¿QUE ES LA ESPECTROSCOPIA ?

Es el estudio de la interacción entre la radiación electromagnética y la materia, con adsorción o emisión de

energía radiante.

El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una
solución que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad de la misma
sustancia.

Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que aparece ser completamente
transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible el agua absorbe fuertemente en
la región del infrarrojo

Uso del espectrofotómetro: los biotecnologos emplean el espectrofotómetro en la elaboración y el análisis

de diversas muestras, esta técnica tiene muchas aplicaciones, como son el análisis cualitativo de pureza de
una muestra, la cuantificación de DNA y proteína, medición de densidad celular, o el ensayo de reacciones
catalizadas por las enzimas.

COMPONENTES DEL ESPECTROFOTOMETRO

 Fuentes de luz
 Monocromador
 Fotodetectores

FUNCIONES DEL ESPECTROFOTOMETRO

El espectrofotómetro realiza dos funciones :

1. Ofrece información de una muestra sobre la naturaleza de la sustancia que contiene .

2. Señala indirectamente la cantidad de la sustancia a investigar que se encuentra presente en la
muestra.

TIPOS DE ESPECTROSCOPIA

1. Espectroscopia de emisión atómica (AE)

2. Espectroscopia de la absorción atómica (AA)
3. Espectroscopia de emisión
4. Visible ultravioleta (UV)

ESPECTROFOTOMETRO UV-VISIBLE

La espectrofotometría se basa en una sencilla premisa de que varios compuestos mostraran una diferente
absorbancia a longitudes de onda específica.
 DEFINICION DE ABSORBANCIA

Es decir de una determinada longitud de onda, atraviesa una solución que contiene una especie
absorbente, la intensidad de la radiación disminuye como consecuencia de la absorción de energía
por parte de las especies absorbentes presentes en la solución.

P= potencia luego de
P0= potencia de la luz atravesar la m.

 Se define TRANSMITANCIA de una solución a la fracción de luz que deja pasar dicha solución:
T=P/P0
 Se define la ABSORBANCIA de la solución a partir de la transmitancia de la solución:
A= -log T

CUBETAS.-Son recipientes de plástico, vidrio o cuarzo que se utilizan para realizar lecturas
espectrofotométricas a liquido

Cubeta de cuarzo --------------- visible, UV-visible e infrarrojo.

Cubeta de vidrio--------------- -visible

Cubeta de plástico--------------visible

APLICACIONES

La espectrofotometría se usa para diversas aplicaciones como:

*Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación.

*Estandarización de colores de diversos materiales, pinturas, detección de niveles de contaminación en aire y

agua.