UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRACTICA Nª10 : METABOLISMO DE LA

BILIRRUBINA

DOCENTE : Dra. HILDA VICTORIA COILA DE LA CRUZ

ALUMNA : ISABELLE CASANOVA LEDEZMA

CICLO: 03

AÑO :2021

OBJETIVOS
 1. Conocer el metabolismo de la Bilirrubina.
2. Conocer el ciclo Entero-Hepático-Renal del Urobilinógeno.
3. Conocer las variables que generan la Ictericia.
4. Conocer la importancia de la concentración de bilirrubina y urobilinógeno, en
sangre y en orina.
5. Para determinar presencia de enfermedades.

MARCO TEORICO

La bilirrubina es un pigmento amarillo, que se genera en la gente desde el Núcleo HEM

(que es una Protoporfirina Tipo IX ó Tetrapirrol macro repetitivo, molécula que tiene
insertado un átomo de Hierro). Sobre este núcleo HEM actúa la enzima Oxigenasa
Heme de los microsomas. Esta Oxigenasa rompe el enlace alfa meteno del anillo
tetrapirrólico y se abre la molécula, convirtiéndose en el pigmento verde Biliverdina, el
cual es subsecuentemente hidrogenado y forma Bilirrubina. Esta reducción la ejecuta la
enzima citosólica Biliverdina reductasa que es una enzima NADPH dependiente. Por
cada mol de HEME catabolizado por esta ruta se genera un mol de bilirrubina, de CO2
y de ión férrico. La producción diaria de bilirrubina a partir de cada una de sus fuentes
en el ser humano es de 250 a 350 miligramo. Alrededor de el 85% de la bilirrubina total
producida se deriva de la molécula del HEM de la Hb liberada desde los eritrocitos
senescentes que son eliminados en el sistema retículo endotelial del hígado, bazo y
médula ósea.
El 15% remanente se genera desde la devastación de las células precursoras de los
eritrocitos en la médula ósea (llamada “eritropoyesis inefectiva”) y además procede del
catabolismo de otras proteínas que tienen dentro núcleo Hem como la mioglobina,
citocromos, peroxidasas y que permanecen distribuidas por medio de todo el organismo.
Luego de su producción en los tejidos periféricos, la bilirrubina es transportada al
hígado vinculada a la albúmina. La Bilirrubina es velozmente tomada por los
hepatocitos, se lleva y se conjuga al ácido glucurónico (UDP – glucuronilo transferasa)
para generar mono y diglucuronato de bilirrubina los cuales se excretan en la bilis. Y
luego de ser excretados hacia el intestino delgado. En el tracto intestinal los
glucorónidos de bilirrubina se hidrolizan a la manera no conjugada por el pH al alcalino
del intestino delgado, y por la acción catalítica de la betaglucuronidasa del hígado,
células epiteliales del intestino y las bacterias. La bilirrubina no conjugada es después
limitada por la flora bacteriana anaeróbica intestinal para conformar un conjunto de 3
tetrapirroles incoloros colectivamente denominados Urobilinógenos que después se
disminuyen y conforman 3 productos: estercobilinógeno, mesobilinógeno y
urobilinógeno. Hasta el 20% de los Urobilinógenos hechos diariamente son
reabsorbidos a partir del intestino hacia la circulación para ir al hígado (Circulación
enterohepática). La mayoría del urobilinógeno reabsorbido es captado por el hígado y es
re-excretado en la bilis y solamente un 2 a 5 % entra a la circulación general y surge en
la orina. En la parte más baja del tracto intestinal, los 3 Urobilinógenos se oxidan
espontáneamente y generan los pigmentos estercobilina,
mesobilina y urobilina, y de esta forma dichos pigmentos adquieren color marrón y que
son los pigmentos que le brindan color a las heces. Hay patologías congénitas y
patologías adquiridas que están afectando a uno ó bastante más de los pasos
relacionados en la producción, captación, depósito, metabolismo y excreción de la
bilirrubina y la
hiperbilirrubinemia es muchas veces el resultado 57 de dichos trastornos.
Estabilirrubinemia podría ser a predominio No conjugado (Indirecta) ó Conjugado
(Directa) dependiendo del tipo de desorden.
La hiperbilirrubinemia causa Ictericia. Una vez que la cifra de bilirrubina en la sangre
excede del miligramo %, existe hiperbilirrubinemia. La hiperbilirrubinemia puede ser
por
la producción de más bilirrubina de la que el hígado regular puede excretar o a la
insuficiencia de un hígado dañado para excretar la bilirrubina producida en porciones
típicos.

ALTERACIONES EN EL METABOLISMO DE LOS PIGMENTOS BILIARES –

HIPERBILIRRUBINEMIA

La bilirrubina normal del adulto y del niño mayor es menor de 1 mg/dl. Cuando la cifra
de bilirrubina en la sangre excede de 1 mg/dl, existe hiperbilirrubinemia. La bilirrubina
se acumula en sangre, y cuando alcanza una cierta concentración difunde a los tejidos.
Este signo se denomina ICTERICIA y se evidencia por la coloración amarilla en piel y
mucosas, manifestación clínica muy común. La hiperbilirrubinemia puede deberse a una
producción excesiva de este pigmento o a una deficiencia en su excreción y se observa
en numerosas enfermedades, que van desde la hepatitis viral hasta cáncer de páncreas.
La ictericia en los adultos aparece con valores de bilirrubina mayores de 2 mg/dl. Para
que un recién nacido esté ictérico la bilirrubina debe ser mayor de 7 mg/dl. Más del
50% de todos los recién nacidos y un porcentaje más alto de prematuros desarrollan
ictericia. Más del 5% de los recién nacidos a término normales presentan valores de
bilirrubina mayores de 13 mg/dl. La hiperbilirrubinemia puede deberse a la producción
excesiva de bilirrubina que el hígado normal puede excretar o puede resultar de la
insuficiencia del hígado dañado para excretar la bilirrubina producida en cantidades
normales. La obstrucción de conductos excretorios del hígado, también causará
hiperbilirrubinemia.

TIPOS DE ICTERICIAS
El aumento de la bilirrubina sérica puede ocurrir por cuatro mecanismos:
• Sobreproducción
• Disminución de captación hepática
• Disminución en la conjugación
• Disminución en la excreción de la bilis (intra o extrahepática).

Esto ha ayudado a clasificar las ictericias en:

• Pre-hepáticas o Hemolíticas
• Hepáticas o Hepotocelulares
• Post-hepáticas u Obstructivas o colestáticas

ICTERICIA PRE-HEPÁTICA

La hemólisis es la causa más común del exceso de bilirrubina indirecta. También si

existe dificultad en la captación de la bilirrubina plasmática por el hígado, Se producirá
una hiperbilirrubinemia a expensas de la bilirrubina no conjugada. Existe un aumento de
la producción de bilirrubina por una destrucción excesiva de los eritrocitos. Predomina
la bilirrubina indirecta o no conjugada y las pruebas de función hepática son normales.
En estos casos existe un aumento de la bilirrubina en sangre, a expensas de su forma no
conjugada y no existe coluria (coloración en orina). Hay coloración oscura de las heces
fecales por acúmulo de estercobilinógeno (hipercolia).

ICTERICIA HEPÁTICA

Este tipo de ictericia puede deberse a fallas en la captación, conjugación o excreción de

bilirrubina por el hígado. A este tipo de ictericias se las denomina también mixtas ya
que pueden cursar con incremento de la bilirrubina no conjugada, de la conjugada, o de
ambas, dependiendo de la alteración primaria.

Las causas de la ictericia hepática son:

1) Disminución de la captación de bilirrubina por el hígado (poco frecuentes, son

desordenes genéticos)
2) Disminución de la conjugación de bilirrubina (deficiencia de glucuroniltransferasa)
3) Daño hepatocelular (muy frecuentes):

a) Hepatitis
b) Cirrosis
c) Cáncer del Hígado

ICTERICIA POST-HEPÁTICA

Se debe al fallo para excretar la bilirrubina desde el hepatocito al duodeno. Se

diagnostica por va lores de bilirrubina directa mayores de 2 mg/dl o por una bilirrubina
directa mayor del 15% de la bilirrubina total. Es siempre patológica. Se caracteriza
porque la bilis no llega al duodeno. No hay coloración en materia fecal (acolia), hay
coloración excesiva en orina (coluria). Las causas de la ictericia post-hepática son:

1) Desórdenes estructurales del tracto biliar.

2) Colelitiasis (cálculos en la vesícula): el cálculo obstruye el paso de la bilis.
3) Atresia congénita de las vías biliares extrahepáticas.
4) Obstrucción biliar por tumores: principalmente causados tumores en la cabeza
depáncreas y en la ampolla de Vater.

Generalmente los pacientes con ictericia obstructiva (post-hepática) tienen una

coloración amarillo-verdosa. Además hay prurito debido a que la bilirrubina se fija en la
grasa de los tejidos.

En todos estos trastornos, la bilirrubina se acumula en la sangre y cuando alcanza una

cierta concentración (aproximadamente de 2 a 2. 5 mg%) se difunde dentro de los
tejidos los cuales adquieren color amarillo, este trastorno se denomina ictericia. La
concentración de bilirrubina en el suero es de gran valor, por eso en la presente practica
la emplearemos.
Dentro de las causas de Ictericia Hemolítica tenemos:

• Anemias hemolíticas
• Ictericia fisiológica neonatal (Inmadurez hepática para captación, conjugación y
secreción de la bilirrubina)
• Síndrome de Cligeer-Najar (Alteración de la conjugación de bilirrubina)
• Enfermedad de Gilbert
• Hiperbilirrubinemia tóxica (Agentes farmacológicos).
 Metabolismo de la bilirrubina

se descomponen en aminoácidos que entrarán a formar parte del “pool” de

Globinas aminoácidos  que se reutilizará para formar nuevasproteínas.
Grupo
hemo
hierro férrico (Fe +++) , se une a la transferrina transportándose a la médula
Hemo- oxigenasa ósea para contribuir al a formación de hematíes.
se transforma
++
Fe
Biliverdin La ictericia se puede dar por:
 Formación excesiva de bilirrubina
biliverdin  Conjugación defectuosa de la bilirrubina
reductasa.
 Excreción defectuosa de la bilirrubina

Bilirrubina no conjugada o
indirecta

Albúmina

Bilirrubina conjugada o
directa
urobilinógen
o
UDP- BN
MGB
BNC En el colón
BNC UDP-gt estercobilina
DG En el riñon
urobilina

Circulación enterohepática (90%)

PARTE EXPERIMENTAL
MATERIALES

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro
Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados

 Tubos o cubetas espectrofotométricas

 Cronómetro
DESARROLLO DE LA PRACTICA

EXPERIMENTO A: DOSAJE DE BILIRRUBINA TOTAL SÉRICA

Fundamentos del Método:

La bilirrubina indirecta, unida a la albúmina, es liberada por un tensioactivo. La

bilirrubina total (conjugada y libre) reacciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD)
formando un azocompuesto de color rojo en solución ácida.

PROCEDIMIENTO:
En 4 tubos marcados colocar:

B c B D
c d
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (menor a 25° C) .Leer en el
espectrofotómetro a 546 nm. Llevando a cero el espectrofotómetro con el BR
4 5
NOTA: 2Procesar un BR por 3cada serie de determinaciones mezclando 0.4 ml. De
reactivo B + 40 uL de agua destilada + 0.1 ml. De reactivo de Trabajo. Se pueden
aumentar proporcionalmente los volúmenes.

CALCULO DE RESULTADOS:

Bilirrubina total (mg/l)=(D-BD) x fc

Concentración de Bilirrubina Total en el calibrador = 48 mg/l

VALORES DE REFERENCIA:
Bilirrubina total en suero o plasma:
Adultos: hasta 10 mg/l
Recién nacidos:
Nacidos a término Prematuros
Sangre de cordón < 20 mg/l < 20 mg/l
hasta las 24 h 14 - 87 mg/l < 80 mg/l
hasta las 48 h 34 - 115 mg/l < 120 mg/l
 del 3º al 5º día 15 - 120 mg/l < 160 mg/l
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al
mes del nacimiento. En los prematuros, los niveles tardan más en alcanzar la
normalidad, dependiendo del grado de inmadurez hepática.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

Realizar los cálculos :

Si se tiene las absorbancias del
Bc = 0.002 Fc=[standard ]/c – Bc
C = 0.258 =48mg/0,0258-0,002
BD = 0.002 =188mg/l
D = 0.092

Bilirrubina total (mg/l)=(D-Bd)xfc

=(0.092-0,002)x188mg/l
=17 mg/l

Conociendo que, los valores normales para la concentración de bilirrubina en suero

tienen como valor los 10mg/l en una persona adulta, podemos decir que en el ejercicio
anterior la persona se encuentra pasado por un proceso de hiperbilirubinemia según la
evaluación nutricional bioquímica. En adultos, la hiperbilirrubinemia o niveles elevados
de bilirrubina en sangre pueden indicar enfermedades del hígado u obstrucción de los
conductos biliares (si aumenta la bilirrubina conjugada) o anemia hemolítica (si
aumenta la bilirrubina no conjugada).
EXPERIMENTO B: DOSAJE DE BILIRRUBINA DIRECTA SÉRICA

PROCEDIMIENTO:
En 4 tubos marcados colocar:

B c B D
c d

2 3 4 5
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (menor a 25° C)
Leer en el espectrofotómetro a 546 nm. Llevando a cero el espectrofotómetro con el BR
NOTA: Procesar un BR por cada serie de determinaciones mezclando 0.4 ml. De
reactivo B + 40 uL de agua destilada + 0.1 ml. De reactivo de Trabajo. Se pueden
aumentar proporcionalmente los
volúmenes.

CALCULO DE RESULTADOS:
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIÓN FINAL
La absorbancia debe ser leída a los 10 minutos exactos.
Bilirrubina directa (mg/l)=(D -BD) x fc

Fc=[standard]/c-Bc

*Concentración de Bilirrubina Directa en el calibrador = 23.9 mg/l

Realizar los cálculos :

Si se tiene las absorbancias del:
Bc = 0.008
C = 0.135 Fc=[standard]/c-Bc
BD = 0.009 =23,9 mg /0,0135 – 0,008
D = 0.029 =188,2 mg/l

Bilirrubina directa (mg/l)=(D-Bd)x fc

=(0,029-0,009)x188,2mg/l
=3,8 mg/l
Conociendo que, los valores normales para la concentración de bilirrubina en suero
tienen como valor frontera es 0,4 mg/l en una persona adulta, podemos decir que en el
ejercicio anterior la persona tiene elevada la bilirrubina directa, podemos decir entonces
que la persona estaría pasando por un proceso de hepatitis si en caso la bilirrubina
indirecta también se encontraría elevada o por una ictericia obstructiva en la cual existe
predominio de la bilirrubina directa, el diagnostico también dependerá de la presencia
de urobilinógeno en orina, pero como primer diagnóstico asumiremos la
hiperbilirrubinemia.

EXPERIMENTO C:INVESTIGACIÓN DE UROBILINÓGENO EN ORINA

Fundamento de la prueba de Ehrlich para la investigación de Urobilinógeno en
orina
(Método Cualitativo).
Esta prueba se basa en la reacción entre el urobilinógeno y el reactivo de paradimetil
aminobenzaldehido, para rendir un complejo coloreado rojo cereza.
Reactivo de Ehrlich: Disolver 10 mg de Paradimetil aminobenzaldehido en una
disolución de 75 ml de agua y 75 ml de HCl concentrado.
Procedimiento: A 2 ml de orina en un tubo de prueba, añadirle 0.5 ml del Reactivo de
Ehrlich y mezclar bien. Observar el color de la mixtura.

DISCUSIONES
Interpretación. Cantidades normales de Urobilinógeno en la orina no producirán color.
Cantidades aumentadas (patológicas) del pigmento urobilinógeno producirán un color
rojizo cereza que se observa bien mirando el tubo desde arriba del tubo (boca del tubo)
contra un fondo blanco.
CONCLUSIONES

La bilirrubina, el primordial pigmento biliar en mamíferos, es el producto final del

metabolismo del conjunto hemo.
Esta molécula, antiguamente descubierta, es una molécula interesante por las
características fisicoquímicas que muestra, dadas esencialmente por su composición.
Aun cuando en altas concentraciones séricas resulta severamente neurotóxica en
humanos,
niveles sutilmente altos de bilirrubina ejercen una acción citoprotectora por medio de
capturar especies reactivas de oxígeno. Distintas y crecientes pruebas sugieren que los
productos bioquímicos relacionados en el metabolismo del hemo poseen efectos
moleculares cruciales con probables repercusiones terapéuticas con secuelas favorables
para diversas procesos fisiopatológicos.
Memorizamos a hacer en esta sesión la decisión de la Bilirrubina Total y Directa, es
primordial saber que valores conteneos, hay enfermedades en las cuales su
diagnóstico se establece mediante esta prueba.Considerar que los elevados niveles de
concentración se les conoce como HIPERBILIRRUBINEMIA y esto paralelamente se
sabe como ictericia. Los niveles de Ictericia son de alrededor de 1mg/dl. Una vez que
dichos niveles suben entre 2 y 3mg/dl, entonces hay detección clínica de Ictericia.
CUESTIONARIO

1.-  Explique la formación de la bilirrubina.

La bilirrubina es un pigmento biliar de color amarillo anaranjado que resulta de la

degradación de la hemoglobina de los glóbulos rojos reciclados. Dicha degradación se
produce en el bazo. Más tarde la bilirrubina se conjuga en el hígado. Estos pigmentos se
almacenan en la vesícula biliar formando parte de la bilis (que luego es excretada hacia
el duodeno, lo que da el color a las heces).

2.-  ¿En qué casos se produce una elevación de la bilirrubina total, tanto a expensas de la
bilirrubina directa como de la indirecta?

Se hace clínicamente evidente cuando la bilirrubina es mayor de 2,5 mg/dl. Este

aumento puede ser a expensas de la fracción no conjugada o "indirecta" de la bilirrubina
(BI); esta es liposoluble y no se filtra por el riñón, por lo que no aparece coluria.
Cuando el aumento es a expensas de la bilirrubina conjugada o "directa" (BD), al ser
esta hidrosoluble, se filtra por el riñón, apareciendo coluria. Puede haber aumentos de
ambas fracciones y se habla entonces de hiperbilirrubinemia mixta. La bilirrubina no
conjugada es la relacionada con la ictericia prehepática y no hay coluria ni acolia,
mientras que la bilirrubina conjugada está relacionada con la ictericia hepática y
posthepática. Los resultados normales de un análisis de bilirrubina son 1,2 miligramos
por decilitro (mg/dl) de bilirrubina total para adultos y, generalmente, 1 mg/dl para
menores de 18. Los resultados normales de bilirrubina directa son generalmente de 0,3
mg/dl.

3.- ¿Cómo se forma el Urobilinógeno y qué importancia tiene?

El Urobilinógeno se forma en la fase intestinal del metabolismo de la bilirrubina y se

encuentra en todas las orinas normales en muy pequeñas cantidades, menores de 4 mg /
24 hs. Se forma en el intestino como hemos señalado en las clases teóricas por la acción
de las bacterias sobre los pigmentos biliares excretados por el hígado. También dijimos
que luego que se excreta la bilirrubina conjugad al conductillo biliar llega al duodeno; la
bilirrubina conjugada no es reabsorbida sino que: o bien se excreta como tal en la heces,
o bien se transforma en UROBILINÓGENO (y derivados asociados) por acción de las
bacterias del colon. El urobilinógeno se puede reabsorber en el intestino delgado (íleon)
y en el colon y pasa a la circulación portal, llega al Hígado y allí se re-excreta a la bilis
y el resto llega al riñón y se excreta con la orina. Cuando existe una alteración en la
captación y excreción hepática de urobilinógeno (como en la enfermedad hepatocelular)
ó la síntesis de bilirrubina como en la hemólisis, la excreción diaria del urobilinógeno
aumentará en forma significativa Por el contrario, si no pasa bilis al intestino, como en
la colestasis u obstrucción biliar extrahepática interfieren en la fase final del
catabolismo de la bilirrubina y ocasiona un descenso notable en la producción y
excreción urinaria del urobilinógeno. Entonces, la medida del urobilinógeno en la orina
resulta muy útil para diferenciar las posibles causas de hiperbilirrubinemia como ocurre
en la obstrucción completa de los conductos biliares, la urobilina estará ausente en la
orina. La excreción se incrementará en todas aquellas condiciones en que exista una
excesiva destrucción de los eritrocitos y en aquellos casos de daño parcial del
parénquima hepático. En las nefritis muy avanzadas puede estar ausente la Urobilina.

4.- ¿Qué es la ictericia y como se evalúa?

La ictericia consiste en una tonalidad amarillenta de la piel, de la conjuntiva de los ojos

y de los líquidos corporales. Es debida a un aumento en la cantidad de bilirrubina de la
sangre. La bilirrubina es un pigmento amarillento resultante de la degradación natural
de los glóbulos rojos o hematíes (eritrocitos). Para detectarse clínicamente se requiere
que bilirrubinemia sea de al menos 2.5 mg %. La ictericia en el recién nacido suele ser
inofensiva y se resuelve en pocas semanas. Pero en algunos casos, los niveles altos de
bilirrubina pueden causar daño cerebral. Se evalúa con un examen de bilirrubina en la
sangre.

5.- ¿Cuáles son los métodos conocidos para el dosaje de bilirrubina?

➢ Estudios de la función hepática. Una serie de análisis de sangre que miden

determinadas enzimas o proteínas en la sangre.
➢ Albúmina y proteína total. Los niveles de albúmina (una proteína producida por el
hígado) y proteína total muestran si el hígado está produciendo adecuadamente las
proteínas que tu cuerpo necesita para combatir infecciones y llevar a cabo otras
funciones.
➢ Hemograma completo. Este análisis mide los niveles de varios componentes y
características de la sangre.
➢ Tiempo de protrombina. Este análisis mide el tiempo de coagulación del plasma.
BIBLIOGRAFIA

➢ https://www.mayoclinic.org/es-es/testsprocedures/bilirubin/about/pac-20393041
➢ https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/examende-bilirrubina-en-
sangre/
➢ https://labtestsonline.es/conditions/ictericia#:~:text=La%20ictericia %20consiste
%20en%20una,rojos%20o%20hemat%C3%ADes%20(erit rocitos).
➢ https://www.iqb.es/monografia/fichas/ficha052.htm
➢ https://es.wikipedia.org/wiki/Ictericia
➢ http://fhu.unse.edu.ar/carreras/obs/anatomo/metabili.pdf
➢ https://www.binasss.sa.cr/revistas/amc/v8n1/art4.pdf
➢ https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1409-
00152019000100073
ANEXOS