Introducción

La precipitación es un método por el cual una sustancia líquida se vuelve en un

sólido mediante la acción de un agente precipitante. El sólido precipitado puede
separarse de los componentes líquidos por medio de filtración, teóricamente la
precipitación debe producir un soluto concentrado y puro.
Los métodos de precipitación de proteínas se basan tres principios:
 Disminución de la solubilidad: Se utilizan como agentes precipitantes sales
como (NH₄)₂SO₄, Modificación del pH o uso de solventes.
 Desnaturalización selectiva: La temperatura, pH y solventes son agentes
precipitantes.
 Afinidad: Mediante ligandos.
Salting out: En este proceso buscamos que las interacciones entre proteínas y
solvente se vuelvan débiles y al mismo tiempo fortalecer las interacciones entre
proteínas para lograr precipitarlas, la adición de sales elimina el agua de que
hidrata a la proteína permitiendo así que las regiones hidrofóbicas se combinen
intermolecularmente entre más hidrofobicidad tiene una proteína antes precipitara.
Precipitación por solventes: Las proteínas se mantienen en solución por la
interacción de los grupos hidrofílicos de su superficie con el solvente Si la
polaridad del solvente se reduce por la adición de un solvente orgánico menos
polar que el agua, la proteína se vuelve menos soluble.
Precipitación por metales pesados: Se lleva a cabo mediante la
desnaturalización de proteínas, la desnaturalización ocasiona que la estructura
cambie, sus propiedades biológicas se pierden y su solubilidad disminuye
drásticamente, al adicionar iones metálicos estos se unen a las proteínas y
provocan su desnaturalización
Determinación del punto isoeléctrico: Esta técnica se basa en la disminución de
la solubilidad en el punto isoeléctrico. Las proteínas por su naturaleza anfotérica
presentan una carga neta negativa a pH altos y una carga neta positiva a pH
bajos. Existe un pH llamado pH isoeléctrico al cual la carga neta de la proteína es
cero. A este pH la molécula es incapaz de desplazarse en un campo eléctrico

Objetivos
Conocer diferentes métodos de precipitación de proteínas e identificar las
aplicaciones prácticas de estos métodos.
Comprender el fundamento de los métodos de precipitación de proteínas
Analizar el efecto que produce la modificación de factores fisicoquímicos sobre la
solubilidad de las proteínas. (objetivo del manual)
Determinar el punto isoeléctrico de la insulina, basándose en sus propiedades de
solubilidad a diferentes valores de pH. (objetivo del manual)
Metodología

Referencias
Carmona Salazar, L. (s.f.). Bioquímica y Biología Molecular para la Industria. Recuperado el 9 de
Marzo de 2020, de Facultad de química UNAM:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/DiplomadoLunes1Oct_21564.pdf

Huerta Ochoa, S. (s.f.). Principios de precipitación de proteínas. Recuperado el 9 de Marzo de 2020,

de Universidad Autónoma Metropolitana:
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/sho/Precipitacion.pdf

Universidad Nacional Autonoma de México . (Enero de 2010). Estructura y propiedades de

proteínas. Recuperado el 9 de Marzo de 2020, de
https://bqexperimental.files.wordpress.com/2010/01/purificacion-salado.pdf