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O b j e t i v o s
Además de ser hidrolasas, las enzimas digestivas son específicas de sustrato –funcionan sobre
algunas sustancias pero no sobre otras-. Por ejemplo, la amilasa salival es una enzima de la saliva
que rompe el almidón (que se encuentra en alimentos como el maíz, las patatas, el pan y la pasta)
y el glucógeno (almidón animal), pero no la celulosa (que se encuentra en las paredes celulares de
las plantas), aunque la celulosa se compone de glucosa, al igual que el almidón y el glucógeno.
La temperatura y el pH son dos factores que desempeñan un papel clave en la eficacia de las
enzimas digestivas. Un aumento en la temperatura puede hacer que una reacción se acelere, ya
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que las moléculas se mueven más rápidamente y entonces se incremente el contacto con la
enzima; sin embargo, una temperatura demasiado alta alterará las uniones moleculares que
estabilizan la configuración de la enzima, causando su desnaturalización (cambio estructural que
impide su función). Además, cada enzima tiene un pH óptimo en el cual es más activa. Dentro del
rango de pH óptimo, la enzima funcionará según lo esperado; más allá de este pH, la enzima no
tendrá efecto.
La mayoría de las moléculas alimenticias se pueden incluir en una de las siguientes categorías:
carbohidratos, proteínas o lípidos. Los carbohidratos son la fuente principal de calorías e incluyen
monosacáridos, disacáridos y polisacáridos. Antes de ser absorbidos, los carbohidratos más
complejos se hidrolizan hasta los más simples (monosacáridos) como la glucosa. Las proteínas son
muy importantes para el crecimiento y varias funciones vitales. Se hidrolizan hasta aminoácidos
antes de ser absorbidos, ya en el organismo se requieren para construir nuevas proteínas. Los
lípidos, la mayoría de los cuales son triglicéridos (componentes principales de grasas y aceites) no
son solubles en agua y por ello plantean problemas especiales para la digestión. La lipasa, la
enzima que actúa sobre los lípidos, es hidrolítica (como todas las enzimas digestivas) y solo puede
actuar en la superficie de las gotas de lípidos porque son insolubles en agua. Para aumentar la
velocidad de digestión por la lipasa, los lípidos primero son emulsionados (se rompen en gotas
más pequeñas) con la ayuda de las sales biliares, derivadas del colesterol. La emulsión da lugar a
gotas más pequeñas con áreas superficiales más grandes, haciendo más fácil que la lipasa se una a
los sustratos y digiera los lípidos. Las sales biliares también forman micelas, que ayudan a la
absorción de los productos de la digestión de los lípidos: ácidos grasos y monoglicéridos.
En los siguientes experimentos se examinarán los efectos de diversas enzimas digestivas sobre los
carbohidratos, proteínas y lípidos. Del menú principal, seleccionar Procesos Físicos y Químicos de
la Digestión. Aparecerá la pantalla de inicio (Figura 7.1). Esta pantalla será utilizada para las dos
primeras actividades, en las cuales se probarán los efectos de la amilasa salival sobre el almidón y
la celulosa.
A c t i v i d a d 1
La digestión del almidón comienza en la boca con la acción de la amilasa salival la cual es
segregada por las glándulas salivales. Esta enzima rompe el almidón en maltosa, un disacárido
formado por dos moléculas de glucosa. Así, la presencia de maltosa en una muestra experimental
indicaría que se ha producido la digestión del almidón.
1.- Pulsar sobre el tubo de ensayo que cuelga más cerca de la incubadora, arrastrarlo a la ranura 1
en la parte superior de la incubadora. Repetir la acción, llenando las ranuras hasta la 7.
2.- Llenar los siete tubos de ensayo con tres sustancias cada uno, tal como sigue:
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Tubo No. 6: almidón, amilasa, buffer pH 2.
Tubo No. 7: almidón, amilasa, buffer pH 9.
3.- Pulsar el número 3 debajo del tubo No. 3. El tubo bajará en la unidad de incubación. Activar
Hervir. El tubo hervirá y volverá a subir. Observar que la única diferencia entre el tubo 3 y 4 es
que el tubo 3 ha hervido.
5.- Incubar. Al final del periodo de incubación, los siete tubos volverán a subir y la puerta del
armario de análisis se abrirá.
Se observará que en el armario de análisis hay siete tubos vacíos y dos botellas cuentagotas
que contienen los reactivos IKI y de Benedict. La prueba de IKI detecta la presencia de
almidón, mientras que la prueba de Benedict detecta la presencia de azúcares tales como
glucosa o maltosa (productos de la digestión del almidón). Se añadirán estos reactivos a los
siete tubos experimentales para determinar si ha habido o no digestión.
6.- Pulsar sobre el tubo 1 de la ranura 1 de la incubadora. Se verá cambiar el cursor a un tubo
de ensayo en miniatura. Arrastrarlo al borde del primer tubo del armario de análisis. El
contenido del tubo de ensayo en miniatura se vaciará en el tubo de análisis.
7.- Repetir el paso 6 para los tubos restantes. Hacer esto secuencialmente.
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8.- Añadir el reactivo de IKI al primer tubo del armario de análisis. Repetir esto para todos los
tubos y observar cualquier cambio de color. Un color azul oscuro o gris indica una prueba
positiva para el almidón; un color amarillo indica una prueba negativa. Anotar los resultados
de la prueba de IKI en la tabla que hay más adelante.
10.- Hervir. Examinar los cambios de color de los tubos. Un color verde, naranja o rojizo indica
la presencia de maltosa, considerando positivo el resultado de la prueba de Benedict. Un color
azul indica que no hay maltosa y el resultado de la prueba se considera negativo. Anotar los
resultados en la Tabla 7.1.
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La amilasa salival sería desactivada casi por completo en el estómago. Sugerir una razón del
por qué, basada en lo que se ha aprendido en esta actividad
Esto sucede debido a sus secreciones como HCl y su pH ya que, si es menor a 4, se
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desactiva.
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A c t i v i d a d 2
En esta actividad se investigará si la amilasa salival digiere a la celulosa, si las bacterias (como
las que se encuentran en el estómago de los rumiantes) la digieren y si la peptidasa (enzima
pancreática que rompe los péptidos) digiere el almidón.
1.- Arrastrar el tubo que cuelga más cerca de la incubadora hasta la ranura 1 en la parte
superior de la incubadora. Repetir esta acción hasta que las siete ranuras contengan un tubo.
2.- Llenar los siete tubos con tres sustancias cada uno, tal como sigue:
3.- Pulsar el número 1 debajo del tubo No. 1. El tubo bajará a la unidad de incubación. Activar
congelar.
5.- Incubar. Los siete tubos bajarán a la unidad de incubación, al final subirán al armario.
Observa que en el armario de análisis hay siete tubos vacíos y las botellas cuentagotas de los
reactivos de IKI y de Benedict los cuales se añadirán a los siete tubos experimentales.
6.- Pulsar el tubo No. 1 de la ranura 1 de la incubadora. Se verá cambiar el cursor a un tubo de
ensayo en miniatura. Arrastrarlo al borde del primer tubo en el armario de análisis. El
contenido del tubo de ensayo en miniatura se vaciará en el tubo de análisis.
8.- Colocar el reactivo de IKI en cada uno de los tubos del armario de análisis y observar
cualquier cambio de color. Un color azul oscuro o gris indica una prueba positiva para el
almidón; un color amarillo indica una prueba negativa. Anotar los resultados de la prueba de
IKI en la tabla 2.
10.- Activar Hervir. Los tubos descenderán, hervirán y volverán a subir. Examinar los cambios
de color de los tubos. Un color verde, naranja o rojizo indica la presencia de glucosa o maltosa
lo que implica positivo el resultado de la prueba de Benedict. Un color azul indica que no hay
glucosa o maltosa y el resultado de la prueba de Benedict se considera negativo. Anotar los
resultados en la Tabla 7.2.
11.- Guardar datos o bien seleccionar Herramientas e Imprimir datos para obtener copia.
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12.- Pulsar y arrastrar cada tubo de ensayo al lavador de tubos de ensayo.
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¿Cuál fue el efecto de la amilasa sobre la glucosa en el tubo No. 3? Sugerir una explicación.
Se encuentra en su forma más simple y no había uniones para hidrolizar por lo que se degrada
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y la prueba da positivo.
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Las palomitas de maíz y el apio están constituidas casi exclusivamente por celulosa. ¿Qué se puede
concluir sobre la digestión de la celulosa a juzgar por los resultados de los tubos 4, 5 y 7?
La hidrólisis inicial en la boca es difícil debido a la amilasa, a diferencia de otros lugares y
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mecanismos del tracto digestivo.
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¿Cuál fue el efecto de la enzima peptidasa utilizada en el tubo No. 6? Explicar la respuesta, en base
al conocimiento del tema sobre la peptidasa y la especificidad del sustrato.
Hubo presencia de almidón, lo que evita su digestión ya que no es la enzima correcta para su
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hidrólisis; sino más bien de las proteínas.
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Pepsina
Las proteínas están compuestas de subunidades llamadas aminoácidos. Cuando están sometidas a
actividad enzimática se rompen en sus componentes aminoácidos. La pepsina es un ejemplo de
enzima que rompe proteínas. Es segregada por glándulas del estómago en forma de proenzima
inactiva, pepsinógeno, que es convertido a pepsina por la escisión de uniones débiles en el
ambiente ácido (pH bajo) del estómago. El grado en el que se hidrolizan o digieren proteínas en el
estómago es significativo aunque variable. Se estima que el 15% de las proteínas de la dieta son
reducidas a aminoácidos por la pepsina. La mayor parte de la digestión de las proteínas ocurre en
el duodeno.
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En la presente actividad se investigará los efectos de la pepsina sobre BAPNA. Activar Experimento
y después seleccionar Pepsina.
En la pantalla mostrada en la Figura 7.2 se observa que las botellas cuentagotas contienen pepsina
y BAPNA, una proteína sintética que se presenta como una solución incolora y transparente pero
que tomará un color amarillo si es digerida por una enzima como la pepsina. No es necesario
añadir reactivos adicionales para determinar si ha habido reacción enzimática.
1.- Colocar el tubo de ensayo que cuelga más cerca de la incubadora en la ranura No. 1. Repetir la
acción hasta que seis de las siete ranuras contengan tubo.
2.- Llenar los seis tubos con tres sustancias cada uno de la forma que se indica a continuación.
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3.- Pulsar el No. 1 debajo del tubo No. 1. El tubo baja a la unidad de incubación, activar hervir, el
tubo baja, hierve y vuelve a subir.
5.- Incubar. Los seis tubos bajarán a la unidad de incubación, serán agitados mientras se incuban.
Al final del periodo, los tubos volverán a subir y se abrirá la puerta del armario de análisis.
7.- Analizar.
11.- Después de que se hayan leído todos los tubos, Guardar Datos.
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La congelación, ¿tendría el mismo efecto? ¿Por qué?
No, sólo con el calor puede efectuar su actividad enzimática.
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Usando la simulación, diseñar un experimento que permita ensayar cómo varía la cantidad de
BAPNA digerida en función del tiempo. Exponer la conclusión.
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En un PH fisiológico, la absorción óptica por la digestión del BAPNA va a aumentar en función
del tiempo comparado al tubo que en 60 minutos nos dio una absorción de 0.03 y en 90
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minutos
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0.05.
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Lipasa
En una dieta normal, los principales lípidos son los triglicéridos, los componentes mayoritarios de
las grasas y aceites. Los lípidos son insolubles en agua y primero debe ser emulsionados (se
rompen en gotas más pequeñas, aumentando su área superficial) antes de que una enzima
digestiva como la lipasa puada actuar con eficacia sobre ellos. En el intestino delgado, los lípidos
son emulsionados por la bilis, un líquido amarillo verdoso producido por el hígado. Las gotas
resultantes cubiertas de bilis tienen áreas superficiales relativamente grandes, permitiendo a la
enzima lipasa, soluble en agua, un acceso más fácil a los sustratos. La lipasa entonces hidroliza las
gotas de lípidos a ácidos grasos y monoglicéridos, los productos finales de la digestión de los
lípidos. La hidrólisis de los lípidos también forma micelas, pequeños agregados moleculares que
aumentan la absorción de los productos de la digestión de los lípidos. Las lipasas que se
encuentran en el jugo pancreático son las responsables de la mayoría de los lípidos presentes en la
dieta normal.
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A c t i v i d a d 4
Seleccionar Experimento y enseguida Lipasa para mostrar la pantalla de inicio (Figura 7.3). Se
observa que entre las botellas cuentagotas se incluye lipasa, aceite vegetal, sales biliares, buffers
codificados por colores.
1.- Colocar un tubo de ensayo en cada una de las ranuras que están en la parte superior de la
incubadora.
2.- Llenar los siete tubos con cuatro sustancias cada uno, tal y como se detalla a continuación:
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3.- Activar el No. 1. El tubo bajará a la unidad de incubación. Hervir. El tubo Hervirá y después
volverá a subir.
5.- Incubar. Los siete tubos bajarán a la unidad de incubación y serán agitados suavemente
mientras se incuban. Al final del periodo, los tubos volverán a subir y se abrirá la puerta del
armario.
Se mostrará un medidor de pH. La digestión del aceite vegetal por la lipasa liberará ácidos grasos,
que disminuirán el pH. De esta forma, utilizando el medidor de pH se puede detectar la presencia
de ácidos grasos y, por lo tanto, evidencia de la digestión comparando el pH de las muestras con
su pH original. Se arrastra de manera individual los tubos hasta el medidor de pH. Una vez los
tubos estén colocados en su lugar, se activa Medir pH. Un electrodo descenderá sobre el
contenido de los tubos y se determinará el pH.
8.- Anotar el valor de pH en la tabla 7.4, después devolver el tubo a su ranura en la incubadora.
10.- Cuando todos los tubos hayan sido analizados, Guardar Datos.
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¿Cuál es el efecto de las sustancia del tubo No. 2 que no fue incluida en el tubo No. 3?
Las sales biliares para emulsionar los lípidos en gotas más pequeñas.
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Los procesos químicos de la digestión son solamente una parte del proceso digestivo. También
están implicados procesos físicos. La masticación, por ejemplo, mezcla el alimento con la
mucosidad salival y la amilasa, lo reduce a partículas pequeñas y manejables y lo transforma en
una masa que se puede tragar denominada bolo. La lengua separa el bolo de la masa de alimento
en la boca, presionándolo contra el paladar duro. El bolo entra entonces en la faringe, estimulando
los receptores táctiles que inician el reflejo de deglución y lo impulsan a través del esófago. Una
onda de contracción denominada peristaltismo mueve entonces el bolo hasta el estómago, donde
se convierte en quimo. Los músculos del estómago mezclan el quimo con los jugos gástricos para
fragmentar el alimento en partículas aún más pequeñas; también regulan la entrada del quimo en
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el intestino delgado. Los movimientos peristálticos continúan en el intestino delgado,
entremezclándose periódicamente con la segmentación, en la cual el quimo va hacia delante y
hacia atrás por la contracción y la relajación de los segmentos intestinales. La segmentación
mezcla a fondo el quimo con las enzimas digestivas, la bilis y el jugo pancreático aumentando la
eficacia de la absorción de nutrientes a la sangre.
1. Hall, J. E., Casanova, G. X., & Gea Consultoria Editorial SL. (2016). Guyton y Hall. Tratado
de fisiología médica + StudentConsult (13a ed.) (Spanish Edition) (3.a ed.). Barcelona,
España: Elsevier España, S.L.U.
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