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Practica Bioquimica-Actividad Enzimática de La Amilasa
Practica Bioquimica-Actividad Enzimática de La Amilasa
1. OBJETIVOS:
Determinar el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática de la amilasa.
Explicar cómo se puede determinar la actividad enzimática de la amilasa.
2. INTRODUCCION.
3. MATERIALES Y METODOS.
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
La temperatura óptima para la acción de las enzimas depende de cada especie. Con cierto
aumento de la temperatura del medio ocurre aceleración de la reacción a consecuencia de la
activación de las moléculas del sustrato. A la vez, incluso un aumento pequeño de la
temperatura conduce al debilitamiento de los enlaces que mantienen la conformación de la
molécula de la enzima, necesaria para la manifestación de su actividad catalítica. Cuando la
temperatura se eleva aún más, sin embargo, la energía cinética de la molécula de la enzima se
vuelve tan grande por sí misma que excede a la barrera energética para romper los enlaces
secundarios que mantienen a la enzima en su estado nativo o catalíticamente activo. Hay en
consecuencia una pérdida de las estructuras secundarias y terciarias y paralelamente una
pérdida de la actividad catalítica. Al bajar la temperatura la enzima disminuye su actividad
también. Sin embargo, el enfriamiento no causa desnaturalización de la enzima, y por lo tanto,
su inactivación puede ser reversible.
TÉCNICA:
1. Prepare una gradilla con dos tubos de ensayo, según muestra el cuadro siguiente:
Tubo N°
1 2 3
Reactivo
Buffer pH 6,8 2 ml 2 ml 2 ml
Cloruro de sodio 0, 5 ml 0,5 ml 0,5 ml
Solución de amilasa 1 ml 1 ml 1 ml
Solución de almidón 3 ml 3 ml 3 ml