. Enfermedad Periodontal.....................................................................................6
2.3. Remodelación Ósea............................................................................................8
2.4. Regeneración Ósea Guiada.................................................................................9
2.5. Regeneración Tisular Guiada............................................................................10
2.6. Membranas Biomateriales................................................................................11
2.6.1. Membranas No Reabsorbibles..........................................................................14
2.6.2. Politetrafluoretileno..........................................................................................15
2.6.3. Polipropileno.....................................................................................................17
3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.........................................................18
3.1. Objetivos...........................................................................................................18
3.1.1. Objetivo General...............................................................................................18
3.1.2. Objetivos Específicos.......................................................................................18
3.2. Hipótesis...........................................................................................................19
3.2.1. Hipótesis alternativa H1:..................................................................................19
3.2.2. Hipótesis nula H0:............................................................................................19
3.3. Conceptualización de variables........................................................................19
3.3.1. Variable independiente.....................................................................................19
3.3.2. Variable dependiente........................................................................................19
3.4. Justificación......................................................................................................20
3.5. Metodología......................................................................................................20
3.5.1. Diseño de la Investigación................................................................................20
3.5.2. Población de estudio y muestra........................................................................20
3.6. Criterios de inclusión y exclusión.....................................................................21
3.6.1. Criterios de Inclusión........................................................................................21
iv
3.6.2. Criterios de Exclusión.......................................................................................21
3.7. Delimitación de la investigación.......................................................................25
3.7.1. Delimitación espacial y temporal.....................................................................25
3.7.2. Delimitación de las unidades de observación...................................................25
3.8. Limitaciones de la investigación.......................................................................26
3.8.1. Aspectos bioéticos............................................................................................26
3.9. Resultados esperados........................................................................................28
4. BIBLIOGRAFÍA..............................................................................................29
5. ANEXOS..........................................................................................................31
v
ÍNDICE DE ANEXOS
vi
1. RESUMEN
Objetivo: Evaluar la permeabilidad y adherencia bacteriana en membranas no
reabsorbibles de polipropileno y politetrafluoretileno de alta densidad. Metodología:
Estudio experimental in vitro en donde se empleará 40 muestras redondas de 5 mm de
diámetro de cada una de las membranas mencionadas que será dividida en cuatro grupos
de 10 cada una siendo. G1: membranas de polipropileno a los 2 días. G2: membranas
de polipropileno a los 7 días. G3: politetrafluoeretileno de alta densidad a los 2 días. G4:
membranas de politetrafluoretileno de alta densidad a los 7 días. Se sembrará cepas de
ATCC 33277 (porphyromonas gingivalis) sobre las membranas. El agar se cultivara de
forma rutinaria en un 3% de caldo de tripticasa de soja suplementado con 0,5% de
extracto de levadura, 5 \ mu g / ml de hemin y 1 \ mu g / ml de menadiona, y los
cultivos se mantendrán a 37 ° C en condiciones anaeróbicas utilizando una caja
anaeróbica que contendrá una atmósfera compuesta de 10% de CO2, 5% de H2 y 85%
de N.
Este proceso se realizará en condiciones estériles en cabina de flujo laminar tipo II.
Después de 2 y 7 días las muestras se abrirán y se mantendrán en solución salina estéril,
previamente saturada en condiciones anaeróbicas. Se verificará las unidades formadoras
de colonias con el uso del estereoscopio. La permeabilidad se evaluará mediante
microscopio electrónico de barrido. Será realizado con un test estadístico T student con
un nivel de significancia del 5 %. Los equipos a usa serán: Estereoscopio marca Nikon
modelo sm2-10, Cámara de anaerobiosis marca AnaeroJar, Incubadora marca Incucell
serie D121788, Cabina de Bioseguridad marca TDI serie C50099, Autocable MRC
modelo UTILBS-7STROS serie A1113, Estufa esterilizadora marca MMM modelo
Sterilal serie D121776. Justificación: La importancia del presente estudio está en la
determinación de la permeabilidad y colonización bacteriana para garantizar así una
regeneración ósea libre de contaminación interna. La membrana no reabsorbible de
politetrafluoretileno densa ha sido sometidas a varios estudios microscópicos que
muestra el paso de bacterias a la superficie interna es por esto la importancia del estudio
de la membrana de polipropileno que tiene escasos estudios en la literatura por ser un
producto nuevo en el mercado, su uso radica en preservación alveolar donde es expuesta
intencionalmente al medio bucal.
1
2. REVISIÓN DE LA LITERATURA
Dentro de las enfermedades infecciosas bacterianas tenemos cuatro grupos que consta
las enfermedades agudas, crónicas, retardadas y las que se producen por una película
biológica llamada biofilm. [ CITATION Soc \l 12298 ]
Dentro de los criterios sobre las enfermedades infecciosas bacterianas dadas por una
película biológica se trata de las enfermedades que resultan de la formación de biofilms
en la superficie del diente. Estas infecciones son, probablemente, las enfermedades
infecciosas más comunes que afectan al ser humano: las caries dentales y las
enfermedades periodontales. [ CITATION Soc \l 12298 ]
La mayoría de las infecciones orales que tienen origen odontogénico son muy comunes
y pueden tratarse mediante extracción dental, terapia endodóntica o tratamiento
quirúrgico. Sin embargo, puede ser necesario recetar un antibiótico. Otras lesiones
2
infecciosas son las manifestaciones de enfermedades sistémicas como la tuberculosis y
la sífilis. [CITATION Sou17 \l 12298 ]
Los biofilms son estructuras fascinantes porque son el método de crecimiento preferido
de muchas, tal vez la mayoría, de las especies de bacterias. Este método de crecimiento
proporciona una serie de ventajas a las especies colonizadoras, la ventaja principal es la
protección que ofrece el biofilm a la especie colonizadora frente a mecanismos
competitivos procedentes de factores ambientales y de los mecanismos de defensa del
huésped, así como frente a sustancias ambientales potencialmente tóxicas, como
productos químicos letales o antibióticos. [ CITATION Soc \l 12298 ]
3
La formación de películas de bioespecies multiespecíficas está influenciada por tres
importantes factores: 1) la naturaleza de la superficie a lo que se adhiere la biopelícula,
2) la composición del potencial colonizador especies que conformarán la biopelícula, y
3) los fluidos que bañan y sostienen a la comunidad del biofilm. [CITATION tel12 \l
12298 ]
En primer lugar, la boca está continuamente bañada por la saliva, manteniendo una
temperatura de 35- 36°C a un pH de 6,75 7,25, condiciones óptimas para el crecimiento
de muchos microorganismos. En segundo lugar, la saliva influye profundamente en la
ecología de la boca; por ejemplo, su composición iónica promueve sus propiedades de
amortiguación y su capacidad para remineralizar el esmalte. [ CITATION Pér05 \l
12298 ]
Por otro lado, los componentes orgánicos (glicoproteínas y proteínas) pueden a) influir
en el establecimiento y selección de la microflora oral, al favorecer la adhesión de
ciertos organismos a través de la formación de una película selectiva acondicionadora
sobre la superficie del esmalte, o la eliminación de bacterias a través del aclaramiento
saliva. [ CITATION Pér05 \l 12298 ]
4
Se reconocieron seis grupos estrechamente asociados de especies de bacterias, entre las
que se incluyeron Actinomyces, un complejo amarillo que consta de miembros del
género Streptococcus un complejo verde compuesto por especies de Capnocytophaga
Actinobacillus actinomycetemcomitan serotipo a, Eikenella corrodens, Campylobacter
concisu y un complejo púrpura consistente en Veillonella parvula y Actinomyces
odontolyticus. [ CITATION Soc \l 12298 ]
5
Porphyromonas gingivalis es una bacteria anaerobia que habita el área subgingival y
tiene un importante papel en la etiología y patología de la enfermedad periodontal. Los
aspectos anatómicos y fisiológicos del surco y las bolsas periodontales permiten que
sean sitios resistentes al efecto de limpieza de la saliva, de la actividad mecánica de la
lengua y de las mejillas y se convierten en un área de retención y estancamiento de
bacterias. Las bacterias que colonizan el área gingival se nutren de líquido gingival, el
cual, contiene proteínas, carbohidratos, minerales y vitaminas que fomentan el
crecimiento de la microbiota del surco. [ CITATION Orr15 \l 12298 ]
Entre los principales patógenos periodontales, P. gingivalis parece ser uno de los
principales agentes etiológicos en la patogénesis y la progresión de los eventos
inflamatorios de la enfermedad periodontal. Esta bacteria periodontopática se encontró
en el 85.75% de las muestras de placas subgingivales de pacientes con periodontitis
crónica. [ CITATION Dat08 \l 12298 ]
6
La población adulta mayor está creciendo rápidamente en el mundo occidental y se
estima que para 2040, la cantidad de adultos ≥65 años será aproximadamente 50% en
los Estados Unidos. Su estado de salud oral será muy importante para mantener una
adecuada calidad de vida. P. gingivalis expresa una miríada de factores de virulencia.
Dado que el intercambio genético puede causar diversidad en factores de virulencia
específicos en P. gingivalis. [CITATION Ing18 \l 12298 ]
Desde el punto de vista histológico, las características que podemos hallar son bolsas
periodontales, localización de la unión epitelial apical a la línea amelocementaria, una
pérdida de fibras colágenas, una elevada concentración de leucocitos
polimorfonucleares en la unión y bolsa epitelial, y una migración del infiltrado celular
inflamatorio hacia el tejido conectivo. [CITATION Esc08 \l 12298 ]
Para clasificar una enfermedad como periodontitis crónica, debemos en primer lugar
descartar una periodontitis agresiva (PA), descartando el cumplimiento de las 3
características primarias de una PA, los pacientes deben de estar clínicamente sanos,
existe agregación familiar de la enfermedad y hallamos una rápida perdida de inserción
y ósea. [CITATION Esc08 \l 12298 ]
7
Anteriormente, el foco principal para los análisis genéticos fue la asociación de
enfermedad periodontal con inmunidad alterada respuesta teniendo en cuenta algunos
genes candidatos relacionado con las vías inmunes. En los últimos 15 años mucho del
trabajo de investigación se centra principalmente en este nuevo concepto de la
infectogenómica periodontal que potencialmente ayuda a comprender mejor la
patogenia de la periodontal enfermedad. [CITATION Gur18 \l 12298 ]
Los huesos no son estructuras inertes dentro del cuerpo humano; continúan cambiando a
lo largo de la vida. Este proceso de cambio esquelético se conoce como remodelación
ósea, que protege la integridad estructural del sistema esquelético y contribuye
metabólicamente al equilibrio corporal de calcio y fósforo. La remodelación implica la
resorción del hueso viejo o dañado, seguido de la deposición de nuevo material óseo.
[CITATION Row18 \l 12298 ]
La ley de Wolff establece que los huesos se adaptarán al grado de carga mecánica, de
modo que un aumento en la carga hará que la arquitectura del hueso esponjoso interno
se fortalezca, seguido del fortalecimiento de la capa cortical. Además, una disminución
de la tensión en el hueso hará que estas capas óseas se debiliten. Existen principalmente
2 células que son responsables tanto de las fases de resorción como de deposición de la
8
remodelación ósea: osteoclastos y osteoblastos; sin embargo, los osteocitos también
tienen un papel en este proceso. [CITATION Row18 \l 12298 ]
El hueso alveolar encierra las raíces del diente para proporcionar un sitio de unión para
el ligamento periodontal y así asegurar anclaje de los dientes. Además, el hueso alveolar
9
y el hueso trabecular subyacente proporcionan soporte estructura contra las cargas
mecánicas inducidas durante la masticación. Tanto el hueso alveolar como el trabecular
se someten continuamente remodelación y optimización en respuesta a estas cargas
mecánicas para mantener la resistencia y prevenir daño tisular. [ CITATION Wat18 \l
12298 ]
Sin embargo, este proceso de remodelación puede verse afectado por enfermedades
comunes como la osteoporosis y periodontitis, lo que causa una disminución en el
volumen del hueso trabecular y una reducción en la altura del alveolar. Este soporte
estructural reducido puede conducir a la inestabilidad de los dientes y, finalmente, a la
pérdida de dientes. La pérdida de dientes es seguido de un proceso irreversible de mayor
resorción ósea alveolar que se extiende por todo el alveolar, aumentando el riesgo de
una mayor pérdida de dientes. [ CITATION Wat18 \l 12298 ]
10
Los injertos óseos son el procedimiento clave para restaurar los defectos óseos, los
autoinjertos son la solución ideal debido a las propiedades osteogenética, osteoinductiva
y osteoconductiva. No transmiten enfermedades y causan reacciones inmunes, mientras
que son gradualmente absorbidos y reemplazados por nuevo tejido óseo. [CITATION
Tie14 \l 12298 ]
El conjunto de tejidos blandos que rodean al diente y al hueso alveolar es decir, encía
insertada, encía libre y mucosa alveolar constituyen el denominado complejo
mucogingival. Dicha unidad puede presentar dos tipos de defectos: unos cerrados que se
denominan bolsas periodontales y otros abiertos que reciben el nombre de recesiones
gingivales (RG).Tanto unos como otros suponen una pérdida de inserción. [CITATION
Bas00 \l 12298 ]
11
Todos los procedimientos de regeneración ósea requieren el cierre pasivo del colgajo
para permitir la regeneración del hueso. Los colgajos reflejados deben reposicionarse
después de la cirugía para el cierre primario de la herida para asegurar un
microambiente sin perturbaciones durante el período de curación. La falta de
mantenimiento del cierre primario da como resultado la dehiscencia de la herida, con la
consecuente reducción o incluso la falla de la regeneración ósea, y por lo tanto pone en
peligro el implante. [CITATION YuH18 \l 12298 ]
Según Storgard Jensen y Terheyden, el uso de un bloque óseo como injerto el material
se asocia con un mayor riesgo de complicaciones que con el injerto de partículas (29.8%
vs. 21.9%, respectivamente); lo atribuyeron a la mayor tensión causada por el injerto en
bloque, por lo tanto el manejo del colgajo se puede considerar más importante que la
técnica de injertar en sí misma. [CITATION YuH18 \l 12298 ]
GTR es una técnica quirúrgica que se utiliza para regenerar el aparato de fijación de un
diente. La membrana puede ser absorbible o no absorbible: el absorbible generalmente
está hecho de colágeno y se degrada en un tiempo variable (1-6 meses); el no absorbible
está hecho de material sintético y requiere una segunda cirugía para su eliminación.
[CITATION AlH03 \l 12298 ]
Se informó sobre las membranas por primera vez de parte de Bjorn en 1964, y ahí se
introdujo el concepto de “excluir el epitelio del proceso de sanado” y además, por parte
de Melcher en 1976, quien discutió sobre los mecanismos biológicos en el sanado óseo
periodontal, y quizá fueron ellos quienes establecieron las bases de lo que se llama hoy
regeneración tisular guiada (GTR).
12
Nyman en 1982, informó el uso de membranas y se generaron muchos otros reportes
que han documentado el uso de membranas, por lo que se desarrolló la regeneración
ósea guiada (GBR), utilizando membranas y materiales de injerto óseo combinados.
[CITATION Var16 \l 12298 ]
El principio de la regeneración ósea guiada por membrana (GBR) está bien establecido
en el tratamiento de defectos óseos y óseos procedimientos de aumento. Diferentes tipos
de membranas disponibles se pueden usar para prevenir la colonización de tejido
conectivo en el defecto óseo regenerador. [CITATION Fra05 \l 12298 ]
Existen 20 tipos de colágeno y se compone de tres cadenas, dos alfa-1 idénticas y otra
diferente alfa-2. Este colágeno es abundante en el hueso, tendón, piel, ligamentos,
arterias, útero y córnea y comprende entre 80 y 99% del total del colágeno. Por otro
lado tenemos las derivadas del pericardio como CoPios que corresponde a colágeno tipo
I y III, el que está compuesto por tres cadenas idénticas alfa-1.
13
Existe también la membrana de pericardio porcino Remotis (Thommen Medical), la
cual tiene un espesor de 0,3-0,4mm lo que puede favorecer un cierre de la herida con
menos tensión. Presenta un tiempo de reabsorción de 8 a 12 semanas con una adecuada
integración al tejido, una adecuada invasión vascular, y favorece la formación de hueso,
y se degrada además sin invasión de células inflamatorias. [ CITATION Sch06 \l
12298 ]
Las membranas no reabsorbibles (MNR) fueron los primeros materiales aprobados para
uso clínico, mantienen su integridad estructural y pueden ser dejadas por mucho tiempo
14
sobre los tejidos. Su estabilidad composicional y diseño le permiten al operador un
completo control en el tiempo de aplicación y minimizar las variaciones en la
efectividad. [CITATION Bur03 \l 12298 ]
Las membranas no reabsorbibles que más soporte científico tienen en la literatura son
las membranas de Politetrafluoruroetileno expandido.
Ventajas
15
Las membranas no reabsorbibles tienen las siguientes ventajas, respecto a las
membranas reabsorbibles:
Desventajas
El hecho de que necesitan una segunda cirugía para su retiro, con el consiguiente
aumento de morbilidad para el paciente, de su alta sensibilidad a la habilidad quirúrgica
del operador y de que hay una mayor probabilidad de infección tras su exposición, ha
disminuido en los últimos años el uso de membranas no reabsorbibles, sobre todo en el
caso de tratamiento de defectos pequeños, de tipo dehiscencias o fenestraciones, a pesar
de su superioridad manifiesta en la regeneración de defectos grandes, o en casos en que
se utiliza sin ningún material de relleno. [CITATION Gon05 \l 12298 ]
2.6.2. Politetrafluoretileno
16
Una característica común de la mayoría de membranas sintéticas existentes, como e-
PTFE, es macroporosidad, la cual se cree que mejora la regeneración por la estabilidad
de la herida. Uno de los principales inconvenientes de e-PTFE es que una infección
bacteriana puede ocurrir, afectando los resultados de la regeneración.
Las membranas d-PTFE sin cierre primario permiten preservar el ancho de tejido
queratinizado existente y lograr la regeneración de tejido queratinizado sobre el sitio de
extracción y defectos del sitio del injerto del implante.
La preservación del ancho del tejido queratinizado ocurre en virtud del hecho de que se
dejan los márgenes de aleta básicamente en su posición anatómica original en lugar de
que ser avanzado sobre el zócalo o sitio quirúrgico para lograr el cierre primario.
Regeneración de gingiva queratinizada con esta técnica quirúrgica se produce por
epitelización secundaria del tejido conectivo denso contenido en el alvéolo o en el sitio
quirúrgico después de la eliminación de la membrana. [ CITATION HDe07 \l 12298 ]
17
También debemos mencionar que nuestro protocolo recomienda quitar la membrana de
barrera dentro de 4 a 6 semanas. No tenemos suficiente experiencia para comentar sobre
la eficacia de dejar la membrana para una mayor duración, ya que a su puede aumentar
el riesgo de complicaciones sin ningún beneficio en términos de calidad ósea
subyacente. [ CITATION HDe07 \l 12298 ]
El uso de una membrana d-PTFE proporciona un ideal opción de tratamiento para este
tipo de desafíos quirúrgicos debido a la simplicidad en su colocación y eliminación,
regeneración predecible de hueso y preservación de tejido queratinizado, todo sin
comprometer la calidad de la regeneración, la vascularidad del sitio quirúrgico, y las
preocupaciones estéticas del paciente y el clínico. [ CITATION HDe07 \l 12298 ]
2.6.3. Polipropileno
Su impermeabilidad permite aplicarla sobre el alvéolo tras la extracción que puede ser
rellenado exclusivamente por el coágulo o con algún injerto y se deja expuesta al medio
bucal sin necesidad de elementos de fijación y puede ser removida fácilmente 7 a 15
días después, solo con anestesia local. [CITATION Mun09 \l 12298 ]
El reporte de un caso demostró que la barrera expuesta al medio (Bone Heal) contribuyó
al mantenimiento longitudinal de la cresta alveolar en su caso clínico. Los estudios con
18
barreras expuestas al medio oral son escasos, ya que podrían producir la contaminación
del coágulo. A pesar de que el uso de estas barreras es muy prometedor, enfrenta
grandes conceptos de la implantología como la necesidad de utilizar injertos para
mantener las dimensiones de los alvéolos postextracción [CITATION Mun09 \l 12298 ]
¿Cuál membrana no reabsorbible que se puede dejar expuesta en cavidad oral para
regeneraciones óseas presenta menor adherencia y permeabilidad a los microorganismos
patógenos?
3.1. Objetivos
19
Evaluar la adherencia bacteriana en membranas no reabsorbible de polipropileno
y politetrafluoretileno de alta densidad a los 2 y 7 días.
Cuantificar las unidades formadoras de colonias de la superficie interna de las
membranas no reabsorbibles de politetrafluoretileno de alta densidad d-PTFE y
polipropileno usando microscopía electrónica de barrido.
Determinar la permeabilidad del microorganismo en membranas no
reabsorbibles de politetrafluoretileno de alta densidad d-PTFE y polipropileno.
3.2. Hipótesis
20
tratamiento de superficie activando de sus propiedades bio-químicas. Diseñada
para permanecer expuesta intencionalmente al medio bucal, no presenta
porosidad en su superficie, lo que le confiere total impermeabilidad dificultando
la acumulación de detritos, restos alimentarios y microorganismos en su
superficie.
3.3.2. Variable dependiente
3.4. Justificación
21
biofilm bucal pero llegando al tiempo necesario para su retiro y su continua
cicatrización de los tejidos.
Este trabajo favorecerá el campo de la Implantología para conocer sobre otros tipos de
materiales que nos darán éxito en el procedimiento de regeneración ósea para futuras
colocaciones de implantes dentales, de la misma manera ver el beneficio para saber en
cuál de las membranas se forma más unidades formadoras de colonias y la
permeabilidad de estas a la parte interna de la membrana.
3.5. Metodología
22
Membranas no absorbibles estériles siguiendo todo el proceso para evitar
contaminación
23
a. Definición operacional de las variables
ESCALA
INDICADOR
DEFINICIÓN CLASIFIC DE
VARIABLES TIPO CATEGÓRIC
OPERACIONAL ACIÓN MEDICIÓ
O
N
Adherencia y La investigación Dependiente Cuantitativa
Permeabilidad de adherencia y continua Unidades
bacteriana permeabilidad formadoras de 1
bacteriana consiste colonias 2 días.
en cultivar en un
medio agar un
microorganismo
mediante todos los Unidades
procesos indicados formadoras de
para bacterias colonias 7 días. 2
anaerobias. Este
cultivo da las
condiciones
adecuadas para el
desarrollo y
proliferación
bacteriana.
Membranas no Las membranas no Independiente Cualitativa Politetrafluoreti 1
absorbibles absorbibles son nominal leno
biomateriales
utilizados para la
regeneración ósea,
función semejante a
las membranas Polipropileno 2
absorbibles
poseyendo, así, una
matriz inorgánica
de
politetrafluoretileno
o
politetrafluoretileno
expandido (resina
anti-adherente). El
politetrafluoretileno
es un polímero de
flúorcarbono inerte,
así también otras
hechas de
polipropileno.
b. Estandarización
Previo a la experimentación se realizará la eficacia del cultivo del agar en las maquinas
del laboratorio de microbiología de la facultad de Odontología de la Universidad
Central del Ecuador, colocación de agar, verificación de las cámaras de anaerobiosis y
24
verificación de contaminación de microorganismos innecesarios para la
experimentación. Contando con la supervisión y entrenamiento del Msc Dr. Juan Viteri.
Los viales de vidrio estériles se llenarán con caldo de tripticasa de soja suplementado
con 0.5% de extracto de levadura, 5 μg / ml de hemina y 1 μg / ml de menadiona. Las
diademas se colocarán sobre los viales y el tubo se sellará usando tapas de goma. Seis
viales se utilizarán para cada membrana probada. Seis adicionales serán tubos de
control, destinados a evaluar la efectividad del sistema de sellado, se prepararán
mediante el uso de un silicio sept en lugar de una membrana. Los viales serán puestos
en un tubo de plástico estéril lleno con 20 ml de soja tripticasa caldo suplementado con
0.5% de extracto de levadura, 5 μg / mL hemina y 1 μg / ml de menadiona. Todos los
dispositivos serán saturados con atmósfera anaeróbica durante 24 horas en un cuarto
anaeróbico. El tubo externo de 7 de los 8 viales será inoculado con cultivo fresco de P.
gingivalis ATCC 33277 e incubado a 37 ° C. El octavo tubo se incubará a 37 ° C sin
inoculación, en orden para probar la esterilidad del dispositivo.
25
Después de los 2 y 7 días, 4 de los 8 viales se abrirán y muestras de la parte interna y
externa se diluyerán en solución salina estéril, previamente saturada en condiciones
anaerobias, sobre agar tripticasa de soja suplementado con 0.5% extracto de levadura, 5
μg / ml de hemina y 1 μg / ml de menadiona.
Las membranas se recogerán para el análisis SEM de los 2 viales restantes para cada
serie de membrana, después de 2 y 7 días de incubación a 37 ° C.
26
G2: Antes del cultivo, las membranas no absorbibles de politetrafluoretileno de alta
densidad se abrirán en un lugar con una atmosfera estéril adecuada para evitar la
contaminación con las instrucciones del fabricante y se procederá hacer los cortes de los
diámetros requeridos para posteriormente colocarlo en el cultivo de agar con la
porphyromona gingivalis ATCC33277, seguido a este paso se colocará en la maquina
anaerobia para dejar su proliferación microbiana por 7 días.
G3: De igual manera antes del cultivo, las membranas no absorbible de polipropileno se
abrirán en un lugar con una atmosfera estéril adecuada para evitar la contaminación con
las instrucciones del fabricante y se procederá hacer los cortes de los diámetros
requeridos para posteriormente colocarlo en el cultivo de agar con la porphyromona
gingivalis ATCC33277, seguido a este paso se colocará en la maquina anaerobia para
dejar su proliferación microbiana por 2 días.
G4: De igual manera antes del cultivo, las membranas no absorbible de polipropileno se
abrirán en un lugar con una atmosfera estéril adecuada para evitar la contaminación con
las instrucciones del fabricante y se procederá hacer los cortes de los diámetros
requeridos para posteriormente colocarlo en el cultivo de agar con la porphyromona
gingivalis ATCC33277, seguido a este paso se colocará en la maquina anaerobia para
dejar su proliferación microbiana por 7 días.
Los datos estadísticos se analizarán con la Prueba t de Student con significancia de 5%.
27
d. Prueba Piloto
No requiere
e. Análisis Estadísticos
Los datos serán procesados y traspasados a una planilla Excel (Microsoft-USA), será
utilizado el programa estadístico SPSS versión 21, previamente será utilizado una
prueba de normalidad de Shapiro-Wilk para optar por un test paramétrico o no
paramétrico. El nivel de significancia del estudio será del 5%.
28
Presenta valor benéfico para la comunidad Odontológica y puede ser usado como
estudio base para otras investigaciones.
Beneficencia:
Confidencialidad:
29
Se manejará el microorganismo con absoluta bioseguridad usando medidas de
protección y manteniendo en condiciones adecuadas para su cultivo y proliferación.
30
4. BIBLIOGRAFÍA
x
1. Suárez Larreinaga CL, Ber5dasquera Corcho D. Enfermedades emergentes y
reemergentes: factores causales y vigilancia.: Rev. Cubana Med. Gen Integr.; 2000.
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x
33
5. ANEXOS
MES ACTIVIDAD
SEPTIEMBRE Propuesta
Noviembre Compra de las membranas
AGOSTO Anteproyecto
SEPTIEMBRE Experimentación
OCTUBRE Obtención de resultados
OCTUBRE Trabajo de titulación finalizado
1. Ensayo clínico
No aplica por ser un estudio experimental in vitro.
_____________________________
Investigador principal
JONATHAN ANDRES DE LA MAZA ZEA
Equipo de investigadores
________________________ ______________________
DR. JUAN BENENAULA MSc Dr. JUAN VITERI
34
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
Yo, Dr. JUAN BENENAULA, docente de la Universidad Central del Ecuador, Facultad
de Odontología, Dr. Maxilofacial e implantes, orientador de tesis; declaro tener una
amplia experiencia en elaboración de trabajos de investigación en temas relacionados
con Implantología, para el presente estudio me he preparado con artículos actuales,
referentes al tema de investigación.
Atentamente,
35
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
Yo, Od. JONATHAN ANDRES DE LA MAZA ZEA, declaro qué al ser mi primer
proyecto de investigación, tengo conocimiento en temas relacionados con
IMPLANTOLOGIA ORAL y para el presente estudio me he preparado con artículos
actuales, referentes a mi tema de investigación.
Atentamente,
36
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
Yo, Dr. Juan Benenaula con C.I: 0103642930, declaro no tener ningún tipo de conflicto
de interés, ninguna relación económica, personal, familiar o filial, política de interés,
financiera con ninguna institución o empresa internacional o nacional. Declaro, además,
no haber recibido ningún tipo de beneficio monetario, bienes ni subsidios, de alguna
fuente que pudiera tener interés en los resultados de esta investigación. Así mismo, las
personas e instituciones que hayan participado en el estudio y análisis de la información,
han sido identificadas y aceptando dicha mención.
Atentamente,
37
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
Yo, Od. JONATHAN DE LA MAZA , con C.I. 1803733060,, declaro no tener ningún
tipo de conflicto de interés, ninguna relación económica, personal, familiar o filial,
política de interés, financiera con ninguna institución o empresa internacional o
nacional. Declaro, además, no haber recibido ningún tipo de beneficio monetario, bienes
ni subsidios, de alguna fuente que pudiera tener interés en los resultados de esta
investigación. Así mismo, las personas e instituciones que hayan participado en el
estudio y análisis de la información, han sido identificadas y aceptando dicha mención.
Atentamente,
INVESTIGADOR
38
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
Atentamente,
39
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
SUBCOMITÉ DE ÉTICA DE INVESTIGACIÓN EN SERES HUMANOS
40
Evaluar la permeabilidad y adherencia bacteriana en membranas no
OBJETIVO
reabsorbibles de polipropileno y politetrafluoeretileno de alta
GENERAL
densidad
BENEFICIOS Y Para de esta manera elegir las membranas adecuadas para evitar
RIESGOS DE LA futuros fracasos y contaminación de las regeneraciones óseas.
INVESTIGACIÓN
El estudio será in vitro sin embargo el anteproyecto será presentado
al comité de ética de la UCE para su aprobación, cumplirá con
todas las normas bioéticas tanto nacionales como internacionales,
por lo cual no existe ningún tipo de riesgo potencial del estudio.
41
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
SUBCOMITÉ DE ÉTICA DE INVESTIGACIÓN EN SERES HUMANOS
NOMBRE
CÉDULA IDENTIDAD FIRMA
INVESTIGADOR
Jonathan Andrés De La
1803733060
Maza Zea
42
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
POSTGRADO IMPLANTOLOGÍA ORAL
43
Quito, DM 24 Julio del 2017
De mi consideración:
Atentamente,
………………………………………………………
TUTOR
DR. JUAN BENENAULA
44