“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de independencia”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA

FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

ARTÍCULO:

“Expresión del gen prosistemina de tomate en papa (solanum tuberosum)”

DOCENTE:
BLGO. Hebert Hernan Soto Gonzales

CURSO:
Biotecnología

ESTUDIANTE:
Lidia Marleni Coaquera Zanga

CODIGO:
2018205015

CICLO: VII

ILO-MOQUEGUA-PERU
Fecha de entrega: 27/06/2021
 EXPRESIÓN DEL GEN PROSISTEMINA DE TOMATE
EN PAPA (Solanum tuberosum)

Autores

Araujo-Burgos y Raó R.

OBJETIVO
INTRODUCCIÓN
Los Es ampliar
El conocimiento sobre el
mecanismos de defensa de la rol biotecnológico de la
planta prosistemina

pueden ser de ubicado en la región Sobre todo, la

terminal C del
función de este
tipo constitutivo precursor
precursor
están y está para
siempre presentes en la planta último codifica para incrementar la resistencia
sistemina endógena
además de los cuales el
de la
gen prosistemina contiene 11 planta frente al estrés
exones biótico
el
de tomate en papa y del mismo gen en una
estudio de la expresión del gen al cual se le ha borrado la porción
prosistemina que codifica para la sistemina. especie diferente al
Los tomate.
genotipos transgénicos de papa PR de prosistemina de tomate y los
presentan la inserción del ADNc genotipos transgénicos PRx
contienen el mismo gen incompleto.
 MATERIALES Y MÉTODOS

los el ADN, control de electroforesis Las células transformadas se inoculan con

Transformación genética de vectores binarios PR y PRx están
en gel de agarosa al 1%. LB agar con antibióticos selectivos.
Agrobacterium en células de E.C. cepa DH5α.

colonia solitaria de las el ADN plasmídico, control con Luego realizó el test de
Una
Control de células de células cultivadas en LB electroforesis en gel de agarosa se ketolactosa
Agrobacterium agar con antibióticos al 1%.

transgénico.
virulencia de la bacteria se las vitroplantas se transfirieron a suelo
La
Transformación genética de creció in vitro en caldo indujo usando el medio estéril y crecieron hasta la producción
papa MS20 a 21°C simplificado de inducción, SIM de tubérculos.

las Plantas transformadas y no de 4 a 6 semanas de edad se utilizaron

Material vegetal transformadas de variedad en todos los experimentos

se observaron en gel de agarosa al

Se colectó material vegetal en nitrógeno Todos productos de la amplificación
Extracción y análisis de 2% y se visualizaron con luz UV.
líquido, el ADN genómico se aisló. los mediante PCR y RT-PCR
ADN genómico

El ARN total se aisló de un La calidad de ARN se vio con

Extracción y análisis de ARN método estándar de extracción
las hojas usando electroforesis en gel de agarosa 1.2%.
total en base a fenol/cloroformo.
tiñó con azul brillante de
en 0.5 g de hojas de papa Un obtuvieron dos geles Coomassie para visualizar
Extracción y análisis de litro de solución de se
congeladas en nitrógeno idénticos para el análisis proteínas
proteínas totales tampón salino fosfato
líquido se molieron. Western
Otro gel se usó en la
el gen Elongation Factor 1-alpha fue el gen transferencia electroforética
Análisis de expresión se eligió entre 90 y 135
génica endógeno de referencia usado para con membranas de
normalizar los niveles de expresión. pares de bases (bp)
nitrocelulosa (BioRad)
 RESULTADOS Y DISCUSIÓN CONCLUSIONES

La expresión del
Transformación vegetal y caracterización molecular de gen prosistemina en papa
los transgénicos.
no
Un
afecta los genes relacionados con respuesta
total, de 29 líneas PR y 29 líneas PRx fueron positivas en el a patógenos como GluB2 y PR1b.
análisis PCR, todos los transformantes positivos se transfi
rieron in vivo en invernadero. los
genes de las prosisteminas endógenas relacionadas
Una con el mecanismo de defensa, Prosys y ProHypSys
banda de proteína con un peso molecular aparente de
no
37 kDa se detectó en controles positivos de tomate.
fueron afectados por el transgen
Ninguna de las dos

bandas de proteínas se observó en plantas de papa no

transformada

Plantas transgénicas mostraron un efecto específico

en la expresión de genes de defensa.

sugieren que la

terminal N de prosistemina también juega un rol en la

activación de algunos genes de defensa en papa

Las dos

líneas transgénicas de papa mostraron una sobre

expresión en Lox3
Link de artículo: http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S2307-
96062013000100003&lng=es&nrm=iso